Aula de Microbiologia Clínica sobre Meios de cultura bacteriana
O documento descreve diferentes tipos de meios de cultura utilizados em microbiologia, classificando-os de acordo com seu estado físico, composição, finalidade e reações com microrganismos específicos. Exemplos como ágar nutriente, MacConkey, sangue, chocolate, Salmonella-Shigella, Löwenstein Jensen e Saboraud são detalhados.
Definição
Resultam daassociação qualitativa e quantitativa de
substâncias que fornecem nutrientes necessários ao
cultivo de microrganismos (mo)
Existem vários tipos de meios de cultura para satisfazer
as necessidades nutricionais da ampla diversidade dos
microrganismos
É preciso fornecer condições ambientais favoráveis ao
desenvolvimento dos mo (pH, pressão osmótica, umidade,
temperatura, tensão de oxigênio)
3.
Classificação
Os meiosde cultura são classificados de acordo com
diferentes critérios:
1. Estado físico:
Sólidos – contém agentes solidificantes, principalmente ágar (1
a 2%) – formação de colônias
Semi sólidos – consistência intermediária (0,075 a 0,5% de
ágar) – permite o crescimento dos mo em diferentes tensões
de oxigênio, verificação da motilidade (visualizada pela
turvação)
Líquidos ou caldos – sem agentes solidificantes – ativação de
culturas, repiques e provas bioquímicas
4.
Classificação
2. Procedênciados constituintes:
Naturais ou complexos - sem composição química definida,
geralmente extratos vegetais, animais ou de outros microrganismos.
Usados para microrganismos menos exigentes na nutrição. Ex -
Meio de Löwenstein Jensen (Mycobacterium tuberculosis) contém
sais, ovos e pedaços de batata
Artificiais ou quimicamente definidos: composição química definida.
Usados para microrganismos mais específicos e exigentes. Ex -
CaldoTetrationato (Samonella) contém apenas iodo, KI e água
5.
Classificação
3. Deacordo com a composição química
Simples – permitem o crescimento bacteriano sem
exigências especiais – caldos e ágar simples
Especiais – quando cumprem exigências vitais de
determinados organismos – ágar sangue, ágar chocolate
7.
Classificação
4. Deacordo com a finalidade bacteriólogica ou micológica
Meios de pré-enriquecimento – permitem a dessensibilização de
microrganismos que sofreram algum tipo de tratamento (térmico
ou químico) – água peptonada, caldo lactosado
Meios de enriquecimento – proporcionam nutrientes adequados ao
crescimento dos mo em baixo número ou crescimento lento –
caldo tetrationado e selenito cistina
Diferenciais – contêm substâncias que permitem estabelecer
diferenças entre mo muito semelhantes – ágar MacConkey
(enterobactérias)
8.
Classificação
4. Deacordo com a finalidade bacteriólogica ou micológica
Seletivos – contêm substâncias que inibem o desenvolvimento de
determinados grupos de microrganismos, permitindo o crescimento
de outros – ágar Salmonella-Shigella (SS)
Meios de triagem – avaliam determinadas atividades metabólicas
permitindo caracterização e identificação presuntiva de muitos
microrganismos – meio Instituto Adolfo Lutz
9.
Classificação
4. Deacordo com a finalidade bacteriólogica ou micológica
Identificação – realização de provas bioquímicas e verificação de
funções fisiológicas de organismos – ágar citrato, caldo nitrato
Dosagem – determinações de vitaminas, antibióticos e aminoácidos
Contagem – determinação quantitativa da população microbiana –
ágar de contagem de placas
Estocagem ou manutenção – garantem a viabilidade de
microrganismos – ágar sabouraud
10.
Classificação
Ágar nutriente
Simples, de fácil preparo e barato, é utilizado na análise de
água, alimentos e leite como meio para cultivo de
amostras submetidas a exames bacteriológicos e
isolamento de organismos para culturas puras.
Cor original – branco opalescente
Positivo – crescimento na superfície
11.
Classificação
Ágar MacConkey
Destinado para o crescimento de bactérias Gram negativas e
indica a fermentação de lactose. Colônias de bactérias que
fermentam lactose tornam o meio rosa choque e as bactérias
que não são fermentadoras de lactose tornam o meio amarelo
claro.
Cor original – rosa avermelhado
Fermentadores de lactose + - colônias rosa
Fermentadores de lactose - – colônias incolores
12.
Classificação
Ágar Sangue
De coloração vermelha escura e opaca, oferece excelentes
condições de crescimento para a maioria dos microrganismos.
Eritrócitos íntegros favorecem a formação de halos de hemólise
13.
Classificação
Ágar Sangue
Beta hemólise – presença de halo transparente ao redor das
colônias – lise total das hemácias -Streptococcus pyogenes
14.
Classificação
Ágar Sangue
Alfa hemólise – presença de halo esverdeado ao redor das
colônias – lise parcial das hemácias – Streptococcus agalactiae
Classificação
Ágar chocolate
Utilizado para microrganismos exigentes
Ao meio é adicionado sangue de cavalo, carneiro ou
coelho em altas temperaturas – Haemophilus ssp,
Neisseria ssp
Cor original – marrom escuro
Neisseria – pigmento amarelo
Haemophilus – pigmento creme
17.
Classificação
Ágar Salmonella– Shigella
Ágar SS possui componentes (sais de bile, verde brilhante e
citrato de sódio) que inibem microrganismos Gram positivos.
Selecionar e isolar espécies de Salmonella e Shigella, em amostras
de fezes, alimentos e água
Colônias com centro escuro – Salmonela
Colônias incolores - Shigella
18.
Classificação
Löwenstein Jensen
A base do meio é constituída por ovos integrais, o que permite
amplo crescimento das micobactérias e o crescimento é
satisfatório para o teste de niacina (que é positivo para
Mycobacterium tuberculosis).
Isolamento primário das micobactérias
Cor original verde claro
Crescimento de colônias amarelas - positivo
19.
Classificação
Ágar Saboraud
Favorece o crescimento de diversos fungos leveduriformes e
filamentosos
Composto por dextrose, ágar e peptonas
Cor original do meio: amarelo claro opalescente.
Após o crescimento, deve-se seguir a identificação do
microrganismo que cresceu.