O documento discute aspectos metodológicos e aplicações da citogenética. Apresenta informações sobre estrutura cromossômica, técnicas de cultura celular e coloração, classificação de cromossomos, nomenclatura citogenética, análises de cariótipos normais e anormais, e síndromes genéticas como a Síndrome de Down.
4. CONSIDERAÇÕES GERAIS
Cromátide
Braço Curto (p)
Braço Longo (q)
Centrômero
(envolvido pelo
Cinetócoro)
Telômeros
Constricções
Secundárias
Constrição
Primária
Cláudio C. Silva, M.Sc.
UCG / BIO
5. Cláudio C. Silva, M.Sc.
UCG / BIO
Cromossomos com alto grau de
condensação, curtos e espessos,
facilmente visíveis com o auxílio da
microscopia óptica.
Mitose
CONSIDERAÇÕES GERAIS
6. Cláudio C. Silva, M.Sc.
UCG / BIO
Amostra Heparinizada
Meio RPMI
Glutamina
Soro Fetal Bovino
Fitohemaglutinina
• Método Cultura Celular:
- Sangue periférico
- Medula Óssea
- Tumores sólidos, etc.
Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações
7. Cláudio C. Silva, M.Sc.
UCG / BIO
Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações
8. Cláudio C. Silva, M.Sc.
UCG / BIO
Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações
9. Cláudio C. Silva, M.Sc.
UCG / BIO
Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações
10. Cláudio C. Silva, M.Sc.
UCG / BIO
Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações
11. Cláudio C. Silva, M.Sc.
UCG / BIO
46,XX
Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações
12. Cláudio C. Silva, M.Sc.
UCG / BIO
Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações
Classificação de Denver – 1960 (Colorado/USA)
1. Posição do Centrômero (Meta, Submeta e Acro)
13. Cláudio C. Silva, M.Sc.
UCG / BIO
Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações
Posição do centrômero
r = l/c
r = razão entre os braços cromossômicos
l = braço longo
c = braço curto
Ic = índice cromossômicoic = c . 100/c + l
Cromossomo r ic
Metacêntrico 1,00 – 1,49 50,0 – 40,1
Submetacêntrico 1,50 – 2,99 40,0 – 25,1
Acrocêntrico 3,00 - ∞ 25,0 – 0,01
14. Cláudio C. Silva, M.Sc.
UCG / BIO
Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações
Classificação de Denver – 1960 (Colorado/USA)
2. Tamanho (Grande, Médio e Pequeno)
15. Cláudio C. Silva, M.Sc.
UCG / BIO
Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações
Grupo
Características
No. de
Cromossomos
Pares Cromossômicos
Tamanho
Posição do
Centrômero
A Grandes
Meta
Submeta
Meta
6
1
2
3
B Grandes Submeta 4 5 e 6
C Médios Submeta
♀ 16
♂ 15
6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 e X
D Médios Acro 6 13, 14 e 15
E Pequenos Submeta 6 16, 17 e 18
F Pequenos Meta 4 19 e 20
G Pequenos Acro
♀ 4
♂ 5
21, 22 e Y
Total 46 Cromossomos
16. Cláudio C. Silva, M.Sc.
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Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações
Baixa Resolução – 400 bandas (regiões e bandas)
Alta resolução – 850 bandas (regiões, bandas e sub-bandas)
Altíssima resolução – 2.000 bandas (regiões, bandas, sub-bandas e
sub-sub-bandas)
17. Cláudio C. Silva, M.Sc.
UCG / BIO
Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações
Incorporação de corante DNA-específico (Aceto-orceína, Giemsa, etc).Incorporação de corante DNA-específico (Aceto-orceína, Giemsa, etc).
Coloração
Convencional
Rápido, fácil e baixo custo
Permite a contagem do número
de cromossomos
Permite avaliar a qualidade dos
preparados cromossômicos
Muito utilizado em dosimetria
biológica
Rápido, fácil e baixo custo
Permite a contagem do número
de cromossomos
Permite avaliar a qualidade dos
preparados cromossômicos
Muito utilizado em dosimetria
biológica
18. Cláudio C. Silva, M.Sc.
UCG / BIO
Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações
Dosimetria Biológica
Aplicação da coloração
convencional na análise
cromossômica.
19. Cláudio C. Silva, M.Sc.
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Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações
Tratamentos cromossômicos envolvendo desidratação,
envelhecimento, desnaturação ou digestão enzimática
seguida da incorporação de corante DNA-específico
Tratamentos cromossômicos envolvendo desidratação,
envelhecimento, desnaturação ou digestão enzimática
seguida da incorporação de corante DNA-específico
Bandeamento
Cromossômico
Formação de bandas claras e
escuras ou coloridas, evidenciando
estruturas de 1-10Mb
Formação de bandas claras e
escuras ou coloridas, evidenciando
estruturas de 1-10Mb
20. Cláudio C. Silva, M.Sc.
UCG / BIO
Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações
21. Cláudio C. Silva, M.Sc.
UCG / BIO
Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações
Autossomos (1 – 22)
Heterossomos ou Cromossomos Sexuais
(X e Y)
♀ 44AXX ou 46,XX
♂ 44AXY ou 46,XY
22. Cláudio C. Silva, M.Sc.
UCG / BIO
Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações
1p22.2
Cromossomo: 1
Braço: Curto
Região: 2
Banda: 2
Sub-banda: 2
23. Cláudio C. Silva, M.Sc.
UCG / BIO
Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações
A – G Grupos cromossômicos
1 - 22 Números de autossomos
X, Y Cromossomos sexuais
/ Separar as linhagens celulares
+ ou - Indica se o cromossomo foi adicionado ou perdido; indica ganho ou perda no
braço cromossômico
? Identificação questionável do cromossomo ou da estrutura cromossômica
* Indica que o cromossomo ou a estrutura deve estar explicada no rodapé
ace Acêntrico
ISCN: An International System for
Human Cytogenetic Nomenclature
24. Cláudio C. Silva, M.Sc.
UCG / BIO
Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações
cen centrômero
dic cromossomo dicêntrico
end endoreduplicação
h heterocromatina
i isocromossomo
inv inversão
Inv(p+q-) Inv(q+p-) inversão pericêntrica
mar marcador
Mat Origem materna
pat Origem paterna
p braço curto do cromossomo
q braço longo do cromossomo
r cromossomo em anel
s satélite
t translocação
tri tricêntrico
25. Cláudio C. Silva, M.Sc.
UCG / BIO
Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações
del deleção
der cromossomo derivativo
dup duplicação
ins inserção
rcp translocação recíproca
rec translocação recombinante
Rob translocação robertsoniana
tan translocação em tandem
: quebra sem junção dos fragmentos
:: quebra e junção
de-para
37. Cláudio C. Silva, M.Sc.
UCG / BIO
Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações
Óvulos Anormais
38. Cláudio C. Silva, M.Sc.
UCG / BIO
Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações
Ovo ou Zigoto com Trissomia do 21
39. Cláudio C. Silva, M.Sc.
UCG / BIO
Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações
47,XY,+21
Síndrome de Down (Trissomia do Cromossomo 21)
40. Cláudio C. Silva, M.Sc.
UCG / BIO
Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações
14 – Acro (Gd)
21 – Acro (Pq)
41. Cláudio C. Silva, M.Sc.
UCG / BIO
Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações
46,XX,rob(14;21)
42. Cláudio C. Silva, M.Sc.
UCG / BIO
Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações
46,XX,rob(21;21)
43. Cláudio C. Silva, M.Sc.
UCG / BIO
Citogenética
Aspectos Metodológicos e Aplicações
Cariótipo: 47,XXY
44. Cláudio C. Silva, M.Sc.
UCG / BIO
Citogenética
Síndrome do Duplo Y
Descrita em 1961 por Sandberg e colaboradores
•1:1000 nascimentos;
• Estatura média 1,83 m;
• Orelhas displásicas;
• Ponte nasal larga;
• Acnes; Dedos alongados;
• Hiperatividade; Fertilidade normal;
• Intelecto normal ou discreta oligofregnia;
47,XYY
45. Cláudio C. Silva, M.Sc.
UCG / BIO
Descrita em 1959 por Jacobs e colaboradores
47,XXX
Citogenética
Síndrome do Triplo X
•1:1000 nascimentos;
• Tendência a esquizofrenia;
• Amenorréia secundária;
• Hiperatividade; Fertilidade normal;
• Intelecto normal ou discreta oligofregnia;
46. Cláudio C. Silva, M.Sc.
UCG / BIO
• 2 – 4 : 10.000 nascimentos;
• Aplasia cutânea do cabelo;
• Microcefalia e microftalmia;
• Fissura lábio-palatal bilateral;
• Micrognatia, Surdez,
Proboscis;
• Anomalias do SNC;
• Quadro convulsivo
• 95% mortalidade nos até 6º
47,XX,+13 ou
47,XY,+13
Citogenética
Síndrome de Patau
47. Cláudio C. Silva, M.Sc.
UCG / BIO
• 1: 3000 nascimentos;
• Comprometimento cardíaco;
• Alterações pulmonares graves;
• 15% dos afetados sobrevivem
ao primeiro ano de vida;
• Convexidade plantar;
• Poliesplenia;
• Hérnias umbilicais;
• Micrognatia;
47,XX,+18 ou
47,XY,+18
Citogenética
Síndrome de Edwards
48. Cláudio C. Silva, M.Sc.
UCG / BIOCariótipo: 45,X
Citogenética
Síndrome de Turner
50. Cláudio C. Silva, M.Sc.
UCG / BIO
Translocação
Não recíproca
Translocação
Recíproca
Translocação
Não recíproca
Translocação
Recíproca
(Robertsoniana)
Crossing-Over desigual
(Duplicação / Deleção)
Citogenética
Aberrações Cromossômicas
51. Cláudio C. Silva, M.Sc.
UCG / BIO
Inversões
(Pericêntrica e Paracêntrica)
Deleções
(Intertiscial, Terminal p e Terminal q)
p-
q-
Citogenética
Aberrações Cromossômicas
52. Cláudio C. Silva, M.Sc.
UCG / BIO
Duplicação Direta e Invertida
Citogenética
Aberrações Cromossômicas
53. Cláudio C. Silva, M.Sc.
UCG / BIO
Cromossomo em Anel (r)
Citogenética
Aberrações Cromossômicas
54. Cláudio C. Silva, M.Sc.
UCG / BIO
Isocromossomos Iso q
Citogenética
Aberrações Cromossômicas
55. Cláudio C. Silva, M.Sc.
UCG / BIO
Estudo Cromossômico
Alterações Cromossômicas Estruturais
Cri-du-Chat (Miado-do-Gato)
• 1: 50.000 nascimentos;
• RDNPM;
• Choro característico;
• Microcefalia e mandíbula
pequena;
• Retrognatia;
• Faringe pequena anormal,
epiglote flácida e glote
hipotônica;
• Dismorfia cranio-facial;
• Oligofrenia.
Cariótipo:
46,XX, 5p- ou 46,XX,del(5p21.1pter)
56. Cláudio C. Silva, M.Sc.
UCG / BIO
Citogenética
Alterações Cromossômicas Numéricas
Síndrome de Turner
Variantes: 46,XX/45,X ou 46,X,i(X) ou 46,X,del(Xq) ou 46,X,r(X)
r(X)
i(X)
del(Xq)