Este documento descreve o procedimento para extrair e visualizar o DNA de um kiwi. Inclui os materiais necessários como detergente, água e álcool, e as etapas de descascar o kiwi, triturá-lo com detergente, filtrar a mistura, e adicionar álcool para separar o DNA na fase superior. O resultado é uma mistura de três fases com uma filamentosa no topo contendo a cromatina de DNA e proteínas.

1. Biologia-Geologia
EXTERNATO RIBADOURO
Biologia e Geologia-11.º ano de Escolaridade
Extração do DNA

2. Biologia-Geologia
Índice
Objetivo ...................................................................................................................................................... 3
Introdução .................................................................................................................................................. 4
Materiais..................................................................................................................................................... 6
Procedimento ............................................................................................................................................. 7
Resultados .................................................................................................................................................. 8
Discussão de resultados/Conclusão ........................................................................................................... 9
Anexos ......................................................................................................... Error! Bookmark not defined.
Bibliografia................................................................................................................................................ 10
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3. Biologia-Geologia
Objetivo
Extração e visualização do DNA de um kiwi.
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4. Biologia-Geologia
Introdução
Cada organismo possui um património genético que o torna único. O seu DNA,
molécula biológica universal, é o suporte da informação, genética que coordena todas as
atividades celulares e que é transmitida a todas as células-filhas no decurso do
desenvolvimento.
Desta forma, a molécula de ADN (ácido desoxirribonucleico, constituinte essencial
dos cromossomas do núcleo celular), pode ser comparada a uma longa escada de corda
enrolada em torno de um eixo imaginário, isto é, é formado por uma dupla hélice. As
cordas das escadas são formadas pela alternância regular duma molécula de açúcar, a
desoxirribose (pentose), e de um grupo fosfato. Os degraus, fixados às moléculas de
açúcar, são formados por um par de bases azotadas, com quatro variantes possíveis adenina-timina (A-T), timina-adenina (T-A), guanina-citosina (G-C) ou citosina-guanina
(C-G) - que se ligam entre si, através de ligações/pontes de hidrogénio. Estas bases
pertencem a duas famílias moleculares - a adenina e a guanina são as bases púricas, a
citosina e a timina são bases pirimídicas.
O conjunto base-pentose-fosfato (Fig.1) constitui um nucleótido. A articulação de
um nucleótido com o seguinte efetua-se graças a uma ligação bioquímica que une um
átomo de oxigénio dum agrupamento fosfato a um átomo de hidrogénio associado à
pentose. A sucessão das bases resultantes do encadeamento dos nucleótidos representa a
mensagem genética.
A molécula de DNA, extremamente dobrada, cabe numa estrutura – o núcleo da
célula – cujo diâmetro não excede alguns milésimos de milímetro, mas que contudo, se a
desdobrássemos, obteríamos um filamento de cerca de 1,20 m de comprimento.
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5. Biologia-Geologia
Foi em 1869, que pela primeira vez, o DNA, foi isolado, pelo físico Friedrich
Miescher, pelo que, hoje em dia, com a evolução da ciência, é nos possível fazê-lo até
mesmo em casa, extraindo o DNA por exemplo de um kiwi.
Fig1 – Composição do DNA: 1- Pentose (desoxirribose);
2- base azotada; 3- Grupo Fosfato.
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6. Biologia-Geologia
Material
Material de Laboratório
Tabuleiro
Material
Detergente sem marca (10mL)
Almofariz com Pilão
Água (70mL)
Provetas (25 ± 0.5) mL
Sal
Faca
Coador
1 Kiwi
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7. Biologia-Geologia
Procedimento
Descascou-se e cortou-se o kiwi em pequenos fragmentos e colocou-se no
almofariz.
Deitou-se o detergente num gobelé com água. Agitou-se suavemente.
Colocou-se a mistura obtida no almofariz e triturou-se.
Filtrou-se, sucessivamente, o produto obtido através de um coador.
Fez-se escorrer, lentamente o álcool refrigerado em quantidade aproximadamente
igual à do filtrado ao logo da parede da proveta.
Esperou-se algum tempo, e procurou-se começar a observar os resultados
pretendidos.
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8. Biologia-Geologia
Resultados
Fig 2- Mistura heterogénea
dividida em três fases: uma
superior, filamentosa e
esbranquiçada, uma
intermédia, alcoólica, e outra
inferior, aquosa.
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9. Biologia-Geologia
Discussão de resultados/Conclusão
Para extrair e visualizar DNA, são necessários vários componentes –
detergente, sal, álcool - cada um deles utilizado para um fim específico.
Uma célula é constituída por duas membranas, a plasmática e o invólucro nuclear;
estas são ainda formadas pela camada fosfolípida. O detergente terá, então,
principal função de dissolver as gorduras, logo as membranas, de modo a que o
DNA extravase, tornando-se então possível obtê-lo. O sal (cloreto de sódio) é
também um dos componentes a ser utilizado na experiência tendo como função, a
neutralização. O grupo fosfato, um dos componentes do DNA, apresenta elevado
número de cargas negativas, o que significa que estas cargas têm tendência para se
repelirem entre elas. O ião sódio (
tem carácter neutralizante, pelo que,
quando colocado, é atraído pelo grupo fosfato e o DNA ficará neutro, pelo que será
possível aglutiná-lo. O cloro
), apesar de fazer parte do processo, não interfere
neste, pois dissolve-se na água. Por fim, com a adição de álcool etílico refrigerado
pretende-se que se formem duas fases, uma superior, alcoólica e uma inferior,
aquosa, para que, a cromatina (DNA associado a proteínas), sendo mais denso que
água, sobe, aproxima-se do álcool, desidrata, aglutina, ficando mais visível.
Assim, o DNA ascendeu da fase inferior para a superior porque, é mais
denso que a água. No entanto, houve pouca formação de bolhas de ar já que
a temperatura do álcool, não era tão baixa quanto devia de modo a que
houvesse um grande choque térmico.
Porem não podemos afirmar que a massa filamentosa corresponde única e
exclusivamente ao DNA Essa massa filamentosa é a cromatina, que e
constituída pelo DNA e proteínas (nomeadamente as histonas), pois ao
longo da experiencia não foi realizada nenhuma etapa que permitisse a
separação destas duas biomoléculas.
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10. Biologia-Geologia
Bibliografia
Livros:
V.V, Terra, Universo de vida, 1º Parte - Biologia, Biologia – Geologia, 11º ano. Porto Editora.
Larousse, Enciclopédia Moderna. Círculo de Leitores. p. 104-105. 1v.
V.V, (2012), Preparação para o Exame Nacional 2013 Biologia e Geologia – 11º ano. Porto:
Porto Editora
V.V, (2010), Preparar o Exame Nacional Biologia e Geologia – 11º ano. Lisboa: Texto
Editores, Lda.
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