O documento descreve a técnica de citometria de fluxo FACS (Fluorescence-Activated Cell Sorter), que permite a identificação e separação de células marcadas com fluorocromos. Explica que o FACS usa um laser para excitar as células marcadas, permitindo sua identificação e separação com base em tamanho, granulosidade e fluorescência. Também fornece alguns exemplos clínicos do uso do FACS, como diagnóstico de imunodeficiências e monitoramento de pacientes transplantados.

1. Trabalho realizado pelos acadêmicos de Medicina da UFBA Adriana Campos, Nivaldo Cardozo Filho, Sabrina Oliveira e Silvana Asfora, sob orientação dos Professores Roberto Meyer, Ivana Nascimento, Robert Schaer, Cláudia Brodskyn, Songelí Freire e Denise Lemaire, do Laboratório de Imunologia do Instituto de Ciências da Saúde da UFBA. Atualizado em setembro de 2003 Aula 9 FACS (Fluorescence-Activated Cell Scanner Fluorescence-Activated Cell Sorter)

2. A citometria de fluxo permite a identificação, quantificação e isola- mento de células que estejam marcadas por fluorocromos. Isto pode ser feito por fluorocromos conjugados a anticorpos, que por sua vez se ligam a marcadores celulares. O FACS é portanto um citômetro de fluxo muito utilizado em pesquisa, bem como na rotina de diagnóstico laboratorial. O FACScan permite a caracterização e identificação de células e o FACSorter o isolamento de diferentes populações celulares com distintos marcadores de superfície. Os diferentes citômetros atuais permitem a identificação de três ou mais populações celulares, considerndo diferentes parâmetros característicos das populações celulares. Um exemplo de técnica: uma amostra de células, marcada com Ac mono- clonal fluoresceinado (conjugado com fluorocromo), é introduzida na câma- ra vibratória do aparelho, sendo aspirada pela câmara de fluido do mesmo. Neste local, a amostra sofre ação do laser e então as células são identificadas ou separadas (sofrendo deflecção em campos magnéticos), de acordo com seu tamanho, granulosidade e fluorescência emitida.

3. FACS (fluorescence-activated cell sorter) AMOSTRA (MISTURA DE CÉLULAS) CÂMARA DE FLUIDO CÂMARA VIBRATÓRIA LASER + _ PLACAS DEFLETORAS TUBOS COLETORES RESÍDUOS FLUORESCÊNCIA VERMELHA FLUORESCÊNCIA VERDE dispersor de luz anterior (define tamanho) dispersor de luz de 90 graus (de- fine granulosidade) separadores

4. Stites, Terr e Parslow,2000. Algumas aplicações clínicas do FACS Gráfico da análise por FACScanner - Populações de linfócitos CD4 e CD8 Imunofenotipagem de leucócitos . Para o diagnóstico de imunodeficiências congênitas . Para avaliação de pacientes com SIDA/AIDS . Monitorização de pacientes receptores de transplante de medula . Diagnóstico de leucemias e linfomas Imunofenotipagem de tumores em geral