Este documento descreve os procedimentos para a extração do DNA de células vegetais de kiwi. O DNA foi extraído usando água, sal, detergente e álcool frio, permitindo sua separação dos restos celulares. O resultado foi a visualização do DNA à vista desarmada no topo da solução.

1. Ana Moreira, Diana Carvalho, Gabriel Misson, Marta Baldo, Cármen Madureira
Resumo
Materiais e Métodos
O conceito de DNA foi inicialmente proposto por Johann Friedrich Miescher, em 1869, que procurava
determinar os componentes químicos do núcleo celular, usando os glóbulos brancos do pus humano.
Esta biomolécula está presente em todas as células dos seres vivos e é o suporte universal da informação
genética, sendo responsável pela transmissão hereditária das características dos seres vivos.
O objetivo desta experiência foi observar o aspeto do DNA das células vegetais do kiwi à vista desarmada.
Para isso procedeu-se à extração da molécula do DNA das células vegetais, seguido da sua separação dos restos
celulares, através da utilização do álcool frio.
Introdução
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Colocar o álcool no frigorífico para uma boa refrigeração;
Cortar o fruto em pedaços numa caixa de Petri e coloca-lo num copo de varinha mágica;
Adicionar aproximadamente 75 mL de água ao fruto cortado;
Adicionar uma colher mal cheia de sal e 5 gotas de detergente da loiça ao conteúdo;
Com a varinha mágica triturar o fruto e envolve-lo aos restantes materiais no interior do copo da
varinha;
Colocar a gaze num funil e filtrar o preparado obtido para o gobelé;
Colocar o filtrado num tubo de ensaio;
À solução filtrada adicionar, muito lentamente, álcool frio com o tubo de ensaio ligeiramente
inclinado.
Deixar repousar e observar os resultados obtidos.
O ácido nucleico DNA localiza-se no núcleo das células eucarióticas, nas mitocôndrias e ainda, no caso das
células vegetais, nos cloroplastos. Nas células procarióticas encontra-se disperso no citoplasma (nucleóide).
O DNA é uma molécula relativamente simples em termos de componentes, contendo apenas elementos como C,
O, N, H e P. No entanto, este polímero apresenta uma grande importância a nível biológico, visto intervir na
atividade celular e ser responsável pela transmissão de informação genética de pais para filhos. É também
responsável pela diversidade da vida e pela autenticidade de cada organismo. O mesmo, juntamente com o
RNA, intervém na síntese proteica.
Resultados
DNA
Este ácido nucleico e um polímero de nucleótidos, que apresentam uma base azotada, uma pentose
(desoxirribose) e um grupo fosfato.
Restos celulares
O DNA é uma molécula persistente devido às ligações que os componentes dos diferentes nucleótidos e os
próprios nucleótidos estabelecem entre si.
A desoxirribose liga-se ao grupo fosfato pelo grupo hidroxilo do seu carbono 5’ e designa-se ligação
fosfodiéster, bem como a que se estabelece entre os diferentes nucleótidos através do grupo fosfato de um
deles ao carbono 3’ da pentose do seguinte.
A ligação que une a base azotada ao carbono 1’ da pentose é denominada por ligação glicosídica do tipo N.
Frederick Griffith, bacteriologista realizou, em 1928, diversas experiências que conduziram à identificação do
DNA como local de armazenamento da informação genética.
Em 1953, James Watson e Francis Crick apresentaram o modelo tridimensional da molécula do DNA, segundo o
qual esta é constituída por duas cadeias polinucleotídicas antiparalelas, ou seja, com sentidos de crescimento
inversos e dispostas em hélice. Esta dupla hélice mantém-se unida devido à complementaridade das bases
azotadas (A-T; C-G), que estabelecem ligações químicas por pontes de hidrogénio.
É possível distinguir dois tipos de bases azotadas:
• Púricas: as de anel duplo, adenina (A) e guanina (G)
• Pirimídicas: as de anel simples, citosina (C), timina (T) no DNA e uracilo no RNA
É de destacar o facto de uma base azotada púrica ligar-se sempre a uma pirimídica, motivo pelo qual o
diâmetro do DNA é constante. Devido à complementaridade das bases azotadas o número de nucleótidos
de A é aproximadamente igual ao de T e o de G ao de C.
Materiais e Métodos
- Kiwi;
- Sal de cozinha;
- Água;
-Álcool comercial;
- Funil;
- Proveta de 100 mL;
- Gaze;
- Varinha mágica;
- Copo de varinha mágica;
- Caixa de Petri;
- Frigorífico com
congelador;
- Bisturi;
- Tubo de ensaio;
- Suporte de tubos de
ensaio.
- Detergente líquido
para a loiça;
- Gobelé;
O resultado obtido foi o desejado, uma vez
que se verificou a ascensão e a separação
do DNA dos restos celulares. O facto de o
DNA ter ficado no topo da solução, junto do
álcool, possibilitou a sua visualização à
vista desarmada.
Discussão/Conclusão
A realização desta experiência teve como objetivo a extração do DNA das células vegetais, de maneira a
que fosse possível a sua visualização à vista desarmada. Para isso utilizamos o detergente que afetou as
membranas celulares, fazendo com que o conteúdo celular se soltasse na solução; o sal, que foi utilizado
para ajudar a manter as proteínas dissolvidas no líquido extraído, impediu que elas precipitassem com o
DNA e que proporcionou um ambiente favorável ao neutralizar a carga negativa do DNA e por fim o álcool,
que possibilitou a separação do DNA sem danificar a molécula devido à sua insolubilidade. O DNA move-se
para a superfície uma vez que é menos denso que a água e que a mistura, logo irá mover-se lentamente
em direção ao álcool, deixando aparecer os pequenos filamentos. As bolhas de ar que se desenvolveram
devido ao choque térmico colaboraram na ascensão do DNA.
Assim podemos concluir que a molécula do DNA é pouco solúvel, é pouco densa e possui ligações muito
fracas, pois partem-se com muita facilidade, isto porque estas são feitas através de pontes de hidrogénio
(ligações pouco intensas do ponto de vista energético).
Inicialmente não podemos observar o DNA extraído, uma vez que o kiwi utilizado não estava
suficientemente amadurecido. Deste modo, as células ainda em desenvolvimento não possuíam o tamanha
apropriado à extração do DNA.
Biografia:
•Carrajola Cristina, Castro Maria, Hilário Teresa; Biologia e Geologia 11º ano “Planeta com vida”; volume 1 Biologia; Santillana
constância;
•Reis Jorge, Lemos Paula, Guimarães António; Biologia e Geologia 11 “Preparação para o exame nacional 2011”; Porto Editora;
Porto.
• Extração do DNA de um kiwi (on-line); elaborado por Anonimo e publicado a 12 de Dezembro de 2011; Disponível via internet
via WWW.URL: http://www.notapositiva.com/pt/trbestbs/ciencnatur/09_extracao_adn_kiwi_d.htm