O documento discute a reprodutibilidade dos diagnósticos histológicos do colo do útero e a utilização de biomarcadores como p16 e Ki-67 para auxiliar na diferenciação de lesões pré-neoplásicas. Há concordância moderada entre patologistas e tendência a classificar lesões como negativas. Estudos demonstraram que os testes de p16/Ki-67 apresentam maior especificidade que testes de HPV alto risco para detecção de lesões de alto grau, principalmente em mulheres mais jovens com citologia LSIL. A

2. • PREVENÇÃO DO CÂNCER DE COLO UTERINO
Castle et al. The Relationship of Community Biopsy-Diagnosed Cervical Intraepithelial Neoplasia Grade 2 to the
Quality ControlPathology-Reviewed Diagnoses. 2007, Am J Clin Pathol
Rastreio
citológico
Colposcopia
Biópsia dirigida Tratamento das
lesões de alto grau
Negativo – NIC I,
NIC II, NIC III Seguimento

3. • No Manejo das mulheres com rastreio positivo para doença pré-neoplásica do
colo uterino é importante distinguir:
Entretanto, essa distinção acurada tem se mostrado difícil de ser
conseguida.
Galagno MT et al. Using Biomarkers as Objective Standards in the Diagnosis of Cervical Biopsies. 2010, Am J Clin
Pathol
• Controle
clínico
CHANCE DE
REGRESSÃO
ESPONTÂNEA
• Intervenção
imediata
POTENCIAL
PARA DOENÇA
INVASIVA

5. • Martin et al (2011) consideram que existe uma tendência para uma baixa
reprodutibilidade inter e intraobservador na avaliação dos graus de NIC entre os
patologistas
Martin & O`Leary, Histology of cervical intraepithelial neoplasia and the role of
Biomarkers. 2011, Best Parctice&ReaserchClinical Obstetrics and Gynaecology
Dificuldade de diagnóstico diferencial
Metaplasia
imatura e NIC I/II
NIC I e as lesões
de alto grau

6. • Estudo multicêntrico – 7 centros
• Resultado Inicial do Centro clínico x Grupo de controle de
qualidade
• Concordância moderada
• Erro sistemático - O grupo de CQ deu resultados menos
graves nos três tipos de amostra

7. • 41 % das citologias LSIL-NIC I foram interpretadas como
negativo pelo grupo Controle de qualidade.
• Concordância para resultado de biópsia NIC I = 42,6% de 887
biópsias

8. A reprodutibilidade dos diagnósticos histológicos do colo
do útero é fundamental para o rastreio eficiente e para
avaliar a eficácia de novas tecnologias.
K = 0,36 (0,32/0,63)
Kp = 0,54 (0,50/0,58)
OBSERVARAMUMA GRANDETENDÊNCIA DOS REVISORES
EM CLASSIFICAR NIC I COMO NEGATIVO.O HPV DNA FOI
POSITIVO NA MAIORIA DOS CASOS DE NIC I, REFLETINDOA
NECESSIDADE DO ESTABELECIMENTO DE CRITÉRIOS MAIS
ESPECÍFICOS NAS ALTERAÇÕES MORFOLÓGICAS
ORIGINADAS PELO EFEITOCITOPÁTICO DO HPV.

9. • Ferramenta acessória com o objetivo de auxiliar na interpretação
de anormalidades citológicas equivocadas
• Os métodos de detecção do DNA do HPV apresentam algumas
limitações, como a incapacidade de detecção do DNA viral na
totalidade das lesões de baixo grau e a dificuldade de
discriminação entre as infecções virais transitória e crônica.
• A discriminação entre estes dois tipos de infecção é crucial para se
determinar a presença de infecção persistente, que pode predispor
a uma progressão da lesão cervical

10. Uso de biomarcadores
• Métodos alternativos e objetivos para auxiliar na resolução de diagnósticos mais
difíceis.
• Crescente avanço do perfil genético e dos biomarcadores com a inserção de vários
marcadores moleculares para doenças pré-neoplásicas e para câncer de colo
uterino
• Alguns biomarcadores foram testados e validados para identificar células
displásicas em espécime de esfregaço cervical, além de possuírem o potencial
para aperfeiçoar e aumentar a performance do rastreio cervical .
• Entre esse biomarcadores, os mais amplamente utilizados são o Ki-67 e o p-16.
Martin & O`Leary, Histology of cervical intraepithelial neoplasia and the role of
Biomarkers. 2011, Best Parctice&Reaserch Clinical Obstetrics and Gynaecology

13. International Journal of Cancer
Volume 136, Issue 12, pages 2741-2751, 12 MAY 2014 DOI: 10.1002/ijc.28900
http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/ijc.28900/full#ijc28900-fig-0001

14. http://www.cap.org/ShowProperty?nodePath=/UCMCon/Contribution%20Folders/WebContent/pdf/ronnett-
biomarker-usage-qa.pdf

17. P16 + KI 67

18. • Estudo Europeu prospectivo, multicêntrico
• Avaliar a performance do Teste
• 5 países – 196 centros
• 25,577 mulheres – citologia + P16/ki 67 + CH HPV (AR)
• 1104 mulheres com diagnóstico ASC-US/LSIL –
colposcopia
• LSIL = 529

19. Cancer Cytopathology
Volume 123, Issue 6, pages 373-381, 17 APR 2015 DOI: 10.1002/cncy.21542
http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/cncy.21542/full#cncy21542-fig-0001

20. Cancer Cytopathology
Volume 123, Issue 6, pages 373-381, 17 APR 2015 DOI: 10.1002/cncy.21542
http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/cncy.21542/full#cncy21542-fig-0001
• Especificidade = de 3,4 vezes maior em mulheres de todas as idades, 3,0 vezes
em mulheres com idade ≥ 30 anos e 4.3- vezes superior com idade <30 anos.
• VPPs foram significativamente maior para citologia p16-ki67 contra o teste de
HPV, atingindo 26,5% em mulheres de todas as idades e 29,4% em mulheres
com idade ≥ 30 anos

21. Cancer Cytopathology
Volume 123, Issue 6, pages 373-381, 17 APR 2015 DOI: 10.1002/cncy.21542
A diferença de sensibilidade, medida pelo rTPF entre a citologia p16/ki67 e teste de
HPV foi estatisticamente significativa para CIN2 + no corte em mulheres de todas as
idades (rTPF, 0,871; P = 0,005) e naqueles com idade ≥ 30 anos (rTPF, 0,865 ; P =
0,026)
• A especificidade da citologia p16-ki67 foi significativamente maior do que
o teste HPV em cada grupo de idade ( P <.001).

22. • Os resultados deste grande estudo multicêntrico, realizado
em 5 países europeus, mostram que citologia p16 / Ki-67
pode ser utilizado para a triagem eficiente de mulheres com
citologia LSIL e ASC-US.
• Reduzindo substancialmente o número de referências para
a colposcopia e identificando a grande maioria das
mulheres com lesões de alto grau que precisam de
acompanhamento rigoroso e/ou tratamento.

23. Estudos elegíveis - mulheres com citologia cervical
ASCUS ou LSIL submetidas aos testes p16 / Ki-67 e
controle posterior com biópsia dirigida.

24. Os intervalos de confiança altamente sobrepostos mostram que o desempenho do
teste de p16 / Ki-67 não pode inequivocamente ser considerada superior à precisão
do diagnóstico de testes HPV alto risco.

26. • Estudo Nacional – 2015
• Comparou as precisões do teste de coloração dupla p16 / Ki-67 e
do teste molecular para o HPV de alto risco (HR-HPV) para
identificar lesão de alto grau em mulheres com citologia cervical
de células escamosas ASC-US e LSIL

27. Possati-Resende JC, Fregnani JHTG, Kerr LM, Mauad EC, Longatto-Filho A, et al. (2015) The Accuracy of p16/Ki-67 and HPV Test in the
Detection of CIN2/3 in Women Diagnosed with ASC-US or LSIL. PLoS ONE 10(7): e0134445. doi:10.1371/journal.pone.0134445
http://journals.plos.org/plosone/article?id=info:doi/10.1371/journal.pone.0134445

28. Correlation between cervical cytology and colposcopy and histological findings.
Possati-Resende JC, Fregnani JHTG, Kerr LM, Mauad EC, Longatto-Filho A, et al. (2015) The Accuracy of p16/Ki-67 and HPV Test in the
Detection of CIN2/3 in Women Diagnosed with ASC-US or LSIL. PLoS ONE 10(7): e0134445. doi:10.1371/journal.pone.0134445
http://journals.plos.org/plosone/article?id=info:doi/10.1371/journal.pone.0134445

29. Examples of positive tests for Ki-67 (red) and p16 (brown).
Possati-Resende JC, Fregnani JHTG, Kerr LM, Mauad EC, Longatto-Filho A, et al. (2015) The Accuracy of p16/Ki-67 and HPV Test in the
Detection of CIN2/3 in Women Diagnosed with ASC-US or LSIL. PLoS ONE 10(7): e0134445. doi:10.1371/journal.pone.0134445
http://journals.plos.org/plosone/article?id=info:doi/10.1371/journal.pone.0134445

30. Comparative performance of hr-HPV and p16/Ki-67 for the diagnosis of CIN2/CIN3.
Possati-Resende JC, Fregnani JHTG, Kerr LM, Mauad EC, Longatto-Filho A, et al. (2015) The Accuracy of p16/Ki-67 and HPV Test in the
Detection of CIN2/3 in Women Diagnosed with ASC-US or LSIL. PLoS ONE 10(7): e0134445. doi:10.1371/journal.pone.0134445
http://journals.plos.org/plosone/article?id=info:doi/10.1371/journal.pone.0134445

31. Desempenho comparativo dos testes para pesquisa de DNA-HPV e
imunocitoquímica no diagnóstico de lesões de alto grau (NICII/III) de
acordo com os parâmetros de sensibilidade, especificidade e área sob a
curva ROC (Hospital de Câncer de Barretos, fevereiro/2012 a
agosto/2013).

32. • 22,1% (23/104) das mulheres com NIC 2 / CIN3 teve um diagnóstico prévio de
LSIL.
• Entre as mulheres mais jovens (≤ 30 anos) com LSIL, p16 / Ki-67 dupla
coloração teve maior precisão na identificação de lesões precursoras,
especialmente CIN3 em comparação com testes moleculares para HPV de
alto risco.
• Entre as mulheres com idade superior a 30 anos e com diagnóstico de LSIL,
os métodos apresentaram desempenho similar.
• Consideram que p16 / Ki-67 combinado pode ser utilizado como uma
ferramenta de diagnóstico adicional para prever lesões clinicamente
relevantes entre as mulheres diagnosticadas com LSIL, principalmente nas
mais jovens.

33. Dinamarca - 2013
Estudo retrospectivo – Cintec plus e HPV alto risco (Aptma)
Desempenho dos testes para detectar lesão de alto grau em
mulheres com citologia baixo grau
469 mulheres idade média de 30 anos

35. • Sensibilidades semelhantes
• Especificidade maior para
Cintec plus
• VPN alto para ambos os
testes

37. •Concluíram que
• Elevada sensibilidade de detecção para ambos os testes aliada ao
valor preditivo negativo tão elevado, indica que os dois testes
poderiam ser seguros para uso em um sistema de triagem.
• Cintec PLUS p16 INK4a / Ki-67 em amostras de citologia LSIL
demonstraram maior especificidade, importante para reduzir o custo
do programa e evitar referência desnecessária para colposcopia e
tratamento.
• O valor kappa para a avaliação do teste Cintec PLUS foi moderada,
mas pode ser melhorado através do treinamento dos observadores.

38. P16 INK4A PARA A INTERPRETAÇÃO DA BIÓPSIA CERVICAL
(COLÉGIO AMAERICANO DE PATOLOGISTAS E DA SOCIEDADE AMERICANA DE
COLPOSCOPIA E PATOLOGIA)
International Journal of Cancer
Volume 136, Issue 12, pages 2741-2751, 12 MAY 2014 DOI: 10.1002/ijc.28900
http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/ijc.28900/full#ijc28900-fig-0001