O documento descreve uma pesquisa que investigou os efeitos antimelanogênicos do óleo essencial de hortelã-limão e seu principal composto, o β-cariofileno. Os resultados mostraram que o óleo essencial e o β-cariofileno reduziram significativamente a síntese de melanina em células de melanoma murino in vitro, através da inibição da expressão de proteínas-chave envolvidas na melanogênese, como a tirosinase.

1. [Peppermint 011]
Óleo essencial: Mentha citrata
Composto: D-limoneno, d-carvona, d-selineno e b-cariofileno
Título: Inhibition of melanogenesis by b-caryophyllene from lime mint essential oil in
mouse B16 melanoma cells
“Inibição da melanogênese pelo b-cariofileno do óleo essencial de hortelã-limão em
células de melanoma B16 de camundongo”
Autor: C.-H. Yang, Y.-C. Huang, M.-L. Tsai , C.-Y. Cheng, L.-L. Liu, Y.-W. Yen e W.-L.
Chen
Journal: International Journal of Cosmetic Science
Vol (Issue): 37 (5)
Ano: 2015
DOI: 10.1111/ics.12224
TAGs: b-cariofileno; cultura celular; hortelã-limão; melanogênese; melanina;
clareamento da pele; hiperpigmentação; d-limoneno; d-carvona; d-selineno; Mentha
citrata; efeito anti-melanogênico; pigmentação; uso tópico; pele; in vitro; tirosinase;
manchas; sardas; cosméticos; cuidados com a pele.
Sobre o artigo:
Na pele de mamíferos, a pigmentação se deve à produção, transporte e distribuição de
melanina, que é sintetizada pelo melanócito e é considerada como um agente protetor
para reduzir os efeitos nocivos da radiação ultravioleta.

2. No entanto, uma superprodução de melanina pode levar a certos distúrbios da pele,
incluindo surgimento de manchas, sardas, entre outras síndromes de hiperpigmentação
epidérmica.
Recentemente, compostos antimelanogênicos sem efeitos colaterais que induzem uma
redução permanente da melanina são considerados valiosos como potenciais agentes
de clareamento da pele.
Sabendo da aplicação dos óleos essenciais voláteis das espécies de hortelã em
cosméticos e em produtos para cuidados com a pele, neste estudo, os pesquisadores
avaliaram os principais componentes químicos da hortelã-limão e suas propriedades
anti-melanogênicas.
Os componentes químicos do óleo essencial foram analisados por cromatografia em
fase gasosa e espectrometria de massa (GC/MS), e os efeitos anti-melanogênicos do
óleo essencial de hortelã e do b-cariofileno foram investigados em células de
melanoma (linhagem: murino B16F10).
Para determinar os efeitos do óleo essencial de hortelã-limão na melanogênese,
mediu-se a viabilidade celular e o conteúdo de melanina das células de melanoma.
Resultados:
As células foram tratadas com óleo essencial de hortelã-limão (0,001 a 0,005%) por
48h e, em seguida, um ensaio de viabilidade celular (MTT) foi realizado para medir a
viabilidade celular e a atividade metabólica. Após o tratamento, o óleo essencial de
hortelã-limão não apresentou efeitos citotóxicos nas células em concentrações
variando de 0,001 a 0,05%.

3. Para determinar as atividades anti-melanogênicas do óleo essencial de hortelã-limão,
as células foram então expostas ao óleo essencial de hortelã-limão (0,005%) por 48h, e
o conteúdo celular de melanina foi medido.
Como mostrado na figura 1, o óleo essencial de hortelã-limão aparentemente diminuiu
a síntese de melanina de maneira dependente da dose nas células de melanoma.
Figura 1: Efeito do óleo essencial de hortelã-limão na síntese de melanina em células. As
células foram tratadas com 0,001 a 0,005% de óleo essencial de limão e menta ou Fenofibrato
(controle positivo).
A análise de cromatografia gasosa-espectrometria de massa revelou que os principais
componentes do óleo essencial de hortelã-limão são d-limoneno (41%), d-carvona
(8%), d-selineno (6%) e b-cariofileno (6%).
O d-limoneno, d-carvona e d-selineno mostraram pouca capacidade de regular a
melanogênese em qualquer um dos presentes ensaios, portanto, os pesquisadores
tentaram avaliar os efeitos do b-cariofileno sobre a melanogênese.

4. As células de melanoma foram tratadas com b-cariofileno por 48h, e pôde-se observar
que o conteúdo de melanina celular foi significativamente reduzido em um padrão
dependente da dose (Figura 2).
Figura 2: Efeito do b-cariofileno na síntese de melanina em células B16F10. As células foram
tratadas com 1 a 150 µM de b-cariofileno ou 10 µM de fenofibrato. Os valores percentuais das
células tratadas são expressos em relação ao valor das células de controle. Fenofibrato foi
usado como padrão positivo.
A fim de investigar mais precisamente os efeitos inibitórios do b-cariofileno na
melanogênese, a atividade da tirosinase intracelular em células de melanoma foi
confirmada usando um ensaio de coloração DOPA.
Os pesquisadores observaram que o b-cariofileno inibiu significativamente a atividade
da tirosinase intracelular, uma enzima chave na biossíntese da melanina, em um
padrão dependente da dose (Figura 3).

5. Figura 3: Efeito do b-cariofileno na atividade da tirosinase intracelular em células B16F10. A
atividade da tirosinase intracelular foi determinada por zimografia L-DOPA. (a) As células foram
tratadas com 1 a 150 µM de b-cariofileno. (b) Os resultados do zimograma são mostrados e a
intensidade relativa da banda foi quantificada.
Surgiu então a hipótese de que a modulação da transdução do sinal melanogênico
pode ser responsável por essa atividade modulatória do b-cariofileno. Portanto, os
lisados celulares obtidos após o tratamento com b-cariofileno foram posteriormente
analisados para determinar a expressão de proteínas relacionadas à melanogênese.
Os pesquisadores observaram que o b-cariofileno reduziu a melanogênese regulando
negativamente a expressão de MITF, TRP-1, TRP-2 e tirosinase, que agem ativando os
genes envolvidos na síntese da melanina, como também ativando a transcrição dos
genes envolvidos na estrutura do melanossoma (onde a síntese de melanina
acontece), resultando em uma diminuição na síntese e acumulação de melanina.
Em conclusão, o óleo essencial de menta-limão reduziu a síntese de melanina em
células B16-F10. O b-cariofileno, um dos principais compostos do óleo essencial de
menta-limão, também pode reduzir a melanogênese por diminuir a expressão de MITF,
TRP-1, TRP-2 e tirosinase, resultando na diminuição do conteúdo de melanina.

6. Na prática:
Os pesquisadores comprovaram que o óleo essencial de hortelã-limão e seu principal
composto, o β-cariofileno, são potenciais agentes clareadores da pele, uma vez que
demonstraram possuir potentes efeitos antimelanogênicos in vitro.
Isso ocorre porque nos efeitos do óleo há uma regulação negativa dos genes
envolvidos na síntese de melanina, assim como a inibição dos receptores na estrutura
celular onde a produção da melanina acontece. Você poderia, portanto, fazer o uso
tópico de 1 a 2 gotas do OE em manchas da pele que deseja clarear.