1. UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA INSTITUTO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE – ICSDEPARTAMENTO DE BIOINTERAÇÃODISCIPLINA: IMUNOLOGIA I – ICS 045 REAÇÕES DE AGLUTINAÇÃO Trabalho realizado pelo Acadêmico de Medicina Veterinária da UFBA José Tadeu Raynal, sob orientação dos Professores Robert Schaer, Roberto Meyer, Claudia Brodskin e Ricardo Portela. Atualizado em Fevereiro de 2010.

2. CARACTERÍSTICAS BÁSICAS

3. CARACTERÍSTICAS BÁSICAS As reações de aglutinação decorrem da ligação entre o Ac e Ag particulado. É o agrupamento de partículas, usualmente por moléculas de Ac, que se ligam a Ag na superfície de partículas adjacentes. Agregação visível de partículas Eritrócitos Bactérias Fungos Látex

5. Classe do anticorpo envolvido.

6. Concentração iônica e pH do meio.

7. Presença de macromoléculas, íons, enzimas e conservantes.

8. Tempo e temperatura.

9. Padronização adequada da suspensão de micropartículas ou células.

10. Concentração ótima de antígeno ou Ac a ser fixado nas micropartículas ou células.

12. TIPOS DE REAÇÃO

13. AGLUTINAÇÃO DIRETA Neste teste, o antígeno faz parte naturalmente da célula, e haverá aglutinação dessas células promovida por anticorpo contra esses antígenos (antígeno é naturalmente insolúvel). Anticorpo Antígeno Complexo precipitado Ex: Identificação de antígenos eritrocitários na tipagem sanguínea, reação de Widal (febre tifóide).

14. AGLUTINAÇÃO DIRETA Na reação de aglutinação direta utilizam-se partículas antigênicas insolúveis em sua forma íntegra ou fragmentada. Hemácias, bactérias, fungos, protozoários podem ser aglutinados diretamente por anticorpo. Os testes para detectar anticorpos específicos são realizados empregando-se diluições em série do anticorpo, frente a uma quantidade constante de antígeno. Após um período de incubação, a aglutinação se completa e o resultado é geralmente expresso como o título do anti-soro, isto é, a máxima diluição em que ocorre a aglutinação. Tipagem ABO Testes confirmatórios para sífilis Salmonelose aviária Coriza infecciosa das galinhas Micoplasmose Brucelose Aglutinação bacteriana Presença de infecção Diferenciação de espécies

16. INIBIÇÃO DA AGLUTINAÇÃO Teste de gravidez NEGATIVO POSITIVO Urina Soro anti hCG + Urina Soro anti hCG + Ac Ac Particulas revestidas com hCG Incubados e colocados em placa Incubados e colocados em placa + + hCG Positivo não aglutina, pois os Ac se ligaram ao hCG da urina na incubação Negativo aglutina

17. TESTE DE COOMBS Acantiimunoglobulinas (Robert Coombs). Doença Hemolítica do Recém Nato – mãe produz IgG anti-Rh (DHRN) Não aglutinam os eritrócitos. Direto: Ac ligados aos eritrócitos fetais. Indireto: Ac anti-Rh não aglutinantes no soro materno. Permite detectar incompatibilidades Rh, prevenindo contra DHRN.

18. RELAÇÃO ANTÍGENO X ANTICORPO O efeito PRÓ-ZONA ocorre devido ao excesso de anticorpos na amostra, que ocorre nos soros fortemente reagentes. Pode ocasionar resultados FALSO-NEGATIVOS. Para evitar o efeito pró-zona, emprega-se soro diluído. Ocorre FALSO-POSITIVOS