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Imunohematologia e-sistema-abo-731041

Imunohematologia

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Noções de
Imunohematologia
e
Sistema ABO
Rogerio Evaristo Chaveiro Fam
Biomédico
Especialista em Saúde Publica
Os antígenos são substâncias que podem ser reconhecidas pelas
células T, células B ou ambas através de receptores
representados por anticorpos ou TCR (receptor de célula T)
particular.
Antígeno completo ou imunógeno: é capaz de ativar uma
resposta imune (Bactérias, fungos, parasitas, etc.)
Antígeno incompleto: não é capaz de ativar uma resposta imune,
mas pode causar entre outras reações, sensibilização.
(antibióticos, várias drogas, etc.)
Antígenos Eritrocitários: antígenos de grupos sanguíneos sendo
A, B e D os principais.
ANTÍGENOS
ANTÍGENOS ERITROCITÁRIOS
Existem mais de 250 tipos de antígenos eritrocitários.
São as substâncias produzidas emresposta aumestímulo
imunogênico e que são capazes de interagir
especificamentecom o epítopo antigênico que provocou a
sua síntese.
ANTICORPOS
Contém 4 cadeias polipeptídicas:
 2 cadeias leves (L)
 2 cadeias pesadas (H)
 Carboidratos
 União por pontes dissulfídricas
ESTRUTURA BÁSICA
Representação esquemáticadaconfiguraçãopentamérica
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Imunohematologia e-sistema-abo-731041

  • 1. Noções de Imunohematologia e Sistema ABO Rogerio Evaristo Chaveiro Fam Biomédico Especialista em Saúde Publica
  • 2. Os antígenos são substâncias que podem ser reconhecidas pelas células T, células B ou ambas através de receptores representados por anticorpos ou TCR (receptor de célula T) particular. Antígeno completo ou imunógeno: é capaz de ativar uma resposta imune (Bactérias, fungos, parasitas, etc.) Antígeno incompleto: não é capaz de ativar uma resposta imune, mas pode causar entre outras reações, sensibilização. (antibióticos, várias drogas, etc.) Antígenos Eritrocitários: antígenos de grupos sanguíneos sendo A, B e D os principais. ANTÍGENOS
  • 3. ANTÍGENOS ERITROCITÁRIOS Existem mais de 250 tipos de antígenos eritrocitários.
  • 4. São as substâncias produzidas emresposta aumestímulo imunogênico e que são capazes de interagir especificamentecom o epítopo antigênico que provocou a sua síntese. ANTICORPOS
  • 5. Contém 4 cadeias polipeptídicas:  2 cadeias leves (L)  2 cadeias pesadas (H)  Carboidratos  União por pontes dissulfídricas ESTRUTURA BÁSICA
  • 7. Resposta Primária: Resulta na produção de imunoglobulina IgM depois de um período de 1 a 2 semanas . Resposta Secundária: exposição resulta na produção de IgG num título elevado em um curto espaço de tempo (resposta anamnéstica) RESPOSTA IMUNE
  • 8. Autoanticorpos: anticorpos do soro de indivíduos que reagem com seus próprios antígenos. (Doenças autoimunes) Aloanticorpos: anticorpos que reagem com antígenos da mesma espécie pertencentes a indivíduos geneticamente diferentes. (gravidez ou transfusão sanguínea incompatível) TIPOS DE ANTICORPOS
  • 9. • Completos ou Aglutinantes: capazes de aglutinar em solução salina, são geralmente IgM • Incompletos ou bloqueadores ou não aglutinantes: fixam-se às hemácias sem conseguir aglutiná-las (promovem sensibilização). Costumam ser IgG, porém certos IgG (anti-A, anti-B) são aglutinantes e certos IgM não o são (anti-Jka). TIPOS DE ANTICORPOS
  • 10. • Monoclonais preparados apartirdehibridomas • Policlonais preparados apartirdaimunização de animaiscomproteínashumanas. TIPOS DE ANTICORPOS
  • 11. • Primeiro sistema de grupo sanguíneo a ser descoberto em1900. • Aindahojeéo principalsistemadegrupo sanguíneo • Possui anticorpos de ocorrência “natural” (Anti-A, Anti-B,Anti–A,B) • Seus antígenos são formados a partir da adição de carboidratos a substâncias precursoras existentes namembranaeritrocitária SISTEMA ABO
  • 12. SISTEMA ABO • Esses antígenos são glicoproteínas e sua presença é controlada por uma série de 3 alelos (IA – IB – i) localizados no par do cromossomo 9. • Exemplo de Polialelia. • a letra I vem de isoaglutinação = aglutinação do sangue entre indivíduos da mesma sp.
  • 13. SISTEMA ABO • Entre os alelos IA e IB há codominância, assim, cada um fornece o seu efeito e aparecem as duas substâncias. • Os alelos IA e IB são dominantes em relação ao i. • A relação de dominância entre os três alelos é: IA = IB > i (recessivo)
  • 15. De ocorrência natural, resultam de estímulos inaparentes; São geralmente da classe IgM, podendo também ser da classe IgG; A forma imune pode ser produzida por indivíduos expostos a eritrócitosestranhos(reaçõestransfusionaisougestacionais); Anti-A, Anti-B e indivíduos do grupo O produzem também produzemAnti-A,B ANTICORPOS ABO
  • 16. Grupos do Sistema ABO Fenótipo Genótipos Aglutinogênios Aglutininas A IA IA , IA i A Anti-B B IB IB ,IB i B Anti-A AB IA IB A e B Nenhum O ii Nenhum Anti-A e Anti-B
  • 17. FENÓTIPO BOMBAIM • O fenótipo, Bombaim é um fenômeno raro, descoberto na cidade indiana de Bombaim, por isso o nome. • Esse fenômeno faz com que indivíduos com o genótipo dos grupos sanguíneos “A”, “B” e “AB” expressem o fenótipo do grupo sanguíneo “O”. • Na Índia a prevalência desse fenótipo é de 1:10.000 e na Europa é de 1:1.000.000.
  • 18. FENÓTIPO BOMBAIM - Etiologia • A expressão dos genótipos do sistema sanguíneo ABO está relacionada com o lócus gênico denominado H, existente no cromossomo 19, onde está o alelo H (dominante) ou h (recessivo). • O alelo H produz uma enzima (enzima H) que transforma uma substância precursora em antígeno H, que, por sua vez, é transformado em antígeno A ou B por ação, respectivamente, de enzimas sintetizadas sob o comando dos alelos IA ou IB. • Como o alelo i é inativo, não promove qualquer transformação no antígeno H, que permanece presente nas hemácias dos indivíduos do verdadeiro sangue tipo “O”.
  • 19. FENÓTIPO BOMBAIM - Etiologia • Pessoas com o fenótipo Bombaim não produzem a enzima ativa (H) que transformaria a substância precursora em antígeno H. • Sendo assim, a sua ausência [da enzima] faz com que essas pessoas não apresentem os antígenos “A” e “B” nem o “H”, em suas hemácias, mesmo possuindo os alelos responsáveis pela síntese dessas substâncias. • Então, indivíduos HH ou Hh (quase toda a população humana), são capazes de expressar os genótipos conhecidos
  • 20. FENÓTIPO BOMBAIM - Etiologia • Indivíduos de composição genética hh por outro lado, são incapazes de promover essa transformação, não expressando, como consequência, os referidos genótipos, caracterizando, portanto, os falsos “O”. • Portanto, o Fenótipo Bombaim não tem antígenos H na superfícies das hemácias e tem anticorpos Anti-H. • Ser deficiente para a enzima H não causa doença. Mas se uma transfusão sanguínea for necessária, pessoas com fenótipo Bombaim podem receber sangue apenas de outros doadores que também são deficientes para a enzima H. • Se pacientes com Anti-H (fenótipo Bombaim) em sua circulação recebem transfusão de sangue que contém antígeno H (sangue do grupo O, por exemplo), podem correr o risco de sofrer uma reação hemolítica aguda transfusional.
  • 21. FENÓTIPO BOMBAIM - Etiologia • O teste para detectar se uma pessoa é realmente “O” ou falso “O” é feito aplicando- se o anticorpo anti- H em uma gota de sangue. • Se houver aglutinação, o indivíduo possui o antígeno H é um “O” verdadeiro, ou seja, “ii”. • Se não ocorrer aglutinação, o indivíduo não possui o antígeno H, sendo, portanto, falso “O”, podendo ser IAIA, IAi, IBIB, IBi ou IAIB.
  • 22. • ProvaDireta detecçãodeantígenos através do uso dedeanti-soros conhecidos • ProvaReversa  detecção deanticorpos através do uso dehemácias conhecidas Determinação do grupo Sanguíneo
  • 23. REAGENTES UTILIZADOS NA FENOTIPAGEM ABO Prova direta • Anti-soros: • anti-A • anti-B • anti-AB,dispensávelquandoanti-Ae anti-B sãomonoclonais
  • 25. REAGENTES UTILIZADOS NA FENOTIPAGEM ABO Prova Reversa • Hemácias • HemáciaA1 • HemáciaB • Hemácias A2 e O(opcionais)
  • 26. Prova reversaProva direta O AB B A BA1Anti-A,BAnti-BAnti-AGrupos Testar o plasma com as hemácias: Testar as hemácias com os anti-soros: FENOTIPAGEM ABO Prova direta Prova reversa Testar as hemácias com os anti-soros: Testar o plasma com as hemácias:
  • 27. Grupo AB COMPATIBILIDADE ABO PARA HEMÁCIAS Grupo O Grupo A Grupo B
  • 28. •Descobertoem1939 •Após oABO, éo sistemademaiorimportância clínicaeo mais complexo •Principais antígenos: D,C,E,c ,e •O antígenoRh éumalipoproteínaeconstitui parte integrantedaparededahemácia SISTEMA Rh
  • 29. • O termoRh positivo eRh negativorefere-seà presençaouausência do antígenoD. • O antígenoD éo mais clinicamentesignificante ANTÍGENO D
  • 30. • MaioriaéIgG • São imunes, estimulados por transfusão ou gravidez • Persistem nacirculação porlongos períodos • Não fixamcomplemento • Atravessamaplacenta ANTICORPOS Rh
  • 32. Eritroblastose Fetal • A Eritroblastose fetal ou doença hemolítica do recém-nascido é caracterizada pela destruição das hemácias do feto ou do recém- nascido por anticorpos anti-Rh produzidos pela mãe. • Durante a gestação ocorre passagem, através da placenta, apenas de plasma da mãe para o filho e vice-versa devido a chamada barreira hemato-placentária;
  • 33. Eritroblastose Fetal • Pode ocorrer, entretanto, acidentes vasculares na placenta, o que permite a passagem de hemácias do feto para a circulação materna. • Nos casos em que a mãe é Rh negativo e o feto possui sangue fator Rh positivo os antígenos existentes em suas hemácias estimularão o sistema imune materno a produzir anticorpos anti-Rh que ficarão no plasma materno e podem, por serem da classe IgG, passar pela BHP provocando lise nas hemácias fetais.
  • 35. Eritroblastose fetal • Conduta para se evitar a ocorrência de DHRN: Imunoglobulina anti-Rh
  • 36. • DIRETO: demonstra hemácias sensibilizadas “in vivo”poranticorpo oufrações decomplemento. • INDIRETO: permite a execução de pesquisa e identificação deanticorpos anti-eritrocitários, teste decompatibilidade, fenotipagens eritrocitárias. TESTE DE ANTIGLOBULINA (COOMBS)
  • 37. Aplicações: 1. Na detecção de anticorpos maternos fixados aos antígenos correspondentes em hemácias de cordão umbilicalouderecém-nascidos. (Diagnóstico da Doença Hemolítica Peri-Natal por incompatibilidadematerno-fetal). TESTE DE ANTIGLOBULINA DIRETO (TAD)
  • 38. TESTE DE ANTIGLOBULINA DIRETO (TAD) • 2.Nadetecçãodeanticorposeritrocitáriosnashemácias depacientesportadoresdeDoençaHemolítica Adquiridadotipo Auto-imune. • 3.Nadetecçãodeanticorposeritrocitáriosresponsáveis porreaçõeshemolíticaspós-transfusionais.
  • 39. Aplicações Pesquisa deanticorpos Irregulares Identificação deAnticorpos Irregulares Fenotipagem Pesquisa deD fraco TestedeAuto-controle TESTE DE ANTIGLOBULINA INDIRETO
  • 41. Exercícios • Para se determinar o tipo sanguíneo de uma pessoa, foram colocadas três gotas de seu sangue sobre uma lâmina de vidro, adicionando-se, a cada uma, soros anti-A, anti-Rh e anti-B, conforme o esquema adiante. Após alguns segundos, notou-se aglomeração de hemácias apenas no local onde havia soros anti-B e anti-A. Com relação a esses resultados, assinale a opção correspondente ao possível genótipo da pessoa em teste: a) IBIBRR b) IBirr c) IBiRr d) IAIBrr e) iiRR Gabarito: D
  • 42. Exercícios No heredograma a seguir estão indicados os fenótipos dos grupos sangüíneos ABO e Rh.O indivíduo 6 deverá ser, em relação aos locos dos sistemas ABO e Rh, respectivamente: a) heterozigoto - heterozigoto. b) heterozigoto - homozigoto dominante. c) heterozigoto - homozigoto recessivo. d) homozigoto - heterozigoto. e) homozigoto - homozigoto dominante. Gabarito: A
  • 43. Exercícios O pai e a mãe de um par de gêmeos monozigóticos têm tipo sangüíneo A. Uma outra criança desse casal é do grupo sangüíneo O. a) Quais os genótipos do pai e da mãe? b) Qual é a probabilidade de que ambos os gêmeos tenham sangue do tipo O? Gabarito: a) pai = IAi, mãe = IAi b) 1/4
  • 44. Exercícios Um homem faleceu por causa de uma transfusão de sangue. Sabendo-se que seus pais pertenciam aos grupos B (homozigoto) e AB, pergunta-se: a) qual é o grupo sanguíneo do homem em questão? b) qual ou quais os possíveis grupos sanguíneos usados erroneamente na transfusão?Gabarito: a) Grupo B. b) Grupo A ou AB.
  • 45. Exercícios Nos anos 40, o famoso cineasta Charlie ChapIin foi acusado de ser o pai de uma criança, fato que ele não admitia. Os exames de sangue revelaram que a mãe era do grupo A, a criança do grupo B e Chaplin do grupo O. Ao final do julgamento, Chaplin foi considerado como sendo um possível pai da criança. a) O veredicto é aceitável? Por quê? b) Na hipótese de Chaplin ter tido filhos com a referida mulher, de que tipos sanguíneos eles poderiam ser? Gabarito: a) Não, porque a criança herdou o gene IB de seu pai verdadeiro e não de Chaplin que pertencia ao grupo O (ii). b) A (IAi) ou O (ii).
  • 46. Exercícios O rei Salomão resolveu uma disputa entre duas mulheres que reclamavam a posse de uma criança. Ao propor dividir a criança ao meio, uma das mulheres desistiu. O rei então concluiu que aquela que havia desistido era de fato a mãe verdadeira. Nos tribunais modernos, um juiz pode utilizar a análise dos grupos sanguíneos e teste de DNA para ajudar a solucionar questões semelhantes. Analisando uma situação em que uma mulher de sangue A atribuía a paternidade de seu filho de sangue O a um homem de sangue B, o juiz não pôde chegar a nenhuma decisão conclusiva. a) Explique por quê. b) Qual deveria ser o grupo sanguíneo do homem para que a decisão pudesse ser conclusiva? Gabarito: a) Um homem do grupo sangüíneo B pode ser heterozigoto (IBi) e, portanto, pai de criança do grupo O (ii). b) Se o homem fosse do grupo AB, com genótipo IAIB, não poderia ser o pai de criança O (ii).
  • 47. Exercícios Nas hemácias de um indivíduo pertencente ao grupo sanguíneo B: a) existe o aglutinógeno B b) existe o aglutinógeno A c) existe a aglutinina A d) existe a aglutinina B e) existem o aglutinógeno A e a aglutinina B Gabarito: A
  • 48. Exercícios Observe a árvore genealógica a seguir para o grupo sangüíneo (ABO) em uma família: Legenda: Grupo "A": A/A ou A/O Grupo "B": B/B ou B/O Grupo "AB": A/B Grupo "O": O/O Gabarito: B OBS: 1. O indivíduo 2 é mulher do grupo sangüíneo "A" 2. O indivíduo 4 é homem do grupo sangüíneo "B" 3. O indivíduo 5 é mulher do grupo sangüíneo "O" Sobre a árvore anterior, marque a opção correta: a) o indivíduo 3 é do grupo sangüíneo "AB" b) o indivíduo 1 pode ser do grupo sangüíneo "AB" c) o indivíduo 1 é do grupo sangüíneo "A" d) o indivíduo 1 é do grupo sangüíneo "O"
  • 49. Exercícios Gabarito: C A respeito do heredograma acima, que considera o sistema sangüíneo ABO, assinale a alternativa INCORRETA. a) O indivíduo 9 pode ser doador universal. b) O indivíduo 7 pertence ao grupo sangüíneo A. c) O indivíduo 6 é homozigoto. d) O indivíduo 1 é receptor universal. e) O indivíduo 8 é heterozigoto.
  • 50. Observe a genealogia. Para o casal (5 e 6) que pretende ter muitos filhos, foram feitas as quatro afirmações a seguir. I - O casal só terá filhos AB e Rh positivo. II - Para o sistema ABO, o casal poderá ter filhos que não poderão doar sangue para qualquer um dos pais. III - O casal poderá ter filhos Rh positivo, que terão suas hemácias lisadas por anticorpos anti-Rh produzidos durante a gravidez da mãe. IV - Se for considerado apenas o sistema Rh, o pai poderá doar sangue a qualquer um de seus filhos. São corretas, apenas, as afirmações a) II e IV b) I, II e IV c) II, III e IV d) I, II e III. e) I e III. Exercícios Gabarito: A
  • 51. Exercícios Gabarito: A Na figura a seguir são mostrados os genótipos e fenótipos possíveis, considerando-se os alelos IA, IB e i determinantes dos grupos sanguíneos do sistema ABO no homem. De acordo com a figura, analise as proposições a seguir. 1) Todos os descendentes de um casal de genótipo tipo 2 serão do grupo A e apresentarão em suas hemácias o aglutinogênio A. 2) Indivíduos do grupo sanguíneo B de genótipo 3 ou 4 apresentam na membrana de suas hemácias aglutinogênio B e, no plasma, aglutinina anti-A. 3) Os descendentes de um casal (genótipo 5) do grupo sanguíneo AB serão fenotipicamente AB e, como têm em seus genótipos os alelos IA e IB, apresentam, na membrana de suas hemácias, os antígenos A e B. 4) Indivíduos do grupo sanguíneo O de genótipo 6, apresentam aglutinogênios A e B no plasma, mas não têm aglutininas anti-A e anti-B na membrana de suas hemácias. Está(ão) correta(s) apenas: a) 2 b) 1 e 4 c) 2 e 4 d) 2 e 3 e) 2, 3 e 4
  • 52. Exercícios Gabarito: D O esquema apresenta uma árvore genealógica de alguns primatas e seus possíveis grupos sanguíneos no sistema ABO De acordo com o esquema, somente humanos podem apresentar os quatro grupos sanguíneos no sistema ABO. Considerando-se apenas os antígenos do sistema ABO, é correto afirmar, EXCETO: a) Apenas dois dos primatas citados podem apresentar indivíduos doadores universais no sistema ABO. b) Orangotangos podem apresentar três grupos sanguíneos, mas chimpanzés, apenas dois. c) Apenas dois dos primatas da árvore podem apresentar indivíduos receptores universais no sistema ABO. d) Alguns gorilas podem receber sangue de alguns orangotangos, mas não de chimpanzés.
  • 53. Exercícios Gabarito: A mãe da criança é a mulher número dois porque é Rh negativo já que seu sangue não sofre aglutinação em presença de soro anti-Rh (anti-D). Duas mulheres disputam a maternidade de uma criança, que, ao nascer, apresentou a doença hemolítica ou eritroblastose fetal. O sangue das duas mulheres foi testado com o uso do soro anti-Rh (anti-D) como mostra o esquema a seguir. Qual das mulheres poderia ser a verdadeira mãe daquela criança? Justifique sua resposta.
  • 54. A eritroblastose fetal é uma doença hemolítica adquirida apresentada por alguns recém-nascidos, sendo observado, além da anemia, icterícia e aumento do baço e fígado. Esta condição é provocada por incompatibilidade sanguínea do fator Rh, exclusivamente: Exercícios Gabarito: B a) quando a mãe é Rh+ e o filho Rh-; b) quando a mãe é Rh- e o filho Rh+ ; c) quando a mãe é Rh- e o pai Rh+ ; d) quando a mãe é Rh+ e o pai Rh-; e) independente do Rh materno, o filho é Rh-.
  • 55. Exercícios Gabarito: A Uma mulher Rh- casou-se e teve um filho. Numa segunda gestação a criança apresentou um quadro de eritroblastose fetal. Com estes dados, indique qual a opção que apresenta o fenótipo para o fator Rh da mãe, do pai e da criança, respectivamente. a) Mãe Rh negativo, Pai Rh positivo e Criança Rh positivo. b) Mãe Rh positivo, Pai Rh positivo e Criança Rh negativo. c) Mãe Rh positiva, Pai Rh negativo e Criança Rh negativa. d) Mãe Rh positivo, Pai Rh negativo e Criança Rh positivo. e) Mãe Rh negativo, Pai Rh positivo e Criança Rh negativo.
  • 56. Exercícios Gabarito: B Interpretando a figura a seguir sobre a Doença Hemolítica do recém-nascido (DHR), assinale a afirmativa INCORRETA. a) A placenta normalmente funciona como uma barreira que separa as células sanguíneas fetais e maternas. b) Após a 1•gravidez, os antígenos fetais não serão capazes de induzir a produção de anticorpos anti-Rh pela mãe. c) Em III, após o contato com o antígeno Rh+, a mãe produz anticorpos anti-Rh que podem ser transferidos para a corrente sanguínea fetal. d) Se, logo após o parto da 1•gravidez, a mãe recebesse anticorpos anti-Rh, a DHR poderia ser evitada.