O documento discute conceitos fundamentais de validação analítica, incluindo erros, população e amostra, comparação de médias, linearidade, limites de detecção e quantificação, precisão, exatidão, recuperação, especificidade e robustez. O texto fornece exemplos de como calcular e interpretar esses parâmetros para avaliar a qualidade de um método analítico.

1. Universidade de São Paulo Instituto de Química de São Carlos Departamento de Química e Física Molecular Laboratório de Cromatografia ANÁLISE INSTRUMENTAL I TRATAMENTO E VALIDAÇÃO DE DADOS ANALÍTICOS Alvaro J. Santos Neto

2. USP/ IQSC DQFM ANÁLISE INSTRUMENTAL I ERROS ERROS GROSSEIROS ERROS ALEATÓRIOS *erros pessoais *erros instrumentais *erros metodológicos ERROS SISTEMÁTICOS – TENDÊNCIAS

3. USP/ IQSC DQFM ANÁLISE INSTRUMENTAL I POPULAÇÃO E AMOSTRA média populacional (  ) desvio padrão populacional (  ) e variância populacional (  2 ) média amostral (x) desvio padrão amostral (s) e variância amostral (s 2 ) desvio padrão relativo (RSD) ou coeficiente de variação (CV) s =  (xi – x ) 2 n – 1 CV = s x x 100

4. USP/ IQSC DQFM ANÁLISE INSTRUMENTAL I COMPARAÇÃO DE MÉDIAS Variâncias não são significativamente diferentes Variâncias são significativamente diferentes

5. USP/ IQSC DQFM ANÁLISE INSTRUMENTAL I Exemplo: Comparação entre AAS e ICP/OES AAS ICP/OES 1 1,25 1,26 2 1,23 1,28 3 1,23 1,29 média= 1,236 1,276 s= 0,01154 0,01527 F = 0,0 00 2 3 /0,0 00 1 3 = 1, 75 <<<< 39,00 = F 2,2 crítico com 95% de confiança Portanto não há diferenças significativas entre as variâncias sc=0,01354 e t=2,954 > 2,776 = tcrit com 95% de confiança AAS=ICP/OES < 4,604 = tcrit com 99% de confiança AAS≠ICP/OES

6. USP/ IQSC DQFM ANÁLISE INSTRUMENTAL I VALIDAÇÃO ANALÍTICA LINEARIDADE Importante: Cálculo dos resíduos Encontrar outliers

7. USP/ IQSC DQFM ANÁLISE INSTRUMENTAL I VALIDAÇÃO ANALÍTICA CALIBRAÇÃO – CURVA ANALÍTICA concentração y = 0,02 x – 0,03 r = 0,998  Indica sensibilidade

8. USP/ IQSC DQFM ANÁLISE INSTRUMENTAL I LIMITE DE DETECÇÃO E QUANTIFICAÇÃO LD menor concentração identificada por procedimento analítico com um nível de confiança especificado ou ainda, que pode ser estatisticamente diferenciado do ruído. Pela IUPAC X é estimado com o Y=Y BCO +3.s BCO LQ menor concentração que pode ser medida com uma precisão especificada. Pela IUPAC X é estimado com o Y=Y BCO +10.s BCO VALIDAÇÃO ANALÍTICA

9. USP/ IQSC DQFM ANÁLISE INSTRUMENTAL I PRECISÃO E EXATIDÃO PRECISÃO avalia a proximidade entre entre várias medidas efetuadas em uma mesma amostra. Repetibilidade Precisão Intermediária Reprodutibilidade EXATIDÃO diferença entre o valor real presente na amostra e o valor obtido na análise. BIAS(inexatidão)=(conc.obtida-conc.esperada).100/conc.esperada VALIDAÇÃO ANALÍTICA

10. USP/ IQSC DQFM ANÁLISE INSTRUMENTAL I RECUPERAÇÃO avalia a eficiência do método de tratamento da amostra. “ quando possível deve considerar efeito da matriz” Recuperação%=média do valor obtido.100/média do valor adicionado VALIDAÇÃO ANALÍTICA

11. USP/ IQSC DQFM ANÁLISE INSTRUMENTAL I ESPECIFICIDADE/SELETIVIDADE capacidade de detectar o analito de interesse na presença de interferentes. VALIDAÇÃO ANALÍTICA ROBUSTEZ habilidade do resultado de um método permanecer inalterado por pequenas mudanças de parâmetros operacionais e ambientais. Exemplo: temperatura, pH, concentração de reagentes etc. ABRANGÊNCIA capacidade de determinar um ou mais analitos em diferentes matrizes ou vários analitos numa mesma matriz. Exemplo: análise de vários metais como chumbo, cádmio, mercúrio, ferro, cobre em amostras de solo.