Aula de coccídios

UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE NORTE
DEPARTAMENTO DE ANÁLISES CLÍNICAS E
TOXICOLÓGICAS
DISCIPLINA DE PARASITOLOGIA CÍNICA
COCCÍDIOS e as COCCIDIOSES
Parasitoses Emergentes e Oportunistas
Profª. Edna Marques de A.Silva
Disciplina de Parasitologia Clínica

CONSIDERAÇÕES
Protozoários
filo: Apicomplexa
classe: Sporozoa (Plasmódios)
ordem: Coccidiida e Haemosporidiida
Parasitos da Malária
famílias: gêneros e espécies
a) Eimeriidae: Eimeria e Isospora belli
b)Sarcocystidae: Sarcocystis hominis, suihominis
e Toxoplasma gondii

CONSIDERAÇÕES
Parasitas intracelulares
obrigatórios
Forma de arco
Complexo apical - estruturas especiais

Reprodução complexa
Assexuada:
esquizogônica por
endodiogenia
Sexuada:gametogonia
 Ciclo biológico:
Monogênicos
Heterogênicos

IMPORTÂNCIA
 Principais Espécies de Coccídios intestinais no
homem
Cryptosporidium pavum
Ciclospora cayetenensis
Isospora belli
Sarcocystis hominis
Sarcocystis sui hominis spp.
Oocistos contendo esporocistos com esporozoítas

CONSIDERAÇÕES
Habitam a mucosa do intestino delgado do
homem.
A transmissão ocorre:
através da ingestão dos
oocistos em água
alimentos contaminados
Transmissão de S. hominis e de S. suihominis
ocorre ingestão de carne bovina e suína mal
cozida

Estágio de diagnóstico  (oocistos)
8 -10μm
15 -25μm
4 -7μm
Tamanho
Morfologia
IMPORTÂNCIA
Devem ser cuidadosamente
examinada pela microscopia ótica.
Isospora belli
30 - 12μm

Diagnóstico de coccidios
Técnicas para o Diagnóstico LLaabboorraattoorriiaall ddee
OOoocciissttooss:: CCrryyppttoossppoorriiddiiuumm sspppp..,,
CCiicclloossppoorraa ccaayyeettaanneennssiiss,,
IIssoossppoorraa bbeellllii ee SSaarrccooccyyssttiiss sspp..
MMééttooddooss ddee CCoolloorraaççããoo PPeerrmmaanneennttee
Amostras: fezes, líquido de aspirado jejunal, escarro,
aspirado brônquico, biópsia da mucosa intestinal
Preservação dos oocistos:
•Fixador acetato de sódio-ácido acético-formaldeído
(SAF)
• Solução salina de formaldeído a 10%
• Solução de bicromato de potássio a 2 ou 2,5%

Diagnóstico
Métodos ddee CCoolloorraaççããoo PPeerrmmaanneennttee
** Método de Giemsa
*MMééttooddoo ddee HHeennrriikksseenn--PPoohhlleennzz
*Método modificado de Kinyoun (a frio)
*MMééttooddoo mmooddiiffiiccaaddoo ddee ZZiieehhll--NNeeeellsseenn ((aa qquueennttee))
*MMééttooddoo mmooddiiffiiccaaddoo ddee ZZiieehhll--NNeeeellsseenn--ddiimmeettiillssuullffóóxxiiddoo
*Coloração pela hematoxilina férrica modificada
*MMééttooddoo ddee HHeeiinnee
*Coloração negativa pela fucsina-fenicada
*MMééttooddoo mmooddiiffiiccaaddoo ddaa ssaaffrraanniinnaa ((aa qquueennttee))
*MMééttooddoo rrááppiiddoo ddaa ssaaffrraanniinnaa

Diagnóstico
Princípio das Colorações Permanentes
·Fornecer contraste de cor aos parasitos e artefatos.
*Permitir reconhecer as características ácido-resistentes
dos coccídios dos gêneros
Cryptosporidium, Cyclospora e Isospora.
Exame
*Examinar os esfregaços com objetiva de imersão.
*Pesquisar no mínimo 300 campos microscópicos.
*Realizar a morfometria com micrômetro ocular.

Diagnóstico
Método de Henriksen-Pohlenz
• Reagentes:
- Corante de Kinyoun (sol. de fucsina-fenicada).
- Solução aquosa de ácido sulfúrico a 2%.
- Solução aquosa de verde de malaquita a 5%.
• Características da Coloração:
Oocistos, arredondados, coram-se de vermelho
intenso e brilhante ou rosa em fundo azul-esverdeado.
Parede espessa, citoplasma finamente granulado com
zona central clara. Corpo residual e esporozoítos
corados em castanho forte. Leveduras e bactérias em
azul-esverdeado.

Diagnóstico
Método de Kinyoun modificado a frio
• Reagentes:
- Corante de Kinyoun (sol. de fucsina-fenicada).
- Sol. álcool etílico + ácido sulfúrico.
- Solução aquosa de verde de malaquita a 3%.
• Características da Coloração: Oocistos de
Cryptosporidium spp., C. cayetanensis e I. belli
coram-se do rosa ao vermelho púrpura intenso sobre
um fundo verde com intensidade variável.
Os oocistos da C. cayetanensis apresentam
variabilidade de coloração sem morfologia interna
bem definida.

Diagnóstico
Método modificado da Safranina (a quente)
*Reagentes:
- Álcool metílico
- Ácido clorídrico
- Safranina (CI 50240 - Sigma)
- Solução de verde de malaquita a 3%
-Resina Sintética
-Características da Coloração: os oocistos
aparecem arredondados corados em um brilhante
vermelho-alaranjado, sobre um fundo
uniformemente corado em verde.

Diagnóstico
Método modificado de Ziehl-Neelsen
Reagentes:
- Solução de fucsina-fenicada
- Solução aquosa de ácido sulfúrico a 5%
- Solução alcoólica de azul de metileno a 0,3%
Características da Coloração:
Oocistos de Cryptosporidium spp.,
C. cayetanensis e I. belli coram-se do rosa ao
vermelho púrpura intenso sobre um fundo azul com
intensidade variável.
Os oocistos da C. cayetanensis apresentam
variabilidade de coloração sem morfologia interna bem
definida.

Diagnóstico
Método de Heine (triagem)
Reagentes: corante de Kinyoun (sol. de fucsina-fenicada)
Amostra: fezes frescas ou formolizadas
• Características da Coloração:
Os oocistos, pela microscopia de contraste de fase
aparecem brilhantes sobre um fundo cinza da
preparação, os outros elementos não parasitas são
corados de vermelho

Diagnóstico
Epifluorescência
*Amostra: fezes frescas ou preservadas (álcool
metílico ou SAF).
• Verde forte (filtro 450 a 490 DM)
• Azul intenso (filtro 365 DM)
Adição de uma gota de solução de iodo de D’Antoni
antes do exame.
.

Diagnóstico
Métodos de coloração subst. Quimioluminescente
#Auramina-Rodamina, Auramina, Alaranjado de
acridina, Iodeto de propídio– microscópio de
imunofluorescência
Visualização- exame ao microscópio - 1000 X
Obs.Examinar os esfregaços com objetiva de imersão.
Pesquisar no mínimo 300 campos microscópicos.
Realizar a morfometria com micrômetro ocular.

Cryptosporidium spp.

 È uma zoonose – protozoário - oocistos
 + 90 países dos 5 continentes
A infecção causa problemas graves e prolongados
em imunodeficientes, notadamente em pacientes
aidéticos; atualmente imo competente
 Células de vertebrados : trato gastrointestinais
trato respiratório
Criptosporidiose

Descoberto em 1976  1980 com o advento da
SIDA
Forte associação - indivíduo imunodeficientes.
Encontrada  diversas faixas etárias
 crianças mais jovens 
 pacientes com HIV positivo 
Estima-se  250 a 500milhões América Latina,
África e Ásia. Brasil- taxas de 4,2 a17%
EUA-surto 403mil pessoas - 4mil hospitalizado
+100 mortos

Morfologia
Cryptosporidium spp
Oocistos
esférico, 4 a 1μm de diâmetro
possui 4 esporozoítos livres no seu interior
(não possui esporocisto).
álcool –ácido-resistente

Oocistos
Cryptosporidium spp
Resistentes  É praticamente inútil o uso de
desinfetantes anti-sépticos aquosos ou
germicidas para eliminar os oocistos do meio.
São totalmente inofensivos:
Soluções de Creolina (Acaroina), Lisol, Iodoforos
(lodopovidona), o Hipocloritos (água sanitária),
Destruídos  remoção do solo, incineração com
lança-chamas, água sanitária do comércio,, o
formol a 10% e aquecimento a 56ºC por 30
minutos

Cryptosporidium spp
TTrraannssmmiissssããoo
 Alimento ou água contaminada com oocistos:
 Surtos populacionais
 Contato- pessoa-animal pessoa-pessoa
 Em parques e centros recreativos, piscinas
 Exposição a animais infetados transmissão
(Transmissão zoonótica)
 Através do contato sexual - (DST)

Cryptosporidium spp..
Manifestação Clínica
 Podem ser agrupadas em dois tipos:
1.Gastroenterite transitória em pacientes
imunocompetentes diarréia de curta duração (1 a 2
semanas).
2. Gastroenterite persistentes com manifestações,
com diarréia aquosa e severa, podendo levar à morte
nos pacientes imunodeprimidos. diarréias prolongada –
recidivante.

 - Imunocompetentes:
 Período de incubação: 4-14 dias.
 Oocistos identificados nas fezes 3 dias após a
contaminação.
 Tempo de emissão dos oocistos: 2-3 semanas.
 Sintomas: Gastroenterite: 5-10 evacuações/dia
durante 2 semanas; diarreia, vômitos, dores
abdominais.
 Assintomáticos.

 Imunodeprimidos:
 Tempo de emissão dos oocistos: indefinido e
descontínuo, nos períodos de diarréia.
 Sintomatologia: freqüente, severa, prolongada
 Diarréia: aquosa, coleriforme, 20-30 evacuações/dia
durante 2 semanas ou mais, eliminação de 17
litros/dia
 Náuseas, vômitos, dores abdominais, cefaléia, febre.
 Associação: amebíase, giardíase, shiguelose.


Patogenia
Imunodeprimidos
Complexa interação entre fatores do parasito
e hospedeiro- ciclo de auto-infecção interna
Infecção persistente:
Excessiva perda de líquidos, distúrbios
eletrolíticos
Desnutrição grave, desidratação e debilitação
Infecção pode  tratos respiratório e biliar.
Risco de vida

DDiagnóstico
Cryptosporidium spp
Métodos ELISA -sensibilidade(83-95%),
IFA parece ser uma escolha melhor
PCR- método tem a vantagem de distinguir com
precisão C. parvum de não-C. espécies parvum

Oocistos of Cryptosporidium parvum corado por método
modificado ácido resistente com corante de fundo o azul
esverdeado contrastando com azul púrpura do oocisto e
mostrando a varariação de cor. Os esporozoítas são visíveis
nos oocistos corados.

Oocistos de Cryptosporidium parvum coloração para ácido-resistentes.
Oocistos de Cryptosporidium parvum corados método da safranina.

Tratamento
Sintomático – efeitos da diarréia e desidratação.
Drogas usada para diminuir a gravidade da infecção:
 Paramomicina
 Azitromicina e inibidores da protease
 Espiramicina
 Nitazoxanida
 Eritromicina
Loperamida (anti-diarreico)
Doses necessárias, - aproximaria de toxicidade

Tratamento
Imunocompetentes:
Rrecuperam sem tratamento.
Quando surge diarréia – ingestão de líquidos para evitar
a desidratação.
Imunodeprimidos:
Maior risco de doença, mais grave e prolongada.
*Crianças e mulheres grávidas - mais suscetíveis à
desidratação resultante da diarréia – muito líquidos
enquanto doente.
*Rápida perda de fluidos por diarreia pode ser
especialmente fatal para os bebês..

Tratamento
*Medicamento anti-diarreico pode ajudar a
desacelerar a diarréia.
A NITAZOXANIDA Tto diarreia
* Imunocompetentes - eficaz
*imunodeprimidos, a eficácia não é clara
*Pessoas com SIDA, a TERAPIA ANTI-RETROVIRAL,
que melhora o estado imunitário
também irá diminuir ou eliminar os sintomas da
criptosporidiose.
No entanto, os sintomas podem voltar se o estado
imunológico se agrava.

CICLOSPOROSE
Infecção - protozoário Cyclospora cayetanensis,
Intensa diarréia (1 a 2 semanas) com recidivas
Sintomas- moderada fadiga
náuseas
anorexia
mialgia
perda de peso

Cyclospora cayetanensis
1ª vez - 1994 no Peru Ortega et al.
Vários surtos diarréicos - geralmente no verão
América Central e do Sul, No Caribe, África,
Ásia Austrália, Inglaterra e Europa acidental
Encontrado  chimpanzés, babuínos (outros)
 homem  único hospedeiro da espécie
( Cyclospora cayetanensis))

TTrraannssmmiissssããoo
Oocistos esporulados
 alimentos (frutas)
 líquidos contaminados.
Quando expulsos nas fezes
 não são esporulados
 necessitam de condições de temperatura
ideais 22ºC a 33ºC
 no solo esoporulam e entram em estágio de infecção
e de diagnóstico - pesquisa do oocisto.
 Nas fezes - pesquisa do oocisto - intermitente e em
pequeno número.

Morfologia
Oocistos
 Excretados em pequenos e intermitentes
 Ovais medem de 8 a 10μm de diâmetro.
 Dois esporocisto com 2 esporozoíta cada
 Paredes bem evidentes e definidas
 Glóbulos internos que se coram de
castanho
 2 vezes maiores que os oocistos C. pavum

DDiiaaggnnóóssttiiccoo
Marcada variabilidade de coloração oocistos incolores
 passando a vermelho claro  v. escuro até a cor púrpura
 Possue autofluorescência sob a ação do ultravioleta
responde a uma cor verde forte ou azul intenso brilhante

DDiiaaggnnóóssttiiccoo
Aparecimento de oocisto enrugado (características que o
distinguem de artefatos ácido-rápidos)
Os métodos corados são mais fáceis e mais prático, de
identificá-los
Oocistos sem coloração aparecem como esferas claras,
redondas, e um pouco enrugadas ((8 a 10 μm).

Tratamento
Semelhante ao utilizado para criptosporidiose
Sintomático – efeitos da diarréia e desidratação.
Drogas usada para diminuir a gravidade da infecção:
 Paramomicina
 Azitromicina e inibidores da protease
 Espiramicina
 Nitazoxanida
 Eritromicina
Loperamida (anti-diarreico)
Doses necessárias – proximidade da toxicidade

IISSOOSSPPOORRÍÍAASSEE
Infecção causada pelo Isospora belli que tem sido
diagnosticada em pacientes co SIDA/AIDS infectando
as células epiteliais do intestino delgado do homem

TRANSMISSÃO
Parasita é adquirido através da ingestão de oocistos
esporulados procedentes de contaminação fecal (via ora)l
MORFOLOGIA
Parasita mundial - infecção muito incomum..
Oocistos - expulsos nas fezes -imaturos
esporoblasto esprocisto  4 esporozoítas
transparentes e elípticos - 30 μm X 12 μm
extremidades estreitas
Incubação – 6 – 10 dias

PATOGENIA
Iinfecções ID  Criptas de Lieberkuhn  reação inflamatória
Immunocompetentes::
 Infecção auto-limitando -- Diarréias 7 a 10 dias
Immunocomprometidos:
 Diarreia evolução crônica, lientérica (restos de
alimentos) Cólicas abdiominais, meteorismo síndrome
disenteriforme, vômitos e meteorismo, perda de peso
Conseqüências > desidratação, desnutrição
Pacientes com SIDA/AIDS infecção crônica e diarréia
intermitente meses

DIAGNÓSTICO
Hemograma ( eosinofilia> 400 eosinófilos/mm)
Exame parasitológico de fezes –
Demonstração de oocistos nas fezes -concentração
 Cristais de Chacot Leyden ( restos de eosinófilos)
 método direto a fresco
 método de Ziehl-Neelsen, Safranina, modificado
 microscopia epifluorescência.

TRATAMENTO
 Trimethoprim-sulfamethoxazole, ( empírico
 Metronidazol e quinacrina, tetraciclina, clorofenicol
 Repouso, hidratação, nutrição
- sulfametoxazol-trimetoprim por 10 dias, seguidos de mais 20
dias com dose única profilática (pacientes imunodeprimidos
é um tratamento quimioprofilático).
Outros medicamentos com bons resultados:
- metronidazol, sulfiidiazina-pirimetamina e
- sulfadoxinapirimetamina.
Pacientes imunocompetentes a cura pode ser expontânea.

Isospora belli
Microscopia de campo luminoso, oocistos são grandes com um
esporoblasto (figura A).
Oocisto esporulado (figura B)
Fluorescência de UV, mostra autofluorescência (figura C)

SARCOSPORIDIOSE
Conhecida a muitos ano em animis como
peixe, répteis , aves e mamíferos

SARCOSPORIDIOSE
 Espécies conhecidas: S. hominis e S. suihominis
Ciclo evolutivo
Heteroxêno
 Hospedeiro intermediário : fibras musculares
fase assexuada: merontes, sarcocistis, bradizoítos
  bovino - Sarcocystis hominis
 suíno – Sarcocystis suihominis
Hospedeiro definitivo : células da parede intestinal
fase sexuada (homem): fezes oocistos

SARCOSPORIDIOSE
Ciclo
evolutivo

SARCOSPORIDIOSE
 Protozoário esporozoário
Espécies conhecidas: S. hominis e S. suihominis
O homem (hospedeiro definitivo) é infectado pela
ingestão de carne crua ou mal cozida (dos
hospedeiros intermediários), contaminada com
sarcocistos maduros contendo bradizoítos.

SARCOSPORIDIOSE
- Sarcocystis hominis - carne de bovinos
-Sarcocystis suihominis, - carne suína
Os hospedeiros imunodeprimidos infectados pelas
espécies S. hominis e S. suihominis apresentam febre,
diarréia grave, dor abdominal e perda de peso.

MORFOLOGIA
Oocistos - Fezes do homem
(2 esporocistos c/ 4 esporozoíta)
Sarcocistos – músculo do suíno ou bovino
(bradizoítos) em forma de banana

PATOGENIA
Lesões mínimas na mucosa intestinal sem sintomas
E ASSINTOMÁTICAS
Sarcosporidiose muscular humana - cistos nos
muscúlos esquéleticos cardíacos ou da faringe -
raro e adquire gravidade
Sintomatologia
Dor muscular, miosite, mal-estar, febre, fibrose
intersticial e eosinofilia.

Diagnóstico
Os estágios de diagnóstico da sarcocistose
- ocistos maduros - esporocistos livres,
Transparentes e de difícil visualização em esfregaços
coloração especial:
- derivados de Ziehl-Neelsen
- método da safranina
Prevenção
Cozimento adequado da carne, evitando a poluição
fecal do solo e a fiscalização das carnes nos
abatedouros

IMPORTÂNCIA
 Infectam  crianças, viajantes (imunodeprimidos)
 Ivadem  células epitelial do ID no homem
Gastoenterite
 Cura  pode ser espontânea e completa ou não
Importância econômica  mortalidade aves e
mamíferos domésticos e animais de pele valiosa
galinhas, patos, perus, faisões, pombos, gado etc.
Terapia - difícil e desconhecida
Oocistos fezes diarréicas
Difícil visualização

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