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UNIVERSIDADE FEDERAL DE ALAGOAS
CENTRO DE CIÊNCIAS AGRÁRIAS
PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM AGRONOMIA “PRODUÇÃO VEGETAL”
Rio Largo/AL, quarta-feira, 3 de agosto de 2022
Acadêmico: CRISTIAN BERNARDO
Professor: Dr. JOÃO CORREIA
Viabilidade de sementes de Libidibia ferrea (Mart. ex Tul.)
L.P. Queiroz var. ferrea avaliada pelo teste de tetrazólio
Sara Monaliza Costa Carvalho, Salvador Barros Torres, Clarisse Pereira Benedito, Narjara
Walessa Nogueira, Antônia Adailha Torres Souza, Maria Lilia de Souza Neta.
Journal of Seed Science v.39, n.1, p.007-012, 2017
http://dx.doi.org/10.1590/2317-1545v39n1163784
Altura média de 20-30 metros.
Fruto do tipo legume com ~8x2cm,
achatada de casca dura, marrom
escuro. Para extrair as sementes é
necessário quebrar com martelo
Sementes com ~0,7cm e pretas
Árvore muito utilizada em paisagismo
urbano, tem o tronco característico,
liso branco com manchas. Propicia boa
sombra e desenvolvimento rápido.
Libidibia ferrea [Fabaceae]
Caesalpinia ferrea
Fonte:
Imagens
da
internet.
?
SEMEAR UMA
SEMENTE
PLANTAR
UM CLONE
20
DIAS
Fonte:
Imagens
da
internet.
Teste bioquímico;
Indica ou ‘mede’ o processo de
respiração das células vivas dos
tecidos da semente;
Manchas os tecidos vivos de vermelho;
Pode estimar a viabilidade de um lote
de sementes em um ponto no tempo.
Teste de Tetrazólio [TZ-Cl-]
2,4,5 Cloreto de Trifenil tetrazólio
Fonte:
Imagens
da
internet.
Teste de Tetrazólio [TZ-Cl-]
O teste se baseia na atividade das enzimas desidrogenases, particularmente a Malato Desidrogenase, que
reduz o sal de tetrazólio nos tecidos vivos das sementes, onde íons de H+ são transferidos para o referido sal.
Fonte:
Imagens
da
internet.
Limitações do teste
Fonte:
Imagens
da
internet.
Tempo , temperatura e concentração de TZ Exposição do tecido Avaliação
Nome Científico Nome Vulgar Referência (ANO)
Copaifera langsdorffii (Fabaceae) Copaíba, pau-de-óleo...
Fogaça et al. (2011)
Schizolobium parahyba (Fabaceae) Guapuruvu, umbela, faveira...
Ceiba speciosa (Malvaceae) Paineira Lazarotto et al. (2011)
Palicourea rigida (Rubiaceae) Gritadeira, chapéu de couro... Fava & Albuquerque (2013)
Enterolobium contortisiliquum (Fabaceae) Tamboril, orelha-de-macaco... Nogueira et al. (2014)
Eugenia uniflora (Myrtaceae) Pitanga Kaiser et al. (2014)
Annona cherimola (Annonaceae) Graviola Gimenez et al. (2014)
Cassia leptophylla (Fabaceae) Falso-babatimão Garlet et al. (2015)
Erythrina velutina (Fabaceae) Mulungu, suinã, canivete... Cunha & Gomes (2015)
Simira gardneriana (Rubiaceae) --------------- Oliveira et al. (2016)
Extraído e adaptado.
PESQUISAS DESENVOLVIDAS PARA VÁRIAS ESPÉCIES FLORESTAIS
Estabelecer um procedimento
adequado para a realização de um
teste de tetrazólio em sementes de
Libidibia ferrea.
Objetivo
?
Laboratório de Análise de Sementes
(LAS) do Centro de Ciências Agrárias
(CCA) da UFERSA
Material e Métodos
Centro de Referência para Recuperação de
Áreas Degradadas (CRAD) da Universidade
Federal do Vale do São Francisco
(UNIVASF). Fazenda Cacimba Nova/
Conceição/PB - Junho de 2012.
25 oC
50 %UR
3 Anos
Dessecador
Material e Métodos
Teor de Água – Método de Estufa (RAS, 2009)
Estufa de secagem
105oC/24hs
Balança analítica
0,001g
Cadinhos de Al
Fonte: Imagens da internet.
Material e Métodos
Escarificação
Lixa nº 80
Construção da curva de embebição
Germitest®
H2O 2,5 x massa do papel seco
B.O.D. 25oC
Micrópila
Balança analítica
0,001g
50% ER
Fonte: Imagens da internet.
Sem escarificação
Material e Métodos
Construção da curva de embebição
0
0.5
1
1.5
2
2.5
3
3.5
1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 27 29 31 33 35 37 39 41 43 45 47 49 51 53
Massa (g) Teor de Água
Mi 100%
Mf X
Rampa de embebição
𝐺𝑎𝑛ℎ𝑜 𝑑𝑒 𝑢𝑚𝑖𝑑𝑎𝑑𝑒 =
𝑀𝑓 − 𝑀𝑖
𝑃𝑖
𝑥 100
Viável
Inviável
Morta
Material e Métodos
Teste de tetrazólio
Pré-umedecimento
B.O.D. 25oC /42hs
TZ 0,05, 0,75 & 0,1%
Escarificação Remoção do
tegumento
1, 3 & 6hs
35 & 40 oC
Enxague
Necrose
Fonte: Imagens da internet.
Avaliação
1, 2, 3...
Material e Métodos
Teste de tetrazólio em sementes de Libidibia ferrea
Fonte: Autores.
Material e Métodos
Teste de Germinação
B.O.D. 30oC
Escarificação
Fonte: Imagens da internet.
Gerbox® de plástico
e Areia Lavada 60%U
20 dias
Areia Lavada
Água
Avaliação
Normal,
anormal...
Material e Métodos
Delineamento e Análise Estatística
Fonte:
Imagens
da
internet.
Delineamento experimental arranjo fatorial 3x3+1, DIC;
Sob temperaturas de 35°C & 40°C;
As médias de sementes viáveis obtidas pelo teste de
tetrazólio foram comparadas pelo teste de Tukey (p ≤
0,05);
A comparação entre as médias das sementes viáveis
com o teste de germinação (controle) foi realizada pelo
teste de Dunnett (p ≤ 0,05);
As análises estatísticas foram realizadas pelo software
ASSISTAT 7.7 beta.
Resultados e Discussão
Imersão de sementes de Libidibia ferrea (Mart. Ex Tul.)
L. P. Queiroz var. ferrea com e sem escarificação, a 25 °C.
A determinação da curva de absorção
de água é importante para se obter
informações sobre o comportamento
das sementes em relação ao ganho de
água, fator que pode contribuir muitas
vezes para melhor penetração do sal de
tetrazólio, além de provocar o
amolecimento das sementes para
realizar cortes.
Bhering et. al., 1996
Fig. 2. Umidade e absorção de água pela semente de L. ferrea.
Resultados e Discussão
*Médias seguidas por letras maiúsculas na linha e minúsculas na coluna não diferem estatisticamente pelo teste de Tukey (5%). Médias seguidas pelas
mesmas letras entre germinação e viabilidade obtida pelo teste de Tetrazólio não diferem estatisticamente pelo teste de Dunnett (5%).
Período (hs)
Concentração (%)
35oC 40oC
0,05* 0,075 0,1 0,05 0,075 0,1
1 23 cBy 38 bAy 31 bABby 41 cAy 47 bAy 42 bAy
3 71 aAx 74 aAx 67 aAx 84 aAx 81 aAx 76 aAx
6 34 bBy 78 aAx 8 cCy 67 bAx 31 cBy 18 cCy
Germinação (%) 76 x
Tab. 1 & 2. Média de viabilidade das sementes de L. ferrea a partir do teste de Tetrazólio
conduzido em diferentes concentrações, períodos e temperatura.
Nome Científico Nome Vulgar Referência (ANO)
Caesalpinia echinata (Fabaceae) pau-brasil, pau-de-pernambuco Lamarca et al. (2009)
Amburana cearensis (Fabaceae) Umburana de cheiro Guedes et al. (2010)
Ceiba speciosa (Malvaceae) Paineira Lazarotto et al. (2011)
Tabebuia roseoalba (Bignoniaceae) Ipê branco Abbade and Takaki (2014)
PESQUISAS COM USO EFICIENTE DE BAIXAS CONCENTRAÇÕES DE TZ
Embora não haja indicações de baixas concentrações para qualquer uma das espécies
florestais descritas nas recomendações da Regras para Análise de Sementes para a
realização do teste de tetrazólio em sementes, pesquisas mais recentes têm
demonstrado eficiência no uso de concentrações mais baixas, como observado
neste trabalho. Resultados evidenciando eficiência do uso da concentração de 0,05%.
Extraído e adaptado.
CONCLUSÃO
Para a realização do teste de tetrazólio em sementes de
L. ferrea é necessário pré-escarificar as sementes com lixa
nº 80, seguida de pré-umedecimento entre substrato de
papel por 42 horas à 25°C e remoção do tegumento.
A viabilidade das sementes de L. ferrea pode ser avaliada
utilizando a concentração de 0,05% de sal de tetrazólio à
35°C ou 40°C durante 3 horas de imersão.
[1] Sara Monaliza Costa Carvalho. Teste de tetrazólio em sementes de Jucá
(Libidibia ferrea (Mart. ex Tul.) L.P. Queiroz var. ferrea). 70p. Dissertação
(Mestrado em Agronomia: Fitotecnia) – Universidade Federal Rural do Semi-
Árido/UFERSA, Mossóro/RN, 2016;
[2] Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento/MAPA. Instruções para
análise de sementes de espécies florestais. 98p. Brasília, 2013;
[3] Vieira, A. H. ; Martins, E. P. ; Pequeno, P. L. L. ; Locatelli, M. ; Souza, M. G. 2001.
Técnicas de Produção de sementes Florestais. Rondônia: EMBRAPA/CPAF. 4p.
(Circular Técnico, 205).
SUGESTÕES DE LEITURA
P
N
OBRIGADO!! K
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Viabilidade de sementes de Libidibia ferrea (Mart. ex Tul.) L.P. Queiroz var. ferrea avaliada pelo teste de tetrazólio

  • 1. UNIVERSIDADE FEDERAL DE ALAGOAS CENTRO DE CIÊNCIAS AGRÁRIAS PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM AGRONOMIA “PRODUÇÃO VEGETAL” Rio Largo/AL, quarta-feira, 3 de agosto de 2022 Acadêmico: CRISTIAN BERNARDO Professor: Dr. JOÃO CORREIA
  • 2. Viabilidade de sementes de Libidibia ferrea (Mart. ex Tul.) L.P. Queiroz var. ferrea avaliada pelo teste de tetrazólio Sara Monaliza Costa Carvalho, Salvador Barros Torres, Clarisse Pereira Benedito, Narjara Walessa Nogueira, Antônia Adailha Torres Souza, Maria Lilia de Souza Neta. Journal of Seed Science v.39, n.1, p.007-012, 2017 http://dx.doi.org/10.1590/2317-1545v39n1163784
  • 3. Altura média de 20-30 metros. Fruto do tipo legume com ~8x2cm, achatada de casca dura, marrom escuro. Para extrair as sementes é necessário quebrar com martelo Sementes com ~0,7cm e pretas Árvore muito utilizada em paisagismo urbano, tem o tronco característico, liso branco com manchas. Propicia boa sombra e desenvolvimento rápido. Libidibia ferrea [Fabaceae] Caesalpinia ferrea Fonte: Imagens da internet.
  • 5. Teste bioquímico; Indica ou ‘mede’ o processo de respiração das células vivas dos tecidos da semente; Manchas os tecidos vivos de vermelho; Pode estimar a viabilidade de um lote de sementes em um ponto no tempo. Teste de Tetrazólio [TZ-Cl-] 2,4,5 Cloreto de Trifenil tetrazólio Fonte: Imagens da internet.
  • 6. Teste de Tetrazólio [TZ-Cl-] O teste se baseia na atividade das enzimas desidrogenases, particularmente a Malato Desidrogenase, que reduz o sal de tetrazólio nos tecidos vivos das sementes, onde íons de H+ são transferidos para o referido sal. Fonte: Imagens da internet.
  • 7. Limitações do teste Fonte: Imagens da internet. Tempo , temperatura e concentração de TZ Exposição do tecido Avaliação
  • 8. Nome Científico Nome Vulgar Referência (ANO) Copaifera langsdorffii (Fabaceae) Copaíba, pau-de-óleo... Fogaça et al. (2011) Schizolobium parahyba (Fabaceae) Guapuruvu, umbela, faveira... Ceiba speciosa (Malvaceae) Paineira Lazarotto et al. (2011) Palicourea rigida (Rubiaceae) Gritadeira, chapéu de couro... Fava & Albuquerque (2013) Enterolobium contortisiliquum (Fabaceae) Tamboril, orelha-de-macaco... Nogueira et al. (2014) Eugenia uniflora (Myrtaceae) Pitanga Kaiser et al. (2014) Annona cherimola (Annonaceae) Graviola Gimenez et al. (2014) Cassia leptophylla (Fabaceae) Falso-babatimão Garlet et al. (2015) Erythrina velutina (Fabaceae) Mulungu, suinã, canivete... Cunha & Gomes (2015) Simira gardneriana (Rubiaceae) --------------- Oliveira et al. (2016) Extraído e adaptado. PESQUISAS DESENVOLVIDAS PARA VÁRIAS ESPÉCIES FLORESTAIS
  • 9. Estabelecer um procedimento adequado para a realização de um teste de tetrazólio em sementes de Libidibia ferrea. Objetivo ?
  • 10. Laboratório de Análise de Sementes (LAS) do Centro de Ciências Agrárias (CCA) da UFERSA Material e Métodos Centro de Referência para Recuperação de Áreas Degradadas (CRAD) da Universidade Federal do Vale do São Francisco (UNIVASF). Fazenda Cacimba Nova/ Conceição/PB - Junho de 2012. 25 oC 50 %UR 3 Anos
  • 11. Dessecador Material e Métodos Teor de Água – Método de Estufa (RAS, 2009) Estufa de secagem 105oC/24hs Balança analítica 0,001g Cadinhos de Al Fonte: Imagens da internet.
  • 12. Material e Métodos Escarificação Lixa nº 80 Construção da curva de embebição Germitest® H2O 2,5 x massa do papel seco B.O.D. 25oC Micrópila Balança analítica 0,001g 50% ER Fonte: Imagens da internet. Sem escarificação
  • 13. Material e Métodos Construção da curva de embebição 0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 27 29 31 33 35 37 39 41 43 45 47 49 51 53 Massa (g) Teor de Água Mi 100% Mf X Rampa de embebição 𝐺𝑎𝑛ℎ𝑜 𝑑𝑒 𝑢𝑚𝑖𝑑𝑎𝑑𝑒 = 𝑀𝑓 − 𝑀𝑖 𝑃𝑖 𝑥 100
  • 14. Viável Inviável Morta Material e Métodos Teste de tetrazólio Pré-umedecimento B.O.D. 25oC /42hs TZ 0,05, 0,75 & 0,1% Escarificação Remoção do tegumento 1, 3 & 6hs 35 & 40 oC Enxague Necrose Fonte: Imagens da internet. Avaliação 1, 2, 3...
  • 15. Material e Métodos Teste de tetrazólio em sementes de Libidibia ferrea Fonte: Autores.
  • 16. Material e Métodos Teste de Germinação B.O.D. 30oC Escarificação Fonte: Imagens da internet. Gerbox® de plástico e Areia Lavada 60%U 20 dias Areia Lavada Água Avaliação Normal, anormal...
  • 17. Material e Métodos Delineamento e Análise Estatística Fonte: Imagens da internet. Delineamento experimental arranjo fatorial 3x3+1, DIC; Sob temperaturas de 35°C & 40°C; As médias de sementes viáveis obtidas pelo teste de tetrazólio foram comparadas pelo teste de Tukey (p ≤ 0,05); A comparação entre as médias das sementes viáveis com o teste de germinação (controle) foi realizada pelo teste de Dunnett (p ≤ 0,05); As análises estatísticas foram realizadas pelo software ASSISTAT 7.7 beta.
  • 18. Resultados e Discussão Imersão de sementes de Libidibia ferrea (Mart. Ex Tul.) L. P. Queiroz var. ferrea com e sem escarificação, a 25 °C. A determinação da curva de absorção de água é importante para se obter informações sobre o comportamento das sementes em relação ao ganho de água, fator que pode contribuir muitas vezes para melhor penetração do sal de tetrazólio, além de provocar o amolecimento das sementes para realizar cortes. Bhering et. al., 1996 Fig. 2. Umidade e absorção de água pela semente de L. ferrea.
  • 19. Resultados e Discussão *Médias seguidas por letras maiúsculas na linha e minúsculas na coluna não diferem estatisticamente pelo teste de Tukey (5%). Médias seguidas pelas mesmas letras entre germinação e viabilidade obtida pelo teste de Tetrazólio não diferem estatisticamente pelo teste de Dunnett (5%). Período (hs) Concentração (%) 35oC 40oC 0,05* 0,075 0,1 0,05 0,075 0,1 1 23 cBy 38 bAy 31 bABby 41 cAy 47 bAy 42 bAy 3 71 aAx 74 aAx 67 aAx 84 aAx 81 aAx 76 aAx 6 34 bBy 78 aAx 8 cCy 67 bAx 31 cBy 18 cCy Germinação (%) 76 x Tab. 1 & 2. Média de viabilidade das sementes de L. ferrea a partir do teste de Tetrazólio conduzido em diferentes concentrações, períodos e temperatura.
  • 20. Nome Científico Nome Vulgar Referência (ANO) Caesalpinia echinata (Fabaceae) pau-brasil, pau-de-pernambuco Lamarca et al. (2009) Amburana cearensis (Fabaceae) Umburana de cheiro Guedes et al. (2010) Ceiba speciosa (Malvaceae) Paineira Lazarotto et al. (2011) Tabebuia roseoalba (Bignoniaceae) Ipê branco Abbade and Takaki (2014) PESQUISAS COM USO EFICIENTE DE BAIXAS CONCENTRAÇÕES DE TZ Embora não haja indicações de baixas concentrações para qualquer uma das espécies florestais descritas nas recomendações da Regras para Análise de Sementes para a realização do teste de tetrazólio em sementes, pesquisas mais recentes têm demonstrado eficiência no uso de concentrações mais baixas, como observado neste trabalho. Resultados evidenciando eficiência do uso da concentração de 0,05%. Extraído e adaptado.
  • 21. CONCLUSÃO Para a realização do teste de tetrazólio em sementes de L. ferrea é necessário pré-escarificar as sementes com lixa nº 80, seguida de pré-umedecimento entre substrato de papel por 42 horas à 25°C e remoção do tegumento. A viabilidade das sementes de L. ferrea pode ser avaliada utilizando a concentração de 0,05% de sal de tetrazólio à 35°C ou 40°C durante 3 horas de imersão.
  • 22. [1] Sara Monaliza Costa Carvalho. Teste de tetrazólio em sementes de Jucá (Libidibia ferrea (Mart. ex Tul.) L.P. Queiroz var. ferrea). 70p. Dissertação (Mestrado em Agronomia: Fitotecnia) – Universidade Federal Rural do Semi- Árido/UFERSA, Mossóro/RN, 2016; [2] Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento/MAPA. Instruções para análise de sementes de espécies florestais. 98p. Brasília, 2013; [3] Vieira, A. H. ; Martins, E. P. ; Pequeno, P. L. L. ; Locatelli, M. ; Souza, M. G. 2001. Técnicas de Produção de sementes Florestais. Rondônia: EMBRAPA/CPAF. 4p. (Circular Técnico, 205). SUGESTÕES DE LEITURA
  • 23. P N OBRIGADO!! K UNIVERSIDADE FEDERAL DE ALAGOAS CENTRO DE CIÊNCIAS AGRÁRIAS PROGRAMA DE PÓS GRADUAÇÃO EM AGRONOMIA “PRODUÇÃO VEGETAL”
  • 24. UNIVERSIDADE FEDERAL DE ALAGOAS CENTRO DE CIÊNCIAS AGRÁRIAS PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM AGRONOMIA “PRODUÇÃO VEGETAL”