Diagnóstico Microbiológico das Infecções de Pele e do Tecido Subcutâneo.

Universidade Federal do Triângulo Mineiro
Instituto de Ciências Biológicas e Naturais (ICBN)
Disciplina de Microbiologia Clínica
Professora Dra. Adriana Gonçalves de Oliveira
Diagnóstico Microbiológico das
Infecções de Pele e Tecido Subcutâneo
Juliana de Morais Palmieri da Silva
Lais de Melo Valente
Lázaro Antonio C. Novaes
Curso de Biomedicina
Uberaba - MG
Junho/2015

Aspectos gerais
DIAGNÓSTICOMICROBIOLÓGICODEINFECÇÕESDAPELEE
TECIDOSUBCUTÂNEO
 Estrutura anatômica
 Epiderme (mais superficial)
 Derme (mais profunda)
 Camada subcutânea adiposa
http://www.infoescola.com/anatomia-humana/derme/

Aspectos gerais
TECIDOSUBCUTÂNEO
Infecções cutâneas
 Grande diversidade de agentes etiológicos
 Mecanismos patogenéticos múltiplos
 Classificação
 Primária – Ex.: Erisipela
 Secundária – Ex.: Complicações de lesões de pele
(abrasões)
 Aguda
 Crônica
 Monomicrobiana – Ex.: Feridas infectadas por estafilococos
 Polimicrobianas – Ex.: Condições gangrenosas cuja
etiologia é o Streptococcus spp.

Microbiota normal
 A pele é um dos sítios colonizados de nosso organismo,
sendo que os microrganismos em questão localizam-se em
especial nas áreas úmidas, como a virilha e as áreas
interdigitais;
Dentre esses microrganismos podem ser citados os bacilos
difteróides aeróbios e anaeróbios, estafilococos aeróbios e
anaeróbios não hemolíticos e bacilos Gram-positivos
aeróbios.
DIAGNÓSTICOMICROBIOLÓGICODEINFECÇÕESDAPELEETECIDO
SUBCUTÂNEO
Exemplos:
 Acinetobacter;
 Aerococcus;
 Bacillus;
 Clostridium
perfringens;
 Corynebacterium;
Micrococcus;
 Propionibacterium;
 Staphylococcus;
 Streptococcus (grupo
A).

Painel Geral de Provas Bioquímicas
SUBCUTÂNEO
Celulite
Enterobactérias
• Prova da
citocromo-oxidase
• Prova da oxidação-
fermentação (OF)
da glicose
Antraz
Bacillus anthracis
• Coloração especial
• Sensibilidade a
antimicrobianos
Tuberculose cervical
Mycobacterium
tuberculosis
• Pesquisa de bacilo
ácool-ácido
resistente - BAAR
Infecção pós-
operatória simples
Clostridium spp.
• Hidrolise de
gelatina;
• Fermentação de
carboidrato;
• SIM
Infecção de feridas
complicadas
Vibrio vulnificus
• Citocromo-Oxidase;
Carboidratos;
• Prova do Halofilismo;
• Teste da Oxidação e
Fermentação (OF) da
glicose
Gangrena de Fournier
Escherichia coli
• Prova da citocromo oxidase;
• Oxidação-Fermentação da glicose
(OF);
• SIM;
• TSI;
• Citrato;
• Ureia;
• Fermentador de lisina;
• Voges Proskauer (VP)
Mordedura
Pasteurella multocida
• Prova da Catalase;
carboidratos;
• Urease;
• SIM

Coleta de Material
Aspiração
Swab
Biópsia >>> Gold Standard
SUBCUTÂNEO
Fonte: http://www.sporometrics.com/services/environmental-analysis/supplies-equipment/

LESÃO ABERTA
Coleta de Material
TECIDOSUBCUTÂNEO
Fonte: http://enfermeiro.br.tripod.com/lesoes/id10.html

ABSCESSO FECHADO
SUBCUTÂNEO
Coleta de Material

FERIDA DE QUEIMADURA
SUBCUTÂNEO
Coleta de Material

PÚSTULA E VESÍCULA
SUBCUTÂNEO
Coleta de Material

BIÓPSIA
SUBCUTÂNEO
Coleta de Material
Fonte: http://www.dermatopatologia.com/biopsias/

 Swab sem meio de transporte – enviar imediatamente
após a coleta
 Swab com meio de transporte - enviar em temperatura
ambiente(20 a 25ºC) até 8 horas após coleta
 Aspirados – em temperatura ambiente (20 a 25ºC) até
2 horas ou injetar a amostra em frasco com meio de
cultura apropriado, como, por exemplo, frasco
utilizados para hemocultura
 Biopsia – em temperatura ambiente (20 a 25ºC) até 2
horas após coleta.
TRANSPORTE
Coleta de Material
SUBCUTÂNEO

TECIDOSUBCUTÂNEO
Procedimentos
 Exames microscópicos
 Método de Gram

TECIDOSUBCUTÂNEO
Procedimentos
 Cultura
 Inoculação
 Swab sem meio de transporte
 Swab com meio de transporte
 Seringa
 Biópsia
 Tecido de pele queimada
 Incubar por 24 a 72 horas
Fonte: http://biomedicinaemicro.blogspot.com.br/p/culturas-bacterianas.html

TECIDOSUBCUTÂNEO
Meios de Cultura
 Agar sangue (AS)
 Agar MacConkey (MC)
 Agar Chocolate (CHOC)
 Caldo TSB
 Caldo tioglicolato (THIO)

TECIDOSUBCUTÂNEO
Avaliação da Cultura

Panorama: infecções e agentes etiológicos
 Lesões eritematosas e superficiais
 Impetigo
 Erisipela
 Celulite
 Foliculite, furúnculos e carbúnculo
 Paroníquia (prega da unha)
 Micoses superficiais
 Ulcerações e nódulos
 Lesões esporotricoides
 Blastomicose e Criptococose
 Difteria cutânea
 Antraz
 Fístulas
 Tuberculose
 Infecções mistas ou foco crônico
 Queimados
SUBCUTÂNEO

Panorama: infecções e agentes etiológicos
Feridas cirúrgicas
 Infecção pós-operatória simples
 Clostridium spp.
 Infecção de feridas complicadas
 Vibrio vulnificus
 Infecções complicadas e lesões causadas por mordedura
 Gangrena de Fournier
 Escherichia coli
 Mordedura por animais
 Pasteurella multocida (cão e gato)
SUBCUTÂNEO

 Margem da área = pouco definida e
sem elevação central.
TECIDOSUBCUTÂNEO
Lesões Eritematosas e Superficiais: CELULITE
Staphylococcus
aureus
Streptococcus spp. do
grupo A

TECIDOSUBCUTÂNEO
• Vibrio spp.
e
Aeromonas
spp.
Introdução do
microrganismo
• Ferida ou
laceração
Natação em água
doce ou do mar
Celulite
 Agentes etiológicos menos
frequentes:
 Enterobactérias;
 Pasteurella spp.;
 Clostridium spp.;
 Bacillus antracis;
 Erysipelotrix sp.
 Aeromonas spp.;
 Haemophilus spp.

TECIDOSUBCUTÂNEO
Coloração de
Gram
Agar Sangue
(AS)
Agar chocolate Agar MacConkey
Caldo
tioglicolato
Caldo
trypticase soja
Celulite
Cultura
Diagnóstico Laboratorial

TECIDOSUBCUTÂNEO
Diagnóstico Laboratorial Celulite
Staphylococcus
aureus
Streptococcus pyogenes
β-hemolítico do grupo A

TECIDOSUBCUTÂNEO
Identificação de Cocos Gram-positivos
Celulite

TECIDOSUBCUTÂNEO
Bacilos Gram-
negativos
Fermentador
Oxidase negativo
(-)
Enterobactérias
Oxidase Positivo
(+)
Plesiomonas
Vibrio
Campylobacter
Não fermentador
Oxidase negativo
(-)
Acinetobacter
Burkolderia
cepacia
Stenotrophomonas
Oxidase positivo
(+)
Pseudomonas spp.
Burkolderia spp.
Alcaligenes spp.
Identificação de
Bacilos Gram-
negativos
Celulite

Identificação de Enterobacteriacea
SUBCUTÂNEO
Celulite

TECIDOSUBCUTÂNEO
Provas Bioquímicas
Celulite
Prova da Oxidação-
Fermentação (OF) da
glicose
 Dois tubos de ensaio com meio OF-glicose semi-sólido (agulha de
platina)
 Óleo mineral estéril (tubo fechado)
Teste positivo
Meio muda de verde para
amarelo (produção de
ácido)

Tubo aberto
• Ácido
(amarelo)
• Ácido
(amarelo)
• Alcalino
(verde ou
azul)
Tubo fechado
• Alcalino
(verde)
• Ácido
(amarelo)
• Alcalino
(verde ou
azul)
Metabolismo
• Oxidativo
• Fermentativo
• Não-
sacarolítico
TECIDOSUBCUTÂNEO

TECIDOSUBCUTÂNEO
Provas Bioquímicas
Celulite
Prova da Citocromo-
Oxidase
 Colônias isoladas em placa de Petri com agar MacConkey (alça de
platina)
 Tira com reativo para detecção da enzima (cadeia respiratória)
Teste positivo Fita adquire coloração azul
(em no máximo 1 minuto)

TECIDOSUBCUTÂNEO
Provas Bioquímicas
Celulite
 EXEMPLO: Enterobactérias são citocromo-oxidase negativas (-)

TECIDOSUBCUTÂNEO
Ulcerações e Nódulos: ANTRAZ
Bacillus anthracis

TECIDOSUBCUTÂNEO
Agar Sangue
(AS)
Agar Sangue
telurito
Antraz
Cultura

TECIDOSUBCUTÂNEO
Antraz
Bacilos Gram-positivos
Giemsa Azul de Löeffler Wright
Olt Hiss Tinta da China
Coloração

TECIDOSUBCUTÂNEO
Agar Triptona de Soja
(TSA):Sensibilidade aos
ATMs
Provas Bioquímicas
Antraz
Bacilos Gram-positivos
Amoxacilina +
Ácido
clavulânico
Gentamicina Amicacina
Canamicina Fluoroquinolonas Tetraciclina
Cloranfenicol Rifampicina Vancomicina

Antraz
TECIDOSUBCUTÂNEO
 Bacilo aeróbio
Gram positivo
 Imóvel
 Capsulado
 Formador de esporo
 Crescimento entre 12 e 44ºC
 Produção de ácido
 Colônias opacas
 Margens irregulares
 Aspecto de “cabeça de medusa”

TECIDOSUBCUTÂNEO
Fístulas: TUBERCULOSE CERVICAL
Mycobacterium
tuberculosis
 Paciente com
linfadenite cervical
causada por micobactéria
(TB positivo)

TECIDOSUBCUTÂNEO
Coloração de Ziehl-
Nielsen
(baciloscopia)/
auramina
Agar
Lowestein-
Jensen
Meio Middlebrook
7H10 ou 7H11
MGIT Bactec 12B
Tuberculose Cervical
Cultura
MB/BacT 3D

TECIDOSUBCUTÂNEO
 Bacilo imóvel
 Aeróbio obrigatório
 Parede celular com grande
quantidade de lipídeos
 Álcool-ácido resistente
 Sensível ao calor e luz UV
 Cresce lentamente em cultura
Tuberculose Cervical

TECIDOSUBCUTÂNEO
Feridas cirúrgicas
Clostridium spp.
Vibrio vulnificus
 Redução Índigo por
Clostridium spp.
isolado

TECIDOSUBCUTÂNEO
Infecções complicadas: gangrena de Fournier
Escherichia coli

TECIDOSUBCUTÂNEO

TECIDOSUBCUTÂNEO
Provas Bioquímicas

TECIDOSUBCUTÂNEO
Lesões causadas por mordeduras
Pasteurella
multocida
 Bactéria cocobacilar
 Gram negativa

Agar Sangue de
carneiro (AS)
Agar chocolate
Cultura
TECIDOSUBCUTÂNEO
Mordeduras

TECIDOSUBCUTÂNEO
Provas Bioquímicas
Meio SIM (sulfeto-
indol-motilidade)
Mordeduras

TECIDOSUBCUTÂNEO
Teste do Indol
 Útil para separar Escerichia coli (positiva) de Klebisiella-
Enterobacter-Hafnia-Serratia (negativas – maioria)
fortemente POSITIVA
Mordeduras

TECIDOSUBCUTÂNEO
Motilidade
IMÓVEL
Mordeduras

TECIDOSUBCUTÂNEO
Teste do sulfeto
(H2S)
NEGATIVA
Mordeduras

Referências Bibliográficas
 Livro Procedimentos Básicos em Microbiologia Clínica.
OPLUSTIL et. al. Editora Sarvier. 3ª ed. 2009
 Livro Diagnóstico Microbiológico. KONEMAN et.al. Editora
Guanabara Koogan. 6 ed. 2008;
 Manual de Microbiologia Clínica para Controle da Infecção
em Serviços de Saúde. www.anvisa.gov.br
Disponível em: < http://www.forumsaude24.com/wp-
content/uploads/2013/12/Impetigo-2.jpg>. Acesso em 29/05/2015, às
17h12min
Disponível em: < http://aeltec.blogspot.com.br/2009/10/impetigo-
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Disponível em: <
http://www.scielo.br/img/revistas/abd/v87n2/a13fig04.jpg >.Acesso
em 29/05/2015, às 17h19min
Disponível em <
https://microdidatica.wordpress.com/microbiologia-geral/aspectos-
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TECIDOSUBCUTÂNEO

Disponível em < http://www.microregistrar.com/wp-
content/gallery-bank/gallery-
uploads/o_18vlm8acsd0nmn6idc1ds3eced.jpg >. Acesso em
29/05/2015, às 17h37min.
 Disponível em <
http://pt.slideshare.net/profluiscarloscarvalho/estafilococos-
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Disponível em <
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839f-de1e-4cfa-aab2-e0f1d145ef44.jpg>.
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