O documento discute os benefícios do uso da reação em cadeia da polimerase (PCR) no diagnóstico clínico veterinário, incluindo doenças infecciosas, parasitárias e genéticas. Apresenta exemplos de como a PCR pode ser usada para diagnosticar condições como leptospirose, coronavírus felino, peritonite infecciosa felina, linfoma felino associado ao vírus da imunodeficiência felina, e diarreias em cães e gatos. Discutem-se também os cuid

1. PCR
Reação em Cadeia da
polimerase
Prof.ª Msc. Carolina Trochmann Cordeiro
Medicina Veterinária - UFPR
Residência em clínica médica de cães e gatos – UTP
Especialização em clínica médica de felinos – Qualittas
Mestre em ciências veterinárias – UFPR
Doutoranda em ciências veterinárias – UFPR
Benefícios na rotina clínica

2. PCR
Reação em cadeia da polimerase
» Ferramenta valiosa da clinica
»Infecciosas e Parasitárias
» Genéticas
» Oncologia – biópsia líquida

3. Relembrando . . .

5. T T T C C G A A G C C
T T A A G G G G A A
A T T G G G C C G G T
T A A

7. T A C T A G A G C A T T
T A C T A G A G C A T T
T A C T A G A G C A T T
T A C T A G A G C A T T
T A C T A G A G C A T T
T A C T A G A G C A T T
T A C T A G A G C A T T
T A C T A G A G C A T T
T A C T A G A G C A T T
T A C T A G A G C A T T
T A C T A G A G C A T T

9. Em qualquer
célula, tecido ou
sangue que
CONTENHA o
material genético
ou partes dele

10. Diagnóstico LEPTO
» Pode avaliar amostras de sangue, urina ou tecido
» pensar na fase da doença
» antígeno tem que estar na amostra!!!!
» Pró: Caracteriza portador renal
» Contra :
» Não caracteriza o sorovar = dados epidemiológicos
» Intermitente
Em qualquer célula,
tecido ou sangue
que CONTENHA o
material genético
ou partes dele

11. » Coronavírus Felino
» Característica importante:
» Capacidade de Mutação ! ! !
Diagnóstico PIF
Sorologia ? ? ?

12. Diagnóstico PIF
??

13. Diagnóstico PIF
Qual amostra
??
Em qualquer célula,
tecido ou sangue
que CONTENHA o
material genético
ou partes dele

14. Diagnóstico FeLV
Viremia
DNA
RNA viral
Detectável no plasma em 1
semana pós exposição
DNA pró viral
Detectável no plasma em 2
semanas pós exposição

15. Diagnóstico FeLV
» Linfoma
» Leucemia
» Neurológicos
» Anemias
Em qualquer célula,
tecido ou sangue
que CONTENHA o
material genético
ou partes dele
?
?
?

16. Diagnóstico FIV
A
B
C
ED
Qual o do
Brasil?
E se o nosso
for W?

17. Diagnóstico
Hemoparasitoses
» Muitas vezes dificeis de detectar na
lâmina
» Vários agentes diferentes (tto?)
» Ou podem estar só na medula óssea
» Cuidado: realmente é o problema?
Painel Anemia Cão »
Ehrlichia, Babesia, Anaplasma, Leishmania,
Mycoplasma, Rangelia, Hepatozoon,
Leptospira e Rickettsia
Painel Hemoparasitas Cão Completo »
Ehlichia, Babesia, Leishmania,
Anaplasma,Rangelia, Mycoplasma
Painel Anemia Gato Completo »
FIV, FELV, Mycoplasma

18. Diagnóstico Diarreias
» Difícil cultivo (anaeróbicas...)
» Dificil identificação
» Cuidado: extração com contaminantes
» Cuidado: realmente é o problema?
Painel Diarreia Cão »
Coronavirus, Campylobacter, Giardia, Parvovirus,
Cinomose, Circovirus
Painel Diarreia Gato »
Coronavirus, Cryptosporidium, Giardia,
Toxoplasma, Tritrichomonas, Parvovirus

19. Diagnóstico Neurológicas
» Difícil cultivo
» Dificil identificação
» Quadros muito semelhantes
» Muitas vezes presente só no SNC
» Amostra: Liquor -20°
» Amostras + + +
Painel Neurológico Cão »
Cinomose, Cryptococcus, Neospora,
Toxoplasma
Painel Neurológico Gato »
Coronavirus, Cryptococcus,
Toxoplasma, Felv, FIV, Panleuco

20. Material e conservação
» Sangue total
» Anticoagulante e não heparinizado
(citrato de sódio ou EDTA)
» -20 a -80°
» Amostra sempre em duplicata

21. Material e conservação
» Tecido ou líquor
» -20°
» Etanol a 95% temperatura ambiente
» RNA
» -80°
» Cuidados no manuseio

22. Sempre pensar . . .
» Sofre influência:
» Tratamentos
» Fase de liberação ou replicação
» Local que está em maior quantidade

23. Erros
» Laboratorial (mts fases)
» Extração do material – contaminação
» Má conservação do material
» Vacinação com virus vivo modificado
» Hespes virus felino / Cinomose

25. Obrigada !
caroltrochmann@gmail.com
https://pt.slideshare.net
/CarolinaTrochmann
Confraria.felina Caroltrochmann