Este documento discute bactérias gram-negativas não fermentadoras (BGNNF) importantes em infecções hospitalares como Pseudomonas aeruginosa, Stenotrophomonas maltophila e Acinetobacter spp. Ele fornece informações sobre identificação, fontes hospitalares, fatores de virulência e métodos de teste para BGNNF.

1. BASTONETES GRAM NEGATIVOS NÃO FERMENTADORESAna Claudia Souza RodriguesFarmacêutica Bioquímica

2. BGNNFFermentadores utilizam carboidratos por via fermentativa aeróbia ou anaeróbia, por isso a base do TSI é sempre amarela (fermentou a Glicose).Os não fermentadores utilizam metabolismo respiratório (o O atua como aceptor final de e-_TSI

3. Bacilos Gram negativos não fermentadoresAeróbios;Não esporulados;Não fermentam carboidratos (via oxidativa).

4. PRINCIPAIS BGNNF DE IMPORTÂNCIA CLÍNICA (70%)PseudomonasaeruginosaStenotrophomonas maltophilaMoraxellacatarrhalisComplexo BurkholderiacepaciaAcinetobacter spp

5. BGNNF de pouca freqüência Alcaligenes sppChryseobacterium menigosepticumChryseobacterium indologenesMoraxellaOutras Pseudomonas

6. FONTES HOSPITALARESP. aeruginosa - água de torneira, superfícies, medicamentos, alimentos, equipamentosS. maltophilia - equipamentos, pias, superfícies germicidasAcinetobacter spp - pia, agua, equipamentos, medicamentos, sabões, superfíciesBurkholderia cepacia - água, soro, sabonetes, germicidas, equipamentos e medicamentos.

7. PseudomonasP. aeruginosa – oxidase +, polissacarídeos capsulares podem produzir aspecto mucóide.Importantes em infecções hospitalares, pacientes com fibrose cística e imunodebilitados.Pigmentos – piocianina, pioverdina e piorrubina.

8. FATORES DE VIRULÊNCIA

9. TOXINAS

10. Bacilos Gram negativos não fermentadoresIdentificação:Inóculo mais densoCulturas jovens e purasOXIDASE;MOTILIDADE;Lisina, Dnase, Malonato, Uréia, OF-Glicose com e sem vaselina, Citrato, TSI, NaCl 6,5¨%, discos de Polimixina, Sufametoxazol, hemólise em Ágar Sangue.

11. BGGNF

12. PIGMENTOSVerde e/ou metálico e/ou marron e/ou vermelha: P.aeruginosa Amarelo: Chryseobacterium spp, P. luteola, P. orzihabitans, Burkholderia. (Micrococcus)Rosa: Roseomonas spp e Methylobacterium spp

13. OXIDASEdisco, fita ou Kit de oxidase - papel impregnado ou reativo na forma líquida a ser pingado em papel de filtroMOTILIDADEPODE SER FEITA EM BHI OU TSB. COLOCAR UMA ALÇA DE BACTÉRIAS NO CALDO E DEIXAR EM REPOUSO DE 4 A 24 HORAS A T AMBIENTE.Observar movimento em aumento 40 com condensador baixo e pouca luz.

14. Lisina – Colocar uma alçada da bactéria e adicionar óleo mineral estéril. A mudança de cor significa resultado NEGATIVO.Dnase – Pode ser feita com HCl. Se observado halo claro o resultado é positivo.

15. Bacilos Gram negativos não fermentadores

16. Bacilos Gram negativos não fermentadores

17. Acinetobacter OXIDASE neg, IMÓVEL

18. Agora o Acinetobacter baumanii e o A. calcoaceticus formam um complexo e não são mais separados na identificação

19. BGNNF OXI neg, MOT pos

20. BGNNF OXI pos, MOT negpigmento amareloAna Claudia S. Rodrigues - HRMSBGNNF OXI pos, MOT pos

22. BGNNF OXI pos, MOT pos, H2S pos e Dnase pos

23. GELATINAColocar um pouco da bactéria em salina estéril. Mergulhar filme de raio X revelado. Após 24 horas a T ambiente se houver precipitação o teste é positivo.

24. OUTRAS PROVAS

25. Sistema de Kits prontos, semi-automatizados e automatizadosAuto-Scan –4 –microscanWalkAwayVitekBBLBactreyKits para não fermentadoresOutros

26. Principais informaçõesP. aeruginosa – brilho metálico, cresc. 42.C, pigmento verde, odor de fruta, oxidase +.

27. Principais informaçõesAcinetobacter spp– cocobacilos, salmão em MacConkey, imóvel, oxidase -.

28. Principais informaçõesStenotrophomonas maltophila – Parece P.aeruginosa, brilho metálico, oxidase 98% -, Lisina +, Dnase +, R a IMP e S a SUT.

29. Principais informaçõesBurkholderiacepacia– Amarelada, cheiro de terra molhada, 98% oxidase +, motilidade+, Dnase -

30. QUAL A IMPORTÂNCIA DE IDENTIFICAR AS “SUAS BACTÉRIAS”?O antibiograma depende da identificação;Pode ser desnecessário e inapropriado realizar o antibiograma;Muitos BGNNF estão relacionados a estado terminal do paciente;Se necessário o isolamento tem que ser feito rapidamente;Um erro na identificação pode levar a erro no TSA e consequentemente em morte do paciente.Preocupação com resistência nas bac. da comunidade.

31. BORDETELLAANA CLAUDIA SOUZA RODRIGUES2011

32. BORDETELLACocobacilo Gram negativo pequeno, aeróbios estritos e não fermentadores.Bordetellapertussis, BordetellaparapertussiseBordetellabronchisepticasão as principaisespécies causadoras de enfermidadeem seres humanos.Meios de cultura devemconter carbono, amido, sangue, albuminaToxina pertussis – unidades A e B (SI – subunid. Tóxica)

33. BORDETELLATOXINAS:adenilciclasa/hemolisina – inibe sistema imunetoxina dermonecrótica – vasoconstrição e isquemiacitotoxinatraqueal – afinidade pelas células epiteliais

34. BORDETELLAHomem – único reservatórioVacina – 1949Mais frequentes em crianças com menos de 1 ano.B. pertussis – mais graveIncubação – 7 a 10 diasEstado catarral (1º. Estágio – gdqt bactérias, febre, mal estar) seguido de fase paroxística (2º. Estágio - Tosse repetitiva – 1 a 2 semanas – aumento de muco, vômitos)  convalescência (3º. Estágio) complicações secundáriasTransmissão – inalação de aerosóis

35. BORDETELLAAmostra – aspirado nasofaríngeoMeio - Bordet-GengouIdentificação – sorológica ou biologia molecular.

36. BGNNFAna Claudia S. Rodriguesanaclaurod@yahoo.com.br