2. Teratogenicidade Cardíaca em ratos com
Fenilcetonúria Maternal: Definindo parâmetros
fenotípicos e influências de fundo genético
Jéssica Lima Conceição
Graduanda de Ciências Biológicas- UFMA
Membro da Liga Acadêmica de Genética Médica- UFMA

3. Introdução
 Malformações cardiovasculares (CVMS) são defeitos
congênitos comuns, que ocorrem em uma taxa de 5-8/1000
nascidos vivos e respondem por ¼ de todos os defeitos
congênitos.
 Fatores genéticos e ambientais
 Trissomia 21
 Síndrome de Turner
 Distúrbios de um único gene (GATA4, Nkx2.5, NOTCH1)
 Exposição pré-natal ao Etanol
 Diabetes Materna
 Fenilcetonúria Maternal (MPKU)

4. O que é Fenilcetonúria?
Erro inato do metabolismo
Ocorre 1 em a cada 10.000 - 15.000 nascidos
vivos
Herança autossómica recessiva

5. Fenilalanina Tirosina
Fenilalanina Tirosina
PHA
PHA
Fenillactato
Fenilacetato
Fenilapiruvato
Nádia. et al. 2000

6. Classificação das deficiências de
fenilalanina hidróxilase segundo a
atividade enzimática
FORMA ATIVIDADE
ENZIMÁTICA
FAL SANGUÍNEA TRATAMENTO
FNC clássica <1 % >20 mg/dl SIM
FNC leve 1-3 % 10-20 mg/dl SIM
Hiperfenilalaninemi
a permanente
> 3% <10 mg/dl NÃO
Trefz FK. et al.1985

7. PKU-Maternal
• Retardo do crescimento
• Microcefalia
• Dismorfias
• Deficiência intelectual
• CVM
CVM - MPKU 7- 15%
Coarctação da aorta (COA)
Tetralogia de Fallot (TOF)
Defeitos no septo Ventricular (VSD)
 Síndrome do coração esquerdo hipoplásico (SHCE)

8. Diagnóstico:
Clínico - triagem neonatal.
Laboratorial – fluorimetria ,espectrometria
de massa.
Trefz FK. et al.1985

9. Quadro clínico
Atraso global do desenvolvimento
Neuropsicomotor
deficiência mental
 comportamento agitado ou padrão autista
convulsões
odor característico na urina
Trefz FK. et al.1985

10. Objetivo
Delinear parâmetros críticos em que a
fenilalanina é um teratogénico cardiovascular
e estudar os efeitos de fundo genético.

11. Materiais e Métodos
Mouse BTBR Pah enu2
Mouse C57B/L6J
Mouse C3H/HeJ
Fêmeas homozigotas
mutantes para Pah enu2

12. 1-Dosagem Experimental de Fenilalanina
– Quatro grupos de tratamento para investigar o nível
crítico materno:
controle (<360 μM)
 baixa (de 360-600 μM)
 médio (600-900 μM)
 elevado (> 900 μM)
Níveis de Phe foram obtidos no início do estudo, E5.5,
E10.5, E15.5 e no sacrifício.
Fêmeas homozigóticos mutantes de C57B/L6J Pah enu2 e
C3H/HeJ Pahenu2 linhagens congênitas
Ração deficiente de Phe
e suplementação 0,7 g /L
Phe na água para manter
os níveis de Phe no soro
materno <360 μM

13. 2-Exposição Temporária a
Fenilalanina
Ração deficiente de Phe e
suplementação 0,7 g /L Phe na água
para manter os níveis de Phe no soro
materno <360 μM
Foram expostos a uma dieta rica em
Phe por períodos escalonados ao
longo de dias E7.5-E15.5
Um dia sem ingestão Phe (ração e água
deficiente Phe).
As fêmeas foram sacrificados em E18.5
e fetos dissecados. Os níveis Phe
Maternal foram coletados, 48 horas e
24 horas após a exposição.

14. Análise da Fenilalanina
Níveis de Phe
-Amostras de sangue submandibular
-Amostras de sangue cardíaco
Espectrometria de
massa em tandem
Analisador de
aminoácidos
As amostras foram processadas no Laboratório de
Bioquímica do Hospital Infantil Nationwide

15. Resultados

17. BTBR- Defeito do septo
ventricular (VSD), dupla
via de saída do ventrículo
direito(DORV), Artéria do
Arco aórtico (AAA).
C3H- Esteriose da válvula
aórtica (AVS), hipertrofia
sub-ventricular (VH).
BL6- Interrupção do arco
aórtico (IAA), arco
aórtico a direita (RAA).

19. Discussões
• 1) cardiovascular associado MPKU defeitos
ocorrem de um modo dependente da dose, de
acordo com os níveis de Phe maternos.
• 2) O tempo de exposição por Phe corresponde
ao padrão humano.
• 3) a base genética influencia a incidência e
fenótipo de defeitos cardiovasculares MPKU
associados.

20. • Semelhante ao humano, perda de gravidez,
quando níveis de Phe no soro materno são
altos.
• Com base em estudos anteriores, previa-se o
fundo genético C3H/HeJ que demonstraria
um aumento na incidência de CVMs, mas não
podíamos prever o resultado para o C57BL /
6.

21. OBRIGADA