O documento aborda as hepatites A, B e C, detalhando seus agentes etiológicos, modos de transmissão, sinais e sintomas, além dos métodos de diagnóstico. A hepatite A é causada pelo vírus HAV e é transmitida via fecal-oral, enquanto a hepatite B, causada pelo HBV, é adquirida principalmente por contato sexual e uso de agulhas. A hepatite C, provocada pelo HCV, é frequentemente transmitida por transfusões de sangue e também por drogas injetáveis, apresentando formas aguda e crônica semelhantes às das outras hepatites.

1. HEPATITES A, B e C
Métodos Parasitológicos e Imunológicos II
Paloma Dianas
Farmácia
Turma VIII
UNIFEB

2. HEPATITE A (HAV)

3. Agente etiológico
 Vírus da hepatite A
(HAV):
vírus RNA, membro da
família Picornaviridae.

4. Como se transmite?
• Via fecal-oral:
• água ou alimentos contaminados ;
• Contato pessoal íntimo ( domicílios,
creches);
• via sexual: rara
• via parenteral: rara (fase de viremia do
período de incubação)

5. Sinais e Sintomas
 Assintomático na maioria das vezes.
No entanto, o indivíduo pode
desenvolver:
 febre baixa;
 dor de cabeça;
 sensação de fraqueza;
 falta de apetite;
 icterícia;
 fezes esbranquiçadas;
 urina escura.
 Incubação: 15 a 50 dias

6. HEPATITE B (HBV)

7. Agente etiológico
 Vírus da hepatite B (HBV)-
vírus DNA, membro da família
Hepadnaviridae (vírus de
DNA hepatotrópicos).

8. Como se transmite?
• Relações sexuais desprotegidas;
• uso de materiais perfurocortantes sem
esterilização adequada;
• hemodiálise;
• compartilhamento de seringas, agulhas
ou outros equipamentos;
• transfusão de sangue e derivados
contaminados ;
• transmissão vertical (mãe/filho) e
aleitamento materno ;
• acidentes perfurocortantes.

9. Sinais e Sintomas
 Infecção aguda
• Incubação: 30 a 180 dias.
• 90 a 95% dos adultos se curam.
• Assintomático ou sintomático.
• A evolução consiste de três fases:
Prodrômica ou pré-
ictérica
Ictérica Convalescença
• Febre
• Astenia
• dores musculares
ou articulares
• Anorexia, náuseas
e vômitos
• Perversão do
paladar
• Cefaléia
• Repulsa ao cigarro.
• Abrandamento
dos sintomas
digestivos
• Icterícia
• Colúria
• Hipocolia
Desaparece a
icterícia e retorna a
sensação de bem-
estar.

10. Sinais e Sintomas
 Forma crônica:
 Infeção aguda que persiste por mais de 6 meses.
 Assintomático ou sintomático.
Cirrose
Icterícia
Edema
Ascite
Varizes de esôfago
Alterações hematológicas
Hepatocarcinoma

11. HEPATITE C (HEV)

12. Agente etiológico
• Vírus da hepatite C
(HCV): vírus RNA, da
família Flaviviridae.
Fonte: TELELAB

13. Como se transmite?
 Transfusão de sangue e uso de drogas
injetáveis
 Hemodiálise
 Perfurocortantes
 Relacionamento sexual (não é o mais
frequente)
 Transmissão vertical e aleitamento
materno

14. Sinais e Sintomas
Forma aguda:
Manifestação de
sintomas na fase
aguda: RARA
Quando presentes:
quadro semelhante
ao das outras
hepatites.
Forma crônica:
Infeção aguda que persiste
por mais de 6 meses.
Assintomático ou
sintomático.
ü Cirrose
ü Icterícia
ü Edema
ü Ascite
ü Varizes de esôfago
ü Alterações hematológicas
ü Hepatocarcinoma

15. EVOLUÇÃO NATURAL DAS HEPATITES B e C

16. DIAGNÓSTICO

17. DIAGNÓSTICO CLÍNICO
DIAGNÓSTICO DIFERENCIAL: herpes, dengue, esteatose
hepática, etc.
DIAGNÓSTICO LABORATORIAL:
Inespecíficos: elevação das aminotransferases (ALT/TGP e
AST/TGO), bilirrubinas, fosfatase alcalina e linfocitose.
Específicos: sorológicos; biologia molecular.

18. HEPATITE A

19. Fluxograma diagnóstico para hepatite A
FONTE: Secretaria de Vigilância em Saúde/MS

20. ELISA de captura para imunoglobulina classe-
específica
 Princípio: o teste se baseia na ligação do anticorpo HAV-
IgM presente na amostra com o antígeno utilizado no teste,
com consequente desenvolvimento de cor >> Detecta
infecção aguda
 INTERFERENTES: ligação do fator reumatóide (IgG/IgM/IgA/
IgE anti-IgG) com o conjugado ou com a
IgG específica e depois com o conjugado
=> resultados falso-positivos;
 AMOSTRA: soro ou plasma (heparina, citrato de sódio ou
EDTA

21. ELISA de captura para IgM

22. HEPATITE B

23. • Detecta HBsAg
• Janela diagnóstica: 30 dias
• AMOSTRA: soro, plasma ou sangue
• INTERFERENTES: medicamentos, lipemia, hemólise, icterícia.
Testes rápidos: Imunocromatografia de
fluxo lateral

24. Testes rápidos: Imunocromatografia de
fluxo lateral
O método utiliza anticorpos anti-HBsAg, que reagem com
antígenos presentes em amostras.
Ao adicionar a amostra no dispositivo, havendo a presença
de HBsAg, estes se ligam ao conjugado(anticorpos IgG anti-
HBsAg) e migram para a área de teste (T), que contém
anticorpos anti HBsAg imobilizados.
À medida que o complexo antígeno-conjugado se liga na
área de teste (T), uma linha visível é formada. Os
conjugados que não se ligaram na área teste continuam a
migrar até a área do controle (C), onde sempre deve
aparecer uma linha colorida.

26. Testes moleculares- PCR em tempo real
(qPCR)
Diagnóstico precoce
Detecta ácido nucléico viral (HBV-DNA)
Princípio: por meio dessa técnica, é possível amplificar
uma região de interesse em uma molécula de DNA
utilizando um par de sequências curtas de nucleotídeos
que se localizam nos flancos dessa região, em conjunto
com uma enzima DNA polimerase termorresistente. Na
qPCR, o resultado é visualizado imediatamente,
dispensando a eletroforese. Isto é possível pelas marcações
fluorescentes nos próprios nucleotídeos. a fuorescência
liberada é detectada por um equipamento específico.

27. Interferentes: contaminação por fenóis; contaminação por
DNA externo; Temperatura de ciclagem errada; primers não-
específicos, proteínas.
Amostra: sangue, urina
Testes moleculares- PCR em tempo real
(qPCR)

28. Imunoensaios
Diferentes estágios da infecção pelo HBV
Infecção aguda ou crônica
Resposta vacinal
Ausência de contato prévio com o vírus.

29. Interpretação dos resultados sorológicos (Ag-Ab) para hepatite B

30. ELISA sanduíche para pesquisa de
antígeno HbsAg
Princípio: Nesse teste, uma enzima é covalentemente ligada a
um anticorpo específico que reconhece o antígeno alvo. Caso
ocorra esse reconhecimento, a enzima irá reagir com um
substrato incolor para produzir um produto colorido.
Ø INTERFERENTES: Hemólise e/ou lipemia. Anticorpos
reagentes ( anticorpos heterofílicos;
anticorpos antianimais; autoanticorpos contra o analito;
fator reumatóide e outras proteínas)
Ø AMOSTRA: soro ou plasma

31. OBS: janela diagnóstica do HBsAg 30 dias após infecção

32. ELISA de captura para imunoglobulina classe-
específica: anti-HBc IgM
OBS.: Anti-HBc IgM --> 30 dias após infecção, sendo substituído por Anti-HBc IgG 6 a 8 meses após a
infecção

33. ELISA Competitivo para anti-HBc total
 Princípio: competição dos anticorpos na amostra com o
anticorpo específico do conjugado pela ligação com o
antígeno adsorvido à fase sólida; quando a amostra é
reagente a ligação do conjugado não acontece, não há
ação da enzima sobre o substrato e, conseqüentemente,
não há desenvolvimento de cor.
 Interpretação do resultado:
 ausência de cor -> amostra reagente
 presença de cor -> amostra não reagente.

34. ELISA Competitivo para anti-HBc total
Ø INTERFERENTES: Hemólise e/ou lipemia. Anticorpos
reagentes, doenças auto-imunes, hipergamaglobulinemia,
mononucleose.
Ø AMOSTRA: soro ou plasma

35. ELISA Indireto para anti-HBs
• Princípio: identificação de anticorpos por anticorpos
marcados com uma enzima, de maneira que esta enzima
age sobre um substrato e a reação faz com que o
cromógeno mude de cor.
Ø INTERFERENTES: Hemólise e/ou lipemia intensa; anticorpos
reagentes, fator reumatoide e outras proteínas.
Ø AMOSTRA: soro ou plasma

36. ELISA Indireto para anti-HBs

37. HEPATITE C

38. Testes rápidos: Imunocromatografia de
fluxo lateral
 Detecta anti- HCV
 Princípio: a fase sólida é composta por uma membrana de
conjugado de antígenos sintéticos e recombinantes com
ouro coloidal. Havendo anticorpos anti-HCV na amostra
adicionada com o diluente ao poço, eles se ligam ao
conjugado e fluem pela membrana . Ao atingir a área que
contém antígeno do HCV imobilizados, formarão uma linha
rosa na área de teste (T). Os reagentes continuam fluindo
pela membrana até formarem uma linha visível (rosa) na
área de controle (C).

39. • AMOSTRA: soro, plasma ou sangue
• INTERFERENTES: medicamentos, lipemia, hemólise,
icterícia.
Testes rápidos: Imunocromatografia de
fluxo lateral

40. Diagnóstico precoce; carga viral
Detecta ácido nucléico viral (HCV-RNA)
Mesmo princípio da qPCR, porém há ação da
enzima transcriptase reversa, que a partir do RNA sintetiza
uma cadeia de DNA complementar (chamado agora de
cDNA).
Testes moleculares-
RT-PCR: Reverse Transcription PCR

42. Identificação do anticorpo anti-HCV
• ELISA indireto ou quimioluminescência
• Princípio da Quimioluminescência >> identificação de
anticorpos por anticorpos marcados com enzima (ex.
peroxidase) que atuará sobre o substrato
quimioluminescente (luminol, polifenóis) com consequente
emissão de luz.
Ø INTERFERENTES: Hemólise e/ou lipemia
intensa. Anticorpos reagentes fator reumatoide e outras
proteínas.
Ø AMOSTRA: soro, plasma ou sangue total

43. Immunoblot (RIBA)- confirmatório
• Detecção do anti- HCV
• Princípio: a amostra contendo anticorpos é incubada com a
membrana de nitrocelulose contendo as proteínas
previamente separadas por tamanho molecular. É
adicionado o conjugado enzimático anti-Ig humana, que se
fixa à imunoglobulina da amostra. É adicionado o substrato
cromogênico para o desenvolvimento de cor insolúvel,
como no dot-ELISA. A interpretação do resultado é feita pela
análise da presença de bandas, que revelam a presença de
anticorpos específicos.

44. AMOSTRA: soro, plasma ou sangue
INTERFERENTES: medicamentos, lipemia,
hemólise, Anticorpos reagentes, outras proteínas.
Immunoblot (RIBA)- confirmatório