Este documento descreve dois experimentos de extração de DNA de frutas. O objetivo era extrair e visualizar o DNA das células das framboesas e do kiwi através de processos físicos e químicos para romper as membranas celulares. O DNA foi precipitado e visualizado após a adição de álcool. Embora alguns problemas tenham ocorrido, como o filtro rompido durante a filtração do kiwi, o DNA foi bem-sucedidamente extraído e visualizado em ambos os experimentos.

1. Extração de DNA
Colégio Vasco da Gama
Realizado por:
Ganna Gab;
Sílvia Urmal de Almeida
Turma: 11ºB
Data:12 Outubro 2014

2. Índice
Objetivos……………………………………………………………………….……………..p.2
Introdução…………………………………………………………………………….………p.3
Desenvolvimento……………………………………………………………………………..p.4
Discussão………………………………………….………………………………………….p.6
Conclusão ……………………………………………………………………...…………….p.7
Bibliografia…………………………………………………………………………………….p.8

3. Framboesas

4. Objetivos
O objetivo desta atividade laboratorial é conseguir extrair DNA presente no núcleo das células, neste caso nas células das framboesas, de modo a que este possa ser visto a olho nu.
Material:
 Framboesas;
 Sal de cozinha;
 Água destilada;
 Álcool comercial a 96º;
 Pacote de 250 mL de ananás (foi utilizada um lata de sumol);
 Detergente líquido para loiça;
 Gobelets de 250 mL;
 Provetas de 10, 20, 50 e 100 mL;
 Gaze;
 Funil;
 Caixa de Petri;
 Banho-maria;
 Espátulas;
 Vidro de relógio;
 Vareta de vidro;
 Pipetas de 5 e 20 mL;
 Frigorífico com congelador;
 Bisturi;
 Tubo de ensaio grande;
 Suporte de tubos de ensaio.
Procedimento:
1. Coloque o álcool no frigorífico para que arrefeça;
2. Pese 50g de framboesas numa caixa de Petri;
3. Com uma espátula macere as framboesas;
4. Pese 3g de sal num vidro de relógio;
5. Num gobelé de 250mL, coloque 90mL de água destilada aquecida a 60ºC;
6. Dissolva o sal na água e adicione 10 mL de detergente, mexendo lentamente durante alguns minutos;
7. Coloque a gaze num funil e filtre o preparado obtido para um gobelé;
8. Ao filtrado obtido adicione 25 mL de sumo de ananás;
9. Meça 20mL do preparado anterior para um tubo de ensaio;
10. À solução filtrada adicione, muito lentamente, 20 mL de álcool frio, com o tubo de ensaio ligeiramente inclinado. Deve distinguir-se uma fase alcoólica (sobrenadante) e uma fase aquosa (inferior);
11. Deixe repousar 5 minutos;
12. Começará a ver um novelo branco (neste caso vermelho porque foram utilizadas framboesas) a formar-se no sobrenadante alcoólico - É o DNA.

5. Introdução
A molécula do DNA (ácido desoxirribonucleico), contém toda a informação da actividade celular e permite obter proteínas (síntese proteica).
Esta molécula é muito grande e encontra-se dentro do núcleo, que é relativamente pequeno (por exemplo, estima-se que o DNA humano meça cerca de 2 metros, enquanto o núcleo das respectivas células mede 0,5 μm de diâmetro).
O DNA das células eucarióticas encontra-se no núcleo mas também no interior das mitocôndrias e dos cloroplastos, enquanto que nas células procarióticas encontra-se espalhado pelo citoplasma.

6. Desenvolvimento
Fases da Atividade Laboratorial
Fig. 1- fruta esmagada
Fig. 2- filtração do preparado

7. Fig. 3- resultado obtido

8. Discussão
Para que fosse possível visualizar o DNA foi necessário romper a membrana celular e membrana nuclear das células das framboesas.
Para que tal acontecesse as framboesas foram maceradas (processo físico) e foi adicionado o detergente de modo a destruir a bicamada fosfolipídica das membranas celulares (processo químico).
A adição de sal (NaCl) serviu para neutralizar a carga negativa do DNA devido à carga positiva do ião (Na+).
O DNA não se dissolve no álcool etílico, provocando a sua precipitação e consequente visualização.

9. Conclusão
Na primeira tentativa, a experiência não correu bem e as frutas foram desperdiçadas.
No entanto, na segunda tentativa tudo correu conforme o planeado e foi possível extrair o DNA e visualiza-lo no tubo de ensaio.

10. Bibliografia
Imagens:
https://www.facebook.com/photo.php?fbid=10152742797889581&set=oa.349619411865163&type=1&theater
https://www.facebook.com/photo.php?fbid=10152742796934581&set=oa.349619411865163&type=1&theater

11. Kiwi

12. Objetivos
O objetivo desta atividade laboratorial é conseguir extrair DNA presente no núcleo das células, neste caso nas células do kiwi, de modo a que este possa ser visto a olho nu.
Material:
 Kiwi;
 Sal de cozinha;
 Água destilada;
 Álcool comercial a 96º;
 Pacote de 250 mL de ananás (foi utilizada um lata de sumol);
 Detergente líquido para loiça;
 Gobelets de 250 mL;
 Provetas de 10, 20, 50 e 100 mL;
 Gaze;
 Funil;
 Caixa de Petri;
 Banho-maria;
 Espátulas;
 Vidro de relógio;
 Vareta de vidro;
 Pipetas de 5 e 20 mL;
 Frigorífico com congelador;
 Bisturi;
 Tubo de ensaio grande;
 Suporte de tubos de ensaio.
Procedimento:
1. Coloque o álcool no frigorífico para que arrefeça;
2. Pese 50g de Kiwi cortado em rodelas numa caixa de Petri;
3. Com uma espátula macere as rodelas de Kiwi;
4. Pese 3g de sal num vidro de relógio;
5. Num gobelé de 250mL, coloque 90mL de água destilada aquecida a 60ºC;
6. Dissolva o sal na água e adicione 10 mL de detergente, mexendo lentamente durante alguns minutos;
7. Coloque a gaze num funil e filtre o preparado obtido para um gobelé;
8. Ao filtrado obtido adicione 25 mL de sumo de ananás;
9. Meça 20mL do preparado anterior para um tubo de ensaio;
10. À solução filtrada adicione, muito lentamente, 20 mL de álcool frio, com o tubo de ensaio ligeiramente inclinado. Deve distinguir-se uma fase alcoólica (sobrenadante) e uma fase aquosa (inferior);
11. Deixe repousar 5 minutos;
12. Começará a ver um novelo branco (neste caso um pouco amarelado porque foi utilizado Kiwi) a formar-se no sobrenadante alcoólico - É o DNA.

13. Introdução
A molécula do DNA (ácido desoxirribonucleico), contém toda a informação da atividade celular e permite obter proteínas (síntese proteica).
Esta molécula é muito grande e encontra-se dentro do núcleo, que é relativamente pequeno (por exemplo, estima-se que o DNA humano meça cerca de 2 metros, enquanto o núcleo das respetivas células mede 0,5 μm de diâmetro).
O DNA das células eucarióticas encontra-se no núcleo mas também no interior das mitocôndrias e dos cloroplastos, enquanto que nas células procarióticas encontra-se espalhado pelo citoplasma.

14. Desenvolvimento
Fases da Atividade Laboratorial
Fig. 1- a fruta
Fig. 2- preparado antes de ser filtrado

15. Fig. 3- filtração do preparado
Fig. 4- resultado obtido

16. Discussão
Para que fosse possível visualizar o DNA foi necessário romper a membrana celular e membrana nuclear das células do kiwi.
Para que tal acontecesse o kiwi foi macerado (processo físico) e foi adicionado o detergente de modo a destruir a bicamada fosfolipídica das membranas celulares (processo químico).
A adição de sal (NaCl) serviu para neutralizar a carga negativa do DNA devido à carga positiva do ião (Na+).
O DNA não se dissolve no álcool etílico, provocando a sua precipitação e consequente visualização.

17. Conclusão
Durante a experiência, no processo de filtração o filtro rompeu-se, pelo que teve de se repetir a filtração.
O resultado desejado foi obtido logo na primeira tentativa da experiência, mas a visualização complicou-se pelo fato de o kiwi ter uma coloração muito clara.

18. Bibliografia
Imagens:
Fotos foram retiradas com um telemóvel durante a realização da experiência.