Este documento discute bactérias gram-negativas não fermentadoras (BGNNF) importantes em infecções hospitalares como Pseudomonas aeruginosa, Stenotrophomonas maltophila e Acinetobacter spp. Ele fornece informações sobre identificação, fontes hospitalares, fatores de virulência e métodos de teste para BGNNF.

1. BASTONETES GRAM NEGATIVOS NÃO FERMENTADORES Ana Claudia Souza Rodrigues Farmacêutica Bioquímica

2. BGNNF Fermentadores utilizam carboidratos por via fermentativa aeróbia ou anaeróbia, por isso a base do TSI é sempre amarela (fermentou a Glicose). Os não fermentadores utilizam metabolismo respiratório (o O atua como aceptor final de e-_ TSI

3. Bacilos Gram negativos não fermentadores Aeróbios; Não esporulados; Não fermentam carboidratos (via oxidativa).

4. PRINCIPAIS BGNNF DE IMPORTÂNCIA CLÍNICA (70%) Pseudomonasaeruginosa Stenotrophomonas maltophila Moraxellacatarrhalis Complexo Burkholderiacepacia Acinetobacter spp

5. BGNNF de pouca freqüência Alcaligenes spp Chryseobacterium menigosepticum Chryseobacterium indologenes Moraxella Outras Pseudomonas

6. FONTES HOSPITALARES P. aeruginosa - água de torneira, superfícies, medicamentos, alimentos, equipamentos S. maltophilia - equipamentos, pias, superfícies germicidas Acinetobacter spp - pia, agua, equipamentos, medicamentos, sabões, superfícies Burkholderia cepacia - água, soro, sabonetes, germicidas, equipamentos e medicamentos.

7. Pseudomonas P. aeruginosa – oxidase +, polissacarídeos capsulares podem produzir aspecto mucóide. Importantes em infecções hospitalares, pacientes com fibrose cística e imunodebilitados. Pigmentos – piocianina, pioverdina e piorrubina.

8. FATORES DE VIRULÊNCIA

9. TOXINAS

10. Bacilos Gram negativos não fermentadores Identificação: Inóculo mais denso Culturas jovens e puras OXIDASE; MOTILIDADE; Lisina, Dnase, Malonato, Uréia, OF-Glicose com e sem vaselina, Citrato, TSI, NaCl 6,5¨%, discos de Polimixina, Sufametoxazol, hemólise em Ágar Sangue.

11. BGGNF

12. PIGMENTOS Verde e/ou metálico e/ou marron e/ou vermelha: P.aeruginosa Amarelo: Chryseobacterium spp, P. luteola, P. orzihabitans, Burkholderia. (Micrococcus) Rosa: Roseomonas spp e Methylobacterium spp

14. Lisina – Colocar uma alçada da bactéria e adicionar óleo mineral estéril. A mudança de cor significa resultado NEGATIVO. Dnase – Pode ser feita com HCl. Se observado halo claro o resultado é positivo.

15. Bacilos Gram negativos não fermentadores

16. Bacilos Gram negativos não fermentadores

17. Acinetobacter OXIDASE neg, IMÓVEL

18. Agora o Acinetobacter baumanii e o A. calcoaceticus formam um complexo e não são mais separados na identificação

19. BGNNF OXI neg, MOT pos

22. BGNNF OXI pos, MOT pos, H2S pos e Dnase pos

23. GELATINA Colocar um pouco da bactéria em salina estéril. Mergulhar filme de raio X revelado. Após 24 horas a T ambiente se houver precipitação o teste é positivo.

24. OUTRAS PROVAS

25. Sistema de Kits prontos, semi-automatizados e automatizados Auto-Scan –4 –microscan WalkAway Vitek BBL Bactrey Kits para não fermentadores Outros

26. Principais informações P. aeruginosa – brilho metálico, cresc. 42.C, pigmento verde, odor de fruta, oxidase +.

27. Principais informações Acinetobacter spp– cocobacilos, salmão em MacConkey, imóvel, oxidase -.

28. Principais informações Stenotrophomonas maltophila – Parece P.aeruginosa, brilho metálico, oxidase 98% -, Lisina +, Dnase +, R a IMP e S a SUT.

29. Principais informações Burkholderiacepacia– Amarelada, cheiro de terra molhada, 98% oxidase +, motilidade+, Dnase -

30. QUAL A IMPORTÂNCIA DE IDENTIFICAR AS “SUAS BACTÉRIAS”? O antibiograma depende da identificação; Pode ser desnecessário e inapropriado realizar o antibiograma; Muitos BGNNF estão relacionados a estado terminal do paciente; Se necessário o isolamento tem que ser feito rapidamente; Um erro na identificação pode levar a erro no TSA e consequentemente em morte do paciente. Preocupação com resistência nas bac. da comunidade.

31. BORDETELLA ANA CLAUDIA SOUZA RODRIGUES 2011

32. BORDETELLA Cocobacilo Gram negativo pequeno, aeróbios estritos e não fermentadores. Bordetellapertussis, BordetellaparapertussiseBordetellabronchisepticasão as principaisespécies causadoras de enfermidadeem seres humanos. Meios de cultura devemconter carbono, amido, sangue, albumina Toxina pertussis – unidades A e B (SI – subunid. Tóxica)

33. BORDETELLA TOXINAS: adenilciclasa/hemolisina – inibe sistema imune toxina dermonecrótica – vasoconstrição e isquemia citotoxinatraqueal – afinidade pelas células epiteliais

34. BORDETELLA Homem – único reservatório Vacina – 1949 Mais frequentes em crianças com menos de 1 ano. B. pertussis – mais grave Incubação – 7 a 10 dias Estado catarral (1º. Estágio – gdqt bactérias, febre, mal estar) seguido de fase paroxística (2º. Estágio - Tosse repetitiva – 1 a 2 semanas – aumento de muco, vômitos)  convalescência (3º. Estágio) complicações secundárias Transmissão – inalação de aerosóis

35. BORDETELLA Amostra – aspirado nasofaríngeo Meio - Bordet-Gengou Identificação – sorológica ou biologia molecular.

36. BGNNF Ana Claudia S. Rodrigues anaclaurod@yahoo.com.br