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BASTONETES GRAM NEGATIVOS NÃO FERMENTADORESAna Claudia Souza RodriguesFarmacêutica Bioquímica
BGNNFFermentadores utilizam carboidratos por via fermentativa aeróbia ou anaeróbia, por isso a base do TSI é sempre amarela (fermentou a Glicose).Os não fermentadores utilizam metabolismo respiratório (o O atua como aceptor final de e-_TSI
Bacilos Gram negativos não fermentadoresAeróbios;Não esporulados;Não fermentam carboidratos (via oxidativa).
PRINCIPAIS BGNNF DE IMPORTÂNCIA CLÍNICA (70%)PseudomonasaeruginosaStenotrophomonas maltophilaMoraxellacatarrhalisComplexo BurkholderiacepaciaAcinetobacter spp
BGNNF de pouca freqüência Alcaligenes sppChryseobacterium menigosepticumChryseobacterium indologenesMoraxellaOutras Pseudomonas
FONTES HOSPITALARESP. aeruginosa - água de torneira, superfícies, medicamentos, alimentos, equipamentosS. maltophilia - equipamentos, pias, superfícies germicidasAcinetobacter spp - pia, agua, equipamentos, medicamentos, sabões, superfíciesBurkholderia cepacia - água, soro, sabonetes, germicidas, equipamentos e medicamentos.
PseudomonasP. aeruginosa – oxidase +,  polissacarídeos capsulares podem produzir aspecto mucóide.Importantes em infecções hospitalares, pacientes com fibrose cística e imunodebilitados.Pigmentos – piocianina, pioverdina e piorrubina.
FATORES DE VIRULÊNCIA
TOXINAS
Bacilos Gram negativos não fermentadoresIdentificação:Inóculo mais densoCulturas jovens e purasOXIDASE;MOTILIDADE;Lisina, Dnase, Malonato, Uréia, OF-Glicose com e sem vaselina, Citrato, TSI, NaCl 6,5¨%, discos de Polimixina, Sufametoxazol, hemólise em Ágar Sangue.
BGGNF
PIGMENTOSVerde e/ou metálico e/ou marron e/ou vermelha: P.aeruginosa Amarelo: Chryseobacterium spp, P. luteola, P. orzihabitans, Burkholderia. (Micrococcus)Rosa: Roseomonas spp e Methylobacterium spp
OXIDASEdisco, fita ou Kit de oxidase - papel impregnado ou reativo na forma líquida a ser pingado  em papel de filtroMOTILIDADEPODE SER FEITA EM BHI OU TSB. COLOCAR UMA ALÇA DE BACTÉRIAS NO CALDO E DEIXAR EM REPOUSO DE 4 A 24 HORAS A T AMBIENTE.Observar movimento em aumento 40 com condensador baixo e pouca luz.
Lisina – Colocar uma alçada da bactéria e adicionar óleo mineral estéril. A mudança de cor significa resultado NEGATIVO.Dnase – Pode ser feita com HCl. Se observado halo claro o resultado é positivo.
Bacilos Gram negativos não fermentadores
Bacilos Gram negativos não fermentadores
Acinetobacter OXIDASE neg, IMÓVEL
Agora o Acinetobacter baumanii e o A. calcoaceticus formam um complexo e não são mais separados na identificação
BGNNF OXI neg, MOT pos
BGNNF OXI pos, MOT negpigmento amareloAna Claudia S. Rodrigues - HRMSBGNNF OXI pos, MOT pos
Aula 8
BGNNF OXI pos, MOT pos, H2S pos e Dnase pos
GELATINAColocar um pouco da bactéria em salina estéril. Mergulhar filme de raio X revelado. Após 24 horas a T ambiente se houver precipitação o teste é positivo.
OUTRAS PROVAS
Sistema de Kits prontos, semi-automatizados e automatizadosAuto-Scan –4 –microscanWalkAwayVitekBBLBactreyKits para não fermentadoresOutros
Principais informaçõesP. aeruginosa – brilho metálico, cresc. 42.C, pigmento verde, odor de fruta, oxidase +.
Principais informaçõesAcinetobacter spp– cocobacilos, salmão em MacConkey, imóvel, oxidase -.
Principais informaçõesStenotrophomonas maltophila – Parece P.aeruginosa, brilho metálico, oxidase 98% -, Lisina +, Dnase +, R a IMP e S a SUT.
Principais informaçõesBurkholderiacepacia– Amarelada, cheiro de terra molhada,  98% oxidase +, motilidade+, Dnase -
QUAL A IMPORTÂNCIA DE IDENTIFICAR AS “SUAS BACTÉRIAS”?O antibiograma depende da identificação;Pode ser desnecessário e inapropriado realizar o antibiograma;Muitos BGNNF estão relacionados a estado terminal do paciente;Se necessário o isolamento tem que ser feito rapidamente;Um erro na identificação pode levar a erro no TSA e consequentemente em morte do paciente.Preocupação com resistência nas bac. da comunidade.
BORDETELLAANA CLAUDIA SOUZA RODRIGUES2011
BORDETELLACocobacilo Gram negativo pequeno, aeróbios estritos e não fermentadores.Bordetellapertussis, BordetellaparapertussiseBordetellabronchisepticasão as principaisespécies causadoras de enfermidadeem seres humanos.Meios de cultura devemconter carbono, amido, sangue, albuminaToxina pertussis – unidades A e B (SI – subunid. Tóxica)
BORDETELLATOXINAS:adenilciclasa/hemolisina – inibe sistema imunetoxina dermonecrótica – vasoconstrição e isquemiacitotoxinatraqueal – afinidade pelas células epiteliais
BORDETELLAHomem – único reservatórioVacina – 1949Mais frequentes em crianças com menos de 1 ano.B. pertussis – mais graveIncubação – 7 a 10 diasEstado catarral (1º. Estágio – gdqt bactérias, febre, mal estar) seguido de fase paroxística (2º. Estágio - Tosse repetitiva – 1 a 2 semanas – aumento de muco, vômitos)  convalescência (3º. Estágio) complicações secundáriasTransmissão – inalação de aerosóis
BORDETELLAAmostra – aspirado nasofaríngeoMeio - Bordet-GengouIdentificação – sorológica ou biologia molecular.
BGNNFAna Claudia S. Rodriguesanaclaurod@yahoo.com.br
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  • 1. BASTONETES GRAM NEGATIVOS NÃO FERMENTADORESAna Claudia Souza RodriguesFarmacêutica Bioquímica
  • 2. BGNNFFermentadores utilizam carboidratos por via fermentativa aeróbia ou anaeróbia, por isso a base do TSI é sempre amarela (fermentou a Glicose).Os não fermentadores utilizam metabolismo respiratório (o O atua como aceptor final de e-_TSI
  • 3. Bacilos Gram negativos não fermentadoresAeróbios;Não esporulados;Não fermentam carboidratos (via oxidativa).
  • 4. PRINCIPAIS BGNNF DE IMPORTÂNCIA CLÍNICA (70%)PseudomonasaeruginosaStenotrophomonas maltophilaMoraxellacatarrhalisComplexo BurkholderiacepaciaAcinetobacter spp
  • 5. BGNNF de pouca freqüência Alcaligenes sppChryseobacterium menigosepticumChryseobacterium indologenesMoraxellaOutras Pseudomonas
  • 6. FONTES HOSPITALARESP. aeruginosa - água de torneira, superfícies, medicamentos, alimentos, equipamentosS. maltophilia - equipamentos, pias, superfícies germicidasAcinetobacter spp - pia, agua, equipamentos, medicamentos, sabões, superfíciesBurkholderia cepacia - água, soro, sabonetes, germicidas, equipamentos e medicamentos.
  • 7. PseudomonasP. aeruginosa – oxidase +, polissacarídeos capsulares podem produzir aspecto mucóide.Importantes em infecções hospitalares, pacientes com fibrose cística e imunodebilitados.Pigmentos – piocianina, pioverdina e piorrubina.
  • 10. Bacilos Gram negativos não fermentadoresIdentificação:Inóculo mais densoCulturas jovens e purasOXIDASE;MOTILIDADE;Lisina, Dnase, Malonato, Uréia, OF-Glicose com e sem vaselina, Citrato, TSI, NaCl 6,5¨%, discos de Polimixina, Sufametoxazol, hemólise em Ágar Sangue.
  • 11. BGGNF
  • 12. PIGMENTOSVerde e/ou metálico e/ou marron e/ou vermelha: P.aeruginosa Amarelo: Chryseobacterium spp, P. luteola, P. orzihabitans, Burkholderia. (Micrococcus)Rosa: Roseomonas spp e Methylobacterium spp
  • 13. OXIDASEdisco, fita ou Kit de oxidase - papel impregnado ou reativo na forma líquida a ser pingado em papel de filtroMOTILIDADEPODE SER FEITA EM BHI OU TSB. COLOCAR UMA ALÇA DE BACTÉRIAS NO CALDO E DEIXAR EM REPOUSO DE 4 A 24 HORAS A T AMBIENTE.Observar movimento em aumento 40 com condensador baixo e pouca luz.
  • 14. Lisina – Colocar uma alçada da bactéria e adicionar óleo mineral estéril. A mudança de cor significa resultado NEGATIVO.Dnase – Pode ser feita com HCl. Se observado halo claro o resultado é positivo.
  • 15. Bacilos Gram negativos não fermentadores
  • 16. Bacilos Gram negativos não fermentadores
  • 18. Agora o Acinetobacter baumanii e o A. calcoaceticus formam um complexo e não são mais separados na identificação
  • 19. BGNNF OXI neg, MOT pos
  • 20. BGNNF OXI pos, MOT negpigmento amareloAna Claudia S. Rodrigues - HRMSBGNNF OXI pos, MOT pos
  • 22. BGNNF OXI pos, MOT pos, H2S pos e Dnase pos
  • 23. GELATINAColocar um pouco da bactéria em salina estéril. Mergulhar filme de raio X revelado. Após 24 horas a T ambiente se houver precipitação o teste é positivo.
  • 25. Sistema de Kits prontos, semi-automatizados e automatizadosAuto-Scan –4 –microscanWalkAwayVitekBBLBactreyKits para não fermentadoresOutros
  • 26. Principais informaçõesP. aeruginosa – brilho metálico, cresc. 42.C, pigmento verde, odor de fruta, oxidase +.
  • 27. Principais informaçõesAcinetobacter spp– cocobacilos, salmão em MacConkey, imóvel, oxidase -.
  • 28. Principais informaçõesStenotrophomonas maltophila – Parece P.aeruginosa, brilho metálico, oxidase 98% -, Lisina +, Dnase +, R a IMP e S a SUT.
  • 29. Principais informaçõesBurkholderiacepacia– Amarelada, cheiro de terra molhada, 98% oxidase +, motilidade+, Dnase -
  • 30. QUAL A IMPORTÂNCIA DE IDENTIFICAR AS “SUAS BACTÉRIAS”?O antibiograma depende da identificação;Pode ser desnecessário e inapropriado realizar o antibiograma;Muitos BGNNF estão relacionados a estado terminal do paciente;Se necessário o isolamento tem que ser feito rapidamente;Um erro na identificação pode levar a erro no TSA e consequentemente em morte do paciente.Preocupação com resistência nas bac. da comunidade.
  • 32. BORDETELLACocobacilo Gram negativo pequeno, aeróbios estritos e não fermentadores.Bordetellapertussis, BordetellaparapertussiseBordetellabronchisepticasão as principaisespécies causadoras de enfermidadeem seres humanos.Meios de cultura devemconter carbono, amido, sangue, albuminaToxina pertussis – unidades A e B (SI – subunid. Tóxica)
  • 33. BORDETELLATOXINAS:adenilciclasa/hemolisina – inibe sistema imunetoxina dermonecrótica – vasoconstrição e isquemiacitotoxinatraqueal – afinidade pelas células epiteliais
  • 34. BORDETELLAHomem – único reservatórioVacina – 1949Mais frequentes em crianças com menos de 1 ano.B. pertussis – mais graveIncubação – 7 a 10 diasEstado catarral (1º. Estágio – gdqt bactérias, febre, mal estar) seguido de fase paroxística (2º. Estágio - Tosse repetitiva – 1 a 2 semanas – aumento de muco, vômitos)  convalescência (3º. Estágio) complicações secundáriasTransmissão – inalação de aerosóis
  • 35. BORDETELLAAmostra – aspirado nasofaríngeoMeio - Bordet-GengouIdentificação – sorológica ou biologia molecular.
  • 36. BGNNFAna Claudia S. Rodriguesanaclaurod@yahoo.com.br