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Adila Trubat
 Reações
antígeno-
anticorpo
 Contraimunoeletroforese – anticorpo vai em
direção ao +, e ´antígeno ao -
 Radioimunoensaio – quantifica antígenos ou
haptenos, por competição com antígenos ou
haptenos marcados.
Antígeno particulado
Antígeno em solução
•Submeter as proteínas à
um campo magnético
•Migram conforme o peso
molecular e afinidade
elétrica, formando bandas
A hemoglobina humana é uma proteína com quatro
subunidades.
O ser humano tem três tipos normais de Hemoglobina:
•A1 com duas cadeias alfa e duas beta.( em torno de 96,5%)
•A2 com duas cadeias alfa e duas delta.( até 3,5%)
•E fetal, com duas cadeias alfa e duas gama.( presente ao
nascimento mas que desaparece com o tempo)
•Hemoglobina S se polimeriza dentro das hemácias ,
deformando-as
•Responsáveis pelo transporte de lipídios no plasma
•Lipoproteína de alta densidade (alfa - HDL): A lipoproteína
HDL é uma pequena partícula de alta densidade, sintetizada
no fígado e no intestino, constituída de 50% de proteína, 30%
de fosfolipídios, 20% de colesterol e apenas traços de
triglicerídeos.
•Lipoproteína de baixa densidade (beta ou LDL): tem menor
conteúdo de triglicerídeos e maior de colesterol, que
transporta até os receptores celulares periféricos.. Oxida e é
chamado colesterol ruim
ELISA
Pode ser um teste qualitativo: positivo ou negativo
Pode ser um teste quantitativo: titulação de anticorpos
Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay 
•Placa coberta com antígeno
•Soro do paciente – contém anticorpos
•Adição do anticorpo marcado com enzima
•Adição do substrato colorido
•Medida da intensidade da cor
Placa coberta com anticorpos
Soro com antígenos
Anticorpo-anti-anticorpo marcado com enzima
Adição do substrato colorido
Medida da intensidade da cor
ELISA – detecção de anticorpos
ligados a antígenos
Incubação do antígeno com o anticorpos
Placas cobertas com antígeno-anticorpo
Adição do anticorpo marcado com enzima
Adição do substrato colorido
Medida da intensidade da cor
 Detecta anticorpos
 Utilizado para determinar se o resultado de um
teste imunológico de varredura é positivo ou
falso positivo.
 Ex.: Teste de HIV p testa a gp41 e p24
 Podem detectar anti IgG
WESTERN BLOT
•Separação das proteínas por
eletroforese bandas distintas
•Transferência das proteínas
para gel
•Papel com soro do indivíduo
•Ac ligam-se às proteínas
•Adiciona-se anti-IgG
marcados ou com enzima
peróxidase de rábano
•Adição do substrato da
enzima
Os cromossomas I e II (homólogos) diferem quanto aos
sítios para a enzima de restrição Eco RI. No corte do
DNA pela enzima Eco RI, pode-se observar que os
fragmentos resultantes do cromossoma I serão diferentes
dos fragmentos resultantes do cromossoma II.
A tabela mostra as sequencias de corte reconhecidas por três
tipos de enzimas de restrição.
Enzima Seq. de corte no DNA
BAM HI GGATCC
CCTAGG
Eco RI GAATTC
CTTAAG
Hind III AAGCTT
TTCGAA
 Controle da Qualidade de
Produtos – imunológicos, hemocomponentes,
hemoderivados, kits para diagnóstico de uso
“in vitro” utilizados para
diagnósticos das funções bioquímicas,,.
Fundamentos metodológicos
aplicados ao diagnóstico:,,
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  • 2.
  • 3.
  • 4.
  • 5.
  • 7.  Contraimunoeletroforese – anticorpo vai em direção ao +, e ´antígeno ao -
  • 8.  Radioimunoensaio – quantifica antígenos ou haptenos, por competição com antígenos ou haptenos marcados.
  • 11.
  • 12. •Submeter as proteínas à um campo magnético •Migram conforme o peso molecular e afinidade elétrica, formando bandas
  • 13.
  • 14. A hemoglobina humana é uma proteína com quatro subunidades. O ser humano tem três tipos normais de Hemoglobina: •A1 com duas cadeias alfa e duas beta.( em torno de 96,5%) •A2 com duas cadeias alfa e duas delta.( até 3,5%) •E fetal, com duas cadeias alfa e duas gama.( presente ao nascimento mas que desaparece com o tempo) •Hemoglobina S se polimeriza dentro das hemácias , deformando-as
  • 15. •Responsáveis pelo transporte de lipídios no plasma •Lipoproteína de alta densidade (alfa - HDL): A lipoproteína HDL é uma pequena partícula de alta densidade, sintetizada no fígado e no intestino, constituída de 50% de proteína, 30% de fosfolipídios, 20% de colesterol e apenas traços de triglicerídeos. •Lipoproteína de baixa densidade (beta ou LDL): tem menor conteúdo de triglicerídeos e maior de colesterol, que transporta até os receptores celulares periféricos.. Oxida e é chamado colesterol ruim
  • 16. ELISA Pode ser um teste qualitativo: positivo ou negativo Pode ser um teste quantitativo: titulação de anticorpos Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay 
  • 17. •Placa coberta com antígeno •Soro do paciente – contém anticorpos •Adição do anticorpo marcado com enzima •Adição do substrato colorido •Medida da intensidade da cor
  • 18. Placa coberta com anticorpos Soro com antígenos Anticorpo-anti-anticorpo marcado com enzima Adição do substrato colorido Medida da intensidade da cor
  • 19. ELISA – detecção de anticorpos ligados a antígenos Incubação do antígeno com o anticorpos Placas cobertas com antígeno-anticorpo Adição do anticorpo marcado com enzima Adição do substrato colorido Medida da intensidade da cor
  • 20.  Detecta anticorpos  Utilizado para determinar se o resultado de um teste imunológico de varredura é positivo ou falso positivo.  Ex.: Teste de HIV p testa a gp41 e p24  Podem detectar anti IgG
  • 21. WESTERN BLOT •Separação das proteínas por eletroforese bandas distintas •Transferência das proteínas para gel •Papel com soro do indivíduo •Ac ligam-se às proteínas •Adiciona-se anti-IgG marcados ou com enzima peróxidase de rábano •Adição do substrato da enzima
  • 22.
  • 23.
  • 24.
  • 25.
  • 26.
  • 27.
  • 28. Os cromossomas I e II (homólogos) diferem quanto aos sítios para a enzima de restrição Eco RI. No corte do DNA pela enzima Eco RI, pode-se observar que os fragmentos resultantes do cromossoma I serão diferentes dos fragmentos resultantes do cromossoma II. A tabela mostra as sequencias de corte reconhecidas por três tipos de enzimas de restrição. Enzima Seq. de corte no DNA BAM HI GGATCC CCTAGG Eco RI GAATTC CTTAAG Hind III AAGCTT TTCGAA
  • 29.
  • 30.
  • 31.
  • 32.  Controle da Qualidade de Produtos – imunológicos, hemocomponentes, hemoderivados, kits para diagnóstico de uso “in vitro” utilizados para diagnósticos das funções bioquímicas,,. Fundamentos metodológicos aplicados ao diagnóstico:,, ,.