Apresentação tipagem sanguinea

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Apresentação tipagem sanguinea

  1. 1. IMUNO-HEMATOLOGIA Sistemas de grupos sanguíneos Maria Auxiliadora N Ferreira
  2. 2. DEFINIÇÃO Estudo e classificação dos grupos sanguíneos através de reações imunológicas entre antígenos e anticorpos.
  3. 3. HISTÓRICO • Início do século XX – Landsteiner verifica a incompatibilidade sanguínea entre as pessoas •Reação de amostras de sangue de diversas pessoas Aglutinação • Substâncias do plasma X Substâncias presentes na membrana das hemácias •1901, Landsteiner descreveu os tipos A, B e O das hemácias, posteriormente, Decastello e Sturli descreveram o tipo AB.
  4. 4. Importância na Transfusão: • Definir o fenótipo, sobretudo ABO e RhD dos doadores e receptores de sangue. • Pesquisar a presença de anticorpos no plasma do receptor contra antígenos presentes na hemácias do doador. • Evitar a reação transfusional, que pode ser leve a grave, podendo ocasionar a morte do receptor.
  5. 5. ANTÍGENOS Substâncias reconhecidas pelo organismo como “não-próprias”, podendo se ligar especificamente a uma molécula de anticorpo ou receptor de célula T. • Antígeno completo ou imunógeno: é capaz de ativar uma resposta imune. • Antígeno incompleto: não é capaz de ativar uma resposta imune. • Antígenos Eritrocitários: antígenos de grupos sanguíneos sendo A, B e D os principais.
  6. 6. ANTICORPOS OU IMUNOGLOBLULINAS São substâncias produzidas a partir da ativação dos glóbulos brancos do sangue (linfócitos B), em resposta à introdução de um dado antígeno. • Funções: Ligar-se ao antígeno Neutralização do Ag Opsonização Ativação dos FC
  7. 7. Pertencem a fração gama(gamaglobulinas), podendo ser classificadas : IgG, IgM, IgE, IgA, IgD. IgM • Molécula pentamérica • Capaz de ativar o sistema complemento • Não atravessa a barreira placentária • São Ac “frios” (a fixação do Ac sobre o Ag é máxima em baixa temperatura 4 a 18°C) IgG • Principal imunoglobulina sérica (75%) • Molécula monomérica • Atravessa a barreira placentária • São produzidas em respostas secundárias
  8. 8. ANTICORPOS OU IMUNOGLOBLULINAS • Anticorpos naturais: Ac formados contra antígenos não presentes no organismo, sem necessidade de contato prévio com o Ag. Surgem em resposta a antígenos presentes em bactérias e alimentos com estrutura semelhante a dos grupos sanguíneos. Ex: Ac sistema ABO (em geral da classe IgM) • Anticorpos adquiridos: Formam-se após a ativação do sistema imune. Ex: Ac adquiridos por resposta imune a transfusão e/ou gravidez. •Anticorpos irregulares: anticorpos formados a partir da exposição a um antígeno. A ocorrência não é esperada. Ex: aloimunização pelo sistema Rh
  9. 9. ANTICORPOS OU IMUNOGLOBLULINAS • Anticorpos completos: promovem aglutinação de hemácias em meio salino. Ex: IgM • Anticorpos incompletos: reagem com antígeno mas não promovem aglutinação de hemácias. Precisam de um meio artificial que promova a aglutinação para visualização da reação. Ag-Ac. Ex: IgG
  10. 10. Fenômeno da aglutinação de hemácias (HEMAGLUTINAÇÃO) • É a técnica que objetiva detectar e quantificar as reações Ag-Ac • A aglutinação das hemácias ocorre quando há uma diminuição das forças de repulsão das hemácias
  11. 11. TESTE DAANTIGLOBULINA HUMANA (TAG) • Coombs (1945) : Sensibilização de animais com injeções de imunoglobulinas humanas. Levando a produção de Ac contra a fração Fc das mesmas. • Soro de coombs ( Ac contra Ac humanos – antiglobulinas humanas) Direto- Hemácias sensibilizadas por Ac ou Fc (DHPN) • Teste da antiglobulina Indireto- Ac no soro/plasma (identificação de ac irregulares)
  12. 12. Sistema ABO • Primeiro sistema de grupo sanguíneo a ser descoberto em 1900 • É o principal sistema de grupo sanguíneo • Os genes ABO localizados no cromossomo 9, tem relação de codominância. (A1, A2, B,O) • Gene O é considerado silencioso • Possui anticorpos de ocorrência “natural” • Os Ac ABO são dirigidos contra os Ag ausentes nas hemácias do próprio individuo. São de classe IgM e IgG, ativos a 37oC e capazes de fixar e ativar o complemento, provocando hemólises intravasculares severas em casos de incompatibilidades transfusionais
  13. 13. Antígenos dos sistema ABO • Presentes na membrana de diversos tecidos • Encontrados na forma solúvel na saliva, leite, lágrima, urina, líquido amniótico, etc. • São produtos secundários dos genes ABO • Os produtos primários são enzimas (glicosiltransferases) capazes de adicionar carboidratos sobre uma estrutura precursora na membrana da hemácia • A expressão dos genes ABO depende da ação de outro gene, o gene H (FUT1), localizado no cromossomo 19
  14. 14. Biossíntese dos Ag do sistema ABO A- Ag H B- Ag A C- Ag B
  15. 15. Determinação do fenótipo ABO • Prova Direta :Detecção de antígenos através do uso de de anti-soros conhecidos • Prova Reversa: Detecção de anticorpos através do uso de hemácias conhecidas
  16. 16. MÉTODOS DE TIPAGEM TUBOS GEL CENTRIFUGAÇÃO MICROPLACAS
  17. 17. Tubo Mais difundida. Muito utilizada para resolver problemas nos resultados. Realizada em pipetagem manual e de rotinas pequenas.
  18. 18. Microplaca Mais utilizada para doadores, pode ser para sistemas automatizados ou pipetarem manual .
  19. 19. Colunas de aglutinação Gel centrifugação, para pipetagem manual ou sistema automatizado.
  20. 20. Principais variações das técnicas TUBOS 15 SEGUNDOS MICROPLACA 1 a 2 MINUTOS COLUNA 9 a 10 MINUTOS Tempo médio de centrifugação TUBOS 2,5 a 5% MICROPLACA 1 a 3% COLUNA 0,8 a 1,2% ou 2,5 a 5% Concentração da suspensão de hemácias
  21. 21. COMPATIBILIDADE ABO PARA HEMÁCIAS
  22. 22. Sistema Rh • É o mais complexo sistema de grupos sanguíneos • Depois do sistema ABO, é o de maior importância clinica • Sistema composto de aproximadamente 49 antígenos • Cinco deles (D,E,e,C,c) são responsáveis por 99% dos problemas clínicos associados ao sistema Rh • É exclusivamente eritrocitário ( Associado com o citoesqueleto da membrana pela anquirina e proteína 4.2) • Produzido a partir 10º semana de vida IU
  23. 23. • Controle da produção das Ptns não glicosadas RH por 2 genes(P34-36) • O gene RHD codifica a produção da proteína RhD que carreia o antígeno D • Gene RHCE que possui vários alelos (RHCe, RHcE, RHce, RHCE,) que codifica a produção da proteína RhCE(CE) • Indivíduos RhD positivos (genes RHD e RHCE), enquanto os negativos apresentam somente o gene RHCE Sistema Rh
  24. 24. HISTÓRICO •1939 :Levine e Stetson atribuem a causa da eritroblastose fetal de um recém nascido à atividade de Ac maternos contra suas hemácias; •1940 : Landsteiner e Wiener produzem por imunização de coelhos com hemácias de macacos Rhesus , soro Ac capazes de aglutinar 85% das hemácias humanas;
  25. 25. Variantes fenotípicas do Ag D 1)D fraco • Indivíduos portadores de D fraco apresentam menor expressão de antígenos D nas hemácias D normal: 10.000 a 25.000 sítios antigênicos D fraco: 66 a 5.000 sítios antigênicos • Variação qualitativa do antígeno RhD que produz uma alteração quantitativa de sítios antigênicos expressos na membrana eritrocitária. • Indivíduos com esse fenótipo não produzem anti D caso recebam transfusão de hemácias D normal. As hemácias D fraco são consideradas como Rh POSITIVO, podendo provocar aloimunizações transfusional ou feto-materna
  26. 26. 2)D Parcial • Caracterizados pela ausência de um ou mais epítopos do antígeno D que foram substituídos por epítopos da proteína CcEe • Alteração qualitativa da proteína RhD na porção extracelular • Produção de anticorpos anti-D contra as subunidades ausentes.
  27. 27. Anticorpos Rh • Aloimunização por transfusão sanguínea ou gestação • Classe IgG • Responsáveis pela doença hemolítica do recém- nascido • Clinicamente significativos • Reagem otimamente a 37°C • Não fixam complemento • Hemólise extravascular • Reação transfusional hemolítica retardada • Uma vez formados, persistem por vários anos
  28. 28. Doença hemolítica Perinatal(DHPN) 1) Aloimunização materna 2) Incompatibilidade ABO entre Ag ABO fetais e os Ac naturais maternos
  29. 29. Condição: pai Rh+, mãe Rh- e filho Rh+. 1) Mãe Rh- é sensibilizada (exposta ao fator Rh por uma transfusão ou primeira gestação de filho Rh +) 2) Mãe começa a produzir anti Rh 3) Em uma segunda gestação de filho Rh +, os anti Rh produzidos passarão através da placenta atingindo o sangue da criança Rh+. Ocorrerá a destruição das hemácias do feto (icterícia, anemia hemolítica, insuficiência hepática, hepatoesplenomegalia e liberação de eritroblastos). DHPN
  30. 30. Procedimento após o parto Administração de injeção intravenosa com anticorpos anti-Rh que provocarão a destruição das hemácias fetais presentes na circulação sanguínea materna.
  31. 31. Outros sistemas de grupos sanguíneos de importância transfusional
  32. 32. Sistema Lewis – LE •Sistema composto por 6 antígenos: –Lea –Leb –Leab –LebH –ALeb –BLeb
  33. 33. Sistema Lewis - LE •Nome do gene: FUT3 (gene Lewis) •Gene associado: FUT2 (gene secretor não ativo no eritroblasto ) •Genes herdados independentemente. •Antígenos presentes nas hemácias e membranas de diversos tecidos – considerados antígenos de histocompatibilidade • Os genes FUT2 e FUT3 produzem enzimas (fucosiltransferases) que atuam sobre a mesma substância de base , produzindo as Ag Lea e H, respectivamente
  34. 34. Gene FUT 3 produz fucosiltransferase capaz de colocar uma fucose no N-acetil glucosamina para produção do Ag Lea Gene FUT 2 (secretor- Se) produz fucosiltransferase capaz de colocar uma fucose na Galactose para produção do produzindo ag H solúvel
  35. 35. Sistema Lewis - LE •Anticorpos –IgM –Não ocasionam a DHPN •Hemácias fetais não expressam antígenos Lewis • São capazes de fixar complemento e causar quadro hemolítico grave
  36. 36. Sistema MNS •Sistema formado por 43 antígenos •Antígenos bem desenvolvidos ao nascimento •Restritos a linhagem eritróide •Associados a sialoglicoproteínas de membrana (SGP) –GPA e GPB transmembranas •Função biológica: –Manutenção do potencial zeta
  37. 37. Sistema MNS •Anticorpos anti- M e anti-N: –raramente causam DHPN •Anticorpos anti-S e anti-s –clinicamente significativos –Produzem aloimunizações
  38. 38. OBRIGADA!! Email:Camila.gil.pat@Hotmail.com

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