O documento discute a formação e ecologia dos biofilmes bucais. Apresenta as principais etapas de formação do biofilme dental supragengival e subgengival, incluindo a colonização inicial por bactérias como Streptococcus sanguis e a formação de uma matriz intermicrobiana. Também descreve as principais bactérias encontradas na cavidade bucal, como Streptococcus mutans, Streptococcus salivarius e espécies de Actinomyces.

1. BIOFILMES BUCAIS

2. Page e Korman (1997) DESAFIO MICROBIANO RESPOSTA IMUNO-INFLAMATÓRIA METABOLISMO DO TECIDO ÓSSEO E CONJUNTIVO Fatores de Risco Ambientais e Adquiridos Fatores de Risco Genéticos SINAIS CLÍNICOS DA DOENÇA PROGRESSÃO

4. ECOLOGIA BUCAL estuda a relação entre a microbiota e a cavidade bucal (competição pela sobrevivência) desequilíbrio ecológico doença infecciosa

9. Estágios ecológicos no estabelecimento da comunidade microbiana transmissão (número de bactérias e freqüência) aquisição espécies pioneiras ( S. salivarius – bacteriocinas ) ( S. oralis e S. sanguis / adesinas) sucessão aumento da diversidade microbiana comunidade clímax

10. MICROBIOTA BUCAL MICROBIOTA autóctone espécies >1% (sítio particular) MICROBIOTA suplementar espécies < 1% Lactobacillus (10 -5 – 10 -3 / microbiota viável) e S. mutans MICROBIOTA transitória Loesche (1994)

11. ANIMAIS germ-free convencionais gnotobióticos

12. Fatores que influenciam a aquisição ou que interferem no equilíbrio da microbiota bucal.

13. ANAEROBIOSE

15. Potencial de Óxido-Redução (Eh) reflete a quantidade de oxigênio Eh da saliva = +200mV

16. “ O sucesso universal dos anaeróbios nas membranas mucosas indica que esta relação é tão estável que deve ser considerada uma relação simbiótica.” Loesche (1994)

20. Fluido Gengival atividade mecânica atividade microbiana

21. Descamação Epitelial Fatores Sistêmicos do Hospedeiro Higiene Bucal Uso de Antimicrobianos

22. FONTE DE NUTRIENTES DIETA

23. composição química consistência física freqüência

24. SALIVA glicoproteínas sais inorgânicos aminoácidos vitaminas glicose neuraminidase ácido siálico

25. FLUIDO GENGIVAL exsudato sérico aminoácidos livres glicose vitaminas

26. CONSIDERAÇÕES HISTÓRICAS Leeuwenhoek, 1683 animálculos Facinus pequenas formas de vida Black placa microbiana gelatinosa Gibbons, 1970 conceito da aderência específica

28. Placa (biofilme) bacteriana (o) 1,7 X 10 11 por grama de peso seco Socransky et al . (1963)

29. POTENCIAL PATOGÊNICO DO BIOFILME hipótese do biofilme não-específico hipótese do biofilme específico

30. HIPÓTESE DOS SURTOS CASUAIS

31. MATÉRIA ALBA microrganismos células epiteliais descamadas restos alimentares componentes salivares

36. Biofilme Supragengival Biofilme Subgengival associado ao dente associado ao epitélio associado ao conjuntivo microbiota móvel intra-sucular

37. FORMAÇÃO DO BIOFILME DENTÁRIO SUPRAGENGIVAL

38. PELÍCULA ADQUIRIDA espessura 0,01µm - 1µm grupamentos sulfatos e carboxila orientados para saliva COMPOSIÇÃO QUÍMICA proteínas (albumina), lisozima, lactoferrina, amilase, IgA, IgG, fosfolipídios, glicoproteínas

40. BIOFILME DENTÁRIO FASE DE COLONIZAÇÃO INICIAL (DE 0 A 8 HORAS) MECANISMOS DE ADESÃO E ESTRUTURAÇÃO

41. superfície dentária Streptococcus mutans S. sanguis Lactobacillus A. viscosus dorso da língua S. salivarius A. naeslundii

43. fase irreversível interações hidrofóbicas (LTA) ( S. sanguis, A. viscosus, A. naeslundii, S. mutans ) lecitina (fibrila) X carboidrato (receptor) ( S. sanguis, S. oralis ) especificidade à galactose e ao ácido siálico interações eletrostáticas – Ca ++ salivar ( S. mutans ) interação envolvendo IgAs ( S. sanguis )

44. interação c/ proteínas salivares ricas em prolina ( A. viscosus, S. mutans ) interações com amilase ( S. gordonii ) interação c/ proteína salivar submandibular e sublingual ( S. mutans ) interações com glicosiltransferase e glucanos ( S. mutans, S. sobrinus ) (Rölla et al ., 1984)

45. FASE DE CRESCIMENTO RÁPIDO (DE 4 A 48 HORAS) predominam mecanismos de aderência interbacteriana

46. MATRIZ INTERMICROBIANA 25% do volume do Biofilme

47. por meio de polissacarídeos ( S. mutans, sanguis, mitis, salivarius e Lactobacillus ) por meio de constituintes da saliva e do fluido gengival ( S. sanguis, S. oralis, A. naeslundii )

48. PEC S. mutans enzima invertase s a c a r o s e glicosiltransferase / frutosiltransferase polímero de glicose (glucan binding proteins – GBP) glucanos (mutano e dextrano) levano (frutano)

50. PIC GLICOGÊNIO

51. Veillonella e Neisseria fermentadoras de ácido láctico modifica o pH final do biofilme

52. por meio de constituintes de superfície de bactérias de diferentes espécies ( A. viscosus ou A. naeslundii e Estreptococos orais) ( S. sanguis e S. oralis e F. nucleatum ) ( S. sanguis e P. gingivalis ) ( Capnocytophaga gingivalis e A. israelli ) ( C. ochracea e A. naeslundii ) ( Prevotella loeschei e S. oralis )

53. FASE DE REMODELAÇÃO produtos extracelulares reações de co-agregação ecologia da placa mudanças na dieta (ingestação de sacarose) oxigênio no ambiente interações nutricionais produção de bacteriocinas

54. O 2 Carboidratos Saliva Streptococcus / Actinomyces Lactato Acetato Formiato

56. Lactato Veilonella Acetato Formiato H 2 Menadiona Campylobacter Pi / Pg

57. tiamina, putrescina, isobutirato Formato Fusobacterium / Eubacterium Bacteroides / Micromonas Co 2 Aa, Capnocytophaga , Ec

59. FORMAÇÃO DO BIOFILME DENTÁRIO SUBGENGIVAL

60. Cemento Radicular Capnocytophaga sp. Células Epiteliais Eikenella corrodens

61. BIOFILME DENTÁRIO SUBGENGIVAL associado ao dente formação do cálculo cáries radiculares

62. BIOFILME DENTÁRIO SUBGENGIVAL associado ao epitélio bastonetes e cocos G- bactérias flageladas espiroquetas

63. BIOFILME DENTÁRIO SUBGENGIVAL associado ao conjuntivo GN / PJL

64. Espiroquetas - GUNA (Listgarten, 1965) Espiroquetas e bastonetes fusiformes - epitélio gengival vital (Listgarten, 1965; Heylings, 1967) Bastonetes; filamentosos; cocos – espaços intercelulares e epiteliais da bolsa periodontal (Frank & Voegel, 1978; Frank, 1980) Invasão Bacteriana

65. Cocos; bastonetes; filamentosos; espiroquetas – epitélio das bolsas periodontais profundas. Aa.; C. sputigena ; Mycoplasma; Espiroquetas - PJL (Saglie, 1982) Invasão X translocação - gengivite induzida em ratos (Sanavi et al . - 1985) Invasão bacteriana gengival - sítios recorrentes (Pertuiset et al . - 1987) Invasão Bacteriana

77. PRINCIPAIS FATORES DE VIRULÊNCIA DOS ORGANISMOS PERIODONTOPATOGÊNICOS

79. ENZIMAS DE AGRESSÃO DIRETA PROTEASES colagenases (Pg, Pi, Aa, Td) ação semelhante à tripsina (P, Bf,Td) aminopeptidases (C, Pg) gelatinases (Pg, Pi)

80. FOSFOLIPASE A precursores da prostaglandina (Pg, Pi) FOSFATASE ALCALINA E ÁCIDA (Pg, Pi, C, Aa) PRODUTOS TÓXICOS EPITELIOTOXINA (Pg, Pi, Aa, C)

81. Fator inibidor da proliferação de fibroblastos suprime síntese de DNA e RNA dos fibroblastos (Pg, Pi, C, Aa, Td) Toxina de distensão citoletal efeito tóxico sobre os fibroblastos e células epiteliais (algumas cepas - Aa) Endotoxinas - LPS

82. Toxina indutora de reabsorção óssea (microvesículas de Aa) Butirato e Propionato – substâncias tóxicas Catabólitos de Proteólise substâncias fétidas – indol, NH 3 e compostos sulfurosos voláteis – aumentam a permeabilidade das mucosas e reduzem a síntese protéica (Pg, Pi)

83. Fatores de evasão das defesas do hospedeiro Fibrinolisina – invasão (Pg, Pi, Td) Inibição da atividade de LPMNs substâncias que competem com as quimiotáticas / bloqueio dos receptores de LPMNs (Pg, Pi, C, Aa, Td) Leucotoxina (Aa)

84. Componentes antifagocitários de superfície ligação de LPMNs (Pg, Aa) Resistência a digestão intracelular superoxidodismutase (Pg, Pi) catalase (Aa) Proteases para IgA e IgG (Pg, Pi, Bf, Aa, TD) Resistência às ações opsonizante e lítica do sistema C proteases para C3b e C5b (Pg)

89. Complexidade da microbiota Dificuldades na coleta: 1. Atividade de doença no sítio selecionado 2. Representatividade do material coletado 3. Diâmetro do sulco gengival Dificuldades no cultivo e caracterização bacteriana.

90. Diluições VMGAIII 0,5ml 10 -1 0,5ml 10 -2 0,5ml 10 -3 0,5ml 10 -4

91. Semeadura em Meio Seletivo 10 -2 pura 100  L 100  L

92. Incubação