1. O documento descreve um projeto de pesquisa sobre o monitoramento e diagnóstico do ácaro Aceria tosichella e dos vírus transmitidos (Wheat streak mosaic virus e High plains virus) no Brasil e Argentina. 2. O objetivo é mapear a distribuição desses agentes, caracterizar suas populações molecularmente, e avaliar a resistência de cultivares de trigo. 3. Os resultados incluem a detecção de WSMV em três municípios do Rio Grande do Sul e a ampliação da distribuição de A. tosichella

1. Monitoramento e diagnose do complexo Aceria tosichella e vírus
transmitidos (Wheat streak mosaic virus, High plains virus) no Brasil
e Argentina e avaliação da resistência de cultivares para estimar o
seu impacto na triticultura nacional. Edital CNPq/MAPA/SDA n° 064-
2008. Proc 578646/2008-0
Monitoramento e diagnose do complexo
Aceria tosichella e vírus transmitidos
(Wheat streak mosaic virus, High plains
virus) compreensão e manejo de um
patossistema em expansão na América do
Sul
Douglas Lau – Embrapa Trigo
dlau@cnpt.embrapa.br

2. Projeto de Pesquisa: Monitoramento e diagnose do complexo Aceria tosichella e vírus transmitidos (Wheat streak mosaic virus, High plains virus) no Brasil e avaliação da resistência de cultivares para estimar o seu impacto na triticultura nacional
TEMA:
Defesa Agropecuária no País na Área de Vigilância e Sanidade Animal e Vegetal
_____________________________________________________________________
LINHA DE AÇÃO:
Projetos de pesquisa científica e tecnológica e inovação
_____________________________________________________________________
Início: Dezembro/2008
Término: Novembro/2011
Relatório Técnico/científico: Janeiro/2012
Edital CNPq/MAPA/SDA n° 064-2008
Proc 578646/2008-0

3. Objetivos:
1. Dar continuidade ao monitoramento e caracterização do complexo Aceria tosichella e viroses transmitidas (Wheat streak mosaic virus, High plains virus) no Brasil e na Argentina.
2. Considerando o impacto para a triticultura nacional, ampliar a competência científica de instituições brasileiras para a detecção do WSMV e HPV e iniciar medidas para redução dos seus efeitos trabalhando em parceria com pesquisadores Argentinos, os primeiros na América do Sul a conviver com este complexo, que já vem desenvolvendo ações no sentido de entender fatores que afetam o desenvolvimento do complexo e introduzir medidas de contenção de danos.
Edital CNPq/MAPA/SDA n° 064-2008
Proc 578646/2008-0

4. •Mapear o avanço da distribuição geográfica de A. tosichella no Brasil
•Caracterizar por morfometria e por métodos moleculares populações de A. tosichella no Brasil e na Argentina
•Mapear possível ocorrência de viroses transmitidas por A. tosichella no Brasil
•Caracterizar por métodos moleculares a população viral (Brasil e Argentina) e testar métodos de diagnose para WSMV e HPV
•Avaliar o nível de resistência dos genótipos de trigo a A. tosichella e ao WSMV
Objetivos específicos:
Edital CNPq/MAPA/SDA n° 064-2008
Proc 578646/2008-0

5. Equipe:
Dr. Douglas Lau
Embrapa Trigo – Fitopatologia/Fitovirologia
Dra. Jurema Schons
Universidade de Passo Fundo – Fitovirologia
Dra. Graciela Ana Maria Truol
IFFIVE-INTA-Córdoba – Argentina – Fitovirologia
Dra. Denise Navia
Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia – Entomologia/Acarologia Dr. Paulo Roberto Valle da Silva Pereira
Embrapa Trigo – Entomologia
Dr. José Roberto Salvadori
Universidade de Passo Fundo – Entomologia
Dra. Ana Lídia V. Bonato
Embrapa Trigo – Biotecnologia
Dr. Antonio Nhani Jr
Embrapa Trigo – Bioinformática
Dr. Pedro Luiz Scheeren
Embrapa Trigo – Melhoramento Genético
MSc. Eduardo Caierão
Embrapa Trigo – Melhoramento Genético de Trigo
MSc. Carlos Tomás Bainotti
EEA Marcos Juárez – Melhoramento Genético de Trigo
PhD. Anna Sckoracka
Adam Mickiewicz University Polônia
Eng. Agricola Monica B. Sagadin - IFFIVE-INTA Argentina
Edital CNPq/MAPA/SDA n° 064-2008
Proc 578646/2008-0

6. Edital CNPq/MAPA/SDA n° 064-2008
Proc 578646/2008-0
Córdoba, Argentina, maio/2010

7. Argentina (2002)
Plantas de trigo com
sintomas de mosaico

8. G. Truol, R. French, M. Sagadin, and J. Arneodo
First report of Wheat streak mosaic virus
infecting wheat in Argentina Australasian Plant
Pathology 33 (1), 137-138 (2004)

9. Malevo1400 kg/ha
Cronox Perdido
Malevo: Sbra 10-Jun
Cronox: Sbra 15-Jul

10. TRUOL et al. 2009

11. Argentina (2004) Aceria tosichella
NAVIA, D.; TRUOL, G.; MENDONÇA, R.S.; SAGADIN, M. Aceria tosichella Keifer (Acari: Eriophyidae) from Wheat Streak Mosaic Virus-infected wheat plants in Argentine. International Journal of Acarology, v.32, p.189-193, 2006.

12. Histórico
O ácaro Aceria tosichella Keifer e Viroses Transmitidas Wheat Streak Mosaic Virus e High Plains Virus, uma Nova Ameaça aos Cultivos de Cereais na América do Sul – Análise de Risco de Pragas, Distribuição Geográfica, Hospedeiros, Caracterização e Controle” financiado pelo CNPq/Prosul - Edital CNPq no. 014/2006, processo 490496/2006-7, liderado pela pesquisadora da Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia, Dra. Denise Navia M. Ferreira

13. Histórico
Occurrence of Aceria tosichella in Brazil Paulo Roberto Valle da Silva Pereira, Denise Navia, José Roberto Salvadori & Douglas Lau Pesq. agropec. bras., Brasília, v.44, n.5, p.539-542, 2009
Brasil (2006) Aceria tosichella

14. Uruguai (2007)
Aceria tosichella

16. Histórico

17. Cenário Brasil 2006-2008
•Ácaro detectado, mapeado e registrado no MAPA
•Vírus não detectado e não registrado Risco potencial
Histórico

18. 1. Mapeamento da distribuição geográfica de populações de A. tosichella nas regiões tritícolas do Brasil.
Responsáveis: Dr. Paulo Roberto V. da Silva Pereira – Embrapa Trigo
Dra. Denise Navia - Embrapa Cenargen
Meta
Descrição
Produtos Esperados
Indicadores
01
Mapear o avanço da distribuição de A. tosichella no Brasil
Mapas com a distribuição de A. tosichella em 2009, 2010 e 2011
Um mapa gerado por ano
100 pontos geográficos distintos (espaço-temporal) por ano, distribuídos pelos estados do Rio Grande do Sul, Santa Catarina, Paraná e Mato Grosso do Sul
Resultados

19. Resultados
451 pontos (espaço-temporal)

20. Resultados
Tabela 2. Lista das espécies de Poaceae amostradas para detecção do ácaro-do-enrolamento-
do-trigo Aceria tosichella (Keifer) nos estados do Rio Grande do Sul,
Santa Catarina, Paraná e Mato Grosso do Sul em 2009, 2010 e 2011.
Gênero/espécie Gênero/espécie
1. Andropogon bicornis 12. Eragrostis plana
2. Aristida longiseta 13. Eustachys distichophylla
3. Avena sativa 14. Hordeum vulgare
A. strigosa 15. Lolium multiflorum
4. Axonopus compressus 1 6 . P a s p a l u m n o t a t u m
5. Brachiaria plantaginea 17. Pennisetum americanum
B. decumbens P. clandestinum
B. brizantha P. purpureum
6. Bromus catharticus 18. Rhynchelytrum repens
7. Cenchrus echinatus 19. Secale cereale
8. Chloris barbata 20. Setaria geniculata
C. polydactyla 21. Sorghum bicolor
9. Cynodon dactylon S. halepense
10. Digitaria horizontalis 22. Triticum aestivum
D. insularis 23. X Triticosecale Wittmack
D. sanguinalis 24. Zea mays
11. Eleusine indica

21. Resultados
Ampliação da distribuição geográfica de A. tosichella no Brasil

22. Resultados

23. Resultados

24. Resultados

25. Resultados
2. Caracterizar por morfometria e por métodos moleculares populações de A. tosichella no Brasil e Argentina
Responsáveis: Dra. Denise Navia - Embrapa Cenargen
Dra. Graciela Truol – IFFIVE-INTA – Argentina
Meta
Descrição
Produtos Esperados
Indicadores
02
Caracterizar por análises morfométricas populações de A. tosichella no Brasil e Argentina
Conhecimento sobre a variabilidade fenotípica de populações de A. tosichella no Brasil e Argentina
Populações caracterizadas
03
Caracterizar por sequenciamento de regiões genômicas populações de A. tosichella no Brasil e Argentina
Sequenciamento de dois marcadores moleculares do genoma de populações de Aceria tosichella
Populações analisadas / No. de seqüências obtidas e análises filogenéticas realizadas

26. A. COI
Populações de A. tosichella no Brasil e
Argentina

27. B. D2
Populações de A. tosichella no Brasil e
Argentina

28. C. ITS
Populações de A. tosichella no Brasil e
Argentina

29. Resultados
3. Mapear possível ocorrência de viroses transmitidas por A. tosichella no Brasil
Responsáveis: Dra. Jurema Schons – Universidade de Passo Fundo
Dr. Douglas Lau - Embrapa Trigo
Meta
Descrição
Produtos Esperados
Indicadores
04
Monitorar a ocorrência e, em caso positivo, mapear a distribuição de viroses transmitidas por A. tosichella no Brasil
Mapas com a distribuição de viroses transmitidas por A. tosichella em 2009, 2010 e 2011
Um mapa gerado por ano.

30. Resultados
954 amostras coletadas entre 2009, 2010 e 2011

31. Resultados
293
Sorológica
463
Biológica
96
Molecular
8 isolados
2 isolados
Caracterização
88,5%

32. Resultados
21 amostras = 4 casa de vegetação + 17 campo
100pb
100pb
198pb
Detecção por RT-PCR – (NIA)

33. Resultados
100pb
948pb
14 amostras = 5 casa de vegetação + 9 campo
Detecção por RT-PCR – (CP)

34. Resultados

35. Resultados
4. Caracterização molecular da população viral e testes de métodos de diagnose para WSMV e HPV
Responsáveis: Dr. Douglas Lau - Embrapa Trigo – Fitopatologia/Fitovirologia
Dra. Graciela Truol – IFFIVE-INTA – Argentina
Dra. Jurema Schons – Universidade de Passo Fundo
Dra. Ana Lídia Variani Bonato - Embrapa Trigo
Dr. Antonio Nhani Jr - Embrapa Trigo
Meta
Descrição
Produtos Esperados
Indicadores
05
Testar métodos de detecção para (WSMV e HPV) incluíndo DAS ELISA, PCR, PCR em tempo real, PCR com marca fluorecente para corrida em capilar
Ampliação da capacidade de diagnose de fitovírus em trigo, por meio da disponibilização de um método rápido e eficiente que permita a diagnosticar com precisão a presença dos principais vírus que ocorrem nas regiões tritícolas do Brasil e Argentina
Métodos comparados e otimizados para uso
06
Caracterização molecular de populações de WSMV da Argentina e do Brasil (se for detectada)
Conhecimento sobre a variabilidade das populações de WSMV no Brasil e Argentina
Populações analisadas / No. de seqüências obtidas e análises filogenéticas realizadas

36. Resultados
COOH-terminal da
poliproteína (CP)
948pb
99% a 97% de similaridade
APNW
América do Norte
Turquia

37. COOH-terminal da
poliproteína (CP)
316aa
98% a 100% de similaridade
Clado D
Diferiram em 5 aminoácidos
São Luiz Gonzaga
Passo Fundo

38. Resultados
96% a 98% de similaridade
Clado D
VPg-NIa
198pb

39. Resultados
Why has this same WSMV lineage recently invaded two (three) isolated wheat-growing regions on separate continentes? (Stenger & French, 2009)

40. Resultados
5. Avaliação do nível de resistência de variedades de trigo ao complexo Wheat streak mosaic virus /A. tosichella em linhagens e cultivares de trigo.
Responsáveis: Dra. Graciela Truol – IFFIVE-INTA – Argentina
Dr. Pedro Luiz Scheeren - Embrapa Trigo
MSc.Carlos Bainotti – EEA Marcos Juàrez
MSc. Eduardo Caierão – Embrapa Trigo
Meta
Descrição
Produtos Esperados
Indicadores
07
Caracterização do nível de resistência a WSMV de genótipos de trigo brasileiros
Conhecimento do nível de resistência dos genótipos de trigo plantados atualmente frente ao WSMV
Número de genótipos caracterizados
Previsão de 30 genótipos (10 por ano envolvendo as cultivares mais plantadas atualmente). – Ensaio estadual de cultivares

41. Resultados

42. Conclusões
A distribuição geográfica e o número de hospedeiros com A. tosichella tem ampliado desde o seu primeiro relato. Além da ampliação de localidades com ocorrência no Rio Grande do Sul, o ácaro foi também detectado no município de Xaxim no oeste de Santa Catarina. No entanto, as populações encontradas no campo até o momento tem sido baixas.
Análises morfométricas e moleculares indicam que as populações brasileiras de A. tosichella são muito similares as da Argentina e que duas linhagens ocorrem na América do Sul. Além disso, outras duas espécies de Aceria sp. foram encontradas em trigo.
Dos vírus transmitidos por A. tosichella, WSMV foi encontrado nos municípios de Passo Fundo, São Luiz Gonzaga e Jóia, todos no Rio Grande do Sul e dentro da circunscrição em que recorrentemente o vetor tem sido detectado.
Análises das sequências virais indicaram que os isolados encontrados no Brasil são similares a população viral presente na Argentina. HPV não foi encontrado no Brasil.

43. Novas ameaças
Truol et al., 2009
TRUOL, G.; SAGADIN, M. Presencia de High plain virus (HPV) nueva enfermedad del cultivo de trigo en la Provincia de Buenos Aires. In:CONGRESO NACIONAL DE TRIGO, 12., Santa Rosa. Anales. Santa Rosa: INTA/UNLPam, 2008

44. High plains virus (HPV)
Novas ameaças

45. Novas ameaças
TriMV
Triticum mosaic virus (TriMV)

46. Novas ameaças
Trigo - milho

47. Proyectos de Cooperación Internacional Bilateral INTA-EMBRAPA
Presentación de Ideas Proyecto
Angela Souza Da Fonseca Ramos Cenargen
Denise Navia Magalhaes Ferreira Cenargen
Marcio Martinello Sanches Cenargen
Douglas Lau CNPT
Paulo Roberto Valle Pereira CNPT
Pedro Luiz Scheeren CNPT
Carlos Tomás Bainotti INTA
Enrique Alberione INTA
Graciela Ana Maria Truol INTA
María Beatriz Formica INTA
Paola Maria López Lambertini INTA
Vanina Alemandri INTA
Jurema Schons UPF
José Roberto Salvadori UPF
Propuesta Llamada 22/2011-Cooperación Internacional EMBRAPA/INTA
Título del proyecto
Monitoreo y diagnóstico del complejo Aceria tosichella Keifer / Wheat
streak mosaic virus (WSMV) y High plains virus (HPV), contribución
argentina para la comprensión y manejo de un patosistema en
expansión en Sud América
Programa Cooperación Internacional INTA - EMBRAPA
Línea Temática
Enfermedades Cuarentenarias-Desarrollo de Estrategias para el
manejo integrado
Responsable
líder INTA
Graciela Truol / Unidad: 151000-IPAVE- INTA
Responsable
líder EMBRAPA
Douglas Lau. Embrapa Trigo, Passo Fundo Brasil
Fecha de la presentación 31/08/2011
Título en portugués
Monitoramento e diagnose do complexo Aceria tosichella Keifer
/Wheat streak mosaic virus (WSMV) e High plains virus (HPV)
contribução brasileira para a compreensao e manejo de um
patossistema em expansao na América do Sul