XU-19P4

1. [Copaíba 012]
Óleo essencial: Murraya paniculata
Composto: β-cariofileno, α-zingibereno e α-cariofileno
Título: Effects of β-caryophyllene and Murraya paniculata essential oil in the murine
hepatoma cells and in the bacteria and fungi 24-h time–kill curve studies
“Efeitos do β-cariofileno e do óleo essencial Murraya paniculata nas células de
hepatoma murino e em estudos de curva de morte por bactérias e fungos em 24 horas”
Autor: Maria Cipriano Selestino Neta, Catia Vittorazzi, Aline Cristina Guimarães, João
Damasceno Lopes Martins, Marcio Fronza, Denise Coutinho Endringer & Rodrigo
Scherer
Journal: Pharmaceutical Biology
Vol (Issue): 55 (1)
Ano: 2016
DOI: 10.1080/13880209.2016.1254251
TAGs: Jessamine laranja; citotoxicidade; fungicida; bactericida; β-cariofileno; atividade
antioxidante; in vitro; inflamação; analgésico; células de hepatoma; ação
antiproliferativa; câncer; alta seletividade; neoplasia; infecção bacteriana; infecção
fúngica; anti-inflamatório; doença hepática; baixa citotoxicidade; atividade antitumoral;
copaíba; Staphylococcus aureus; Escherichia coli; Salmonella typhimurium;
Enterococcus faecalis; Aspergillus niger; A. fumigates; A. parasiticum; F. solani; ensaio
de viabilidade celular; fibroblastos; células de hepatoma; método de microdiluição em
caldo; cromatografia gasosa; espectrometria de massa; β-cariofileno; α-zingibereno;
α-cariofileno; Murraya paniculata; concentração fungicida mínima; Concentração
inibitória mínima; concentração bactericida mínima; ação bacteriostática; curvas de
morte por tempo; camptotecina; murta-de-cheiro.
Sobre o artigo:

2. A Organização Mundial da Saúde (OMS) recomenda, desde 2002, que os governos
adotem a fitoterapia nos programas de atenção primária à saúde, utilizando os recursos
naturais disponíveis em seus territórios.
A planta Murraya paniculata (Rutaceae), comumente conhecida como “Orange
Jessamine” na Ásia, tem sido amplamente usada em fitoterapia na China, Índia e
Indonésia.
A Murraya paniculata faz parte da antiga medicina indiana, e esta espécie é descrita na
farmacopéia chinesa como remédio anti-inflamatório, antibiótico e analgésico, enquanto
a medicina popular indonésia relata o uso de bandagens feitas com folhas no
tratamento de fraturas ósseas. Contudo, apesar dos usos e efeitos relatados, o uso
terapêutico da planta ainda não é muito difundido no Brasil.
A literatura atual descreve a planta como tendo propriedades anti-hiperglicêmicas,
antifúngicas, antibacteriana, analgésica, antioxidante, ações antiespasmódicas,
broncodilatadoras e vasodilatadoras.
A diversidade de propriedades atribuídas a M. paniculata deve-se principalmente à
variedade de compostos químicos desta planta, como os flavonóides, fenóis,
alcalóides, polissacarídeos e cumarinas.
Poucos estudos foram realizados com o seu óleo essencial e a maioria avaliou apenas
a composição química, descrevendo a presença de sesquiterpenos, como β-cariofileno,
limoneno, espatulenol e elemeno (γ e δ), como compostos principais.
Os únicos dois estudos na literatura que descrevem a atividade biológica do óleo
essencial revelaram atividades antioxidantes e antibacterianas contra Klebsiella
pneumoniae e Bacillus subtilis, e repelência contra Diaphorina citri – um inseto
responsável por causar doenças em regiões produtoras de cítricos. Além disso, não
foram encontrados dados para os principais compostos isolados.
Portanto, o objetivo do presente trabalho foi avaliar os efeitos do β-cariofileno e do óleo
essencial de “Orange Jessamine”, também conhecida como murta-de-cheiro, nas
células de hepatoma murino (Hepa1c1c7).
A atividade citotóxica de M. paniculata e β-cariofileno (7,8 a 500 μg/mL) foi avaliada
usando o ensaio de viabilidade celular (MTT) em fibroblastos normais e células de
hepatoma.

3. A concentração inibitória mínima e as curvas de eliminação do tempo (24 h) foram
avaliadas contra as bactérias Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Salmonella
typhimurium, Enterococcus faecalis, Aspergillus niger, A. fumigates e A. parasiticum e
F. solani pelo método de microdiluição em caldo.
A atividade antioxidante foi medida pelos ensaios DPPH e ABTS, e ainda, a
composição química foi avaliada por análises de cromatografia gasosa e
espectrometria de massas (GC-MS).
Resultados:
Na análise da composição química do óleo essencial, foram identificados 13
compostos, representando um total de 99,5% do óleo essencial, sendo 99,3%
sesquiterpenos e 0,3% monoterpenos, onde o composto principal foi β-cariofileno
(57%), seguido por α-zingibereno (31%) e α-cariofileno (3,5%).
No ensaio ABTS, o óleo essencial e o β-cariofileno não apresentaram ação mesmo na
maior concentração testada (8 mg/mL), e a atividade antioxidante avaliada pelo método
DPPH apresentou atividade antioxidante pobre de acordo com a classificação proposta
por outros autores recentemente.
A atividade antioxidante está diretamente relacionada à capacidade do composto de
eliminar os radicais livres, portanto, compostos com pouco ou nenhum agrupamento
químico com essa capacidade (por exemplo, grupos hidroxila) não serão capazes de
desempenhar essa função.
Os compostos mais abundantes no óleo essencial de M. paniculata obtidos neste
experimento não possuem grupos hidroxila, o que pode ser a causa do fraco potencial
antioxidante.
De acordo com a classificação, valores de CIM menores que 0,1 mg/mL representam
forte ação antimicrobiana, valores entre 0,1 mg/mL e 0,5 mg/mL indicam atividade
antimicrobiana moderada, valores entre 0,5 e 1,0 mg/mL indicam ação fraca e valores
acima de 1,0 mg/mL inativação.
A concentração inibitória mínima e as concentrações bactericidas mínimas do óleo
essencial de M. paniculata e β-cariofileno são apresentadas na tabela abaixo.

4. Considerando essa classificação, o óleo essencial apresentou atividade antibacteriana
fraca para S. aureus e ação moderada para todas as outras cepas de bactérias. A ação
do β-cariofileno foi semelhante para bactérias Gram-positivas e Gram-negativas
testadas e mostrou apenas fraca atividade em todas as cepas bacterianas
investigadas, sugerindo que a ação moderada encontrada para o óleo essencial ocorre
por um efeito sinérgico entre seus compostos e não por ação de seu composto
principal.
Os valores de CIM do óleo essencial também demonstram que ele apresenta atividade
antifúngica moderada a forte (CIM entre 0,1 e 0,5 mg/mL), principalmente no fungo
Aspergillus fumigatus.
Semelhante ao teste antibacteriano, os valores de CIM e CFM para β-cariofileno foram
superiores aos encontrados para o óleo essencial, indicando que o efeito sinérgico
entre os componentes do óleo é essencial para a ação antifúngica.
A razão da concentração letal para a concentração inibitória mínima (CBM / CIM ou
CFM / CIM) indica que o composto exibe ação bactericida ou bacteriostática, onde
valores maiores que 4,0 indicam ação bacteriostática, enquanto valores menores que
4,0 indicam ação bactericida. E no presente estudo, os valores foram todos menores ou
iguais a 4, indicando que o óleo essencial e o β-cariofileno apresentaram ação
bactericida e fungicida.
Tanto o óleo essencial quanto o β-cariofileno induziram a morte bacteriana rápida com
concentrações iguais ou acima do CIM para todas as bactérias, exceto o β-cariofileno
contra S. aureus.

5. O estudo da curva de tempo de morte mostrou que o óleo essencial e β-cariofileno
exibiram um efeito fungicida bom e rápido dentro de 2 a 4h para F. solani e 4 a 8h para
A. niger.
Os resultados também mostraram um efeito dependente da dose para todos os fungos,
enquanto a concentração de 2 × CIM levou a uma redução mais rápida nas contagens
em comparação com a concentração de CIM.
A figura 1 mostra os resultados da atividade citotóxica do óleo essencial de M.
paniculata e β-cariofileno em células tumorais de hepatócitos e em células de
fibroblastos normais.
Pode-se observar que o óleo essencial foi mais citotóxico nas células tumorais do que
nas células normais, apresentando atividade semelhante à da camptotecina (um
medicamento padrão), por outro lado, o β-cariofileno apresentou menor atividade em
ambas as linhas celulares investigadas.
Figura 1: Atividade citotóxica do óleo essencial de M. Paniculata e β-cariofileno em fibroblastos
3T3 e Hepa1c1c7, uma linha celular de hepatoma humano usando o ensaio MTT. Os dados

6. são apresentados como porcentagem de morte celular de três experimentos independentes. A
Camptotecina (CPT) foi usada como controle positivo.
Na prática:
Muito interessante como um composto, presente em diversos tipos de plantas e em
diferentes famílias botânicas, o β-cariofileno, apresenta alto índice de seletividade (a
partir do óleo essencial presente no estudo M. paniculata) e qualifica seu uso no
tratamento do câncer promovendo a morte de células cancerígenas e preservando as
células normais da morte, o que é um desafio para o manejo atual de neoplasias
(proliferação celular anormal).
Além disso, o óleo essencial exibiu potencial atividade bactericida e fungicida para os
microrganismos testados. Portanto, os pesquisadores sugerem que o óleo essencial de
M. paniculata é um forte candidato para ser utilizado no tratamento de câncer, de
infecções bacterianas e também fúngicas.