O documento discute os requisitos e preparação de meios de cultura, incluindo fatores como pH, temperatura, nutrientes e consistência necessários para o crescimento de microrganismos. Ele também classifica e exemplifica diferentes tipos de meios de cultura, descreve sua composição e fornece recomendações sobre controle de qualidade e armazenamento.

1. Preparação, Acondicionamento e Controle dos Meios de Cultura

2. Exigências InerentespH – apropriado e não ácidoTemperatura – antes = frioPressão OsmóticaGrau de UmidadeTensão de Oxigênio – aeróbias, anaeróbias, facultativas e microaerófilas

3. Exigências Nutritivas Fonte de CarbonoFonte de NitrogênioFonte de EnergiaFonte de Sais MineraisVitaminas e Aminoácidos

4. Preparo do MeioSólido – em placaTubo – (1)horizontal e (2) inclinado 12

5. Classificação dos Meios de CulturaQuanto à ConsistênciaLíquido: Nutrientes em solução aquosa e inexistência de ágar;

6. Semi-Sólido: Presença de nutrientes e Ágar em [ ] menor que 15g/1000ml;

7. Sólido: Presença de nutrientes e Ágar em [ ] maior que15g/1000ml.Classificação dos Meios de CulturaQuanto à FunçãoEnriquecedor: Permite o crescimento de microrganismos que necessitam de fatores de crescimento, mas não inibem o crescimento de outros;

8. Seletivos: É aquele que inibe o crescimento de microrganismos, porém permitem o crescimento de outros;Classificação dos Meios de CulturaQuanto à FunçãoDiferenciador: Possui substâncias que evidenciam uma característica que permite separar um grupo ou uma espécie de microrganismos;

9. Manutenção: Permite a viabilidade e manutenção de características fisiológicas de um microrganismo.Exemplificando os Meios de CulturaQuanto à ConsistênciaLíquido: (THIO-Thiglycollatemedium, BHI-BrainHeartInfusion)

10. Semi-Sólido:(SIM -Sulfeto IdolMotilidade)

11. Sólido: (MSA - Manitol SaltÁgar, AS – Ágar Sangue)Quanto à FunçãoEnriquecedor :(BHI, AS)

12. Seletivos :(MSA, MC – MacConkey)

13. Diferenciador: (MC, AS)

14. Manutenção: (NA- Nutriente Ágar)Composição dos Meios BHI - meio enriquecido e líquidoInfusão de cérebro e coração

15. Peptona

16. Dextrose

17. Cloreto e Fosfato de Sódio

18. Água destilada MC-MacConkey – meio seletivo e sólido em placaSais biliares

19. Peptona

20. Lactose

21. Cloreto de Sódio

22. Ágar

23. Vermelho Neutro

24. Cristal Violeta

25. Água destilada NA– meio de manutenção e sólido em tuboPeptona

26. Extrato de Carne

27. Ágar

28. Água destiladaRecomendaçõesEvitar usar meios vencidosNão usar meios prontos ressecados.Recomenda-se o uso de tubos com tampa de rosca, pois evitam o ressecamento rápido do meioTodos os meios confeccionados devem ser devidamente identificados com o nome, data de fabricação, data de validade e tipo de armazenamento.Todos os meios de placa devem ser embalados em filme plástico PVC transparente

29. Controle e Armazenamento Autoclavagem – 121 C por 30 min Refrigeração – contínua

30. Armazenamento dos MeiosInicialmente devem ser guardados na geladeira dentro de plásticos para evitar a desidratação;Os tubos isolados com rolhas e alumínio na geladeira;Após a inoculação deve ser incubado em estufa a temperatura ambiente;Identificação do conteúdo, data de preparação e vencimento.

31. Controle de Qualidade Uma amostra do lote deve ser inoculada e observada para testar viabilidade dos nutrientes e certeza de resultados.Ex: Estreptococos grupo A em ágar sangue – observar bom crescimento e beta-hemólise.

32. Crescimento BacterianoCrescimentoFase EstacionáriaLOGDeclínioLAGTempoLag = Latência Log = Exponencial Estacionária = Stop Declínio = Decaímento por competição

33. Crescimento Bacteriano Depende de:Exigências NutritivasExigências Inerentes

34. Inoculação

35. InoculaçãoPlaca Estriagem EsgotamentoTubo de Ensaio - Líquido - Semear - Horizontal – picagem profunda (2/3) - Inclinado - estriagem