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Carregado porVitinho Yukio
Aulas 01-histórico-e-microscopia
Este documento discute a história da citologia e dos microscópios ópticos, desde os primeiros desenvolvimentos no século XVII até técnicas modernas. Apresenta os pioneiros Robert Hooke e Anton van Leeuwenhoek e suas observações com microscópios de lentes simples. Também explica o princípio de funcionamento do microscópio óptico e técnicas como coloração, fixação e preparação de lâminas para melhor visualização de estruturas celulares.
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- 1. CITOLOGIA: HISTÓRIA EMICROSCÓPIOS UNIVERSDADE DE SÃO PAULO COLÉGIO TÉCNICO DE LORENA ENSINO MÉDIO – PRIMEIRO ANO Marco Alcântara – marko@usp.br AULAS 01
- 2. Linha 1 Linha 2 Linha3 Linha 4 0 2 4 6 8 10 12 Coluna 1 Coluna 2 Coluna 3 Roteiro da aula HISTÓRICO MICRAOSCÓPIO ÓPTICO E TÉCNICAS DE USO MICROSCÓPIO ELETRÔNIO: UMA REVOLUÇÃO NA CITOLOGIA OUTRAS TÉCNICAS UTILIZADAS EM MICROSCÓPIO ÓPTICO TAMANHOS E INTRUMENTOS
- 3. 3 Até início doséc. XIX: Microscópio: “brinquedo sofisticado” - Pernas de mosca, olhos facetados... Dois personagens mudaram isso: - Robert Hooke – Inglaterra - Anton Von Leeuwenhoeck – Holanda HISTÓRICO
- 4. 4 ROBERT HOOKE Física –c/ Robert Boyle – gases Química Paleontologia Astronomia Arquitetura Tecnologia naval, Meteorologia – barômetro, anemômetro, higrômetro Figura 1: Robert Hooke Problema: Isaac Newton...
- 5. 5 Hooke: usou umdos melhores microscópios compostos da época Observações: Esponjas, insetos, penas de aves... Figura 2: microscópio de Hooke
- 6. 6 + Famosa: cortiça Naépoca: não se entendia a cortiça: leve e resistente. Celas de monge – células Na época: não sabia o que eram... Termo utilizado até hoje! Figura 3: Foto de cortiça vista ao microscópio óptico 1665 – Livro Micrographia
- 7. 7 ANTONIE PHILIPS VONLEEUWENHOEK Tudo menos cientista: Comerciante de tecidos Provador de vinhos Funcionário público (Provavelmente influenciado por Hooke) Figura 4: Anton von Leeuwenhoeck 1as observações de protozoários Bactérias Espermatozóides – “animálculos” Glóbulos vermelhos do sangue Placas dentárias – “animaizinhos”
- 8. 8 Sucesso de Leeuwenhoek: Lentesalta qualidade. Microscópios simples. Evitava “aberrações cromáticas” – 40-50x. Enviava cartas para a Royal Society (Londres). Acabou ficando sócio (nunca foi nas sessões) Esses 2 abriram caminho para outros:
- 9. 9 SCHLEIDEN & SCHWANN: Séc.XIX – Teoria Celular “Todo ser vivo é composto por células” VIRCHOW: “Toda célula provém de outra célula” TEORIA CELULAR
- 10. 10 Figura 5: O microscópioóptico e seus componentes MICROSCÓPIO ÓPTICO E TÉCNICAS DE USO
- 11. 11 Figura 6: Omicroscópio óptico e seus componentes
- 12. 12 Figura 7: princípiode funcionamento do MO PRINCÍPIO DE FUNCIONAMENTO DO MICROSCÓPIO ÓPTICO
- 13. 13 Princípio: Feixe luz atravessaobjeto fino → sistema de lentes → ampliação Objeto grosso pode ser observado MO? Fatias muito finas: micrótomo
- 14.
- 15. 15 Figura 8: Doisexemplos de micrótomos
- 16. 16 Outro problema prático: Aluz atravessa igualmente diversos componentes Ex: núcleo e citoplasma Como resolver?
- 17. 17 Coloração: corantes têmafinidades especiais por certas partes da célula. Hematoxilina (azul): Básico colore ácido – núcleo, ribossomos Eosina (rosa): Ácido colore bases – citoplasma
- 18. 18 Corantes básicos ounucleares - Estruturas Azul de metileno - Cora o núcleo de azul Vermelho neutro - Acumula-se em vacúolos Água iodada - Cora o núcleo e amiloplastos Corantes ácidos ou citoplasmáticos - Estruturas Eosina - Citoplasma Fucsina ácida - Citoplasma CORANTES SELETIVOS pH OU CARGA ELÉTRICA DA PROTEÍNA Corantes neutros - Estruturas Violeta de Genciana - Cromossomas de células vivas em divisão Soluto de lugol - Grãos de amido, paredes celulósicas
- 19. 19 CORANTES NATURAIS -ORIGEM Carmim - Ovários de um insecto - Cochonilha Hematoxilina - leguminosa Anil - Anileira – papilionácea Orceína - Líquen Açafrão - Estames de Crocus sativus
- 20. 20 Figura 9: Células hepáticasde camundongo tratadas com diversos corantes e fixadores
- 21. 21 Problema: estruturas celulares rapidamentedeterioram Antes de corar: preciso fixar: Conservar estruturas celulares Métodos Físicos Métodos Químicos Calor Aldeídos Ácido acético Tetróxido de ósmio
- 22. 22 Figura 10: preparaçãode uma lâmina para microscópio óptico
- 23. 23 Duas fases: antese depois do ME ME: 1946 Feixe de elétrons, não feixe de luz: Aumentou poder de resolução Poder de Resolução: capacidade de distinguir dois objetos Aumento máximo: MO: 1.500x ME: 300.000x (ou mais) Mais recente: ME de varredura – tridimensionais MICROSCÓPIO ELETRÔNICO: UMA REVOLUÇÃO NA CITOLOGIA
- 24. 24 Figura 11: Célulasde ameba ao MO, ME e MEV
- 25. 25 CAMPO CLARO Comum, já conhecido nosso... Figura12: Microscópio óptico de campo claro OUTRAS TÉCNICAS UTILIZADAS EM MICROSCÓPIOS ÓPTICOS
- 26. 26 CONTRASTE DE FASE Índicede refração ≠: retardo da luz é captado por anel especial na objetiva Aumenta ≠ contraste entre célula e meio circundante, possibilita observar células não coradas Figura 13: Microscópio óptico de contraste de fase
- 27. 27 CAMPO ESCURO Luz atingelateralmente objeto Na objetiva: luz dispersada pelo objeto Ótimo para organismos móveis: ver flagelos Figura 14: Microscópio óptico de campo escuro
- 28. 28 FLUORESCÊNCIA Objetos que emitemcor quando iluminados por uma cor ≠ Autofluorescência ou corantes fluorescentes Estudos diagnósticos clínicos e ecologia microbiana Figura 15: Microscópio óptico de fluorescência
- 29. 29 Figura 16: Tamanhodas estruturas Unidades de medida: m → mm → µm → nm TAMANHOS E INSTRUMENTOS
- 30. 30 Figura 17: comparaçãoentre os tamanhos de diferentes estruturas ♥