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Indicadores de qualidade de água
 Bactérias: Escherichia coli
 Protozoários: Cistos (Giardia) e oocistos
(Cryptosporidium)
 Algas: cianobactérias
 Vírus
 Ovos de helmintos
COLIFORMES
 Bactérias do tipo bastonetes, gram-
negativas, aeróbias ou anaeróbias
facultativos, fermentam a lactose para formar
gás em 48 horas após terem sidos colocadas
em caldo lactosado a 35°C.
Grupo coliforme: coliformes totais e
fecais
 indicadores de escolha para monitorar qualidade da água;
 Presença→ riscos à saúde → Salmonella, Shigella, Vibrio,
Mycobacterium, Pasteurella, Leptospira e vírus entéricos
 Fermentam lactose→ gás, ácido, aldeído à 35°C em 24-48h
Coliformes
termotolerantes:E.coli
Klebisiella
Grupo coliforme: totais e fecais
Coliformes
fecais: E.coli
 gêneros: Citrobacter,
Escherichia, Enterobacter e
Klebsiella
 Citrobacter, Enterobacter e
Klebsiella: vegetação e solo
Coliformes fecais
 Sub-grupo: coliformes totais → Escherichia coli
 Contaminação fecal oriundas de animais de sangue quente
 Metodologia: temperatura de 44,5 +0.2°C, fator seletivo (termotolerantes)
 Enzimas específicas
Escherichia coli
Outros indicadores microbiológicos
 Bactérias que utilizam
nutrientes orgânicos
 A contagem de bactérias
heterotróficas→ medida
empírica;
 presença em maior ou menor
quantidade → grau de
poluição da água →
enriquecimento MO.
1-Bactérias Heterotróficas
BACTÉRIAS HETERÓTROFICAS
(CETESB/97)
 Podem atuar como patógeno oportunista.
 Deterioração da qualidade da água (odores e
sabores)
 Pode impede a detecção de coliformes.
 Auxilia:
 Avaliar as condições de higiênicas e de
proteção de poços, fontes, piscinas....
 Avaliar a eficiência das diversas etapas da
estação de tratamento de água na remoção
de bactérias.
 Método: pour plate
 Princípio: condições de nutrição, temperatura
e tempo de incubação, se houver bactérias
viáveis na água, haverá a formação de
colônias.
 Meio: ágar triptona glicose extrato de
levedura (Plate Count Agar)
Outros indicadores microbiológicos
 Bioindicador referenciado na
legislação
CONAMA 274/2000
 Melhores indicadores para águas
marinhas → Tolerância a altas
concentrações de sal
 Grupo Streptococcus fecais→
Streptococcus faecalis, S. faecium, S.
galinarum e S. avium;
 contaminação fecal humana X fezes
outros animais
2-Estreptococcus fecais
3-Pseudomonas aeruginosa
 Solo, água, matéria orgânica em decomposição;
 Microbiota do intestino e pele de seres humanos;
 Patógeno oportunista
- infecções auditivas em usuários de águas recreativas contaminadas
- surtos de gatroenterites veiculadas por água -
imunodeprimidos
 capacidade de crescer em ambientes oligotróficos
4 - Staphylococcus aureus
 Pele e mucosa (nariz, garganta) do homem: Diversas infecções
 Não estão relacionados com contaminação fecal;
 Sobrevivem mais tempo na água;
 Ambientes aquáticos – intensa utilização para fins recreacionais -
contagens de S. aureus
 Indicadoras de poluição: ambientes de água doce, quanto marinhos;
 número e espécie → tipo e pureza da água;
 Ocorrência e distribuição→ presença de poluição orgânica;
 complemento a contagem de coliformes;
 Gêneros comuns: Aureobasidium, Candida, Cryptococcus,
Rhodotorula, Saccharomyces e Trichosporon
 Maioria associada a plantas, solos ou fontes de poluição orgânica
5- Leveduras
 Lagos não poluídos (<10 UFC/100 ml)
 Lagos mesotróficos ( 10 – 50 UFC/100 ml)
 Águas – esgoto - seguras para recreação (50 – 100 UFC/100
ml)
 Águas eutrofizadas (>100 UFC/100ml)
(Hagler & Ahearn,1987)
Legislação
Água potável: obedecer ao padrão de potabilidade, não oferecer riscos à saúde
humana
Padrões de Balneabilidade determinados pelo CONAMA, através da
Resolução nº 357, de 17 de março de 2005.
Categoria Coliformes
fecais/100ml
Escherichia
coli/100ml
Enterococcus/
100ml
Excelente até 250 até 200 até 25
Muito boa até 500 até 400 Até 50
Satisfatória até 1000 até 800 Até 100
Imprópria > 2500 > 2000 > 400
Metodologia
Coleta:
 Coletar a amostra em recipiente esterilizado;
 Até 4/5 da capacidade do frasco;
 Água com cloro: 0,1 ml de tiossulfato a 10%;
 Água bruta que contenha metais pesados: 0,3 ml EDTA a 15%.
TÉCNICA DOS TUBOS
MÚTIPLOS-CETESB/93
 Princípio: bactérias presentes em uma
amostra podem ser separadas por agitação,
resultando em uma suspensão de células
bacterianas.
 Objetivo: consiste em inocular volumes
decrescentes da amostra em meio de
cultura.
 Indicação para água: 1 ml em cinco tubos
para cada volume inoculado (10-5).
Contagem de Coliforme – técnica dos tubos
múltiplos
1- Caldo lactosado
35/370C/ 24-48 h
2- Caldo Verde
Brilhante e Bile 2%
35/370C/ 24-48 h
3- Caldo Ec 44,50C-
24 h
Amostra de água
10 ml
1 ml 0,1 ml
Água: três séries de cinco tubos
Metodologia da Membrana
Filtrante (MF)
Filtragem da amostra
MEMBRANA FILTRANTE
 Princípio: filtragem de volumes conhecidos
de água, através de membrana filtrante com
porosidade adequada.
 As bactérias a serem detectadas ficam
retidas na membrana e são transferidas para
as placas de Petri.
Substrato Cromogênico/fluorogênico
Teste P/A
Adição do meio com
substrato à amostra
Incubação por 24h.Resultados:
Incolor:Negativo;
Amarelo:Coliforme total +;
Azul:Coliforme E. coli +
Fermentação
Caldo Lauril Triptose
Formação de
Gás
Confirmação: Fermentação com
Caldo Verde Brilhante Lactose
- + +
Gás
Fermentação: Caldo lactosado Confirmação: Caldo verde brilhante
E.coli: fluorecência (UV)
Não contaminado
Presença de
coliformes
Presença de
coliformes fecais
Teste Quantitativo
1
2
3
4 Mesmas placas
amarelas submetidas
a luz ultra-violeta
(UV)
Resultado Azul 
Ecoli
Se (-) e amarelo 
C. Total
5
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Tabelas de NMP
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Indicadores microbiológicos qualidade água

  • 1. Indicadores de qualidade de água  Bactérias: Escherichia coli  Protozoários: Cistos (Giardia) e oocistos (Cryptosporidium)  Algas: cianobactérias  Vírus  Ovos de helmintos
  • 2. COLIFORMES  Bactérias do tipo bastonetes, gram- negativas, aeróbias ou anaeróbias facultativos, fermentam a lactose para formar gás em 48 horas após terem sidos colocadas em caldo lactosado a 35°C.
  • 3. Grupo coliforme: coliformes totais e fecais  indicadores de escolha para monitorar qualidade da água;  Presença→ riscos à saúde → Salmonella, Shigella, Vibrio, Mycobacterium, Pasteurella, Leptospira e vírus entéricos  Fermentam lactose→ gás, ácido, aldeído à 35°C em 24-48h Coliformes termotolerantes:E.coli Klebisiella Grupo coliforme: totais e fecais Coliformes fecais: E.coli  gêneros: Citrobacter, Escherichia, Enterobacter e Klebsiella  Citrobacter, Enterobacter e Klebsiella: vegetação e solo
  • 4. Coliformes fecais  Sub-grupo: coliformes totais → Escherichia coli  Contaminação fecal oriundas de animais de sangue quente  Metodologia: temperatura de 44,5 +0.2°C, fator seletivo (termotolerantes)  Enzimas específicas Escherichia coli
  • 5. Outros indicadores microbiológicos  Bactérias que utilizam nutrientes orgânicos  A contagem de bactérias heterotróficas→ medida empírica;  presença em maior ou menor quantidade → grau de poluição da água → enriquecimento MO. 1-Bactérias Heterotróficas
  • 6. BACTÉRIAS HETERÓTROFICAS (CETESB/97)  Podem atuar como patógeno oportunista.  Deterioração da qualidade da água (odores e sabores)  Pode impede a detecção de coliformes.  Auxilia:  Avaliar as condições de higiênicas e de proteção de poços, fontes, piscinas....  Avaliar a eficiência das diversas etapas da estação de tratamento de água na remoção de bactérias.
  • 7.  Método: pour plate  Princípio: condições de nutrição, temperatura e tempo de incubação, se houver bactérias viáveis na água, haverá a formação de colônias.  Meio: ágar triptona glicose extrato de levedura (Plate Count Agar)
  • 8. Outros indicadores microbiológicos  Bioindicador referenciado na legislação CONAMA 274/2000  Melhores indicadores para águas marinhas → Tolerância a altas concentrações de sal  Grupo Streptococcus fecais→ Streptococcus faecalis, S. faecium, S. galinarum e S. avium;  contaminação fecal humana X fezes outros animais 2-Estreptococcus fecais
  • 9. 3-Pseudomonas aeruginosa  Solo, água, matéria orgânica em decomposição;  Microbiota do intestino e pele de seres humanos;  Patógeno oportunista - infecções auditivas em usuários de águas recreativas contaminadas - surtos de gatroenterites veiculadas por água - imunodeprimidos  capacidade de crescer em ambientes oligotróficos
  • 10. 4 - Staphylococcus aureus  Pele e mucosa (nariz, garganta) do homem: Diversas infecções  Não estão relacionados com contaminação fecal;  Sobrevivem mais tempo na água;  Ambientes aquáticos – intensa utilização para fins recreacionais - contagens de S. aureus
  • 11.  Indicadoras de poluição: ambientes de água doce, quanto marinhos;  número e espécie → tipo e pureza da água;  Ocorrência e distribuição→ presença de poluição orgânica;  complemento a contagem de coliformes;  Gêneros comuns: Aureobasidium, Candida, Cryptococcus, Rhodotorula, Saccharomyces e Trichosporon  Maioria associada a plantas, solos ou fontes de poluição orgânica 5- Leveduras
  • 12.  Lagos não poluídos (<10 UFC/100 ml)  Lagos mesotróficos ( 10 – 50 UFC/100 ml)  Águas – esgoto - seguras para recreação (50 – 100 UFC/100 ml)  Águas eutrofizadas (>100 UFC/100ml) (Hagler & Ahearn,1987)
  • 13. Legislação Água potável: obedecer ao padrão de potabilidade, não oferecer riscos à saúde humana
  • 14.
  • 15.
  • 16. Padrões de Balneabilidade determinados pelo CONAMA, através da Resolução nº 357, de 17 de março de 2005. Categoria Coliformes fecais/100ml Escherichia coli/100ml Enterococcus/ 100ml Excelente até 250 até 200 até 25 Muito boa até 500 até 400 Até 50 Satisfatória até 1000 até 800 Até 100 Imprópria > 2500 > 2000 > 400
  • 17. Metodologia Coleta:  Coletar a amostra em recipiente esterilizado;  Até 4/5 da capacidade do frasco;  Água com cloro: 0,1 ml de tiossulfato a 10%;  Água bruta que contenha metais pesados: 0,3 ml EDTA a 15%.
  • 18. TÉCNICA DOS TUBOS MÚTIPLOS-CETESB/93  Princípio: bactérias presentes em uma amostra podem ser separadas por agitação, resultando em uma suspensão de células bacterianas.  Objetivo: consiste em inocular volumes decrescentes da amostra em meio de cultura.  Indicação para água: 1 ml em cinco tubos para cada volume inoculado (10-5).
  • 19. Contagem de Coliforme – técnica dos tubos múltiplos 1- Caldo lactosado 35/370C/ 24-48 h 2- Caldo Verde Brilhante e Bile 2% 35/370C/ 24-48 h 3- Caldo Ec 44,50C- 24 h Amostra de água 10 ml 1 ml 0,1 ml Água: três séries de cinco tubos
  • 20. Metodologia da Membrana Filtrante (MF) Filtragem da amostra
  • 21. MEMBRANA FILTRANTE  Princípio: filtragem de volumes conhecidos de água, através de membrana filtrante com porosidade adequada.  As bactérias a serem detectadas ficam retidas na membrana e são transferidas para as placas de Petri.
  • 22. Substrato Cromogênico/fluorogênico Teste P/A Adição do meio com substrato à amostra Incubação por 24h.Resultados: Incolor:Negativo; Amarelo:Coliforme total +; Azul:Coliforme E. coli +
  • 23. Fermentação Caldo Lauril Triptose Formação de Gás Confirmação: Fermentação com Caldo Verde Brilhante Lactose - + + Gás Fermentação: Caldo lactosado Confirmação: Caldo verde brilhante E.coli: fluorecência (UV) Não contaminado Presença de coliformes Presença de coliformes fecais
  • 24. Teste Quantitativo 1 2 3 4 Mesmas placas amarelas submetidas a luz ultra-violeta (UV) Resultado Azul  Ecoli Se (-) e amarelo  C. Total 5 6 Tabelas de NMP Resultados em numeros/100 ml