O documento resume uma aula sobre avaliação genética em homens inférteis. Apresenta as principais causas genéticas de infertilidade masculina como anormalidades cromossômicas, mutações gênicas e microdeleções no cromossomo Y. Discutem-se os métodos de avaliação genética como cariótipo, pesquisa de mutações no gene CFTR e de microdeleções no Y, além da importância do aconselhamento genético.

1. Congresso Brasileiro de Urologia – Florianópolis – 2011
Curso de Pós-graduação – Avaliação em Infertilidade Masculina
Sandro Esteves
Diretor, ANDROFERT
Campinas, SP
Esteves, 1

2. Conteúdo da Aula
Base Genética Fertilidade Masculina
Infertilidade de Causa Genética
Avaliação Genética do Homem Infértil:
Para quem e como?
Esteves, 2

3. Base Genética Fertilidade Masculina
Hamada, Esteves, Agarwal: Genetics and Male Infertility. In: Dubey A [ed]. Infertility:
Management and Treatment, Jaypee Med. Pub., In press

4. Base Genética Fertilidade Masculina
Hamada, Esteves, Agarwal: Genetics and Male Infertility. In: Dubey A [ed]. Infertility:
Management and Treatment, Jaypee Med. Pub., In press

5. Base Genética
Fertilidade
Masculina
Hamada, Esteves, Agarwal: Genetics and Male Infertility. In: Dubey A [ed]. Infertility:
Management and Treatment, Jaypee Med. Pub., In press

6. Base Genética Fertilidade Masculina
Adaptado de: Esteves & Agarwal. Novel concepts in male infertility. Int Braz J Urol 2011;37:5-15.

7. Infertilidade Causa
Genética
Genótipo Céls. Somáticas Normal
• Anormalidades cromossômicas nos espermatozóides
• Alteração integridade DNA espermático
• Defeitos mitocondriais
• Alterações epigenéticas (ex. S. Angelman, Beckwith-Wiedemann)
Genótipo Céls. Somáticas Anormal
• Hipogonadismo Hipogonadotrófico: ex.: S. Kallman
• Aberração Cromossômica (aneuploidias/translocações): ex. S. Klinefelter
• Mutações Gênicas: ex. gene CFTR (CBAVD)
• Deleção Cromossômica Parcial: ex. Microdeleção Y
• Alts. Gênicas c/Repercussão Funcional: ex. S. Kartagener
Hamada, Esteves, Agarwal: Genetics and Male Infertility. In: Dubey A [ed]. Infertility:
Management and Treatment, Jaypee Med. Pub., In press

8. Infertilidade Causa Genética
Aberrações Cromossômicas & Concentração
Espermática
12
10,4%
10
8
6 4,6%
4
2 1,0%
0
0 >0-19 >19
Frequência de alterações cromossômicas
Chandley et al. , 1972; De Kretser et al, 1972; Matsuda et al, 1992
Esteves, 8

9. 1. Aberrações Cromossômicas
Síndrome Klinefelter
Prevalência:
1:600-1.000 nascidos sexo masculino
~5% casos oligozoospermia grave
~11% casos azoospermia não-obstrutiva
Cariótipo (Aneuploidia):
Clássico: 47,XXY; Mosaico: 47,XXY/46,XY
Clínica:
Testículos hipotróficos
FSH elevado, hipogonadismo, ginecomastia (1/3 casos)
Azoospermia (92% casos)
Oligozoospermia grave (~0.1 milhão/mL)
Esteves, 9

10. 1. Aberrações Cromossômicas
Síndrome Klinefelter
Azoospermia:
Focos células germinativas: 40-50% casos
Histologia: SCO (espermatogênese focal 8-24% túbulos)
Importância: captação Sptz para ICSI
Espermatogônia 47,XXY:
Gametas aneuplóides e haplóides
Impacto:
Sciurano et al., Hum
Chance paternidade biológica via ICSI Reprod. 2009
Risco Genético:
- Abortamento
- Saúde prole (Klinefelter, Turner)
- Diagnóstico genético pré-implantacional (PGD)
Esteves, 10

11. 2. Mutações Gênicas
Agenesia Congênita Canais Deferentes
Prevalência:
Homens inférteis: 1,3%; Azoospermia Obstrutiva: 6%
Característica:
Mutação gene fibrose cística (7q:190kb e 27 exons)
CFTR: cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
Clínica:
Azoospermia + Hipospermia (pH ácido)
FSH normal
Epidídimos engurgitados (ausência parcial)
Deferentes ausentes
Vesículas seminais hipoplásicas ou ausentes
Esteves, 11

12. 2. Mutações Gênicas
Agenesia Congênita Canais Deferentes
Mutação gene CFTR detectada 80% CBAVD
∆F508, polimorfismos 5T/7T, R117H (+1,500 mutações)
Agenesia unilateral canal deferente
pode estar associada à mutação CFTR;
agenesia renal ipsilateral pode coexistir
Obstrução idiopática e S. Young (sinusite
crônica, bronquiectasia e azoospermia obstrutiva)
pode estar associada à mutação CFTR
Esteves, Miyaoka & Agarwal. An update on the initial assessment of the
infertile male. CLINICS 2011; 66:1-10.
Esteves, 12

13. 2. Mutações Gênicas
Agenesia Congênita Canais Deferentes
SUCESSO CAPTAÇÃO ESPERMATOZÓIDES NA
AZOOSPERMIA OBSTRUTIVA
100% 100%
95.3%
CBAVD (N=30) Vasectomia (N=64) Pós-infecção (N=48)
Esteves SC et al. Success of percutaneous sperm retrieval and
intracytoplasmic sperm injection (ICSI) in obstructive azoospermic (OA) men
according to the cause of obstruction. Fertil Steril. 2010;94 (Suppl):S233.
Esteves, 13

14. 2. Mutações Gênicas
Agenesia Congênita Canais Deferentes
CBAVD:
- Espermatogênese preservada
- Aspiração espermatozóides & ICSI
Risco Genético :
Mulheres caucasianas tem 4% chance de serem
portadoras mutações gene CFTR
- Risco fibrose cística prole:
25% chance
FC: doença autossômica recessiva letal
Diagnóstico genético pré-implantacional (PGD)
Esteves, Miyaoka & Agarwal. An update on the initial assessment of the
Esteves, 14
infertile male. CLINICS 2011; 66:1-10.

15. 3. Deleção Gênica
Microdeleções Cromossomo Y
Yp: região SRY associada ao desenvolvimento testicular
Yq: AZF associada à espermatogênese
Hamada, Esteves, Agarwal: Genetics and Male Infertility. In: Dubey A. In press

16. 3. Deleção Gênica
Microdeleções Cromossomo Y
Prevalência:
1:2.000-3.000 meninos nascidos
Homens inférteis: 5-12%
Característica:
Deleções do tipo de novo
Clínica:
Testículos normais ou hipotróficos
FSH normal ou elevado
Azoospermia ou Oligozoospermia grave
Pode coexistir com varicocele e/ou criptorquidia
Esteves, 16
Esteves, Miyaoka & Agarwal. An update on the initial assessment of the
infertile male. CLINICS 2011; 66:1-10.

17. Microdeleções Cromossomo Y e
Concentração Espermática
9 10,4%
8
7
6
4,6%
5
4
3 1,0%
2
1 0
0
0 0-1 1-5 >5
Frequência de microdeleções Yq
Girardi et al, Hum Reprod 1997

18. Microdeleções Cromossomo Y e
Riscos Genéticos
 Transmissão microdeleções AZFc para a prole via
concepção natural ou assistida (ICSI)
Vogt, 1996; Pryor, 1997; Chang, 1999; Saut, 2000
 Portadores microdeleções Y são inférteis e pode
ocorrer diminuição concentração espermática com o
tempo
Chang, 1999; Girardi, 1997; Simoni, 1997; Saut, 2000

19. Avaliação Genética do Homem Infértil
Importância
1) Determinação causa genética infertilidade
2) Prognóstico:
chance captação Sptz (azoospermia)
impacto nas chances de gravidez
3) Aconselhamento genético:
transmissão infertilidade
risco malformações, retardo mental, etc.
risco abortamento
Esteves, Miyaoka & Agarwal. An update on the initial assessment of the
Esteves, 19 infertile male. CLINICS 2011; 66:1-10.

20. Avaliação Genética do Homem Infértil
Para quem e como?
Oligozoospermia Cariótipo Bandas G Cariótipo: cultura linfócitos
Indicações
Testes
Método
sangue
grave (≤5 periférico, extração
milhões/mL) cromossomos e coloração
Giemsa
Pesquisa
Azoospermia Não- Microdeleções MDCY: PCR linfócitos
obstrutiva Cromossomo Y sangue periférico
(amplificação sítio AZF do
Yq e identificação genes
marcadores)
Azoospermia Pesquisa mutações PCR linfócitos
Obstrutiva (agenesia gene CFTR sangue periférico
canais deferentes) (amplificação gene
Azoospermia CFTR 3q e pesquisa
Casal (mínimo mutações)
obstrutiva idiopática esposa)
Candidatos às TRA
Dada, Esteves, Agarwal. Genetic testing in male infertility. Open Reprod Sci J 2011;3:42-53.

23. Avaliação Genética do Homem Infértil
Impacto
Azoospermia
6%
15%
11%
68%

24. Avaliação Genética do Homem Infértil
Como interpretar resultados anormais?
Cariótipo: Oligozoospermia: Aconselhamento
Opções
Manejo
Klinefelter
47,XXY Concepção natural?? genético
47,XXY/46,XY TRA: ICSI Discutir PGD (ICSI)
Tratamento
Espermograma: Azoospermia:
medicamentoso
Azoospermia TESE ou micro-TESE
Oligozoospermia
Esteves, Miyaoka & Agarwal. Surgical treatment of male infertility in the era of
ICSI – new insights. CLINICS 2011; 66:1463-77.

25. Síndrome Klinefelter
inibidores aromatase & chance sucesso
captação espermatozóides micro-TESE
350
300
72%
250
200
55% Resposta pos
150
Resposta neg
100
50
0
Testosterona Basal T pós-IA
Ramasamy et al., J Urol 2009

26. Avaliação Genética do Homem Infértil
Como interpretar resultados anormais?
PCR gene CFTR TRA: Aconselhamento
CBAVD
Opções
Manejo
esposa: PESA/TESA/MESA & genético:
Mutação presente ICSI Mt+: Risco FC
(Mt+) (ICSI c/PGD)
Mutação ausente
(Mt-) não exclui
risco (máx. 95% Mt-: Risco
gene mapeado) CBAVD menino
(ICSI c/PGD &
Espermograma: sexagem
Azoospermia embrionária)
Esteves, Miyaoka & Agarwal. Surgical treatment of male infertility in the era of
ICSI – new insights. CLINICS 2011; 66:1463-77.

27. Avaliação Genética do Homem Infértil
Como interpretar resultados anormais?
PCR AZF: TRA: Indicação Extração
Manejo
Opções
MDCY
Deleção isolada Oligozoospermia: Espermatozóides
região AZFa depende região
ICSI AZF acometida
(5%), AZFb (16%)
ou AZFc (60%) Azoospermia Não- Aconselhamento
Deleções obstrutiva: genético:
combinadas (14%) TESE/micro-TESE & Transmissão
Espermograma: ICSI infertilidade prole
Oligozoospermia masculina (ICSI
c/PGD & sexagem
grave
embrionária)
Azoospermia
Esteves, Miyaoka & Agarwal. Surgical treatment of male infertility in the era of
ICSI – new insights. CLINICS 2011; 66:1463-77.

28. Sucesso Extração
Espermatozóides de acordo com a
região AZF deletada
Deleção
AZFb
Não há chance de
extrair Sptz testiculares .
Esteves SC & Agarwal A: Novel concepts in male infertility. Int Braz J Urol 2011; 37:5-15;
Foresta C, Moro E, Ferlin A: Y chromosome microdeletions and alterations of spermatogenesis. Endocr
Rev. 2001; 22: 226-39

29. Avaliação Genética do Homem Infértil
Potencial Reprodutivo ICSI homens azoospérmicos
Obstrutiva (N=142) Não-obstrutiva (N=172)
97.9%
55.2%
38.2%
25.0%
Sucesso Captação Espermatozóides Taxa Nascidos Vivos
Odds-ratio 43.0 1.86
IC 95% 10.3 – 179.5 1.03 – 2.89
p <0.01 0.03
Prudencio C, Seoul B, Esteves SC. Reproductive potential of azoospermic men
undergoing intracytoplasmic sperm injection is dependent on the type of azoospermia.
Fertil Steril 2010; 94(4):S232-3; Frontiers in Bioscience, in press.

30. Mensagens Finais
Base Genética Fertilidade Masculina
~2.000 genes implicados
Infertilidade de Causa Genética
15% homens inférteis; 30% azoospérmicos
Klinefelter, MDCY e CBAVD mais comuns
Avaliação Genética do Homem Infértil
Cariótipo, pesquisa MDCY, mutação gene CFTR
Indentifica causa infertilidade
Prognóstico chances paternidade e sucesso extração Sptz
Aconselhamento genético
Esteves, 30

31. Leitura Complementar
1) Esteves SC, Miyaoka R & Agarwal A. An update on the
initial assessment of the infertile male. CLINICS 2011;
66:1-10.
2) Dada R, Esteves SC, Agarwal A. Genetic testing in male
infertility. Open Reprod Sci J 2011; 3:42-53.
3) Esteves SC, Miyaoka R & Agarwal A. Surgical treatment
of male infertility in the era of ICSI – new insights.
CLINICS 2011; 66:1463-77.
4) Esteves SC & Agarwal A. Novel concepts in male
infertility. Int Braz J Urol 2011; 37: 5-15.