O documento descreve vários kits para extração e purificação de DNA e RNA. Ele explica os principais passos do processo de extração, incluindo a lise celular, ligação do DNA/RNA à membrana de sílica, lavagem e eluição do DNA/RNA purificado. Além disso, fornece detalhes sobre cada um dos kits disponíveis para diferentes tipos de amostras, como sangue, bactérias, plantas, entre outros.

1. K i t s d e E x t r a ç ã o / P u r i f i c a ç ã o d e D N A / R N A

2. INTRODUÇÃOPág. 3
Kit de Extração de DNA Genômico de Sangue Miniprep HiPura™ - MB504Pág. 6
Pág. 7
Pág. 8
Pág. 9
Pág. 10
Pág. 11
Pág. 12
Pág. 13
Pág. 15
Pág. 14
Pág. 16
Kit de Extração de DNA Genômico de Bactérias Miniprep HiPura™- MB505
Kit de Extração de DNA Genômico de Plantas Miniprep HiPura™ - MB507
Kit de Extração de DNA Plasmidial Miniprep HiPura™ - MB508
Kit de Purificação de Produtos da PCR Miniprep HiPura™ - MB512
Kit de Purificação DNA de Gel Miniprep HiPura™ - MB539
Kit de Purificação DNA do Solo Miniprep HiPura™ - MB542
Kit de Purificação DNA de Fungos Miniprep HiPura™ - MB543
Kit de Purificação DNA de Leveduras Miniprep HiPura™ - MB552
Kit de Purificação DNA de Múltiplas Amostras Miniprep HiPura™ - MB554
Kit de Purificação RNA de Múltiplas Amostras Miniprep HiPura™ - MB602
SumárioSumário

3. 3 TM
Extração / Purificação de DNA e RNA
LISE
As Colunas Spin contém resina de sílica que promove a
ligação seletiva de DNA/RNA dependendo da concentração de sal
e outros fatores que são influenciados pelo método de extração.
Entenda como funciona o princípio da sílica presente na Coluna
Spin dos Kits de Extração/Purificação.
Lise
Ligação do DNA/RNA
Lavagem
Eluição do DNA/RNA
DNA/RNA Purificado
O isolamento dos ácidos nucléicos começa a partir da
lise ou quebra das paredes celulares. A quebra das estruturas
proteicas é necessária para liberar os ácidos nucléicos que estão
posicionados no núcleo das células. A lise de tecidos não rígidos
ou de células é mais fácil quando comparada com a de tecidos
rígidos (por exemplo, plantas, ossos, madeira) que requerem o
congelamento por nitrogênio líquido e, subsequentemente, a
pulverização destes tecidos em um pó fino. A fórmula da lise varia
conforme a extração de DNA e RNA, mas ambos utilizam como
base um tampão de lise que contém alta concentração de sais
caotrópicos. Esses sais fazem a quebra das ligações de hidrogênio,
interações de van der Waals e hidrofóbicas. As proteínas são
desestabilizadas, incluindo as nucleases e as associações de
ácidos nucléicos com água é rompida criando condições para a
membrana de ligação de sílica.
Por outro lado, os caotrópicos são usualmente utilizados
como detergentes para auxiliar na lise, solubilização de proteínas
e precipitação. Também pode se utilizar enzimas para a lise,
dependendo do tipo da amostra. Por exemplo, a Proteinase K (um
tipo de enzima), funciona muito bem como tampão desnaturante,
ao contrário da Lisozima. Por isso, o tratamento com Lisozima
normalmente é feito antes de adicionar os sais de desnaturação.
INTRODUÇÃO

4. 4 TM
Extração / Purificação de DNA e RNA
LAVAGEMLIGAÇÃO
Os kits de extração oferecem o melhor protocolo para
isolar os ácidos nucléicos das amostras.
Em resumo, o uso das colunas aumenta o rendimento das
amostras e em um tempo mais curto de isolamento comparado
a extração convencional a partir de solventes. O kit melhora
a qualidade do rendimento do ácido nucléico e melhora a sua
qualidade quando purificado para uso em aplicações posteriores.
O método de purificação pela Coluna Spin também envolve a troca
iônica e a tecnologia da membrana de sílica.
Quando a membrana de sílica é utilizada para purificação,
é essencial a presença de sais caotrópicos ou sais de alta
concentração para a desnaturação de proteínas melhorando
a ligação seletiva de ácidos nucléicos com carga negativa na
membrana de sílica. Além disso, para aumentar e influenciar a
ligação dos ácidos nucléicos na membrana de sílica é adicionado
etanol no tampão de ligação. Estas condições levam a uma
situação energeticamente favorável para que os ácidos nucléicos
(DNA/RNA) sejam absorvidos na membrana de sílica.
Durante a etapa de absorção do DNA/RNA, primers
indesejados, impurezas como sais, enzimas, agarose, corantes,
nucleotídeos não incorporados, detergentes, óleos e proteínas
irão passar diretamente pela membrana e não irão se ligar a
membrana de sílica.
Os ácidos nucléicos (DNA/RNA) são absorvidos na
superfície da membrana de sílica, enquanto a maioria das outras
moléculas passa através da coluna. Entretanto, a membrana
continua contaminada com resíduos de proteínas e sais. Os ácidos
nucléicos (DNA/RNA) ligam-se na membrana da Coluna Spin e
são lavados com as soluções tamponadas próprias para remover
as impurezas das colunas como proteínas e polissacarídeos
presentes na amostra. As etapas de lavagem removem estas
impurezas. A primeira etapa de lavagem sempre possui uma baixa
quantidade de sais caotrópicos para remover as proteínas e parte
dos contaminantes. Este passo é acompanhado da adição de
etanol para remover resíduos de sais. O percentual e o volume de
etanol interferem no rendimento de ácido nucléico no tampão de
eluição, ou seja, normalmente etanol 80% irá permitir uma ótima
ligação dos ácidos nucléicos na membrana, enquanto 70% ou uma
concentração menor irá reduzir drasticamente a ligação.
Uma alta quantidade de etanol irá aumentar a ligação dos ácidos
nucléicos degradados na membrana de sílica. Por outro lado, o
uso de pequenas quantidades de etanol irá reduzir a eficiência do
tampão de lavagem na retirada dos sais da membrana.
O HiShredder™ substitui a etapa dos protocolos
convencionais para remoção de resíduos e precipitados da
centrifugação na qual é difícil a separação e preparação de
amostras para obter um lisado perfeito.
Colunas Spin Miniprep
HiElute™
HiShredder™

5. Extração / Purificação de DNA e RNA
5 TM
A etapa final é a liberação dos ácidos nucléicos (DNA/
RNA) da membrana de sílica. A eluição eficiente depende do pH e
das concentrações de sais do Tampão de Eluição. A eluição é mais
eficiente sob condições alcalinas e baixas concentrações de sais.
A baixa concentração de sais permite a renaturação dos ácidos
nucléicos (DNA/RNA), fazendo com que eles tenham uma alta
afinidade com a membrana de sílica. Para as preparações de DNA
pode-se utilizar o Tampão Tris 10 mM com pH entre 8-9. O DNA é
mais estável sob condições com pH levemente alcalino e dissolve
mais rápido. A eficiência máxima da eluição do DNA é alcançada
por um pH entre 7.0 a 8.5. A água com grau de biologia molecular
tende a ter o pH mais baixo, entre 4-5 e, assim as moléculas
de DNA/RNA com alto peso molecular não são reidratadas
completamente em um curto espaço de tempo. Quando a água
é utilizada para eluição garanta que o pH esteja entre 7.0 e 8.5.
Além disso, a eluição do DNA/RNA pode ser aumentada permitindo
com que o tampão seja depositado na membrana por alguns
minutos antes da centrifugação. O DNA/RNA eluido em água deve
ser armazenado a -20°C para evitar a degradação do DNA na falta
do tampão. A eluição com o Tampão TE (Tris HCl 10 Mm, EDTA 1
Mm, pH 8.0) não é recomendado por o EDTA pode inibir reações
enzimáticas subsequentes como a PCR e digestão por enzimas de
restrição.
SECAGEM DA COLUNA SPIN ELUIÇÃO
Após a lavagem com o etanol a maioria dos protocolos
possui uma etapa para a secagem da Coluna Spin. Esta etapa é
necessária para remover o etanol e deixar o DNA/RNA eluido em
uma solução sem impurezas. Caso esta etapa não se seja realizada
pode ocorrer baixos rendimentos de ácidos nucléicos. Quando o
Tampão de Eluição (Tris 10 mM ou Água com grau de Biologia
Molecular) é adicionado na membrana para a eluição os ácidos
nucléicos tornam-se hidratados e são liberados da membrana. Na
presença de resíduos de etanol na coluna os ácidos nucléicos não
podem ser completamente reidratados.
Abaixoestãoosindicadoresquedetectamacontaminação
por etanol:
• As amostras não aparecem no gel de agarose mesmo na
presença do corante.
• As amostras não congelam mesmo armazenadas em – 20°C.
5 TM

6. 6 TM
Extração / Purificação de DNA
Transporte e
armazenamento
em temperatura
ambiente
50 preparações
250 preparações
APLICAÇÕES:
O DNA purificado pode ser utilizado em uma grande
variedade de aplicações como:
• PCR Convencional e PCR em Tempo Real;
• Southern blot;
• Sequenciamento;
• Genotipagem SNP (Polimorfismo de única base);
• Estudos farmacogenômicos;
• Revelação e validação de Polimofirsmo de única
base (SNP).
O Kit de Extração de DNA Genômico de Sangue HiPurA™ purifica o DNA a partir de
amostras de sangue recém coletadas, amostras armazenadas por mais de 24 horas ou de
sangue congelado.
O protocolo implica na lise das células que é realizada através da incubação a 55°C
do sangue total em uma solução contendo íons caotrópicos na presença de Proteinase K.
A lise é preparada para a ligação inicial do DNA na Coluna Spin e impurezas como
proteínas, polissacarídeos, metabólitos de baixo peso molecular e sais sejam removidos em
poucas etapas de lavagem.
O formato da Coluna Spin da HiMedia permite o processamento rápido de múltiplas
amostras.
As colunas possuem uma alta capacidade de ligação com um dna de alta qualidade
essencial para aplicações posteriores.
Kit de Extração de DNA Genômico de SANGUE Miniprep HiPura™
MB504
Razão de A260/A280:
1.6-1.9
Rendimento Total de DNA:
4-12 µg
Volume de Eluição:
200 µL
Volume de Sangue Total:
200 µL
DNA obtido de sangue humano
usando o Kit de Extração de DNA
Genômico de Sangue HiPura
(MB504)
• Amostras a partir de
sangue recém coletado,
armazenado por mais de
24 horas ou de amostras
congeladas.
• Processamento de
múltiplas amostras.
MÉTODO/TECNOLOGIA:
Método da Coluna Spin com
membrana de sílica.

7. 7 TM
Extração / Purificação de DNA
Transporte e
armazenamento
em temperatura
ambiente
50 preparações
250 preparações
MB505
Kit de Extração de DNA Genômico de BACTÉRIAS Miniprep HiPura™
APLICAÇÕES:
O DNA purificado pode ser utilizado em uma grande
variedade de aplicações como:
• PCR Convencional e PCR em Tempo Real;
• Southern blot;
• Sequenciamento;
• Genotipagem SNP;
• Estudos farmacogenômicos;
• Reveleção e validação de SNP
O Kit de Extração de DNA Genômico de Bactérias HiPurA™ purifica o DNA a partir
de bactérias Gram-Positivas e Gram-Negativas.
A purificação do DNA pela membrana de sílica tem alta capacidade de ligação com
o DNA de para aplicações posteriores.
A lise nas bactérias Gram-Positivas é mais difícil devido a parede celular de peptideoglicanas,
comparacomasbactériasGram-Negativas.ParaaliseeficientedasbactériasGram-negativas
é necessário apenas o uso da Proteinase K, ao contrário das bactérias Gram-Positivas que
necessitam da combinação da Proteinase K e a Lisozima.
Razão de A260/A280:
1.6-1.9
Rendimento Total de DNA:
20 µg
Volume de Eluição:
200 µL
Volume de Amostra Total:
1.5 mL de meio de cultura
Linhas 1,2 e 3: DNA extraído de E. coli.
Linhas 4, 5 e 6: DNA extraído de S. aureus.
• Extração de DNA a partir
de bactérias Gram-Positivas
e Gram-Negativas.
• Uso de Proteinase K e
Lisozima para a lise da
parede celular.
MÉTODO/TECNOLOGIA:
Método da Coluna Spin com
membrana de sílica.

8. 8 TM
Extração / Purificação de DNA
Transporte e
armazenamento
em temperatura
ambiente
50 preparações
250 preparações
Kit de Extração de DNA Genômico de PLANTAS Miniprep HiPura™
MB507
APLICAÇÕES:
O DNA purificado pode ser utilizado em uma grande
variedade de aplicações como:
• PCR Convencional e PCR em Tempo Real;
• Southern blot, RFLP, AFLP;
• Sequenciamento;
• Análises com microssatélites.
O Kit de Extração de DNA Genômico de Plantas HiPurA™ purifica o DNA a partir de
tecidosvegetaisquesãodifíceisdeprocessardevidoapresençadeceluloseepolissacarídeos
em suas membranas.
Para a disrupção das paredes o material é macerado em nitrogênio líquido,
juntamente com o tampão de lise.
A precipitação de proteínas é seguida da remoção de outros contaminantes usando
o HiShredder. A fração sobrenadante é mistura com uma Solução de Ligação para garantir
a ligação do DNA na membrana da Coluna Spin.
Posteriormente, são realizadas as etapas de lavagem para que seja obtido um DNA
de alta qualidade o qual é eluido no Tampão de Eluição.
Este Kit pode ser utilizado para a extração de DNA de várias espécies de
plantas como arroz, sorgo, menta, Okra, Eucalyptus e etc.
MÉTODO/TECNOLOGIA:
Método da Coluna Spin com
membrana de sílica.
Razão de A260/A280:
1.6-1.9
Rendimento Total de DNA:
5-40 µg
Volume de Eluição:
200 µL
Volume de Amostra Total:
100 mg
1. DNA de sorgo. 2. DNA de folha de arroz. 3. DNA de folha de trigo.
• Extração para vários tipo
de espécies de plantas, até
mesmo para as mais difíceis
de extrair.
• Protocolo completo para
lise através de nitrogênio
líquido.

9. 9 TM
Extração / Purificação de DNA
Transporte e
armazenamento
em temperatura
ambiente
50 preparações
250 preparações
MB508
Kit de Extração de DNA PLASMIDIAL Miniprep HiPura™
APLICAÇÕES:
O DNA purificado pode ser utilizado em uma grande
variedade de aplicações como:
• PCR Convencional;
• Sequenciamento automatizado de alta qualidade;
• Digestão de restrição;
• Transformação e ligação;
• Transfecção de células robustas;
• Transcrição e translação In vitro;
A purificação plasmidial é baseada no princípio da tecnologia da membrana de sílica
no formato da Coluna Spin.
O método é dividio em 4 etapas, Lise das células, absorção do DNA na membrana,
lavagem de resíduos dos contaminantes e eluição do DNA plasmidial purificado.
A lise é uma etapa peculiar na qual a lise alcalina e a neutralização ajudam eliminação
do DNA genômico, mas conserva o DNA plasmidial.
O kit é compatível com a extração de pequenas e grandes cópias de plasmídeos,
mas o rendimento pode variar dependendo do tipo do plasmídeo.
Razão de A260/A280:
1.6-1.9
Rendimento Total de DNA:
20 µg
Volume de Eluição:
50µL
Volume de Amostra Total:
1.5 mL
DNA purificado de diferentes amostras de
plasmídeos.
MÉTODO/TECNOLOGIA:
Método da Coluna Spin com
membrana de sílica.
• Compatível com
plasmídeos de cópias
grandes e pequenas.
• Rápido processamento
em apenas 4 etapas.

10. 10 TM
Extração / Purificação de DNA
Transporte e
armazenamento
em temperatura
ambiente
50 preparações
250 preparações
Kit de Purificação de Produtos da PCR Miniprep HiPura™
MB512
APLICAÇÕES:
O DNA purificado pode ser utilizado em uma grande
variedade de aplicações como:
• PCR Convencional;
• Sequenciamento;
• Análises de microarranjos;
• Ligação e Transformação;
• Digestão de restrição;
• Identificação;
Método rápido e simples de purificação da molécula de DNA a partir da PCR ou de
outra reação enzimática.
Fragmentos de 100 pb a 10 kb podem ser purificados a partir de primers,
nucleotídeos, polimerases e sais através da membrana de sílica.
Contaminantes como nucleotídeos, primers (até 50 pb), proteínas, MgCl2, óleo
mineral entre outros são completamente removidos nas etapas de lavagem.
A purificação é feita com o DNA concentrado eluido em um pequeno voluma de
tampão com baixa concentração de sal. O produto da PCR possui uma recuperação de 80-
95% dependendo do tamanho de DNA.
MÉTODO/TECNOLOGIA:
Método da Coluna Spin com
membrana de sílica.
Razão de A260/A280:
1.6-1.9
Rendimento Total de DNA:
80-90%
Volume de Eluição:
30-50 µL
Volume de Amostra Total:
25-50 µL da Reação de PCR
Linha 1: Marcador de DNA de 100 pb.
Linha 2: Produtos da PCR após
purificação (O círculo vermelho indica os
primer-dimers).
Linha 3: Produtos da PCR após
purificação.
• Purificação de produtos
com fragmentos de 100 pb
a 10 kb.
• Recuperação de 80-95%.

11. 11 TM
Extração / Purificação de DNA
Transporte e
armazenamento
em temperatura
ambiente
50 preparações
250 preparações
MB539
Kit de Purificação DNA de GEL Miniprep HiPura™
APLICAÇÕES:
O DNA purificado pode ser utilizado em
uma grande variedade de aplicações como:
• PCR Convencional e transcrição in vitro;
• Sequenciamento;
• Análises de microarranjos;
• Ligação e Transformação;
• Digestão de restrição;
• Identificação;
• Microinjeção.
Com base no método da membrana de sílica todos os géis de agarose padrões ou
de baixo ponto de fusão são dissolvidos a 57°C no Tampão de Ligação de Gel. O tampão
ajuda na ligação do DNA na membrana de sílica. O DNA absorvido é lavado para a remoção
de sais e impurezas da amostra original para a obtenção do DNA purificado o qual é eluido
no Tampão de Eluição.
O indicador de pH está presente no tampão para detectar a mudança de pH. Uma
vez que o pH da solução determina se a ligação do DNA na membrana será ou não eficiente.
Inibidores da PCR como cátions divalentes e proteínas são completamente
removidos nas etapas de lavagem, purificando os ácidos nucléicos que serão eluidos na
etapa de Eluição através do Tampão de Eluição e estarão prontos para uso em aplicações
posteriores.
O kit tem capacidade de isolar o DNA (250 pb – 10 kb) de todos os tipodes de
agaroses com cerca de 90% de recuperação.
Razão de A260/A280:
1.6-1.9
Rendimento Total de DNA:
80-90%
Volume de Eluição:
30-50µL
Volume de Amostra Total:
400 mg de gel com DNA
Linhas 1 a 5: Gel extraído com banda de 1 kb.
Linha 6: Marcador de 1 kb.
• Capacidade de isolamento
de DNA (250 pb-10 kb) de
todos os tipos de agarose.
• Até 90% de recuperação.
MÉTODO/TECNOLOGIA:
Método da Coluna Spin com
membrana de sílica.

12. 12 TM
Extração / Purificação de DNA
Transporte e
armazenamento
em temperatura
ambiente
50 preparações
250 preparações
Kit de Purificação DNA do SOLO Miniprep HiPura™
MB542
APLICAÇÕES:
O DNA purificado pode ser utilizado em uma grande
variedade de aplicações como:
• PCR Convencional;
• Identificação;
• Digestão por enzimas de restrição.
O solo é uma das amostras mais difíceis de trabalhar devido a vários parâmetros
como matéria orgânica, pH, ácido húmico, metais e outros. Estes componentes dificultam no
rendimento da extração do DNA ou na eluição de interferentes.
Os interferentes eluidos são inibidores que dificultam em procedimentos posteriores
como PCR e digestão por enzimas de restrição.
O kit apresenta um método rápido e fácil para a purificação de DNA total de
amostras do meio ambiente contendo ácido húmico em grandes quantidades bem como
outros compostos e sedimentos normalmente encontrados no solo.
A Solução de Removedora de Inibidores (IRSH) fornecida no kit é eficiente na
remoção dos inibidores da PCR mesmo das amostras de solo mais difíceis.
A amostra do solo é lisada e homogeneizada através de uma etapa de disrupção
(bead-beating). O DNA genômico total obtido liga-se a membrana da Coluna Spin, é lavado
e eluido.
MÉTODO/TECNOLOGIA:
Método da Coluna Spin com
membrana de sílica.
Razão de A260/A280:
1.6-1.9
Rendimento Total de DNA:
20 µg
Volume de Eluição:
100 µL
Volume de Amostra Total:
250-500 mg
Figura 1.
Linhas 1 a 3: DNA de Vermicompostagem.
Linha 4: Marcador de DNA.
Figura 2.
Linhas 1 a 3: DNA de solo composto de Geranium.
Linha 4: Marcador de DNA.
• Purificação completa do
DNA total, mesmo contendo
compostos e sedimentos
que dificultam a purificação.
• Etapa diferencial de Bead-
beating para disrupção do
material.

13. 13 TM
Extração / Purificação de DNA
Transporte e
armazenamento
em temperatura
ambiente
50 preparações
250 preparações
MB543
Kit de Purificação DNA de FUNGOS Miniprep HiPura™
APLICAÇÕES:
O DNA purificado pode ser utilizado em uma grande
variedade de aplicações como:
• PCR Convencional;
• Southern blot;
• Digestão por enzimas de restrição;
• Reações de identificação;
• Sequenciamento.
Os fungos possuem uma estrutura encapsulada de aspecto viscoso e parede celular
rígida, tornando a lise difícil. Sendo assim, é necessário realizar a lise através da disrupção
dos tecidos.
A lise enzimática na solução de sais caotrópicos é utilizada para a extração de DNA
das células de fungos.
A amostra é macerada em nitrogênio líquido juntamente com o Tampão de Lise. A
precipitação das proteínas é seguida da remoção dos contaminantes através do HiShredder.
Em seguida, o sobrenadante é misturado com a solução que permite a ligação do DNA na
membrana da Coluna Spin.
A solução passa através da membrana e, em seguida, são realizadas as etapas
de lavagem para remover os contaminantes. Ao final, o DNA purificado de alta qualidade é
eluído no Tampão de Eluição.
Razão de A260/A280:
1.6-1.9
Rendimento Total de DNA:
2-30 µL (dependendo da espécie)
Volume de Eluição:
200 µL
Volume de Amostra Total:
100-150 mg
DNA extraído de várias culturas de fungos.
Linhas 1 a 3: Trichoderma spp.
Linhas 4 a 6: Aspergillus niger.
Linhas 7 a 9: Penicillium notatum.
MÉTODO/TECNOLOGIA:
Método da Coluna Spin com
membrana de sílica.
• Remoção de
contaminantes através do
HiShredder.
• Lise enzimática para
a extração eficiente das
células de fungos.

14. 14 TM
Extração / Purificação de DNA
Transporte e
armazenamento
em temperatura
ambiente
50 preparações
250 preparações
Kit de Purificação DNA de LEVEDURAS Miniprep HiPura™
MB552
APLICAÇÕES:
O DNA purificado pode ser utilizado em uma grande
variedade de aplicações como:
• PCR Convencional;
• Southern blot;
• Digestão por enzimas de restrição.
As leveduras possuem suas paredes celulares constituídas com polissacarídeos
que devem ser removidos para a extração do DNA. Sendo assim, estes polissacarídeos são
convertidos na forma de Esferoplastos que é uma forma da célula sem a parede, mas sem
perder a integridade citoplasmática.
Os tampões sorbitol, juntamente com as enzimas de restrição Zimolase e Liticase
levam a formação dos Esferoplastos.
Uma vez o Esferoplastos formado, o processo para extração de DNA pode ser
realizado normalmente com a lise, a ligação na membrana, as etapas de lavagem e a eluição.
É recomendado que as leveduras sejam coletadas quando alcançarem a fase Log,
pois a extração torna-se mais fácil.
MÉTODO/TECNOLOGIA:
Método da Coluna Spin com
membrana de sílica.
Razão de A260/A280:
1.6-1.9
Volume de Eluição:
50 µL
Volume de Amostra Total:
1 X 108 células na fase Log
DNA de S. cerevisiae.
• Protocolo específico para
formação de Esferoplastos
utilizando enzimas Zimolase
e Liticase.

15. 15 TM
Extração / Purificação de DNA
Transporte e
armazenamento
em temperatura
ambiente
50 preparações
250 preparações
MB554
Kit de Purificação DNA de MÚLTIPLAS AMOSTRAS Miniprep HiPura™
APLICAÇÕES:
O DNA purificado pode ser utilizado em uma grande
variedade de aplicações como:
• PCR Convencional;
• Southern blot;
• Digestão por enzimas de restrição;
• Reações de identificação;
• Sequenciamento.
A extração do DNA pode ser realizada a partir da extração de sangue (recém-
coletado,congeladooucommaisde24horas),bactérias(Gram-PositivaseGram-Negativas),
tecidos e células.
Para cada tipo de amostra o kit fornece os reagentes específicos bem como o
protocolo direcionado para a lise de cada uma das amostras.
O DNA com alto peso molecular (>30 kb) pode ser extraído facilmente através da
membrana da Coluna Spin.
O kit é ideal para atender uma variedade de amostras com um método rápido.
MÉTODO/TECNOLOGIA:
Método da Coluna Spin com
membrana de sílica.
Razão de A260/A280:
1.6-1.9
Volume de Amostra Total:
200 µL
Volume de Eluição:
4-12µg (sangue)
4-20µg (bactéria)
30-45µg (tecido animal)
10-20µg (cultura de células)
Linha 1: Marcador de DNA 1kb.
Linha 2 e 3: DNA de tecido de aves.
Linha 1 a 3: DNA de tecido de caprinos.
Linha 4: Marcador de DNA DE 1kb.
• Protocolos específicos
para cada tipo de amostra.
• DNA obtido de amostras
de sangue, bactérias,
tecidos e células.
• Alto rendimento de DNA.

16. 16 TM
Extração / Purificação de RNA
Transporte e
armazenamento
em temperatura
ambiente
50 preparações
250 preparações
Kit de Purificação RNA de MÚLTIPLAS AMOSTRAS Miniprep HiPura™
MB602
APLICAÇÕES:
O DNA purificado pode ser utilizado em uma grande
variedade de aplicações como:
• Análises de Northen;
• Seleção de RNA Poli A+;
• Extensão de primes;
• Ensaios de proteção de Rnase e nucleasse n1;
• RT-PCR (PCR em Tempo Real);
• Análise de expressão de arranjos e ChIP;
• Construção de bibliotecas de cDNA.
MÉTODO/TECNOLOGIA:
Método da Coluna Spin com
membrana de sílica.
Razão de A260/A280:
1.8-2.1
Volume de Eluição:
100 µg
Volume de Amostra Total:
1 X 107 células, 15-30 mg de tecido
RNA de células Jurkat.
• Protocolos específicos
para cada tipo de amostra.
• RNA obtido de amostras
de sangue, bactérias,
tecidos e células.
• Alto rendimento de RNA.
A extração do RNA pode ser realizada a partir da extração de células e tecidos animais,
bactérias, leveduras e de RNA de outras reações.
O tampão de lise ajuda na disrupção e desnaturação das células. As amostras são
centrifugadas no HiShredder removendo materiais insolúveis e reduzindo a viscosidade dos
lisado.
O etanol é adicionado ao lisado promovendo a ligação seletiva do RNA na membrana
de sílica. Após a etapa de ligação do RNA, as impurezas como proteínas, polissacarídeos,
metabólitos de baixo peso molecular e sais são removidos nas etapas de lavagem. O RNA de
alta qualidade é eluido no Tampão de Eluição fornecido no kit.

17. conheça também
Produto
Referência
Modelo
Kit de Purificação de DNA de Osso Miniprep HiPura™ MB525
Kit de Purificação de DNA de Amostras Forenses Miniprep HiPura™ MB524
Kit de Purificação de DNA de Inseto Miniprep HiPura™ MB529
Kit de Purificação de DNA de Tecidos Parafinados Miniprep HiPura™ MB530
Kit de Purificação de DNA de Amostras Bucais Miniprep HiPura™ MB531
Kit de Purificação de DNA de Fezes Miniprep HiPura™ MB544
Kit de Purificação de DNA de Água Miniprep HiPura™ MB547
Kit de Purificação de DNA de Sémen Miniprep HiPura™ MB522
Kit de Purificação de DNA de Mycobacterium tuberculosis Miniprep HiPura™ MB545
Kit de Purificação de DNA de Streptomyces Miniprep HiPura™ MB527