Este protocolo experimental tem como objetivo extrair e visualizar o DNA de células de banana, kiwi e da cavidade bucal humana. O procedimento envolve esmagar as frutas e colocar a mistura resultante em solução salina e detergente para libertar o DNA, que é depois precipitado com álcool e visualizado ao microscópio após coloração.

1. Direção-
Geral dos Estabelecimentos Escolares Direção
de Serviços da Região Centro
Estruturas Pedagógicas
Área disciplinar de Biologia e Geologia
Ano Letivo 2021 / 2022
FICHA DE TRABALHO de Biologia e Geologia - Ano: 11º Data: Set./ 2021
O DNA (ácido desoxirribonucleico) tem papel fundamental na manutenção da vida da célula. Esta molécula é
composta por duas cadeias polinucleotídicas,orientadasemsentido oposto (são antiparalelas),ligadas por pontes
de hidrogénio em que a adenina emparelha com a timina e a citosina emparelha com a guanina.
Este protocolo experimental tem por objetivo, extrair e visualizar o DNA de células de banana e de kiwi.
MATERIAL
 Copo misturador / almofariz com pilão
 Bisturi
 Proveta de 500 mL
 1 tubo de ensaio
 Gase
 Microscópio ótico
 Lâminas e lamelas
 2 pipetas
 Varetas
 6g de NaCl (sal de cozinha)
 20g de bicarbonato de sódio
 9ml de detergente da loiça
 500mL de água destilada
 Álcool a 96% frio (+/- 5º C)
 Fuscina Básica
 Banana / kiwi
 Células da cavidade bucal
PROCEDIMENTO I:
1) Descascar um kiwi / banana e esmagar no almofariz;
2) Adicionar uma mistura composta por 500ml de água, 20g de bicarbonato de sódio, 6g de sal de cozinha e
9ml de detergente da loiça;
3) Continuar com o processo de esmagamento;
4) Filtrar a mistura através da gaze.
5) Agitar a mistura, depois de filtrada, com uma vareta.
6) Encher meio tubo de ensaio com a mistura obtida.
7) Fazer escorrer, com uma pipeta de Pasteur, álcool gelado pelas paredes do tubo de ensaio;
8) Observar a formação de duas fases e o aparecimento de um precipitado branco (filamentos de DNA) na
interface.
9) Enrolar os filamentos de DNA com uma agulha e transferi-los para uma lâmina de microscópio.
10) Proceder à coloração com fuscina básica.
11) Fazer o registo das diferentes observações.
PROCEDIMENTO II
1) Preparar uma solução saturada de cloreto de sódio;
2) Colocar na boca uma porção da solução de cloreto de sódio durante dois minutos;
3) Despejar o conteúdo da boca num gobelé;
4) Colocar uma porção do conteúdo bucal num tubo de ensaio;
5) Fazer escorrer, com uma pipeta de Pasteur, álcool gelado pelas paredes do tubo de ensaio;
6) Observar a formação de duas fases e o aparecimento de um precipitado branco (filamentos de DNA) na
interface.
7) Enrolar os filamentos de DNA com uma agulha e transferi-los para uma lâmina de microscópio.
8) Proceder à coloração com fuscina básica.
9) Fazer o registo das diferentes observações.

2. DISCUSSÃO:
1. Indique o papel:
1.1. do esmagamento.
1.2. da adição do detergente.
1.3. da adição do cloreto de sódio (tendo em conta que o grupo fosfato do DNA tem carga negativa e que o
cloreto de sódio em solução aquosa origina Na+ e Cl-).
2. Indique o papel desempenhado pela solução saturada de cloreto de sódio na boca.
3. Sugira uma explicação para a ascensão do DNA na solução.
4. Dos seguintes projetos de investigação refira aquele(s) onde será necessário proceder à extração do DNA.
A. Estudar as condições ótimas para a indução da diferenciação decélulasestaminais emcélulas
cartilagíneas.
B. Desenhar um via sintética para a produção in vitro de uma droga.
C. Criação deuma nova geração de drogas proteicas.