O documento descreve o teste de fixação do complemento, um método usado para detectar anticorpos ou antígenos em amostras utilizando o sistema complemento. O teste baseia-se na ligação do complemento ao complexo antígeno-anticorpo, levando à lise de hemácias e liberação de hemoglobina em amostras positivas. Também é descrito o teste de inibição da fixação do complemento, que detecta antígenos ao inibir a ligação do anticorpo às hemácias.

1. UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA INSTITUTO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE – ICSDEPARTAMENTO DE BIOINTERAÇÃODISCIPLINA: IMUNOLOGIA I – ICS 045FIXAÇÃO DO COMPLEMENTOTrabalho realizado pela Acadêmica de Ciências Biológicas da UCSal Paula Braga Daltro sob orientação dos Professores Robert Schaer, Roberto Meyer, Claudia Brodskyn e Ricardo Portela. Atualizado em Fevereiro de 2010.

2. CARACTERÍSTICAS BÁSICAS

3. CARACTERÍSTICAS BÁSICAS O teste de fixação do complemento (FC) é um método sorológico usado para determinar a presença ou semi-quantificar anticorpos (Ac) ou antígenos (Ag) (Inibição da Fixação do Complemento) em uma amostra, utilizando a ação do Sistema do Complemento.

4. O sistema complemento é um conjunto de proteínas séricas que tem por função ajudar na eliminação de microorganismos invasores. Este sistema funciona em cascata e possui três vias. O teste de fixação do complemento tem como base a via clássica, onde o complemento liga-se ao sítio ativo formado pelo complexo antígeno-anticorpo.

5. O complexo Ag-Ac: Quando moléculas de anticorpos ligam-se ao antígeno, os sítios ativos da região Fc tornam-se disponíveis para a ligação do complemento.CARACTERÍSTICAS BÁSICAS FUNDAMENTOS:

6. A ativação do sistema complemento por anticorpos ligados a antígenos resulta na formação de complexos de ataque a membrana que podem romper a membrana celular. Se o anticorpo é ligado a antígenos adsorvidos nas hemácias, estas são destruídas e ocorre hemólise.

7. Pode ser um teste qualitativo ou semi-quantitativo, quando é então realizada uma diluição seriada da amostra, observando-se a máxima diluição onde ocorre reação positiva.CARACTERÍSTICAS BÁSICAS CURIOSIDADES SOBRE O SISTEMA COMPLEMENTO PARA MELHOR COMPREENSÃO DO ENSAIO:

8. Função: ligar covalentemente a moléculas específicas na superfície de microorganismos invasores, ou em complexos Ag-Ac.

9. Objetivo: induzir desequilíbrio osmótico e/ou apoptose em microorganismos invasores ou células tumorais.

10. Componentes : formado por um grupo de proteínas séricas numericamente denominadas, e na sua maioria produzidas pelo fígado.CARACTERÍSTICAS BÁSICAS CURIOSIDADES SOBRE O SISTEMA COMPLEMENTO PARA MELHOR COMPREENSÃO DO ENSAIO:

11. Complexo de ataque a membrana: Ao unir-se à membrana microbiana ou ao complexo Ac-Ag, o complemento forma um canal transmembrânico de forma anelar, causando uma lise osmótica, induzindo apoptose e, conseqüentemente, a morte da célula.Complexo de ataque à membranaInfluxo de fluidosBicamada fosfolipídicaCitoplasma

12. CARACTERÍSTICAS BÁSICAS ELEMENTOS NECESSÁRIOS PARA A REALIZAÇÃO:

13. Soro teste

14. Sistema Complemento

15. Sistema hemolítico (hemácias recobertas com antígenos)

16. Estufa para incubação

17. Centrífuga

18. Antígeno purificado (na Inibição da Fixação do Complemento)CARACTERÍSTICAS BÁSICAS ELEMENTOS NECESSÁRIOS PARA A REALIZAÇÃO:Estufa incubadoraMicrotubosCentrífugas de microtubos

19. CARACTERÍSTICAS BÁSICAS DESVANTAGENS: