Este estudo avaliou a eficácia analgésica e anestésica de três óleos essenciais (cravo, manjericão e melaleuca) em peixes-palhaço. Os resultados mostraram que todas as concentrações promoveram analgesia, com cravo e manjericão (250μL/L) sendo os mais eficazes. Contudo, o manjericão causou espasmos e mortalidade, possivelmente devido à inibição da acetilcolinesterase. Assim, cravo parece ser a opção mais segura para procedimentos dolor

1. [Tea Tree 004]
Óleo Essencial: Melaleuca alternifolia
Composto: terpinen-4-ol e gamma-Terpineno
Título: Basil, tea tree and clove essential oils as analgesics and anaesthetics in
Amphiprion clarkii(Bennett, 1830)
"Óleos essenciais de manjericão, tea tree e cravo como analgésicos e anestésicos em
Amphiprion clarkii (Bennett, 1830)".
Autor: A. M. Correia, A. S. Pedrazzani, R. C. Mendonça, A. Massucatto, R. A. Ozório
and M. Y. Tsuzuki
Journal: Brazilian Journal of Biology
Vol/Issue: 78
Ano: 2018
DOI: 10.1590/1519-6984.166695
TAGs: tea tree; Manjericão; Ocimum basilicum; Cravo; Eugenia caryophyllata;
Melaleuca; Melaleuca alternifolia; anestesia; analgesia; peixe-palhaço; A. clarkii; peixes
ornamentais; veterinária; efeito sedativo; in vivo; Estágios de anestesia;
comercialização de peixes; nocicepção; efeitos analgésicos; estímulos dolorosos;
estresse; manuseio; peixes-palhaço de cauda amarela; Sedação; anestesia leve;
anestesia profunda; anestesia cirúrgica; colapso medular; nociceptores; Amphiprion
clarkii; manipulação não invasiva;
Sobre o artigo
A família Pomacentridae (Teleostei: Perciformes), particularmente as espécies do
gênero Amphiprion, representa o grupo mais importante de peixes marinhos em
aquários.

2. O peixe-palhaço, Amphiprion clarkii, vive em associação com a anêmona e é o peixe
de recifes de corais mais amplamente distribuído, encontrado naturalmente no Oceano
Indo-Pacífico, além disso, sua produção foi alcançada com sucesso em cativeiro.
Sabe-se que durante o cultivo e a comercialização de peixes estes são submetidos a
procedimentos de manejo capazes de causar alterações fisiológicas, relacionadas às
respostas ao estresse e que influenciam diretamente no bem-estar dos animais.
Além disso, há um reconhecimento crescente de que os peixes são capazes de
nocicepção, ou seja, são capazes de perceber estímulos nocivos, e, portanto, podem
vivenciar conscientemente medo, dor e sofrimento.
Substâncias sedativas e analgésicas têm sido utilizadas para facilitar o manuseio e
prevenir lesões físicas e dores durante os procedimentos, minimizando os efeitos
nocivos do estresse e da mortalidade. No entanto, pesquisas farmacológicas que
forneçam analgésicos e dosagens para peixes são escassas na literatura veterinária e
os agentes anestésicos nesses animais nem sempre apresentam efeitos analgésicos.
Assim, é necessário testar a eficácia analgésica de novas substâncias para
proporcionar alívio da dor, que pode ser causada por estímulos dolorosos nos animais
durante o manuseio.
Vários produtos sintéticos são amplamente usados para anestesiar peixes, no entanto,
efeitos negativos como perda de muco, irritação branquial e danos à córnea podem ser
observados, bem como o potencial carcinogênico de alguns produtos.
Assim, por esses motivos, é crescente a demanda por produtos anestésicos de baixo
custo, de fácil obtenção e que ofereçam segurança aos animais, aos tratadores e ao
meio ambiente.

3. Alguns óleos essenciais (OEs) derivados de plantas têm se mostrado uma alternativa
viável para reduzir o estresse durante a captura e manuseio de peixes. Diferentes óleos
têm sido usados para anestesiar peixes, como Eugenia caryophyllata, Cinnamomum
camphora, Mentha arvensis, Melaleuca alternifolia, Ocimum gratissimum, Hesperozygis
ringens e Ocotea acutifolia.
O óleo de cravo, extraído de Eugenia caryophyllata (ou Syzigium aromaticum), é um
anestésico reconhecido em vertebrados e invertebrados e, de acordo com alguns
cientistas, é comumente usado na aquicultura brasileira.
Seu principal componente, o eugenol (4-alil-2-metoxifenol), é considerado uma
substância segura, por não apresentar efeitos colaterais. No entanto, não há
informações sobre a concentração ideal para anestesia com A. clarkii ou o efeito
analgésico nesta espécie.
Melaleuca alternifolia (Myrtaceae) é conhecida pelas ações antifúngica, bactericida e
antiinflamatória de seu principal componente, o terpinen-4-ol. Um produto comercial
baseado no OE da árvore do chá é comumente usado como um medicamento
cicatrizante em peixes ornamentais. No entanto, estudos sobre sua eficácia anestésica
em peixes são escassos.
Outra espécie de planta com potencial para uso como anestésico em peixes é o
manjericão, Ocimum basilicum (Lamiaceae). O manjericão tem efeito analgésico em
humanos, proporcionando um efeito anestésico local, e é um depressor do sistema
nervoso central (SNC). No entanto, não se conhecem estudos científicos sobre seu uso
como anestésico ou analgésico em peixes.
Portanto, o objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia de diferentes concentrações de
OE de cravo-da-índia, tea tree e manjericão na anestesia e analgesia em peixes-
palhaço de cauda amarela (A. clarkii).

4. Os peixes juvenis foram submetidos às concentrações de 40, 50, 60, 70 e 80 µl/L-1 de
cravo; 150, 200, 250, 300 e 350 µl/L-1 de manjericão; e 200, 300, 400, 500 e 600 µl/L-1
de melaleuca; previamente definidas em testes pilotos.
Individualmente e somente uma vez, os peixes de cada tratamento foram colocados em
recipiente de vidro contendo 1L de água salgada, em temperatura de 25 °C, salinidade
de 35 g/L -1 e a concentração específica de OE diluída (solução estoque).
Tratamentos controle (apenas água marinha) e branco (água marinha e a maior
concentração de etanol utilizada para diluição dos óleos) também foram conduzidos.
Após atingirem o estágio de anestesia cirúrgica, os peixes foram submetidos à
biometria e teste de sensibilidade. Em seguida, foram transferidos para água marinha
limpa. Os tempos necessários para atingir cada estágio anestésico e recuperação
foram registrados e os animais foram observados por 72 horas após os procedimentos.
Resultados:
Tabela 1:Estágios de anestesia em peixes e comportamento característico em cada estágio.
Estágio Anestésico Parâmetros de comportamento
I – Sedação Perda de reação ao toque e percepção visual.
II - Anestesia leve
Perda de equilíbrio e movimento natatório normal
intercambiados com natação lateral irregular.
III - Anestesia profunda Perda total de equilíbrio, natação descoordenada.
IV - Anestesia cirúrgica
Redução do batimento opercular, ausência de
movimento natatório.
V - Colapso medular Ausência de batimento opercular, óbito.
Nenhum dos peixes, dos grupos controle e branco, apresentaram qualquer efeito
anestésico ou qualquer efeito analgésico, demonstrando uma resposta (nocicepção) a
estímulos dolorosos por meio de saltos ou boca aberta.

5. Isso evidencia a necessidade de buscar métodos que aliviem ou previnam a dor
durante o manuseio, a fim de preservar o bem-estar animal, evitando o estresse e
danos aos peixes.
Em contraste, todas as concentrações de OEs promoveram analgesia e anestesia nos
animais. Houve diferença significativa entre as concentrações de OE em relação ao
tempo de indução anestésica (estágio IV), com tempos menores observados em
concentrações maiores (Figura 1).

6. Figura 1: Este gráfico representa o tempo em segundos (em medianas) para atingir a anestesia
e recuperação de Amphiprion clarkii submetido aos óleos essenciais de cravo (A, B),
manjericão (C, D) e Tea tree (E, F), respectivamente. Letras distintas indicam significância
estatística entre os tratamentos.
Essa relação entre o aumento da concentração de OE e a diminuição do período de
indução da anestesia também foi observada no robalo-pombo, Centropomus parallelus,
anestesiado com eugenol, mentol e benzocaína em outro estudo.
Tal característica demonstrou que o aumento da concentração eleva o potencial de
absorção dos agentes anestésicos pelas brânquias, de forma que a substância chega
ao SNC mais rapidamente.
Os pesquisadores observaram que os animais submetidos ao óleo de cravo tiveram as
menores medianas de tempos com 60, 70 e 80 µL/L-1 em relação à menor
concentração (40 µL/L -1).
As concentrações de 250 e 350 µL/L -1 de óleo de manjericão provocaram anestesia
mais rápida do que a menor. Da mesma forma, as concentrações de 500 e 600 µL/L -1
de óleo de tea tree induziram o estágio IV mais rapidamente do que as duas
concentrações inferiores.
O tempo para indução da anestesia (estágio IV) não deve exceder uma margem de 180
segundos. Neste estudo, com exceção dos tratamentos de 150 e 200 µL/L-1 do óleo de
manjericão, observou-se que todas as outras concentrações apresentaram tempos
medianos adequados para a promoção da anestesia, permitindo eficácia em um curto
período de exposição.
As concentrações de 40 e 50 µL/L-1 de cravo apresentaram recuperação anestésica
mais rápida em comparação às concentrações de 60 e 80 µL/L -1 (Figura 1). O outro
OE não indicou diferenças para o período de recuperação entre suas concentrações.

7. Todos os tratamentos apresentaram tempos medianos abaixo do limite recomendado
de 300 segundos descritos anteriormente como o máximo ideal para o retorno dos
peixes ao nível basa.
Com o uso do óleo de manjericão o período de recuperação ficou próximo ao limite
recomendado (295 segundos), exceto para a concentração de 300 µL/L -1, que
ultrapassou esse limite de tempo de recuperação e apresentou 50% da mortalidade
total neste estudo.
Esse resultado confirma que a eliminação rápida das drogas é mais segura para os
animais, pois mostrou que a dificuldade do peixe em eliminar do corpo os componentes
do óleo de manjericão, possivelmente tóxicos para esta espécie, aumenta os riscos à
saúde do animal.
Ainda, a análise de regressão linear demonstrou que não houve correlação entre o
tempo de indução e recuperação da anestesia em nenhum dos tratamentos deste
estudo.
A ausência de correlação pode indicar que os intervalos de tempo de recuperação
estão mais intensamente relacionados com a capacidade individual de A. clarkii de
eliminar os medicamentos do organismo do que com o tempo de exposição ao
medicamento.
A nocicepção é o processo neural de detecção de um estímulo nocivo que pode
danificar o tecido e ser potencialmente doloroso, geralmente acompanhado por uma
resposta reflexa de retirada. A capacidade dos peixes de sentir dor é sustentada pela
presença de nociceptores (fibras delta A e C) idênticos aos dos mamíferos, ligados a
uma estrutura cerebral comparativa.
O estudo testou os estímulos nocivos mecânicos aplicados aos lábios, onde estão os
nociceptores. Nesse sentido, a analgesia ou alívio da dor em animais aquáticos pode

8. ser considerada quando eles não respondem ou diminuem a resposta a estímulos
dolorosos após sedação ou anestesia.
Este estudo recomenda que, devido ao seu elevado eficácia analgésica, o óleo de
cravo deve ser utilizado quando o procedimento a ser realizado com o peixe for
invasivo ou passível de gerar dor, a fim de minimizar o efeito do estímulo nocivo por
razões éticas e garantir o bem-estar do animal, evitando o estresse e suas
consequências negativas.
Observou-se também que todas as concentrações de cravo e a concentração de 250
µL/L -1 de óleo de manjericão provocaram efeito analgésico em 100% dos animais.
Este efeito também foi verificado em pelo menos 70% dos peixes submetidos às
demais concentrações de OE de manjericão e tea tree (Tabela 2).
Tabela 2: A porcentagem de Amphiprion clarkii que sofreu analgesia e mortalidade ocorreu
durante e após a exposição a cada concentração dos óleos essenciais de cravo-da-índia,
manjericão e Tea tree, respectivamente.

9. Todos os peixes anestesiados com manjericão tiveram espasmos musculares durante
a indução da anestesia e os procedimentos de manuseio. Além disso, dois peixes
morreram ao serem transferidos para o receptor de recuperação e outros quatro
animais também tratados com este OE morreram durante o período de observação de
72 horas (Tabela 2).
O óleo de manjericão e seu principal componente, metil chavicol (estragol) são
reconhecidos como potenciais pesticidas e, de acordo com alguns pesquisadores,
alguns inseticidas são neurotoxinas potentes e exercem sua toxicidade bloqueando a
degradação da acetilcolina (ACh), o neurotransmissor primário nos sistemas sensoriais
e neuromusculares dos peixes.
A produção de estímulo muscular excessivo pode estar relacionada à inibição da
acetilcolinesterase (AChE) nos músculos devido a esse possível aumento dos níveis de
ACh, que também pode resultar em tetania, paralisia e eventual morte.
Assim, apesar de o manjericão apresentar concentrações que promovem efeitos
analgésicos e anestésicos nos momentos ótimos de indução e retorno, este óleo não é
indicado para uso em A. clarkii, pois não atende aos requisitos básicos de segurança
para animais.
Contudo, não ocorreram efeitos negativos nos tratamentos com cravo-da-índia e tea
tree durante a exposição aos anestésicos ou nas 72 horas seguintes, confirmando que
esses óleos são seguros para uso em peixes.
Assim, as menores concentrações de cada OE que resultaram em tempos satisfatórios
de indução e recuperação da anestesia e maior analgesia de A. clarkii foram 50 e 500
µL/L -1 de óleo de cravo e da tea tree, respectivamente.
A utilização das mesmas concentrações de cada óleo para diferentes tamanhos e
espécies de peixes sugere a ausência de relação entre essas características com a

10. concentração ideal do fármaco, demonstrando que é importante a realização de
estudos específicos sobre o efeito potencial anestésico.
Na prática:
Para quem gosta de ter um aquário em casa e não sabe como manusear seu peixe na
hora de limpar o aquário, sem causar estresse no bicho, por exemplo, este estudo te dá
duas opções de óleos essenciais atóxicos e naturais para o manejo de peixes
ornamentais.
Portanto, o óleo de Tea Tree e Cravo foram os mais indicados para tal, sendo o óleo de
cravo o mais eficiente para seu uso em procedimentos mais invasivos e dolorosos.