Apresentação feita no Seminário de Discussão de Avaliações de Tecnologias em Saúde de projetos financiados pelo Departamento de Ciência e Tecnologia - DECIT do Ministério da Saúde.

1. Instituto Nacional de Infectologia Evandro Chagas - INI
Comparação da acurácia diagnóstica de testes
diagnósticos comerciais imunocromatográficos com NS1
para detecção do Dengue
CNPq 4036 2013/8
TEMA: Monitoramento de tecnologias
LINHA: Avaliação de novas intervenções para o rastreamento e confirmação
diagnóstica de dengue. Com resultado esperado: Estudo de validação no contexto
brasileiro

2. Objetivo Geral
Analisar a acurácia e a confiabilidade dos
testes rápidos por imunocromatografia para
o diagnóstico do dengue tipo 4

3. Objetivos Específicos
1. Comparar a acurácia diagnóstica de testes rápidos NS1 com o padrão de
referência RT-PCR E Elisa NS1 para dengue 4 em pacientes atendidos em
Unidades de Pronto Atendimento.
2. Avaliar e comparar a confiabilidade interobservador dos kits comerciais de
testes rápidos e segundo tipo de amostra (fresca ou congelada)

4. MÉTODO
Delineamento:
Estudo seccional (diretriz STARD) e análise de acurácia de 4 TRI:
• NS1 Bioeasy®
• NS1 Bioclin®
• NS1 Orangelife®
• NS1 Biorad®

8. Instituições
• UPA e Hospital (Secretaria Estadual Saúde/RJ): coleta
• LabEpiClin (INI/Fiocruz):concepção, supervisão e análises de dados
• Laboratório de Flavivírus (IOC/Fiocruz): diagnóstico viral
MÉTODO

9. População: adultos com síndrome febril aguda (2013-2014) atendidos na
UPA 24 hs Tijuca e Hospital de Emergência de Resende.
Critérios inclusão: Maiores de 18 anos com febre até 3 dias, sem
evidência de foco infeccioso.
Grupo de comparação: quatro grupos (um para cada teste rápido).
MÉTODO

10. Tamanho Amostral: cálculos no MedCalc versão 15.10, onde:
• Estudo de validação dos TRI - mínimo de 230 pacientes para cada grupo (dengue
e não dengue), comparar sensibilidades e especificidades dos quatro TRI.
• Repetição independente, duas vezes, com cegamento, de 360 testes para aferir
confiabilidade interobservador de cada TRI. H0 kappa < 80%, erros alfa (5%) e
beta de 20%.
• Repetição de 150 testes para aferir a confiabilidade segundo tipo de amostra
clínica (fresca versus congelada).
MÉTODO

11. Seleção dos pacientes e coleta de amostras
Estudo de validação da imunocromatografia – amostras: seleção
consecutiva de pacientes
Diagnósticos Laboratoriais índice e Referência – Procedimentos
Padrão de referência: RT-PCR, Elisa NS1, Elisa IgM e IgG (nos positivos)
Índices: NS1 Bioeasy, NS1 Bioclin, NS1 Orangelife e NS1 Biorad.
MÉTODO

12. Análise de Dados
Medidas de acurácia – sensibilidade, especificidade, Razões de Verossimilhança
positiva e negativa dos quatro TRI com IC 95%
Concordância entre duas observações (amostra fresca e congelada) dos TRI estimada
pelo índice kappa (IC 95%). Interpretação (Landis & Koch 1977): concordância pobre
(k<0,0), discreta (0,0 a 0,2), regular (0,2 a 0,4), moderada (0,4 a 0,6), substancial (0,6 a
0,8), quase perfeita (0,8 a 1,00) e perfeita (k=1).
Softwares: digitação Epidata 3.1; análise no MedCalc 15.1, e TreeAge Pro.
MÉTODOS

13. ASPECTOS ÉTICOS
• Resolução CNS 466/2012.
• Termo Consentimento Livre Esclarecido.
• Projeto clínico original aprovado pelo CEP INI, aprovação da
Coordenação Geral das UPA da SES e financiamento CNPq via
edital da REBRATS.

14. RESULTADOS
Accuracy of a Dengue Imunochromatographic Strip Test in a
Predominant DENV 4 Setting
Even though this test was twenty and four times more likely to be positive in patients with
dengue infection than in those with other febrile illness, the test failed in confirming
almost a half of DENV-4 cases due to false negative results. This sensitivity was worse
than that described in Asia for similar rapid test used in other three dengue serotypes.
Immunochromatographic strip tests are rapid and convenient to use and does not involve
special laboratory equipment, but in patients with negative results a diagnostic algorithm
should include another test.
Apresentação oral

15. Avaliação de dois testes rápidos imunocromatográficos em dengue 4
VI Congresso de Economia da Saúde da América Latina e do Caribe e XI Encontro
Nacional de Economia da Saúde: Saúde, Desenvolvimento e Território. - São
Paulo. 2014
Verónica Elizabeth Mata1, Sibelle Nogueira Buonora2, Diana Rodrigues3, Cynthia
Meirelles4, Fernanda Moises Quintela5, Carlos Augusto Ferreira de Andrade6, Rita Maria
Nogueira7, Sônia Regina Lambert Passos8.
Comparar o desempenho dos testes Dengue NS1 Bioeasy® e Dengue NS1Ag Strip (Bio-Rad®),
utilizando como padrão de referência o Reverse Trancriptase Polimerase Chain Reaction (RT-PCR)
para dengue 4 em pacientes atendidos em Unidade de Pronto Atendimento (UPA).

16. Amostra I
em UPA/RJ
dengue 4
2013-2014
UPA-SES/RJ

18. Fluxograma de seleção de amostra e análise laboratorial (Amostra I)

19. Caraterísticas clínicas e demográficas (Amostra I)
• Prevalência = 49,3% (n= 167 casos)
• Infecção primária = 6% (10/167)
• Infecção secundária = 79,6% (133/167)
• Sexo feminino 52,5%
• Sorotipo DENV-4 em 91% (152/167) das amostras

20. Acurácia dos testes rápidos imunocromatográficos segundo o padrão de
referência (RT-PCR ou ELISA)
• Três testes da empresa Orangelife® tiveram resultados inconclusivos,
sendo 02 deles dengue
• Os quatro testes apresentaram alta especificidade (variando de 95,9
a 99,4%), porém baixas sensibilidades (Bioeasy®=43,1%, Bioclin®=
20,4%, Bio-Rad ®=16,2% e Orangelife®=13,9%)
• O teste Bioeasy® apresentou o melhor desempenho sendo cerca de
25 vezes mais positivo em verdadeiros doentes do que em não
doentes (LR+ = 24,7, variando de 7,9 a 76,9)

25. Confiabilidade inter-observador com IC de 95% (Amostra I)
• Confiabilidade quase perfeita para todos os testes, com exceção do IC
95% do teste Orangelife® para a dupla homogênea que varia de
concordância substancial a quase perfeita.
• Discordâncias mais recorrentes na presença do diagnóstico para os
testes:
a. Orangelife®: Ppos variando entre os grupos entre 90,9 e 95,7%
b. Bioclin®: Ppos variando entre os grupos entre 92,5 e 94,3%
• Concordância na ausência da doença altas para os três testes avaliados
(variando entre os grupos de 98,5 a 99,6%).

26. Amostra II
em Hospital de Resende
dengue 1
2015
Hospital de Emergências – Resende/RJ

29. Caraterísticas clínicas e demográficas (Amostra II)
Frequência
Idade em anos (média e desvio padrão) 39,6 (20,9)
Sexo feminino 53,3% (79/150)
Febre em dias (média e desvio padrão) 1,6 (1,1)

30. Acurácia do teste rápido imunocromatográfico Bioeasy® segundo o
padrão de referência (ELISA NS1)
• O tipo de amostra e o tempo para a leitura do teste parecem ser
variáveis que interferem na sua acurácia
• Sensibilidade nas amostras frescas varia de 77,6% (leitura aos 15´)
a 79,3% (leitura aos 30´)
• Sensibilidade nas amostras de soro congelado varia de 83,2% (leitura
aos 15´) a 87,6% (leitura aos 30´)

31. Confiabilidade tipo de amostra (fresca vs congelada) com teste
Bioeasy®
• Leitura aos 15 minutos de iniciado o teste:
Concordância na leitura quase perfeita (kappa=0,83)
Mais discordâncias entre a leitura de resultado negativo
(Pneg=88,4%) do que na presença da doença (Ppos=94,1%)
• Leitura aos 30 minutos de iniciado o teste:
Kappa = 0,79 (substancial)
Ppos = 93,5%
Pneg = 85,7%

32. Conclusão
• Teste Rápido Dengue 4 melhor desempenho - BioEasy ®
• Teste Rápido Dengue 1 Bioeasy® desempenho foi pior que em Dengue 4 e variou
segundo o tipo de amostra e o tempo de leitura
• Utilização como Add-on
• Caso positivo - tratar como dengue
• Caso negativo manter investigação para dengue e outras Síndromes febris agudas
• Confiabilidade quase perfeita entre duas leituras independente de expertise e formação
profissional, a discrepância ocorreu na presença do diagnóstico
• Confiabilidade quase perfeita a substancial entre exame com soro congelado e sangue
fresco a beira do leito (discrepâncias principalmente nos resultados negativos)

33. EQUIPE
• Sonia Regina Lambert Passos. http://lattes.cnpq.br/1563815489548742. PhD; Médica; Pesquisadora Titular;
Orientadora. Coordenadora do estudo; Concepção do projeto; Análise de dados; Interpretação dos resultados.
INI/Fiocruz; Docente P_SP_ENSP.
• Carlos Augusto Ferreira de Andrade. http://lattes.cnpq.br/1012877450215153. PhD; Médico; Pesquisador
Associado. Concepção Estudo Revisão Sistemática. INI/Fiocruz.
• Verônica Elizabeth Mata. http://lattes.cnpq.br/8105520479021295. Mestre; Enfermeira. Concepção, Execução de
Testes Rápidos; Análise de Dados; Revisão Sistemática e estudo de Custo efetividade; Elaboração de manuscritos
para publicação. Doutoranda INI/Fiocruz/2014.
• Sibelle Nogueira Buonora. http://lattes.cnpq.br/1739651536493358. Mestre; Médica Infectologista; Doutoranda INI/
2012. Coordenação de campo; Concepção do projeto clínico; Treinamento de campo; Supervisão de equipe.
CBMERJ/SES; IPEC/Fiocruz.

34. • Regina Paiva Daumas. http://lattes.cnpq.br/7819162703300906. PhD; Médica. Concepção do estudo
clínico; Análise dos dados. Pesquisadora Adjunta ENSP/ Fiocruz.
• Fernanda Moises Quintela. http://lattes.cnpq.br/1337130563562030. Graduanda de medicina.
Treinamento de campo; Coleta de dados. Bolsista CNPQ ITI-A.
• Yara Hahr Marques Hokerberg. http://lattes.cnpq.br/0133246013470288. PhD; Médica. Análise
Estatística. Tecnologista IPEC/Fiocruz.
• Rita Maria Ribeiro Nogueira. http://lattes.cnpq.br/9749453000493825. PhD; Médica virologista.
Coordenadora da análise das amostras laboratoriais. Pesquisadora IOC/Fiocruz.
• Flavia Barreto dos Santos. http://lattes.cnpq.br/7039328264620392. PhD; Bióloga. Supervisão e
realização dos exames RT-PCR e EIE. Lab de Flavivirus IOC/Fiocruz.
EQUIPE PARTICIPANTE DO ESTUDO

35. • Suzana Alves da Silva. http://lattes.cnpq.br/8851565468841241. PhD; Médica. Supervisão da Revisão
Sistemática e Estudo diagnóstico. Bolsa CNPq DTI-B (2014) Lab Epidemiologia Clínica.
• Maria Letícia Borges dos Santos Gestão de Projetos, coordenação de campo. Bolsa CNPq DTI-B (2015)
• Levy Vilas Boas Fukuoka. http://lattes.cnpq.br/0268738071032669. Graduando medicina UFF. busca
bibliográfica, leitura e extração de dados. Bolsista IC CNPq.
• Cleber Nascimento do Carmo. http://lattes.cnpq.br/9904579095302578. PhD; Estatístico. Análise Estatística.
Pos-doutorando Pesquisador ENSP/Fiocruz.
• Raquel V Carvalhaes de Oliveira. http://lattes.cnpq.br/8134556871127442. PhD; Estatística. Análise Estatística.
Pesquisadora Adjunta IPEC/Fiocruz.
• Guilherme Migueis Berardinelli Graduando de Medicina Bolsista IC CNPq
• Indiara Brito Matemática Bolsista ITI A CNPq Elaboração, digitação, análise de dados
EQUIPE PARTICIPANTE DO ESTUDO

36. OBRIGADA
sonialambert@fiocruz.br