Procedimento operacional padrão para exame de VDRL qualitativo, imagens e passo a passo

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P O P V D R L - Q U A L I T A T I V O
Com a micropipeta, transferir 50 µL da amostra para o
centro de um circulo da placa de Kline. Proceder da
mesma maneira para os controles;
Homogeneizar a suspensão antigênica cuidadosamente em
movimentos suave de rotação ou inversão entre as palmas da
mãos por 1 min, e adicionar desta 20 µL no círculo e nos
controles e homogeneizar;
Colocar a lamina em um agitador mecânico a 180 rpm ou
realizar movimentos circulares na palma da mão por 1 min;
Ler os resultados dentro de 1 min ao microscópio em
aumento de 100x ( ocular e objetiva de 10x)
Observe na página seguinte para definir se a amostra é
reagente ou não.

2. P O P V D R L - Q U A L I T A T I V O
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Com a placa de Kline pronta no microscópio, observe a
presença de floculação dos antígenos no aumento de 4x e
10x.
Amostras reagentes: apresentam floculação de
antígenos visíveis ao microscópio. Necessária
quantificação.
Amostras não reagentes: apresentam mistura
homogênea.
Aspereza reagente: é um fenômeno em que
algumas amostras podem apresentar um padrão
intermediário entre a não-reatividade e
reatividade.

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P O P V D R L - Q U A N T I T A T I V O
A M O S T R A
R E A G E N T E
Após observação microscópica da
presença de flocos, é necessária
quantificação da amostra.
Transferir 50 µL da solução fisiológica ( NaCl 0,85%) estéril
nos círculos de 2 a 4 da placa de Kline;
Dispensar 50 µL da amostra do circulo 1 no circulo 2;

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P O P V D R L - Q U A N T I T A T I V O
Transferir 50 µL do circulo 2 para o circulo 3 e misturar, em
seguida, passar a mesma quantidade do circulo 3 para o
circulo 4, desprezando os últimos 50 µL. Obtendo assim as
diluições 1:2, 1:4 e 1:8 respectivamente dos círculos 2, 3 e 4
Proceder deste ponto a diante como indicado no método
quantitativo.
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Caso a ultima diluição ainda apresente reagente, continuar
a diluição seriada ( 1:16, 1:32, 1:64, 1:128, etc)
Diluição seriada apenas para quando apresentar
reatividade, desconsiderando quando apresentam aspereza
reagente.
3 Misturar o soro e a solução fisiológica no circulo 2 por
aspiração 8 vezes;

5. P O P V D R L
INDICAÇÃO DO TESTE
Teste não treponêmico utilizado para determinação qualitativa e
semi quantitativa, de anticorpos não treponêmicos (reaginas)
presentes no soro ou plasma, utilizado para triagem sorológica da
Sífilis. Somente para uso diagnóstico in vitro.
PREPARAÇÃO DE AMOSTRA E PACIENTE
A) Tipos de amostra:
- Soro: usar soro recém coletado e separado o mais rápido possível
após a coleta, sem hemólise e sem lipemia
- Plasma: usar plasma com EDTA recém coletado, separado o mais
rápido possível após a coleta, sem hemólise e sem lipemia. Não se
deve congelar ou aquecer o plasma.
B) Preparo do paciente:
Como a lipemia pode interferir na reação, recomenda-se a coleta da
amostra após um jejum de cerca de 8 a 12 h.
C) Critérios de rejeição
Em amostras de soro e plasma que apresentarem lipemia e hemólise
ou sinais de contaminações microbianas devem ser rejeitada.
D) Armazenamento e estabilidade da amostra
- Soro: geladeira 2 a 8 C por até 5 dias; ou freezer a -20C
- Plasma: geladeira 2 a 8 C por 2 dias. Não devem ser congeladas ou
aquecidas.
MATERIAL NECESSÁRIO
Microscópio
Placa escavada (Placa de Kline)
Pipetas automáticas para dispensar 20 µL e 50 µL
Solução salina (0,9% NaCl)
Agitador mecânico ajustável a 180 rpm
Suspenção antigênica

6. P O P V D R L - R E S U L T A D O S
RESULTADOS E INTERPRETAÇÃO
- Positivos: Reportar como ‘’ Amostra analisada reagente até o título..’’ (
indicar o título)
- Negativo: Reportar como ‘’ Amostra analisada não reagente’’
INTERPRETAÇÕES
- Reagente: pode significar doença atual ativa, doença curada antiga,
reação anamnéstica, presença de anticorpos hereditários.
- Não reagente: significa que não representa a doença e não tem
significado clínico.
SIGNIFICADO CLÍNICO
A sífilis é uma doença infecto-contagiosa causada pelo Treponema
pallidum. É transmitida principalmente pela via sexual, mas também,
pode ser transmitida verticalmente (sífilis congênita) durante a gestação
e por transfusão sanguínea.
O USPSTF (U. S. Preventive Services Task Force) recomenda a triagem
de rotina para detecção da sífilis em todas as mulheres grávidas.
De acordo com o USPSTF a sensibilidade diagnóstica estimada dos
testes de RPR e VDRL é de 78 a 86 % na detecção da sífilis primária,
100% na detecção da sífilis secundária e 95 a 98 % na detecção de sífilis
latente. A especificidade diagnóstica varia de 85 a 99 % e pode estar
reduzida em indivíduos que apresentam outras condições preexistentes,
como por exemplo, doença vascular do colágeno, gravidez, uso de
drogas injetáveis, doença maligna avançada, tuberculose, malária e
doenças virais, podendo assim, apresentar resultados falso-positivos.
Após o primeiro ano da doença os títulos tendem a diminuir,
podendo a reatividade desaparecer mesmo sem tratamento. Deste
modo, nas formas tardias a sensibilidade diminui. Após o tratamento
adequado da infecção o teste tende a negativar-se entre 9 - 12 meses,
podendo a reatividade em baixos títulos (≤ 1:8) permanecer por vários
anos ou por toda a vida. Esta reatividade residual denomina-se
”memória” ou “cicatriz” sorológica.