controledequalidadedematriasprimasinsumos-150711024839-lva1-app6892.pptx

1. Controle de Qualidade
de Matérias Primas –
Insumos e produto
acabado
Novembro/2013
1

2. Vanessa Rodrigues Lopes
Farmacêutica, graduada pela Faculdade de Ciências Farmacêuticas da
Universidade de São Paulo – USP, São Paulo. Especialista em fármacos e
medicamentos também pela USP. Com vários cursos de especialização nas áreas
de Validação Analítica, Estabilidade, Controle de Qualidade e Assuntos
Regulatórios por associações independentes. Experiência de 10 anos adquirida
nas empresas Bristol-Myers Squibb nas áreas de controle e garantia de
qualidade e Eurofarma na área de assuntos regulatórios. Atualmente é
Especialista em assuntos regulatórios, atuando como link entre as áreas
técnicas e regulatória na submissão de novos projetos, resposta à exigências e
treinamentos técnicos internos. Contato com a ANVISA como especialista
técnica para desenho de projetos e participação ativa nas discussões de
entidades para revisão da legislação técnica atual.
2

3. Objetivos da aula
 Discutir a legislação local, conceitos e testes necessários para o
estabelecimento do controle de qualidade de:
 Insumos;
 Excipientes;
 Materiais de embalagem;
 Produto acabado;
3

4. Principais legislações relacionadas
 RDC 16/2007 - Regulamento Técnico para Medicamentos Genéricos
 RDC 17/2003 – Regulamento técnico para medicamentos similares
 RDC 136/2003 – Regulamento técnico para medicamentos novos
 RDC 45/2012 – Estabilidade de IFA
 IN 02/2009 – Fabricação de Lotes piloto
 RDC 899/2003 – Validação analítica
 RDC 31/2010 – Equivalência Farmacêutica
 RDC 17/2010 – Boas práticas de fabricação
 RDC 25/2007 – Terceirização de produção e CQ
 RE 0/1/2005 – Estabilidade
 Guia para fotoestabilidade (site da ANVISA)
 RDC 48/2009 – Pós registro
4

5. Definições
RDC 17/2010
5

6. Controle de qualidade
Art. 281. O Controle de Qualidade é responsável pelas atividades referentes à
amostragem, às especificações e aos ensaios, bem como à organização, à
documentação e aos procedimentos de liberação que garantam que os
ensaios sejam executados e que os materiais e os produtos terminados não
sejam aprovados até que a sua qualidade tenha sido julgada satisfatória.
6

7.  Calibração: conjunto de operações que estabelece, sob condições especificadas, a relação entre os valores
indicados por um instrumento ou sistema de medição ou valores representados por uma medida
materializada ou um material de referência, e os valores correspondentes das grandezas estabelecidos por
padrões;
 Especificação: documento que descreve em detalhes os requisitos que os materiais utilizados durante a
fabricação, produtos intermediários ou produtos terminados devem cumprir. As especificações servem
como base para a avaliação da qualidade;
 Validação: ato documentado que atesta que qualquer procedimento, processo, equipamento, material,
atividade ou sistema realmente e consistentemente leva aos resultados esperados;
 Controle de qualidade: Conjunto de ensaios realizados com o objetivo de avaliar a qualidade de matérias
primas, materiais de embalagem, produtos intermediários, acabados e verificar se os mesmos se
apresentam de acordo com as especificações definidas;
 Desvio de qualidade: afastamento dos parâmetros de qualidade estabelecidos para um produto ou
processo
7

8. Segurança
Eficácia
Qualidade
8

9. Organograma convencional GQ/CQ
Diretoria
técnica
Gerente de
GQ
Supervisor
de GQ
Gerente de
CQ
Supervisor
de CQ
Supervisor
de
estabilidade
Gerente de
P&D
Supervisor
de DMA
Supervisor
de validação
Supervisor
de
estabilidade
9

10. Escolha/descober
ta da molécula
Prospecção de
fabricantes da
molécula
Escolha dos
excipientes
Definição das
especificações
Avaliação de
possíveis
processos
produtivos
Desenvolvimento
da formulação
Desenvolvimento
e validação de
metodologia
analítica
Produção piloto
Estudos de
estabilidade
acelerada
Estudos in vivo
Estudos de
estabilidade de
longa duração
Submissão
regulatória
Aprovação
ANVISA
Transferência CQ
Análise de rotina
(liberação)
Estabilidade de
acompanhament
o
10

11. Responsabilidades
do CQ
11

12. I. Aprovar ou rejeitar as matérias-primas, os materiais de embalagem e os produtos intermediários, a granel e
terminados em relação à sua especificação;
II. Avaliar os registros analíticos dos lotes;
III. Assegurar que sejam realizados todos os ensaios necessários;
IV. Participar da elaboração das instruções para amostragem, as especificações, os métodos de ensaio e os
procedimentos de controle de qualidade;
V. Aprovar e monitorar as análises realizadas, sob contrato;
VI. Verificar a manutenção das instalações e dos equipamentos do controle de qualidade;
VII. Assegurar que sejam feitas as validações necessárias, inclusive a validação dos métodos analíticos e calibração
dos equipamentos de controle; e
VIII. Assegurar que sejam realizados treinamentos iniciais e contínuos do pessoal da área de Controle de
Qualidade, de acordo com as necessidades do setor.
12

13. Estabelecimento de
especificações
13

14. Controle de qualidade
 Equipamentos laboratório
 Metodologia analítica aprovada
 Reagentes
 Validação de métodos
 Qualificação de equipamentos;
 Procedimentos operacionais;
 Especificações escritas MPs, PAs, MEs;
 Análise química/física das MPs, PAs, MEs;
 Boletins de Análise;
 Aprovação e rejeição;
 Estudo de Estabilidade.
14

15. Padrões de referência:
1.4. Deve-se utilizar substâncias de referência oficializadas pela Farmacopéia Brasileira ou, na
ausência destas, por outros códigos autorizados pela legislação vigente. No caso da inexistência
dessas substâncias, será admitido o uso de padrões de trabalho, desde que a identidade e o teor
sejam devidamente comprovados (RDC 899/2003)
• padrão secundário (padrão de trabalho): padrão utilizado na rotina laboratorial, cujo valor é
estabelecido por comparação a um padrão de referência (RDC 17/2010) – NÃO ACEITOS EM
VALIDAÇÃO!!!
• padrão de referência: são exemplares de fármacos, impurezas, produtos de degradação,
reagentes, dentre outros, altamente caracterizados e da mais elevada pureza, cujo valor é aceito
sem referência a outros padrões (RDC 17/2010);
– Farmacopeico: Adquirido de um compêndio oficial reconhecido pela ANVISA (RDC 37/2009);
– Caracterizado (primário): Análises para determinação absoluta da pureza e identidade;
15

16. http://www.pharmtech.com/pharmtech/Peer-Reviewed+Research/Reference-Standard-Material-Qualification/ArticleStandard/Article/detail/591372
16

17. Testes gerais – Fármacos e excipientes
 Identificação
 Características físicas
 Solubilidade
 Doseamento ou teor
 Produtos de
degradação/Impurezas
 Pureza quiral
 Polimorfismo
 Tamanho de partícula
 Resíduo por ignição
 Perda por secagem
 Umidade por karl
fischer
 pH
 Ponto de fusão
 Densidade
 Solventes residuais
 Testes microbiológicos
 Rotação especifica
17

18. Identificação, teor e
produtos de
degradação
TÉCNICAS ANALÍTICAS QUALITATIVAS E
QUANTITATIVAS
18

19. Espectrofotometria
ESPECTROFOTOMETRIA UV
ESPECTROFOTOMETRIA IV
19

20. A espectrofotometria faz parte da classe dos
métodos analíticos que baseiam-se na interação da
matéria com a energia radiante
 Baixo custo, comparado à outras técnicas
 Fácil operação
Luz
incidente
Luz
emergente
Luz absorvida
20

21. USP <851> SPECTROPHOTOMETRY AND LIGHT-
SCATTERING
 Espectrofotometria é a medida quantitativa das
propriedades reflexivas ou transmissivas de um
material em função de um comprimento de onda.
 Espectrofotometria de absorção é a medida da
interação entre a radição eletromagnética e as
moléculas ou atomos de uma substância química
 Tipos de técnicas analíticas: UV/ visível, IR, e espectroscopia de absorção
atômica
21

22.  Espectrofotometria de absorção: Técnica que mede a
absorção de uma radiação em função de sua frequencia
(ou comprimento de onda), devido às interações com
uma amostra.
 A amostra absorve energia (fótons) do campo radiante.
 A intensidade da absorção depende da frequencia (comprimento
de onda) sendo que esta variação compõe o espectro de
absorção.
22

23. O Espectro eletromagnético
23

24. 24

25. Lei de Beer-Lambert
T: Transmitância
I: Intensidade da luz incidente
I0: Intensidade da luz transmitida
α: coeficiente de absorção
l: caminho percorrido pela luz (cm)
c: concentração da amostra (mol/L)
25

26. A absorbância é muito importante porque ela é diretamente proporcional à
concentração, c, de espécies absorventes de luz na amostra
26

27. Desvios da lei de Beer-Lambert
– Desvios/limitações instrumentais
• São dependentes da forma como a medição é feita
– Desvios químicos
• Resultado de alterações químicas associadas com a
mudança de concentração
27

28.  Em soluções relativamente concentradas (>0,01 mol L-1 ), a
distância média entre moléculas absorventes diminui e
interações entre as mesmas começam a afetar a
distribuição de cargas.
 Este tipo de interação pode alterar a habilidade das espécies
absorverem um dado comprimento de onda
 Em soluções diluídas de analitos porém com grande
concentração de outras espécies, p.ex., eletrólitos
 Interações eletrostáticas podem alterar a absortividade molar ε
das espécies
 Em casos extremos, soluções tão diluídas quanto 10-6 mol L-1
são necessárias para observação da lei de Beer
 Em teoria, ε é dependente do índice de refração n. Se a
concentração alterar significativamente n ⇒ desvio da lei de Beer
Desvios da lei de Beer-Lambert 28

29.  Principal causa de desvios químicos ocorre quando o analito se
dissocia, associa ou reage com as moléculas do solvente
gerando uma espécie química com espectro de absorção
diferente
 Por ex., indicadores ácido-base (Ka = 1,42 x 10-5)
Desvios da lei de Beer-Lambert 29

30. Desvios da lei de Beer-Lambert
A lei só é válida para radiação monocromática, ou seja, para um único
comprimento de onda ()
Como minimizar o desvio?
• Escolher a região onde o  é constante
30

31. Espectrofotômetros
Feixe Simples
Feixe Duplo
31

32. Partes Essenciais de um Espectrofotômetro
 Fontes de radiação;
 Monocromador;
 Compartimento de
amostra;
 Detector.
32

33. Fontes de Radiação
33

34. Fontes de Radiação
 Condições para uma fonte ser de boa qualidade:
 gerar radiação contínua;
 ter intensidade de potência radiante suficiente
para permitir a sua detecção pelo sistema
detector;
 ser estável.
 Além disso deve ter um tempo de vida longo e
preço baixo.
34

35. Monocromadores
 Função: seleção do comprimento de onda em que se tem interesse para
a análise.
 Constituição:
 fenda de entrada de um elemento de dispersão de radiação
 fenda de saída
 Tipos:
 prismático
 reticuladores
35

36. Monocromador Prismático
 A radiação policromática vinda da fonte de radiação
passa pela fenda de entrada e incide sobre a face de
um prisma, sofrendo um desvio.
 Os vários comprimentos de onda terão diferentes
direções após a incidência no prisma. Se for realizado
um ajuste rigorosamente controlado da fenda de
saída, pode-se selecionar o comprimento de onda
desejado.
36

37. Monocromador Prismático
37

38. Monocromador Reticular
 O principal elemento dispersante é a rede de
difração. Essa rede consiste em uma placa
transparente ou refletora com muitas ranhuras
paralelas e equidistantes.
 Dispersão resultante desta rede é linear. Os
vários comprimentos de onda dispersos são
igualmente espaçados, por isso a fenda de saída
isolará uma banda de radiação de largura
constante.
 A resolução é muito mais elevado que os
prismas.
38

39. Monocromador Reticular
39

40. Celas de Medida
40

41. Absorção da radiação eletromagnética
41

42. Fundamentos da Espectrofotometria
Dois requisitos devem ser observados para que
uma determinada radiação possa ser absorvida por
uma molécula:
• A radiação incidente deve ser de freqüência
equivalente aquela rotacional ou vibracional,
eletrônica ou nuclear da molécula,
• A molécula deve ter um dipolo permanente ou
um dipolo induzido, ou seja, deve haver algum
trabalho que a energia absorvida possa fazer.
42

43. Porque ocorre o fenômeno da absorção?
• TRANSIÇÕES ELETRÔNICAS – UV/Vis
– Moléculas que apresentam elétrons que podem ser
promovidos a níveis de energia mais elevados
mediante a absorção de energia
• ROTACIONAL E VIBRACIONAL – IR ou IV
– Níveis discretos de energia são absorvidos devido à
vibrações e rotações das moléculas
43

44. Espectrofotometria
UV
44

45. Absorção da energia eletromagnética UV/vis 45

46. Transições eletrônicas – UV/Vis
46

47. Espectro visivel: entre 36 a 72 kcal/mol,
UV próximo (a partir de 200 nm): 143 kcal/mol
• Somente as duas primeiras transições descritas acima são possíveis com a energia
disponível entre 200 a 800 nm.
• A promoção do elétron é sempre do orbital molecular mais ocupado (HOMO) para o
orbital molecular menos ocupado (LUMO) sendo que as espécies resultantes deste
processo são ditas em estado excitado.
• Quando moleculas de uma amostra são expostas a luz contendo a energia necessária
para uma possível transição eletrônica, parte da luz é absorvida e o elétron é promovido
a um orbital de maior energia. O espectrofotometro registra os comprimentos de onda
nos quais esta absorção ocorre, bem como o grau de absorção em cada comprimento
de onda, formando um gráfico de absorbância (A) x comprimento de onda.
47

48. Energy
s*
p
s
p*
n
Atomic orbital
Atomic orbital
Molecular orbitals
Occupied levels
Unoccupied levels
Transições eletrônicas – UV/Vis
48

49. Energy
s*
p
s
p*
n
s
s
p
n
n
s*
p*
p*
s*
p*
alkanes
carbonyls
unsaturated cmpds.
O, N, S, halogens
carbonyls
Transições eletrônicas – UV/Vis
49

50. Espectrofotometria
UV
PRÁTICA
50

51. Cromóforos Representativos
Composto Cromóforo max (nm) Log ε
Octeno-3 C=C 185 , 230 3,9
Acetileno C=C 173 3,8
Acetona C=O 188 , 279 2,9 , 1,2
Acetato de diazoetila N=N 252 , 371 3,9 , 1,1
Butadieno C=C-C=C 217 4,3
Crotonaldeído C=C-C=O 217 , 321 4,2 , 1,3
Dimetilglioxina N=C-C=N 226 4,2
Octatrienol C=C-C=C-C=C 265 4,7
Decatetraenol [-C=C-]4 300 4,8
Vitamina A [-C=C-]5 328 3,7
Benzeno 198 , 255 3,9 , 2,4
1,4-Benzoquinona C C 245 , 285 , 435 5,2 , 2,7 , 1,2
Naftaleno 220 , 275 , 314 5,0 , 3,7 , 2,5
Difenilo 246 4,3 51

52. Análises Quantitativas
52

53. Análises Quantitativas
53

54. Análises Quantitativas
54

55. Titulações Espectrofotométricas
55

56. Análise Qualitativa
240 250 260 270 280 290 300
Comprimento de onda (nm)
2,0
2,2
2,4
2,6
2,8
3,0
3,2
Log
ε
A ou B
C
D
C5H11
C5H11
OH
C5H11
R
OH OH
R
OH
C5H11
OH
OH
OH
OH
(A) (B)
(C) (D)
Espectro de absorção do canabidiol comparado com outros fenóis.
56

57. Padrão: 50,1 mg * 99,03%/50 mL * 2 mL/100 mL = 0,01984 mg/mL – leitura 0,493
0,01984 mg/mL ---------------- 0,493
x ---------------- 0,487 – x= 0,01960 mg/mL
* 50 mL = 0,9802 mg em 5,0 mL = 0,1960 mg/mL
* 50 mL = 9,8 mg/mL na amostra
57

58. Padrão: 50,2 mg * 99,70%/100 mL * 5 mL/50 mL * 2 mL/50 mL = 0,0020 mg/mL –
leitura 0,499
0,0020 mg/mL ---------------- 0,499
x -------------- 0,495 – x= 0,001986 mg/mL
* 100 mL = 0,1986 mg em 5,0 mL = 0,03972 mg/mL
* 100 mL = 3,972 mg em 10,0 mL = 0,3972 mg/mL /0,400 mg/mL = 99,3%
58

59. Espectrofotometria
IV
59

60. 60

61. Espectrofotometria IV
 Região infravermelha do espectro eletromagnético, que é
caracterizada por possuir um comprimento de onda maior e
uma menor frequencia do que a luz visível;
 Dividida em três regiões:
 IV próximo (NIR): 14000 a 4000 cm-1 – vibrações harmonicas;
 IV intermediário: 4000 a 400 cm-1 – vibrações rotacionais e vibracionais
 IV longe: 400 a 10 cm-1 – vibrações rotacionais
 Energia desta parte do espectro (entre 1 a 15 kcal/mol) não é
suficiente para induzir excitação dos elétrons, entretanto pode
induzir excitação vibracional dos atomos e grupos ligados
covalentemente.
 Virtualmente todos os compostos orgânicos absorvem
radiação infra vermelha
61

62. Número de modos vibracionais
 Uma molécula pode vibrar de várias formas, cada forma é chamada
de modo vibracional;
 Para moléculas com N átomos, temos:
Moléculas lineares: 3N – 5 graus de
modos vibracionais
Moléculas não lineares: 3N – 6 graus de
modos vibracionais
H2O, molecula não liner teria 3 × 3 –
6 = 3 graus de modos vibracionais
62

63. Energia rotacional e vibracional – IV
63

64. Symetrical streching
Antisymmetrical
stretching
Scissoring
Rocking Wagging Twisting
Energia rotacional e vibracional – IV
64

65. Espectrofotometria IV
 O espectro IV da amostra é registrado passando um raio de luz IV
pela amostra. Quando a frequencia do raio é a mesma da vibração,
ocorre a absorção.
65

66. Espectrofotometria IV - prática
 Cada molécula tem um espectro IV único, isso permite que a
técnica seja amplamente utilizada para análise qualitativa,
principalmente na identificação de moléculas no controle de
qualidade
66

67. HPLC/CLAE
HIGH PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY
CROMATOGRAFIA LÍQUIDA DE ALTA EFICIÊNCIA
67

68. 68

69. Separação
 Operação pela qual uma mistura é dividida em pelo menos duas
frações com diferentes composições.
 É obtida por meios físicos embora reações químicas podem ser
envolvidas no processo.
 Os métodos físico-quimicos de separação são baseados na
utilização de alguma propriedade física das substâncias a serem
separadas.
69

70.  Objetivo: Separação individual dos diversos constituintes de
uma mistura de substâncias seja para identificação,
quantificação ou obtenção da substância pura;
 Migração da amostra através de uma fase estacionária por
intermédio de um fluido (fase móvel);
 Após a introdução da amostra no sistema cromatográfico, os
componentes da amostra se distribuem entre as duas fases e
viajam mais lentamente que a fase móvel devido ao efeito
retardante da fase estacionária;
 O equilíbrio de distribuição determina a velocidade com a
qual cada componente migra através do sistema.
Visão Geral da cromatografia
70

71. Separação cromatográfica
71

72. Importância da cromatografia
 Velocidade
 Poder de resolução
 Manuseio de pequenas quantidades de amostra (10-9 –
10-15 g)
 Simplicidade da técnica
72

73.  A amostra é dissolvida em um solvente e introduzida na
coluna cromatográfica preenchida com a fase estacionária (FE)
 Um solvente (FM) é bombeado com vazão constante e
desloca os componentes da mistura através da coluna. Esses
se distribuem entre as duas fases de acordo com suas
afinidades
 As substâncias com maior afinidade com a FE movem-se mais
lentamente. Já as substâncias com pouca afinidade com a FE
movem-se mais rapidamente.
 Ao sair da coluna, os componentes passam por um detector
que emite um sinal elétrico o qual é registrado, constituindo
um cromatograma.
Princípio da eluição cromatográfica
73

74. Princípio da eluição cromatográfica
74

75. Princípio da eluição cromatográfica
75

76. Princípio da eluição cromatográfica
76

77. Princípio da eluição cromatográfica 77

78. Princípio da eluição cromatográfica 78

79. 79

80. Componentes de um sistema HPLC
80

81. Componentes de um sistema HPLC
81

82.  Fase móvel;
 Bomba da fase móvel;
 Injetor;
 Coluna e termostato;
 Detector;
 Software de registro e tratamento de dados
Componentes de um sistema HPLC
82

83.  O sucesso da separação cromatográfica só é possível se for
aplicada uma FM correta a uma FE conveniente.
 A escolha da composição da FM leva em conta vários fatores,
tais como:
 Propriedades físico-químicas que afetam a solubilidade,
partição e adsorção e, portanto, a separação
 Propriedades físicas que afetam a possibilidade de
detecção dos componentes
 Propriedades físicas que dificultam o manuseio das
bombas, detectores ecoluna
 Propriedades que afetam a segurança (toxidez e
inflamabilidade)
 Custo
Fase móvel
83

84.  Os seguintes parâmetros devem ser considerados para uma escolha
adequada da FM:
 Viscosidade
 Compressibilidade
 Pressão de vapor
 Toxidez
 Índice de Refração
 Corte de UV (cut off) – espectro de absorção UV-VIS
 Miscibilidade de solventes e outras características importantes
 Força dos Solventes
Fase móvel
84

85. 85

86. 86

87.  Leva a fase móvel desde o reservatório até a
coluna;
 Alta reprodutibilidade e exatidão
 Vazão contínua sem pulso de 0,01ml /min - 10ml
/min
 Vazão constante independentemente da pressão
 Alta resistência à corrosão – inércia química a
solventes comuns
 Opera a altas pressões (6000 psi)
Bomba da fase móvel
87

88. Bombeamento isocrático
 A composição da fase móvel é mantida
constante durante toda análise cromatográfica.
 Utiliza-se apenas uma bomba.
88

89. Bombeamento Gradiente
 Alguma análises necessitam alteração da composição da
fase móvel, sem alteração da vazão total, com a
finalidade de diminuir tempo de análise e/ou melhorar a
separação dos componentes da amostra;
 baixa pressão: utiliza-se uma única bomba e a seleção
do solvente a ser utilizado dá-se através de válvula de
multiplas vias controladas pelo software do sistema.
 alta pressão, cada solvente tem uma bomba
específica.
89

90. 90

91.  Realizada com auxílio de válvulas especiais que
permitem introdução com grande precisão e
exatidão de volumes que variam, em geral, de 5
a 20 mcl.
Injetor – sistema de injeção da amostra 91

92. Coluna cromatográfica
 Os tubos das colunas são preenchidos com a fase estacionária
conveniente, geralmente sílica ou seus derivados, com
granulometria de 3, 5, 7 ou 10 mcm (em alguns casos, até de 1
mcm) de diâmetro médio.
 Devido a queda de pressão elevada nos tubos, as colunas são
relativamente curtas e de paredes espessas.
 COMPRIMENTO: 3 – 60 cm
 DIÂMETRO INTERNO: 0,2 – 8 mm
92

93. Mecanismos de separação
 Em função da fase estacionária utilizada tem-se
os seguintes mecanismos de separação:
 Adsorção
 Partição
 Troca iônica
 Exclusão
 Bioafinidade
93

94. Mecanismos de separação - Adsorção
 A fase estacionária é um sólido contendo grupos (sítios ativos)
que podem adsorver certas substâncias.
 Compostos com diferentes constantes de adsorção são
separados.
94

95. Mecanismos de separação - Partição
 A fase estacionária é um líquido depositado ou quimicamente ligado a um
suporte sólido.
 As moléculas dos componentes a serem separados se distribuem entre a fase
estacionária ligada e a fase móvel líquida de acordo com sua afinidade relativa;
 Compostos com diferentes constantes de partição são separados;
 A FM carrega as moléculas nela dissolvidas. Para reestabelecer o equilíbrio,
moléculas na FE passam para a FM e são arrastadas. Tem-se um equilíbrio
dinâmico em cada segmento da coluna. Como a FM está em contínuo
movimento, esta acaba retirando todas as moléculas da coluna.
95

96. Mecanismos de separação – Troca iônica
 A fase estacionária é uma resina catiônica ou
aniônica.
96

97. Mecanismos de separação – Por exclusão
 A fase estacionária é uma resina catiônica ou
aniônica.
 A separação é efetuada de acordo com o
tamanho das moléculas.
 A fase estacionária tem poros de tamanho
controlado
 Moléculas pequenas podem penetrar na maioria
dos poros e apresentam um maior tempo de
retenção
 Moléculas grandes movem-se rapidamente
através da coluna pois não entram nos poros
97

98. Mecanismos de separação – Bioafinidade
 Nessa técnica somente componentes que
possuem bioafinidade com a fase estacionária
são retidos (exemplo: isomeros)
98

99. Detectores
 Os principais detectores utilizados em HPLC são:
Índice de refração
Espectrofotometira UV-Visível
Fluorescência
Eletroquímico
Espectrometria de massa LC/MS
99

100. Detectores – Índice de refração
 No momento da passagem do analito pelo detector, pode ocorrer
uma alteração do índice de refração. Essa alteração em relação ao
valor da fase móvel livre de analito é detectada.
 A detecção só é possível quando o índice de refração do analito é
diferente do IR da fase móvel.
 Esse detector é normalmente utilizado quando os analitos não
absorvem na região de comprimento de onda do UV-VIS.
 Apresenta as seguintes desvantagens:
 baixa sensibilidade
 não permite a utilização em análises por gradiente (pois o IR
varia com a composição da fase móvel)
 temperatura deve ser constante (pois o IR varia com a
temperatura)
100

101. Detectores – UV/visível
 Baseia-se na absorbância da luz pelo analito ao passar pelo detector.
 É um detector seletivo pois só detecta os compostos que absorvem no
comprimento de onda em que o detector for ajustado.
 É o detector mais utilizado em HPLC pois grande maioria das
substâncias absorvem radiação
 UV. Exemplos de substâncias são: olefinas, aromáticos, compostos
contendo ligações C=O, C=S, N=O.
CONSIDERAÇÕES IMPORTANTES:
 A fase móvel utilizada não pode absorver no comprimento de onda
selecionado
 A pureza da fase móvel é extremamente importante (traços de
impurezas podem absorver intensamente no comprimento de onda
utilizado): UTILIZAR SOLVENTES GRAU HPLC
101

102. Detectores – UV/visível
Espectrofotométricos (REDE DE DIODOS – DIODE ARRAY)
 Nesse tipo de detector, toda luz passa pela cela. A luz emergente é
dispersada em uma grade holográfica e os comprimentos de onda
resultantes são focalizados em uma rede de fotodiodos (256 a 1024).
Assim, todo o espectro do componente pode ser armazenado. Com
o auxílio de um computador, pode-se reproduzir um cromatograma
para um determinado comprimento de onda ou produzir uma série
de espectros em intervalos de tempo fixos.
VANTAGENS EM RELAÇÃO AO DETECTOR UV-VIS
 No detector UV-VIS, seleciona-se o comprimento de onda que pode
não ser o mais adequado para todos os componentes da amostra.
Isso resulta na perda de sensibilidade de alguns componentes da
amostra.
102

103. 103

104. Detectores – Eletroquímicos
 Baseia-se na possibilidade de muitos compostos
serem oxidados ou reduzidos quando se aplica
um potencial elétrico.
 Em um processo eletroquímico, um par de
eletrodos é colocado na cela e um potencial
suficientemente elevado é aplicado provocando
uma reação de oxidação ou redução gerando
uma corrente que é medida em um detector
eletroquímico. A corrente gerada é proporcional
a concentração do composto.
104

105. Detectores – ELSD
evaporative light scattering detector
 Baseado na habilidade das partículas causarem espalhamento
(scattering) de fótons, quando elas atravessam um feixe de luz
policromática.
 O líquido efluente do HPLC é primeiro nebulizado e a mistura
aerosol resultante contendo as partículas dos analitos é dirigida a
um feixe de luz. As partículas causam espalhamento da luz. É gerado
um sinal, que é proporcional à massa presente, e independe da
presença ou ausência de grupos cromóforos, fluoróforos ou
eletroativos.
 Qualquer analito não volátil pode ser detectado.
 Pode ser usado acoplado a um espectrômetro de massa, para
fornecer uma análise completa da amostra.
105

106. Parâmetros cromatográficos
Tempo de retenção
 Por definição chamamos de TEMPO DE RETENÇÃO, de uma
substância ao tempo decorrido do instante em que a amostra foi
introduzida até o instante do máximo do pico;
 Na análise cromatográfica, mantido constantes a vazão da fase
móvel e a temperatura da coluna, o tempo de retenção é constante.
106

107. Pratos Teóricos
 Número indicativo da performance da coluna. É a medida da largura
do pico em relação ao seu tempo de retenção. É o parâmetro que
mais precisamente define a qualidade de um sistema
cromatográfico.
Parâmetros cromatográficos 107

108. 108

109. Resolução
 Fornece uma medida quantitativa da habilidade da coluna em
separar duas substâncias.
Parâmetros cromatográficos 109

110. 110

111. 111

112. HPLC
PRÁTICA
112

113. Análise Qualitativa
Análise Qualitativa em Controle de qualidade
 É normalmente efetuada através da comparação do
tempo de retenção ou retenção relativa dos analitos de
interesse com esses parâmetros de padrões. Tais análises
são realizadas com metodologias já estabelecidas.
Análise qualitativa em identificações não rotineiras
 Neste caso é importante conhecer o máximo da história
da amostra e utilizar detectores que auxiliam a
identificação da estrutura do composto, como detector
de espectrometria de massa.
113

114. Análise Quantitativa
Normalização de área (% em área)
Ai = área do composto i
ΣAi = somatória das áreas de todos componentes
Considera-se que todos os componente apresentam
resposta proporcional a sua concentração e que mesma
concentração de diferentes compostos resulte em áreas
iguais (o que dificilmente ocorre).
114

115. Análise Quantitativa
Normalização com área corrigida
Ai = área do composto i
Fi = fator de resposta do componente i
ΣAiFi = somatória das áreas de todos componentes multiplicadas pelos
respectivos fatores de resposta
É necessário conhecer todos os componentes da amostra
para determinação dos fatores de resposta de cada
componente
115

116. Testes Gerais
116

117. Determinação do ponto de fusão 117

118. Determinação da densidade
118

119. Determinação do índice de refração
119

120. Determinação da viscosidade
120

121. Poder rotatório ou rotação especifica
121

122. Perda por dessecação 122

123. Cinzas sulfatadas 123

124. Granulometria dos pós
124

125. Granulometria dos pós 125

126. Microbiologia
126

127. Microbiologia 127

128. Fármaco –
especificação para
testes críticos
• IMPUREZAS/PRODUTOS DE DEGRADAÇÃO
• CONCEITO CLASSIFICAÇÃO BCS/SCB
• TAMANHO DE PARTÍCULA
• POLIMORFISMO E ISOMERIA
• SOLVENTES RESIDUAIS
128

129. DMF – Drug master file
 Contém todos os dados do desenvolvimento e
fabricação dos lotes do IFA – “dossie do IFA”
 Fórmula estrutural
 Características físico químicas
 Processo de fabricação e solventes usados
 Polimorfos e isômeros
 Solubilidade
 Estabilidade
 Produtos de degradação/impurezas
 Métodos analíticos e validações
 Materiais de embalagem
129

130. Fármaco - Especificações
• Especificações farmacopéicas:
1.6. No caso de metodologia analítica descrita em farmacopéias ou
formulários oficiais, devidamente reconhecidos pela ANVISA, a metodologia
será considerada validada.
RDC 899/2003 – Validação analítica
 Entretanto...
Art. 18. O item 1.6 da Resolução – RE nº 899, de 29 de maio de 2003, passa a
vigorar acrescido dos itens 1.6.1 e 1.6.2:
“1.6.1. A metodologia analítica para a quantificação de produto de
degradação, mesmo que descrita em farmacopéias ou formulários oficiais,
deverá ser validada.
1.6.2. A metodologia analítica por HPLC para a quantificação de teor, mesmo
que descrita em farmacopéias ou formulários oficiais, deverá apresentar
pureza cromatográfica.”
CP 11/2012 – Produtos de degradação
130

131. Impurezas/Produtos
de degradação
131

132.  Impurezas (WHO – 2011):
 Substâncias químicas não desejáveis presentes no fármaco ou no produto acabado que
não tem valor terapêutico e podem ou não ser potencialmente prejudiciais à saúde;
 Impurezas de materiais de partida:
 Materiais usados na síntese do fármaco e incorporado como um elemento na estrutura
um intermediário ou do próprio fármaco. Tem estrutura e características químicas bem
definidas e conhecidas. Podem ou não ser produtos de degradação do fármaco.
 Impurezas Intermediárias ou de síntese:
 Materiais produzidos durante as etapas de sintese do fármaco e que sofre reações
quimicas adicionais antes de se tornar o próprio fármaco. Podem ou não ser produtos de
degradação do fármaco.
 Produtos de degradação:
 Impureza resultante de uma alteração química da substância ativa ocorrida durante a
fabricação e/ou armazenamento pelo efeito de, por exemplo, luz, temperatura, pH, água,
reações com o excipiente ou com a embalagem primária
Aplicável ao fármaco
Aplicável ao fármaco
Aplicável a fármaco e medicamento
132

133. Estabelecendo limites para impurezas:
1. Quais são as impurezas em potencial?
2. Quais são as impurezas que realmente ocorrem?
3. Quando especificar?
4. Quais os limites?
133

134. Material de partida
Intermediário
Fármaco
Produto acabado
Reagentes
Solventes
Catalisadores
Reagentes
Solventes
Catalisadores
Solventes?
Impurezas do
material de partida
Derivados
Derivados
Degradação
Interação com
excipientes
Interação com
excipientes
Potenciais Impurezas
1. Resíduo do material de partida
2. Resíduo dos intermediários
3. Impurezas no material de partida
4. Reagentes
5. Solventes
6. Catalisadores
7. Derivados da reação
8. Produtos de degradação
9. Reações fármaco-excipiente
10. Reações formulação-embalagem
Imprescindível: Conhecimento
das possíveis reações químicas
durante a síntese e dos
prováveis produtos de
degradação nas mais variadas
condições (ácido, base,
oxidação)!!!
134

135. Impurezas - Desenvolvimento
1. Possíveis:
 Realização de estudos de stress:
 Stress ácido
 Stress básico
 Stress por calor
 Stress por umidade
 Stress por oxidação
 Fotoestabilidade
2. Relevantes:
 Estudo de estabilidade acelerada
 Estudo de estabilidade longa duração
135

136. Possíveis – estudo de stress
Garantir degradação de 10-30% do ativo (evitar degradação secundária):
 Nem todas as condições vão gerar degradação:
pesquisa em literatura – após 7 dias, pode ser
considerado estável naquela condição (aumentar
concentração, p.ex. para garantir);
 Método deve “ver” a degradação (balanço de
massas) – indicativo de estabilidade;
 PD significativos (20% em área do total degradado)
deverão ser identificados e tratados como PD em
potencial;
136

137. 2. Relevantes:
 Estudo de estabilidade acelerada
 Estudo de estabilidade longa duração
Confirmam quais são as impurezas que realmente ocorrem no fármaco ou no
produto acabado:
 Utilizando a formulação definida
 Fabricado pelo processo produtivo proposto
 Embalagem primária definida
 Condições de armazenamento propostas
137

138. Impurezas no fármaco
1. Impurezas Orgânicas: Podem ser originárias do processo de fabricação
ou do armazenamento do fármaco. Podem ser identificadas ou não,
voláteis ou não e incluem as seguintes subclasses:
a. Materiais de partida: materiais usados na síntese do fármaco e incorporado
como um elemento na estrutura de um intermediário ou do próprio fármaco.
Tem estrutura e características químicas bem definidas e conhecidas;
b. Derivados (by-products):
c. Intermediários: Materiais produzidos durante as etapas de sintese do fármaco
e que sofre reações quimicas adicionais antes de se tornar o próprio fármaco;
d. Produtos de degradação: Impureza resultante de uma alteração química da
substância ativa ocorrida durante a fabricação e/ou armazenamento pelo efeito
de, por exemplo, luz, temperatura, pH, água, reações com o excipiente ou com
a embalagem primária
e. Reagentes, ligantes e catalisadores
f. Estereoisomeros: Compostos com mesma estrutura 2D, mas diferentes
orientações na estrutura 3D. Existem testes especificos nas monografias quando
ocorre este tipo de impureza.
138

139. Impurezas no fármaco
1. Impurezas Inorgânicas: Podem ser resultantes do processo produtivo.
São geralmente conhecidas e compreendem as seguintes subclasses:
a. Reagentes, ligantes e catalisadores
b. Metais pesados ou outros metais residuais
c. Sais inorgânicos
d. Outros materiais (filtros, carvão)
2. Solventes residuais: Líquidos orgânicos usados como veículo durante
a síntese do fármaco;
139

140. Impurezas/Produtos de degradação –
Especificações
 As especificações devem incluir:
 Impurezas/produtos de degradação:
 Especificação para cada impureza/PD identificado;
 Especificação para cada impureza/PD não identificado (≤
identification threshold);
 Total de impurezas/PD.
 Solventes residuais: Para todos os fármacos e controle no produto
acabado somente se a dose do mesmo for maior que 10 g por dia ou se
os limites no fármaco estiverem acima dos descritos nos guias
internacionais
 Impurezas inorgânicas: Somente nos fármacos e utiliza-se monografias
e especificações de capítulos gerais das farmacopéias.
140

141. Impurezas no fármaco
Solventes residuais
• Classes I e II: Tabelas do guia ICH Q3C(R4)
• Classe III: 5000 ppm ou controlado por perda por
secagem (NMT 0,5%)
141

142. Impurezas/Produtos de degradação -
Especificações
 Resultados devem ser apresentados
numericamente e não em termos gerais (“cumpre”
ou “dentro do limite”);
 Qualquer impureza/PD maior que o limite de
reporte e para o total de impurezas/PD:
 Abaixo de 1.0%: duas casas decimais;
 Acima de 1.0%: uma casa decimal;
 Impurezas/PD devem ser designados por códigos
ou pelo seu tempo de retenção;
142

143. Fluxograma de
decisão
FÁRMACO
143

144. 144

145. Impurezas/produtos de degradação -
Especificações
• Limites de qualificação maiores ou menores que os anteriormente descritos
podem ser adequados em alguns casos, dependendo do racional científico e do
nível de preocupação com o produto de degradação:
Aceitação de limites maiores: Produtos de
degradação que também são metabólitos;
Necessidade de limites menores: Impurezas
genotóxicas ou produtos de degradação que são
reconhecidamente associados à reações adversas;
145

146. Impurezas no fármaco - Monografias
 Monitorar as impurezas descritas no DMF, além das
impurezas descritas na monografia USP do fármaco.
Porque?
 Diferentes fabricantes de fármacos = diferentes rotas de síntese
 Monografia é baseada em um fabricante e não nos indica qual rota
de síntese utilizada;
 Impurezas controladas dão pistas de qual rota de síntese;
 Nem sempre as impurezas descritas na monografia são relevantes
para o fármaco em questão (se não são produtos de degradação
conhecidos);
 Monografia não controla todos os produtos de
degradação/impurezas para todos as rotas de síntese disponíveis:
podem haver impurezas, reagentes e solventes diferentes (WHO,
2011);
146

147. Impurezas
genotóxicas
147

148. Alertas estruturais 148

149.  Consideradas inseguras em qualquer nível
 Não há guia específico na legislação brasileira;
 Guias FDA e EMA: divergências entre conceitos
 ICH: em processo de harmonização – Término: 2013
 Guideline Mais Recente (EMA, Setembro/2010): Especificações
(limites) conforme o TTC (Threshold of Toxicological Concern)
Risco aceitável de desenvolvimento de câncer ao longo da vida
 Água Potável: 1 em 106
 Benzeno (1,5 µg/dia): 1 em 105
 Genotóxicos em Medicamentos: 1 em 105
Limites conforme o TTC
1,5 µg/dia a 120 µg/dia
(depende da posologia do medicamento)
149

150. Exceções ao TTC
Modelo de Análise de Risco (Câncer): inapropriado ou irrelevante
 Medicamentos oncológicos
 Medicamentos para tratamento emergencial (condições de risco à
vida)
 Tratamentos paliativos (expectativa de vida < 5 anos)
 Impurezas com exposição significativa a partir de outras fontes
(alimentos, metabólitos, etc)
 Impureza e API com a mesma estrutura descrita como alerta – não é
necessário controle como genotoxina
Exceções são tratadas caso-a-caso: Não há recomendações
específicas
150

151. Outras definições – USP 34
• Impurezas ordinárias: Espécies no fármaco ou produto acabado que não
tem atividade biológica não desejável significativa nas quantidades
presentes. Podem ser originadas durante a síntese, preparação ou
degradação do fármaco ou de outras substâncias;
• Substâncias desconhecidas: Impurezas que são de fonte externa ou
desconhecida ao processo de fabricação e que são introduzidas por
contaminação ou adulteração. Estas substâncias não podem ser
antecipadas e não são cobertas pelas monografias oficiais, constituindo
um risco à qualidade da substância.
• Substâncias relacionadas: Substâncias estruturalmente relacionadas ao
fármaco. Podem ser:
– Impurezas identificadas ou não identificadas originárias do processo de síntese,
como materiais de partida, intermediários ou by-products que não aumentam com o
armazenamento ou tempo;
– Produtos de degradação identificados ou não identificados que resultam do
processo de síntese do fármaco ou de fabricação do produto acabado ou durante seu
armazenamento;
151

152. Outras definições – USP 34
• Componentes concomitantes: Não são considerados impurezas para a
farmacopéia, desta forma, quando existentes na substância, tem limites
individuais . Exemplos: isômeros opticos e geométricos e antibióticos
que são misturas. Não podem ter efeito tóxico para serem considerados
componentes concomitantes;
• Polimorfos: Formas cristalinas diferenciadas de um mesmo fármaco.
Podem incluir produtos de solvatação ou hidratação
(pseudopolimorfos) e formas amorfas. Não são impurezas por definição,
porém a forma polimórfica é crítica para a caracterização do fármaco;
152

153. Solubilidade e o
Conceito
Classificação BCS
153

154. Conceitos – BCS ou SCB
SOLUBILIDADE:
 Solubilidade de um fármaco (BCS): disolução da dosagem mais
alta (em tomada única) de um medicamento em 250 mL de uma
solução tampão de pH entre 1,0 e 8,0.
 Fármaco altamente solúvel: relação dose/solubilidade é menor
ou igual a 250;
PERMEABILIDADE:
 Um fármaco de alta permeabilidade: biodisponibilidade
absoluta é maior que 90% na ausência de instabilidade no trato
gastrintestinal ou quando este parâmetro é determinado
experimentalmente.
ANVISA: Recomendações para realização de ensaios de dissolução para formas farmacêuticas sólidas orais de liberação imediata
154

155. Classificação BCS e exemplos
155
http://www.contractpharma.com/contents/displayImage/5605/

156. Determinando a solubilidade
1. Utilizar no mínimo tampões pH pH 1,2; 4,6 e 6,8
a. Utilizar 3 replicatas
b. Deve ter coeficiente de variação ≤ 5% entre as replicatas
2. Shake flask;
3. Avaliação da estabilidade do fármaco na duração do
estudo e nos meios testados
4. Método indicativo de estabilidade – farmacopeico ou
validado
156

157. Tamanho de
partícula
<429> LIGHT DIFFRACTION MEASUREMENT OF PARTICLE SIZE
157

158. Tamanho de partícula, biodisponibilidade e
dissolução
Tamanho de partícula importante para
fármacos de baixa solubilidade – BCS
classe II ou classe IV.
Deve ser definido antes do estudo de BE e
mantido para o biolote e lotes produtivos.
158

159. Descrição do tamanho de partícula no
produto
159

160. Polimorfismo e
isomeria
<941> CHARACTERIZATION OF CRYSTALLINE AND PARTIALLY
CRYSTALLINE SOLIDS BY X-RAY POWDER DIFFRACTION (XRPD)
160

161. Definição de polimorfos
 É a habilidade de uma substância existir como
duas ou mais fases cristalinas que tem diferentes
arranjos ou conformações das moléculas em sua
estrutura cristalina.
 Mesma entidade quimica diferentes formas;
 Associados a diferentes propriedades físicas do fármaco
 Polimorfismo pode interferir na qualidade, eficácia
e segurança do medicamento
161

162. Tipos de polimorfismo
 Formas polimórficas:
 Formas cristalinas com diferentes arranjos ou conformações das
moléculas na estrutura cristalina;
 Formas amorfas consistindo de arranjos desordenados das moléculas que
não possuem uma estrutura cristalina distinguivel;
 Solvatos consistindo de formas contendo quantidades estequimétricas ou
não de solventes incorporados. Podem ser hidratos (água) ou solvatos
(outros solventes)
162

163. Importância do polimorfismo
 Diferentes formas polimórficas tem
diferentes propriedades quimicas e
físicas:
 Ponto de fusão, Reatividade
quimica, Solubilidade aparente,
Taxa de dissolução,
Propriedades opticas e
mecânicas, Pressão de vapor,
Densidade
 Estas propriedades tem um efeito
direto na habilidade de processar
e/ou fabricar o fármaco ou o
produto acabado:
 Estabilidade do produto
acabado, Dissolução,
Bioequivalência
5-Methyl-2-[(2-nitrophenyl)amino]-3-
thiophenecarbonitrile has been crystallized in ten
polymorphs: The structure of themolecule is shown in
the figure. The systemhas been named ROY for its
red,orange, andyellowcrystal colors.
Thedifferentpolymorphs arenamedas, yellowprisms (Y),
red prisms (R), orange needles (ON), orange plates
(OP), yellowneedles (YN), orange-red plates (ORP), and
red plates (RPL).
163

164. Caracterização de polimorfos
 XRD – caracterização completa e absoluta
 Microscopia
 Análise térmica
 Termogravimetria
 Análise térmica diferencial (DTA)
 Calorimetria diferencial exploratória (DSC)
 IV
 Raman
 NMR no estado sólido
164

165. Isomeria – Carbono Quiral
165

166. Solventes
Residuais
<467> Residual Solvents
166

167. Classificação dos solventes residuais
<467> USP e ICH Q3C(R5)
Classe 1 – Solventes a serem evitados
 Conhecidamente ou com fortes suspeitas de
carcinogenicidade e danos ambientais;
Classe 2 – Solventes a serem limitados
 Não genotóxicos, carcinogênicos ou causadores de toxicidade
irreversível, como neurotoxicidade ou teratogenicidade;
Classe 3 – Solventes com baixo potencial tóxico
 Solventes com baixo potencial toxico aos humanos, no qual
não são necessários limites baseados na segurança à saúde.
167

168. • Solventes residuais:
− Rota de síntese do fabricante x especificação descrita
− Método validado ou farmacopeico
− Skip test: Prova de que o processo está sob controle e não gera
fármaco com solvente significativo (≥ 10 ppm)
168

169. Excipientes
SELEÇÃO E APROVAÇÃO
169

170. Excipientes
 Grau?
 Farmacêutico, Técnico, Reagente
 Especificações?
 Farmacopéicas (testes adicionais?)
 In-house
 Solventes residuais – (ICH Q3C7 ou USP8 <467>)
 Origem dos excipientes?
 Animal (EET)/vegetal
 Processo com reagentes de origem animal?
 Óleos de plantas: aflatoxinas
 Procedimento de qualificação/requalificação dos fornecedores?
170

171. Solventes Residuais
• Declaração dos fabricantes sobre os solventes
utilizados:
− Only Class 3 solvents are likely to be present. Loss on drying is less
than 0.5 percent.
− Only Class 2 solvents X and Y are likely to be present. All are below
the Option 1 limit. (Here the excipient manufacturer would name the
Class 2 solvents represented by X and Y)
− Only Class 2 solvents X and Y and Class 3 solvents are likely to be
present. Residual Class 2 solvents are below the Option 1 limit and
residual Class 3 solvents are below 0.5 percent.
− No Class 1, Class 2, Class 3, or other solvents are used.
• Abaixo da opção 1 da USP não é necessário testes no
produto acabado desde que se utilizem menos de 10 g
do produto por dia
171

172. Materiais de
embalagem
172

173. Materiais de embalagem
173

174. Materiais de embalagem – FDA
 Adequabilidade em termos de:
 Proteção
 Compatibilidade
 Segurança
 Performance
 Dependente da forma farmacêutica e via de administração
 Avaliação do risco
174

175. Recipientes para medicamentos e correlatos
6.1 - Recipientes de vidro
6.1.1 - Resistência hidrolítica ou alcalinidade
6.1.2 - Arsênio
6.1.3 - Capacidade volumétrica total
6.2 - Recipientes plásticos
6.2.1 - Recipientes e correlatos plásticos
6.2.1.1 - Recipientes de polietileno
6.2.1.2 - Recipientes de polipropileno
6.2.1.3 - Recipientes de poli(tereftalato de etileno) e poli(tereftalato de etileno glicol)
6.2.2 - Tampas de elastômero
6.2.3 - Recipientes de plástico - testes de desempenho
6.2.3.1 - Recipientes de múltiplas unidades para cápsulas e comprimidos
175

176. 6.2.3.2 - Recipientes de unidade simples e dose unitária para cápsulas e comprimidos
6.2.3.3 - Recipientes de dose múltipla e de dose unitária para líquidos
6.2.3.4 - Teste de transmissão de luz
6.2.4 - Biocompatibilidade
6.2.4.1 – Recipientes plásticos e tampas de elastômeros
6.2.4.2 - Correlatos
6.2.4.3 - Testes in vitro, testes in vivo e designação de classe para plásticos e outros
polímeros
6.2.4.4 - Biocompatibildade de correlatos
6.2.4.5 - Guia para a seleção de plástico e outros polímeros
6.2.5 - Testes de reatividade biológica in vitro
6.2.6 - Testes de reatividade biológica in vivo
Recipientes para medicamentos e correlatos 176

177. Referências USP
 <87> Biologic reactivity tests, in vitro
 <88> Biologic reactivity tests, in vivo
 <381> Elastomeric closures for injections
 <660> Containers – glass
 <661> Containers – plastic
 <670> Auxiliary packaging components
 <671> Containers – Performance testing
 <1031> Biocompatibility
177

178. Qualificação do
fornecedor
• SKIP LOT E SKIP TEST
• ANÁLISE REDUZIDA DE EXCIPIENTES E INSUMOS ATIVOS
• RDC 17/2010
178

179. 179

180. Produto acabado
• FORMAS FARMACÊUTICAS
• TESTES GERAIS DE CONTROLE DE QUALIDADE
• TERCEIRIZAÇÃO DE CONTROLE DE QUALIDADE
• ESTABILIDADE
• TESTES OBRIGATÓRIOS POR FORMA FARMACÊUTICA
180

181. Principais formas farmacêuticas
 Sólidos:
 Cápsulas moles
 Cápsulas duras
 Comprimidos
 Supositórios e óvulos
 Pós para suspensão
 Pós liófilos para injetáveis
 Semi-sólidos:
 Cremes
 Pomadas
181

182.  Líquidos:
 Soluções
 Suspensões
 Emulsões
 Sprays Nasais
 Inalatórios orais
 Pó seco pré medido (DPI)
 Medidos pelo device (MDI)
Principais formas farmacêuticas
182

183. Controle de
qualidade
RDC 17/2010
183

184. Testes gerais – Produto acabado
 Peso médio
 Volume
 Dureza
 Friabilidade
 Desintegração
 Dissolução
 Uniformidade de doses
unitárias
• Teor
• Produtos de degradação
184

185. Determinação de peso 185

186. Determinação de volume
186

187. Determinação de Dureza
187

188. Determinação de Friabilidade
188

189. Determinação de Desintegração
189

190. Impurezas/produtos
de degradação
190

191. Impurezas no produto acabado
1. Impurezas do fármaco: não aumentam durante o tempo, não
são controladas, exceto se também forem produtos de
degradação;
2. Produtos de degradação exclusivamente dos excipientes:
verificados em estudos de stress e estabilidade do placebo – não
são controlados;
3. Produtos de degradação provenientes de interação com o
fármaco – controlados:
 Interação fármaco-excipiente: Verificado em estudos de stress
e nos estudos de estabilidade
 Interação fármaco-material de embalagem: Verificado nos
estudos de estabilidade
4. Extraíveis e lixiviáveis: Não cobertos pelo guia ICH,
especialmente importantes para soluções – capítulo geral da
USP – recente: recall Pfizer
191

192. Extraíveis e lixiviáveis – referências USP
192

193. Produtos de degradação no produto acabado
193

194.  Reporting threshold – limite de reporte:
Limite máximo no qual uma impureza não necessita ser reportada
(limite de corte);
 Identification threshold – limite de identificação:
Limite máximo no qual uma impureza não necessita ser identificada
(estruturalmente);
 Qualification threshold – limite de qualificação:
Limite máximo no qual uma impureza não necessita de qualificação;
 Qualificação: Processo de aquisição e avaliação de dados que
estabeleçam a segurança biológica de uma impureza individual ou
de um perfil de impurezas em um nível especificado;
• Teste de AMES, mutações pontuais, aberrações cromossomais
194

195. Exemplo
195

196. Fluxograma de
decisão
PRODUTO ACABADO
196

197. 197

198. Impurezas/produtos de degradação – Especificações –
FDA - ANDAs
 “Se o limite para uma impureza/produto de degradação especificado não existir
na USP, é recomendado que a impureza seja qualificada por comparação às
quantidades observadas da impureza no produto de referência”;
 Localmente para o produto acabado: Formulações diferentes entre medicamento teste e referência
dão origem à produtos de degradação diferentes.
 “Uma impureza/PD é considerado qualificado quando cumpre com uma das
seguintes condições:
 O nível observado e o critério de aceitação proposto não excede o nível observado para o produto
de referência
 É um metabolito significativo do fármaco;
 O nível observado e o critério de aceitação proposto estão adequadamente justificados por
literatura;
 O nível observado e o critério de aceitação proposto não excedem os níveis que foram avaliados
em estudos de toxicidade.”
198

199. Método de
dissolução
199

200. O que é o teste de dissolução?
Teste padronizado que mede a porção do fármaco:
1. Liberada da matriz da forma farmacêutica e
2. Dissolvida no meio de dissolução em condições
controladas durante um período de tempo definido;
Em termos simples:
1. A forma farmacêutica se desintegra;
2. O fármaco então se dissolve no meio;
 Quanto mais lenta a desintegração da forma farmacêutica,
mais lenta a dissolução.
200

201. Importância do teste de dissolução
 Prever o desempenho in vivo da formulação;
 Garantir a qualidade lote a lote do medicamento;
 Orientar o desenvolvimento de novas formulações;
 Assegurar a uniformidade da qualidade e do desempenho do
medicamento depois de determinadas alterações;
 Reflexo da qualidade da formulação!!!!
201

202. 202

203. Componentes de um teste de dissolução
 Meio de dissolução;
• Volume de meio de dissolução;
• Deaeração do meio de dissolução;
 Dissolutor;
 Equipamento de quantificação (UV, HPLC);
 Aparatos e acessórios (ex. Sinker);
• Velocidade de agitação do aparato;
 Filtros;
 Tipos de dissolução, tempo de duração ou de coleta;
 Justificativa para o valor de “Q”
203

204. Meio de dissolução
Testar meios de dissolução na faixa de pH fisiológico:
 pH 1,2 a 6,8 (liberação imediata).
 pH 1,2 a 7,5 (liberação modificada)
Meio ideal:
 Não utilizar surfactantes
• Permitido utilizar para atingir “sink condition (3 x volume mínimo
de solvente para completa solubilização da dose)
 Não utilizar solventes orgânicos;
 Água: problemas de tamponamento e variação de qualidade;
 Meios típicos: HCl diluído, tampões na faixa fisiológica, fluido gástrico
ou intestinal simulado (com ou sem enzimas), água e surfactantes
(ionicos, cationicos e neutros);
204

205. Equipamento e aparatos
 Aparato 1 (cesta)
 Aparato 2 (pás)
 Aparato 3 (cilindro reciprocador)
 Aparato 4 (célula flow-through)
 Aparato 5 (pá sobre disco)
 Aparato 6 (cilindro)
 Aparato 7 (holder reciprocador)
Escolha depende da forma
farmacêutica e da finalidade do teste.
205

206. Aparato 1 - cesta
206

207. Aparato 2 - pá
207

208. Aparato – velocidade de agitação
 Para cápsulas ou comprimidos:
 Aparato 1 (cesta): 100 rpm
 Aparato 2 (pás): 50 rpm ou 75 rpm (se formar cone) ou 100 rpm
(comprimidos de liberação modificada)
 Outras velocidades de agitação podem ser usadas se justificadas
(refletem melhor o comportamento “in vivo” ou tornam o método
mais discriminativo);
 Abaixo de 25 rpm ou acima de 150 rpm: Inapropriados por conta de
efeitos hidrodinamicos e de turbulencia
 Para suspensões:
 Aparato 2 (pás): 25 ou 50 rpm
 Outras velocidades de agitação podem ser usadas se justificadas;
208

209. Formação de cone - exemplo
Durante todo o teste/desenvolvimento do método de dissolução, a observação e o
senso crítico do analista são fundamentais. O método deverá ser reprodutível e isso
envolve manter o ambiente controlado.
209

210. Filtros
Filtração é etapa essencial do método de dissolução:
 Amostras devem ser filtradas imediatamente:
 Param o processo de dissolução;
 Primeira porção do filtrado deve ser descartada
(saturação do filtro)
 Filtro não pode reter o fármaco
 Validar usando padrão diluido filtrado e centrifugado –
variação esperada máx. 2,0%
210

211. 211

212. Determinação da uniformidade de dose unitária 212

213. Terceirização de
controle de
qualidade
RDC 25/2007
213

214.  Art. 46. No caso de contrato de análise, a aprovação final para liberação do produto para comercialização deve ser realizada
pela pessoa designada da Garantia da Qualidade da empresa contratante;
Contratante:
 Art. 48. O contratante é responsável por avaliar a competência do contratado em realizar corretamente os processos ou
testes contratados, pela aprovação das atividades do contrato, bem como por assegurar em contrato que os princípios de
BPF descritos nesta resolução sejam seguidos.
 Art. 49. O contratante deve fornecer ao contratado todas as informações necessárias para a realização das operações
contratadas de forma correta, de acordo com o registro do produto e quaisquer outras exigências legais.
Contratada:
 Art. 52. É vedado ao contratado terceirizar qualquer parte do trabalho confiado a ele no contrato.
214

215. Produto acabado -
Estabilidade
RDC 01/2005
215

216. RDC 01/2005 - Condições
216

217. RDC 01/2005 - Condições
Número de lotes a serem incluídos no estudo
 3 lotes para registro
 1 ou 3 lotes para qualquer alteração pós registro (de acordo com a RDC 48/2009);
 Acompanhamento:
 1 lote/ano para fabricação > 15 lotes/ano
 1 lote a cada 2 anos para fabricação < 15 lotes/ano
Critério de avaliação do estudo:
 Até 6 meses de acelerada ou 12 meses de longa duração variação de teor < 5% em relação ao valor
inicial – caso contrário só 12 meses de estabilidade concedida;
 Demais testes dentro da especificação (dissolução até S2);
 Após 12 meses, resultados dentro da especificação
Concessão do registro:
 Com estabilidade acelerada completa (6 meses): Concessão de prazo de validade provisório de 24 meses
217

218. Testes obrigatórios para a
forma farmacêutica de
acordo com a RE 01/2005
218

219. Sólidos – testes obrigatórios
 Aparência
 Teor do princípio ativo e método analítico correspondente
 Quantificação de produtos de degradação e método analítico
correspondente
 Limites microbianos
 Dissolução
 Dureza
219

220. Suspensões – testes obrigatórios
 Teor do princípio ativo e método analítico correspondente
 Quantificação de produtos de degradação e método analítico correspondente
 Limites microbianos
 pH
 Sedimentação pós-agitação em suspensões
 Perda de peso em suspensões de base aquosa (forma final)
220

221. Semi-sólidos – testes obrigatórios
 Teor do princípio ativo e método analítico correspondente
 Quantificação de produtos de degradação e método analítico
correspondente
 Limites microbianos
 pH (base aquosa)
 Separação de fase em emulsões e cremes
 Perda de peso em semi-sólidos de base aquosa
221

222. Líquidos – testes obrigatórios
 Teor do princípio ativo e método analítico correspondente
 Quantificação de produtos de degradação e método analítico
correspondente
 Limites microbianos
 pH
 Claridade em soluções (limpidez da solução)
 Perda de peso em líquidos de base aquosa
222

223. Validação de
metodologia
analítica
223

224. O que é validação?
• Ato documentado que atesta que qualquer
procedimento, processo, equipamento, material,
atividade ou sistema realmente e consistentemente
leva aos resultados esperados;
– RDC 17/2010 – Boas Práticas de Fabricação
• Process of defining an analytical requirement, and
confirming that the method under consideration has
performance capabilities consistent with what the
application requires.
– Eurachem: Fitness for purpose of analytical methods
224

225. Porque validar?
• Demonstrar que o método é apropriado para a
finalidade pretendida, ou seja, a determinação
qualitativa, semi-quantitativa e/ou quantitativa de
fármacos e outras substâncias em produtos
farmacêuticos.
– RDC 899/2003 – Validação de métodos analíticos
• A validação é uma parte essencial de Boas Práticas
de Fabricação (BPF), sendo um elemento da garantia
da qualidade associado a um produto ou processo
em particular.
– RDC 17/2010 – Boas Práticas de Fabricação
225

226. Quando validar?
• Os métodos de controle de qualidade devem ser validados antes de
serem adotados na rotina, levando-se em consideração as instalações e
os equipamentos disponíveis.
– Parágrafo único. Os métodos analíticos compendiais não requerem validação,
entretanto antes de sua implementação, devem existir evidências documentadas
de sua adequabilidade nas condições operacionais do laboratório.
– RDC 17/2010 – Boas Práticas de Fabricação
• No caso de metodologia analítica descrita em farmacopéias ou
formulários oficiais, devidamente reconhecidos pela ANVISA, a
metodologia será considerada validada.
– RDC 899/2003 – Validação analítica
226

227. 227

228. Quando revalidar?
• A metodologia analítica deverá ser revalidada nas seguintes
circunstâncias:
– mudanças na síntese da substância ativa,
– mudanças na composição do produto acabado,
– mudanças no procedimento analítico.
– Outras mudanças podem requerer validação dependendo da sua natureza.
– RDC 899/2003 – Validação de métodos analíticos
• Alterações de formulação (excipiente, sabor, cor), alteração de
especificações e métodos, inclusão de novo fabricante do fármaco ou
alterações na sua rota de síntese, inclusão de nova concentração ou
forma farmacêutica do medicamento,
– RDC 48/2009 – Alterações pós registro
228

229. Responsáveis pela validação?
Responsável Técnico
assegurar a realização dos programas de validação
Responsável pelo Controle de Qualidade
assegurar que sejam feitas as validações necessárias, inclusive a validação
dos métodos analíticos e calibração dos equipamentos de controle
Responsável pela Garantia da Qualidade
assegurar o correto cumprimento das atividades de validação
RDC 17/2010 – Boas Práticas de Fabricação
229

230. Como validar?
Qualificação
•Conjunto de ações realizadas para atestar e documentar que quaisquer instalações, sistemas e equipamentos estão propriamente instalados e/ou funcionam
corretamente e levam aos resultados esperados. A qualificação é freqüentemente uma parte da validação, mas as etapas individuais de qualificação não constituem,
sozinhas, uma validação de processo;
Plano mestre
de validação
•Estabelece as estratégias e diretrizes de validação adotadas pelo fabricante. Ele provê informação sobre o programa de trabalho de validação, define detalhes,
responsabilidades e cronograma para o trabalho a ser realizado;
Protocolo de
validação
•Descreve as atividades a serem realizadas na validação de um projeto específico, incluindo o cronograma, responsabilidades e os critérios de aceitação para a
aprovação de um processo produtivo, procedimento de limpeza, método analítico, sistema computadorizado ou parte destes para uso na rotina
Validação
•Deve garantir, por meio de estudos experimentais, que o método atenda às exigências das aplicações analíticas, assegurando a confiabilidade dos resultados. Para
tanto, deve apresentar especificidade, linearidade, intervalo, precisão, sensibilidade, limite de quantificação, exatidão, adequados à análise.
Relatório de
validação
•Documento no qual os registros, resultados e avaliação de um programa de validação são consolidados e sumarizados. Pode também conter propostas de melhorias;
230

231. Requisitos prévios para validação
Qualificação e calibração de equipamentos:
1.9. Para a garantia da qualidade analítica dos resultados, todos os
equipamentos utilizados na validação devem estar devidamente
calibrados e os analistas devem ser qualificados e adequadamente
treinados (RDC 899/2003);
• qualificação: conjunto de ações realizadas para atestar e documentar que
quaisquer instalações, sistemas e equipamentos estão propriamente
instalados e/ou funcionam corretamente e levam aos resultados esperados
(RDC 17/2010);
• calibração: conjunto de operações que estabelece, sob condições
especificadas, a relação entre os valores indicados por um instrumento ou
sistema de medição ou valores representados por uma medida materializada
ou um material de referência, e os valores correspondentes das grandezas
estabelecidos por padrões (RDC 17/2010);
231

232. Requisitos prévios para validação
Treinamento dos analistas:
1.9. Para a garantia da qualidade analítica dos
resultados, todos os equipamentos utilizados na
validação devem estar devidamente calibrados e os
analistas devem ser qualificados e adequadamente
treinados (RDC 899/2003);
232

233. Plano mestre de validação
• Deve conter os elementos chave do programa de validação.
Deve ser conciso e claro, bem como conter, no mínimo:
I. uma política de validação;
II. estrutura organizacional das atividades de validação;
III. sumário/relação das instalações, sistemas, equipamentos e
processos que se encontram validados e dos que ainda deverão
ser validados (situação atual e programação);
IV. modelos de documentos (ex: modelo de protocolo e de relatório)
ou referência a eles;
V. planejamento e cronograma;
VI. controle de mudanças; e
VII. referências a outros documentos existentes.
– RDC 17/2010 – Boas práticas de fabricação
233

234. Protocolo de validação
• Devem incluir, no mínimo, as seguintes informações:
I. objetivos do estudo;
II. local/planta onde será conduzido o estudo;
III. responsabilidades;
IV. descrição dos procedimentos a serem seguidos;
V. equipamentos a serem usados, padrões e critérios para produtos e
processos relevantes;
VI. tipo de validação;
VII. processos e/ou parâmetros;
VIII. amostragem, testes e requisitos de monitoramento; e
IX. critérios de aceitação.
– RDC 17/2010 – Boas práticas de fabricação
234

235. Processos/Parâmetros da validação
• No caso de metodologia analítica não descrita em farmacopéias ou
formulários oficiais, devidamente reconhecidos pela ANVISA, a
metodologia será considerada validada, desde que sejam avaliados os
parâmetros relacionados a seguir,
– Especificidade e Seletividade
– Linearidade
– Intervalo
– Precisão
– Limite de detecção (sensibilidade)
– Limite de quantificação
– Exatidão
– Robustez
– RDC 899/2003 – Validação de métodos analíticos
235

236. Categoria Finalidade
I
Testes quantitativos para a determinação do princípio ativo em
produtos farmacêuticos ou matérias–primas
II
Testes quantitativos ou ensaio limite para a determinação de
impurezas e produtos de degradação em produtos farmacêuticos
e matérias-primas
III
Testes de performance (por exemplo: dissolução, liberação do
ativo, etc)
IV Testes de identificação
Categorias de testes 236

237. Ensaios necessários por categoria
Parâmetro Categoria I
Categoria II
Categoria
III
Categoria
IV
Quantitativo Ensaio Limite
Especificidade Sim Sim Sim * Sim
Linearidade Sim Sim Não * Não
Intervalo Sim Sim * * Não
Precisão
Repe Sim Sim Não Sim Não
Repro ** ** Não ** Não
Limite de detecção Não Não Sim * Não
Limite de quantificação Não Sim Não * Não
Exatidão Sim Sim * * Não
Robustez Sim Sim Sim Não Não
* pode ser necessário, dependendo da natureza do teste específico.
** se houver comprovação da reprodutibilidade não é necessária a comprovação da Precisão Intermediária.
237