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MICROBIOLOGIA AGRÍCOLA
AULA 07 – NUTRIÇÃO E CRESCIMENTO
MICROBIANO
Prof. Dr. Giovani de Oliveira Arieira
UNIVERSIDADE FEDERAL DE MATO GROSSO – UFMT
FACULDADE DE AGRONOMIA E ZOOTECNIA – FAAZ
DEPARTAMENTO DE FITOTECNIA E FITOSSANIDADE - DFF
O que é necessário para um organismo crescer?
ENERGIA
FONTE DE
CARBONO
NUTRIENTES
De onde os microrganismos obtém energia?
De onde os microrganismos obtém Carbono?
Microrganismo
Luz
CO2
Compostos
orgânicos
Reações
químicas
CO2
Compostos
orgânicos
Fototróficos
Quimiotróficos
ENERGIA CARBONO
 Utilizam luz como fonte de energia e dióxido de
carbono como fonte principal de carbono.
FOTOAUTOTRÓFICOS
Ex: Algas, plantas e cianofíceas.
 Utilizam luz como fonte de energia e compostos
orgânicos como principal fonte de carbono.
FOTOHETEROTRÓFICOS
Ex: Bactérias púrpuras e verdes não enxofradas.
 Utilizam substâncias químicas inorgânicas como
fonte de energia e dióxido de carbono como principal
fonte de carbono.
QUIMIOAUTOTRÓFICOS
Ex: bactérias nitrificantes.
 Utilizam substâncias químicas orgânicas como fonte
de energia e os compostos orgânicos como principal
fonte de carbono.
QUIMIOHETEROTRÓFICOS
Ex: Animais, bactérias, fungos, protozoários.
 Carbono
Nitrogênio
Hidrogênio
Oxigênio
Enxofre
Fósforo
ELEMENTOS QUÍMICOS ESSENCIAIS
ELEMENTOS ESSENCIAIS
% do PESO SECOELEMENTO
Carbono 50
Oxigênio 20
Nitrogênio 14
Hidrogênio 8
Fósforo 3
Enxofre 1
Potássio 1
Sódio 1
Cálcio 0,5
Magnésio 0,5
Cloro 0,5
Ferro 0,2
Outros 0,3
Composição aproximada de elementos químicos de uma célula bacteriana (E. coli)
 Microrganismos autotróficos
 Fonte de carbono é o CO2 ou o íon bicarbonato 
síntese dos demais compostos orgânicos
 Microrganismos heterotróficos
 Fontes orgânicas de carbono (proteínas,
carboidratos e lipídeos)
CARBONO
Metade do peso de uma célula bacteriana
típica é composta de carbono.
 Síntese de proteínas, DNA, RNA e ATP.
Algumas bactérias retiram o nitrogênio diretamente da
atmosfera e o convertem a nitrogênio orgânico.
 Numerosos fungos, algas e a quase totalidade das
bactérias utilizam compostos inorgânicos de nitrogênio
(sais de amônia e nitratos).
Fungos e algumas bactérias exigem fontes orgânicas
de nitrogênio  adição de aminoácidos e hidrolisados
de proteínas favorece o crescimento da maioria dos
organismos heterotróficos em meio de cultura.
NITROGÊNIO
 Fósforo – síntese de DNA, RNA e ATP.
Enxofre – síntese de aminoácidos e de vitaminas
como biotina e tiamina.
Potássio – ativador de enzimas e regula a pressão
osmótica.
Magnésio – ativador das enzimas extracelulares e
fator importante na esporulação.
Cálcio – co-fator para as reações enzimáticas.
Ferro – síntese de citocromos e de certos pigmentos.
MACRONUTRIENTES ESSENCIAIS
 Atmosfera
 Temperatura
 Ph
 Disponibilidade de água
EFEITOS AMBIENTAIS
Não constitui um nutriente, mas é indispensável para
o crescimento dos microrganismos.
Fora das células, os nutrientes estão dissolvidos em
água, facilitando a passagem através das membranas
celulares.
Dentro da célula, a água é o meio para maioria das
reações químicas.
ÁGUA
ÁGUA
Não constitui um nutriente, funciona como receptor
final de hidrogênio nos processos de respiração
aeróbica.
De acordo com a resposta ao oxigênio gasoso, os
microrganismos são divididos em grupos fisiológicos
OXIGÊNIO
Aeróbios estritos – exigem a presença de oxigênio
livre.
 Microaerófilos – exigem pequena quantidade, não
toleram as pressões normais de O2 atmosférico.
 Anaeróbios estritos – não toleram a presença de
oxigênio livre.
 Anaeróbios facultativos – crescem na presença ou
ausência de oxigênio livre.
 Anaeróbios tolerantes – toleram oxigênio livre e
crescem na ausência de oxigênio livre.
OXIGÊNIO
OXIGÊNIO
• (A) Aeróbios estritos
• (B) Anaeróbios estritos
• (C) Anaeróbios
facultativos
• (D) Microaerófilos
• (E) Anaeróbios
aerotolerantes
TEMPERATURA
TEMPERATURA
pH
 O material nutriente preparado em laboratório para o
crescimento de microrganismos é denominado meio de
cultura.
O meio de cultura deve conter todos os nutrientes
necessários para que o microrganismo de interesse
possa crescer.
Quando microrganismos são colocados em um meio
de cultura para iniciar o crescimento, são chamados de
inóculo.
Os microrganismos que cresceram e se multiplicaram
nos meios de cultura são denominados cultura.
MEIOS DE CULTURA
 Sólidos ou líquidos.
Geralmente os microrganismos têm maior facilidade
de iniciar o crescimento em meio líquido.
Meio sólido facilita a identificação do microrganismo e
permite o cultivo de “cultura pura”.
O agente solidificador mais utilizado é o ágar,
polissacarídeo extraído das algas, que funde a 100°C e
solidifica ao redor de 45°C, geralmente se adiciona de
1,5 a 2,0%.
MEIOS DE CULTURA
MEIOS DE CULTURA
Sólidos
MEIOS DE CULTURA
Sólidos
MEIOS DE CULTURA
Líquidos
MEIOS DE CULTURA
Líquidos
MEIOS DE CULTURA
PARA COMPOR UM MEIO ADEQUADO É NECESSÁRIO CONHECER A
FISIOLOGIA DOS MICRORGANISMOS DE ESTUDO!
 Meios sintéticos: meios em que a composição
química é qualitativa e quantitativamente conhecida.
 Meios complexos: meios compostos de nutrientes
como extrato de levedura, de carne e peptona, que não
tem composição química perfeitamente definida.
MEIOS DE CULTURA
MEIOS DE CULTURA
Ingredientes Função Quantidade
(NH4)2SO4 Fonte de nitrogênio e energia 0,5 g
NaHCO3 Fonte de carbono 0,5 g
Na2HPO4 Tampão e íons essenciais 13,5 g
KH2PO4 Tampão e íons essenciais 0,7 g
MgSO4.7H2O Íons essenciais 0,1 g
FeCl3.6H2O Íons essenciais 0,014 g
CaCl2.2H2O Íons essenciais 0,18 g
Água Solvente 1.000 ml
Bactérias quimioautotróficas – meio sintético
MEIOS DE CULTURA
Bactérias heterotróficas – meio sintético
Ingredientes Função Quantidade
Glicose Fonte de energia e carbono 1 g
NH4H2PO4 Fonte de nitrogênio, tampão e
íons essenciais
5 g
K2HPO4 Tampão e íons essenciais 1 g
MgSO4.7H2O Íons essenciais 0,2 g
NaCl Íons essenciais 5 g
Água Solvente 1.000 ml
MEIOS DE CULTURA
Bactérias heterotróficas – meio complexo
Ingredientes Função Quantidade
Extrato de
carne
Substâncias hidrossolúveis de tecido
animal: carboidratos, compostos de
nitrogênio orgânico, vitaminas, sais
3 g
Peptona Nitrogênio orgânico, algumas
vitaminas
5 g
Cloreto de
sódio
Íons e requerimentos osmóticos 8 g
Água Solvente 1.000 ml
ISOLAMENTO E REPICAGEM
ISOLAMENTO
R
E
P
I
C
A
G
E
M
ISOLAMENTO E REPICAGEM
BACTÉRIAS  OBTENÇÃO DE COLÔNIAS INDIVIDUALIZADAS!
ISOLAMENTO E REPICAGEM
BACTÉRIAS  OBTENÇÃO DE COLÔNIAS INDIVIDUALIZADAS!
Semeadura por estrias simples
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QUANTIFICAÇÃO DE COLÔNIAS BACTERIANAS
Crescimento microbiano
Elementos essenciais para os microrganismos
Meios de cultura
Efeitos ambientais
 Quantificação de colônias bacterianas
RESUMO DA AULA
goarieira@gmail.com
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  • 2. O que é necessário para um organismo crescer? ENERGIA FONTE DE CARBONO NUTRIENTES
  • 3. De onde os microrganismos obtém energia? De onde os microrganismos obtém Carbono? Microrganismo Luz CO2 Compostos orgânicos Reações químicas CO2 Compostos orgânicos Fototróficos Quimiotróficos ENERGIA CARBONO
  • 4.  Utilizam luz como fonte de energia e dióxido de carbono como fonte principal de carbono. FOTOAUTOTRÓFICOS Ex: Algas, plantas e cianofíceas.
  • 5.  Utilizam luz como fonte de energia e compostos orgânicos como principal fonte de carbono. FOTOHETEROTRÓFICOS Ex: Bactérias púrpuras e verdes não enxofradas.
  • 6.  Utilizam substâncias químicas inorgânicas como fonte de energia e dióxido de carbono como principal fonte de carbono. QUIMIOAUTOTRÓFICOS Ex: bactérias nitrificantes.
  • 7.  Utilizam substâncias químicas orgânicas como fonte de energia e os compostos orgânicos como principal fonte de carbono. QUIMIOHETEROTRÓFICOS Ex: Animais, bactérias, fungos, protozoários.
  • 9. ELEMENTOS ESSENCIAIS % do PESO SECOELEMENTO Carbono 50 Oxigênio 20 Nitrogênio 14 Hidrogênio 8 Fósforo 3 Enxofre 1 Potássio 1 Sódio 1 Cálcio 0,5 Magnésio 0,5 Cloro 0,5 Ferro 0,2 Outros 0,3 Composição aproximada de elementos químicos de uma célula bacteriana (E. coli)
  • 10.  Microrganismos autotróficos  Fonte de carbono é o CO2 ou o íon bicarbonato  síntese dos demais compostos orgânicos  Microrganismos heterotróficos  Fontes orgânicas de carbono (proteínas, carboidratos e lipídeos) CARBONO Metade do peso de uma célula bacteriana típica é composta de carbono.
  • 11.  Síntese de proteínas, DNA, RNA e ATP. Algumas bactérias retiram o nitrogênio diretamente da atmosfera e o convertem a nitrogênio orgânico.  Numerosos fungos, algas e a quase totalidade das bactérias utilizam compostos inorgânicos de nitrogênio (sais de amônia e nitratos). Fungos e algumas bactérias exigem fontes orgânicas de nitrogênio  adição de aminoácidos e hidrolisados de proteínas favorece o crescimento da maioria dos organismos heterotróficos em meio de cultura. NITROGÊNIO
  • 12.  Fósforo – síntese de DNA, RNA e ATP. Enxofre – síntese de aminoácidos e de vitaminas como biotina e tiamina. Potássio – ativador de enzimas e regula a pressão osmótica. Magnésio – ativador das enzimas extracelulares e fator importante na esporulação. Cálcio – co-fator para as reações enzimáticas. Ferro – síntese de citocromos e de certos pigmentos. MACRONUTRIENTES ESSENCIAIS
  • 13.  Atmosfera  Temperatura  Ph  Disponibilidade de água EFEITOS AMBIENTAIS
  • 14. Não constitui um nutriente, mas é indispensável para o crescimento dos microrganismos. Fora das células, os nutrientes estão dissolvidos em água, facilitando a passagem através das membranas celulares. Dentro da célula, a água é o meio para maioria das reações químicas. ÁGUA
  • 15. ÁGUA
  • 16. Não constitui um nutriente, funciona como receptor final de hidrogênio nos processos de respiração aeróbica. De acordo com a resposta ao oxigênio gasoso, os microrganismos são divididos em grupos fisiológicos OXIGÊNIO
  • 17. Aeróbios estritos – exigem a presença de oxigênio livre.  Microaerófilos – exigem pequena quantidade, não toleram as pressões normais de O2 atmosférico.  Anaeróbios estritos – não toleram a presença de oxigênio livre.  Anaeróbios facultativos – crescem na presença ou ausência de oxigênio livre.  Anaeróbios tolerantes – toleram oxigênio livre e crescem na ausência de oxigênio livre. OXIGÊNIO
  • 18. OXIGÊNIO • (A) Aeróbios estritos • (B) Anaeróbios estritos • (C) Anaeróbios facultativos • (D) Microaerófilos • (E) Anaeróbios aerotolerantes
  • 21. pH
  • 22.  O material nutriente preparado em laboratório para o crescimento de microrganismos é denominado meio de cultura. O meio de cultura deve conter todos os nutrientes necessários para que o microrganismo de interesse possa crescer. Quando microrganismos são colocados em um meio de cultura para iniciar o crescimento, são chamados de inóculo. Os microrganismos que cresceram e se multiplicaram nos meios de cultura são denominados cultura. MEIOS DE CULTURA
  • 23.  Sólidos ou líquidos. Geralmente os microrganismos têm maior facilidade de iniciar o crescimento em meio líquido. Meio sólido facilita a identificação do microrganismo e permite o cultivo de “cultura pura”. O agente solidificador mais utilizado é o ágar, polissacarídeo extraído das algas, que funde a 100°C e solidifica ao redor de 45°C, geralmente se adiciona de 1,5 a 2,0%. MEIOS DE CULTURA
  • 28. MEIOS DE CULTURA PARA COMPOR UM MEIO ADEQUADO É NECESSÁRIO CONHECER A FISIOLOGIA DOS MICRORGANISMOS DE ESTUDO!
  • 29.  Meios sintéticos: meios em que a composição química é qualitativa e quantitativamente conhecida.  Meios complexos: meios compostos de nutrientes como extrato de levedura, de carne e peptona, que não tem composição química perfeitamente definida. MEIOS DE CULTURA
  • 30. MEIOS DE CULTURA Ingredientes Função Quantidade (NH4)2SO4 Fonte de nitrogênio e energia 0,5 g NaHCO3 Fonte de carbono 0,5 g Na2HPO4 Tampão e íons essenciais 13,5 g KH2PO4 Tampão e íons essenciais 0,7 g MgSO4.7H2O Íons essenciais 0,1 g FeCl3.6H2O Íons essenciais 0,014 g CaCl2.2H2O Íons essenciais 0,18 g Água Solvente 1.000 ml Bactérias quimioautotróficas – meio sintético
  • 31. MEIOS DE CULTURA Bactérias heterotróficas – meio sintético Ingredientes Função Quantidade Glicose Fonte de energia e carbono 1 g NH4H2PO4 Fonte de nitrogênio, tampão e íons essenciais 5 g K2HPO4 Tampão e íons essenciais 1 g MgSO4.7H2O Íons essenciais 0,2 g NaCl Íons essenciais 5 g Água Solvente 1.000 ml
  • 32. MEIOS DE CULTURA Bactérias heterotróficas – meio complexo Ingredientes Função Quantidade Extrato de carne Substâncias hidrossolúveis de tecido animal: carboidratos, compostos de nitrogênio orgânico, vitaminas, sais 3 g Peptona Nitrogênio orgânico, algumas vitaminas 5 g Cloreto de sódio Íons e requerimentos osmóticos 8 g Água Solvente 1.000 ml
  • 34. ISOLAMENTO E REPICAGEM BACTÉRIAS  OBTENÇÃO DE COLÔNIAS INDIVIDUALIZADAS!
  • 35. ISOLAMENTO E REPICAGEM BACTÉRIAS  OBTENÇÃO DE COLÔNIAS INDIVIDUALIZADAS! Semeadura por estrias simples
  • 36. ISOLAMENTO E REPICAGEM BACTÉRIAS  OBTENÇÃO DE COLÔNIAS INDIVIDUALIZADAS! Semeadura por estrias compostas
  • 37. ISOLAMENTO E REPICAGEM BACTÉRIAS  OBTENÇÃO DE COLÔNIAS INDIVIDUALIZADAS! Semeadura com Alça de Drigalsky
  • 39. Crescimento microbiano Elementos essenciais para os microrganismos Meios de cultura Efeitos ambientais  Quantificação de colônias bacterianas RESUMO DA AULA