Este documento descreve diferentes tipos de meios de cultura utilizados para cultivar bactérias, incluindo sua classificação de acordo com a consistência, composição e tipo de utilização. Detalha meios líquidos, semi-sólidos e sólidos, bem como meios sintéticos e complexos. Também discute meios de isolamento, seletivos, diferenciais e enriquecidos, e seus usos para obter culturas puras de bactérias.
Aula de Microbiologia Clínica sobre Meios de cultura bacterianaJaqueline Almeida
O documento descreve diferentes tipos de meios de cultura utilizados em microbiologia, classificando-os de acordo com seu estado físico, composição, finalidade e reações com microrganismos específicos. Exemplos como ágar nutriente, MacConkey, sangue, chocolate, Salmonella-Shigella, Löwenstein Jensen e Saboraud são detalhados.
O documento descreve diferentes tipos de meios de cultura utilizados em microbiologia para o crescimento de microrganismos, incluindo seus princípios, funções e interpretações. É detalhado o uso de meios sólidos, semi-sólidos e líquidos, assim como meios seletivos, diferenciais e complexos. Exemplos específicos como ágar sangue, MacConkey e Löwenstein-Jensen são explicados.
O documento descreve os meios de cultura utilizados para o crescimento de microrganismos em laboratório. São apresentados os principais tipos de meios de acordo com a consistência (sólidos, semi-sólidos e líquidos), classificação (complexos, sintéticos, diferenciais, seletivos, de enriquecimento), condições para o crescimento de bactérias (temperatura, pH, atmosfera gasosa) e métodos de preparação e esterilização dos meios.
Este documento descreve os principais tipos de meios de cultura utilizados para o cultivo de microrganismos, incluindo seus componentes, preparação e classificação. Explica que os meios de cultura fornecem nutrientes necessários para o crescimento de microrganismos e podem ser sólidos, semi-sólidos ou líquidos. Além disso, descreve exemplos específicos de meios de cultura, como o caldo simples e ágar simples, e suas finalidades como meios de enriquecimento, seletivos e de
O documento discute a nutrição e crescimento de microrganismos, incluindo os componentes necessários para o crescimento celular, tipos de meios de cultura e condições ambientais que afetam o crescimento microbiano.
Definição, classificação, composição e conservação aula 2UERGS
Este documento discute a composição e classificação de alimentos. Ele define alimentos e descreve seus principais componentes nutricionais, incluindo proteínas, lipídeos, hidratos de carbono, sais minerais e vitaminas. Também discute a classificação de alimentos de acordo com sua origem e composição, e fornece detalhes sobre a estrutura e funções das proteínas e lipídeos.
O documento discute a nutrição e o metabolismo microbiano, abordando as necessidades nutricionais das bactérias, os componentes dos meios de cultivo e as condições físicas para o seu crescimento, como temperatura, pH e atmosfera gasosa. Também apresenta exemplos de meios de cultivo químicamente definidos e para fins específicos.
O documento discute a nutrição bacteriana, listando os principais nutrientes necessários para o crescimento bacteriano, como água, fonte de energia, nitrogênio, vitaminas e sais minerais. Também classifica os microrganismos quanto à sua nutrição e fonte de energia, distinguindo entre quimiotróficos, quimioautotróficos, quimioheterotróficos, fototróficos, fotoautotróficos e fotoheterotróficos. Além disso, destaca o carbono, nitrogênio,
Aula de Microbiologia Clínica sobre Meios de cultura bacterianaJaqueline Almeida
O documento descreve diferentes tipos de meios de cultura utilizados em microbiologia, classificando-os de acordo com seu estado físico, composição, finalidade e reações com microrganismos específicos. Exemplos como ágar nutriente, MacConkey, sangue, chocolate, Salmonella-Shigella, Löwenstein Jensen e Saboraud são detalhados.
O documento descreve diferentes tipos de meios de cultura utilizados em microbiologia para o crescimento de microrganismos, incluindo seus princípios, funções e interpretações. É detalhado o uso de meios sólidos, semi-sólidos e líquidos, assim como meios seletivos, diferenciais e complexos. Exemplos específicos como ágar sangue, MacConkey e Löwenstein-Jensen são explicados.
O documento descreve os meios de cultura utilizados para o crescimento de microrganismos em laboratório. São apresentados os principais tipos de meios de acordo com a consistência (sólidos, semi-sólidos e líquidos), classificação (complexos, sintéticos, diferenciais, seletivos, de enriquecimento), condições para o crescimento de bactérias (temperatura, pH, atmosfera gasosa) e métodos de preparação e esterilização dos meios.
Este documento descreve os principais tipos de meios de cultura utilizados para o cultivo de microrganismos, incluindo seus componentes, preparação e classificação. Explica que os meios de cultura fornecem nutrientes necessários para o crescimento de microrganismos e podem ser sólidos, semi-sólidos ou líquidos. Além disso, descreve exemplos específicos de meios de cultura, como o caldo simples e ágar simples, e suas finalidades como meios de enriquecimento, seletivos e de
O documento discute a nutrição e crescimento de microrganismos, incluindo os componentes necessários para o crescimento celular, tipos de meios de cultura e condições ambientais que afetam o crescimento microbiano.
Definição, classificação, composição e conservação aula 2UERGS
Este documento discute a composição e classificação de alimentos. Ele define alimentos e descreve seus principais componentes nutricionais, incluindo proteínas, lipídeos, hidratos de carbono, sais minerais e vitaminas. Também discute a classificação de alimentos de acordo com sua origem e composição, e fornece detalhes sobre a estrutura e funções das proteínas e lipídeos.
O documento discute a nutrição e o metabolismo microbiano, abordando as necessidades nutricionais das bactérias, os componentes dos meios de cultivo e as condições físicas para o seu crescimento, como temperatura, pH e atmosfera gasosa. Também apresenta exemplos de meios de cultivo químicamente definidos e para fins específicos.
O documento discute a nutrição bacteriana, listando os principais nutrientes necessários para o crescimento bacteriano, como água, fonte de energia, nitrogênio, vitaminas e sais minerais. Também classifica os microrganismos quanto à sua nutrição e fonte de energia, distinguindo entre quimiotróficos, quimioautotróficos, quimioheterotróficos, fototróficos, fotoautotróficos e fotoheterotróficos. Além disso, destaca o carbono, nitrogênio,
O documento discute os requisitos e preparação de meios de cultura, incluindo fatores como pH, temperatura, nutrientes e consistência necessários para o crescimento de microrganismos. Ele também classifica e exemplifica diferentes tipos de meios de cultura, descreve técnicas de inoculação e fornece recomendações para o controle de qualidade.
Meios de cultura e Técnicas de semeio- MICROBIOLOGIAHemilly Rayanne
O documento descreve os diferentes tipos de meios de cultura, incluindo sólidos, semi-sólidos e líquidos. Detalha como a consistência dos meios é dada pela concentração de agar-agar e fornece exemplos de meios enriquecidos, seletivos e indicadores comumente utilizados para o cultivo e identificação de bactérias.
Microrganismos desempenham um papel crucial na indústria alimentar através de processos fermentativos que transformam alimentos e os conservam. Os principais processos são a fermentação láctica (produzindo iogurte), a fermentação alcoólica (produzindo cerveja e vinho) e a fermentação acética (produzindo vinagre). Estes processos fornecem energia aos microrganismos e transformam os alimentos.
O documento descreve os principais aspectos da nutrição de células procarióticas, incluindo os macronutrientes e micronutrientes necessários, os tipos de meios de cultura, e como fatores ambientais como temperatura, pH, atividade de água e oxigênio afetam o crescimento microbiano.
O documento discute a fisiologia bacteriana, abordando tópicos como nutrição bacteriana, condições de cultivo, meios de cultura, influência de fatores ambientais e curva de crescimento bacteriano. É explicado que as bactérias precisam de nutrientes específicos como carbono, nitrogênio, oxigênio e outros para se desenvolverem, e que fatores como temperatura, pH e presença de oxigênio afetam seu crescimento. Também são detalhados os requisitos para cultivo em laboratório, como meios
Aula de Microbiologia sobre meios de cultura e características bacterianasJaqueline Almeida
Este documento fornece instruções sobre procedimentos gerais para meios de cultura bacteriana, incluindo esterilização adequada, controle de qualidade e validade. Ele também descreve vários meios de cultura, como ágar chocolate para isolamento, meios de transporte como Cary Blair e Stuart, e nutriente ágar para conservação.
O documento descreve o procedimento para isolar e contar Lactobacillus presentes na saliva para avaliar o risco de agravamento da doença cárie no indivíduo. O procedimento envolve a coleta de saliva, diluições seriadas, semeadura em placa de Petri contendo ágar seletivo para Lactobacillus, incubação e contagem de colônias para estimar o número de Lactobacillus e associar ao risco de cárie.
Este documento discute a importância dos microrganismos nos alimentos, classificando-os em três grupos: 1) Úteis, que causam alterações benéficas nos alimentos durante processos como fermentação; 2) Deteriorantes, que causam alterações prejudiciais nos alimentos levando à deterioração; 3) Patogênicos, que podem causar doenças. Exemplos de microrganismos úteis incluem bolores como Penicillium camembertii usado em queijos, e leveduras como Saccharomyces cerevisiae usada em
Este documento resume principais conceitos e técnicas utilizadas em microbiologia, incluindo tipos de meios de cultura, cuidados de assepsia, inoculação, descontaminação, cepas padrão e banco de dados de cepas do laboratório. Ele também descreve procedimentos para preparo de meios de cultura e manutenção de culturas.
O documento descreve diversos meios de cultura e suas aplicações, incluindo meios para transporte, manutenção, isolamento e identificação de microrganismos. São detalhados meios como Ágar Chocolate, Mac Conkey, Salmonella-Shigella e meios para testes como TSI, Christensen e oxidase.
Este documento discute a microbiologia dos alimentos, incluindo três aspectos fundamentais: 1) a preservação dos alimentos através do uso de microrganismos, 2) a detecção e prevenção de intoxicações causadas por microrganismos em alimentos, e 3) o controle da transmissão de doenças através dos alimentos. Também aborda os principais microrganismos de interesse em alimentos, como bactérias, fungos e vírus, e fatores que influenciam na multiplicação microbiana nos alimentos.
Este documento discute os microrganismos e os alimentos. Apresenta os objetivos gerais de conhecer os diferentes tipos de perigos e reconhecer a importância dos fatores ambientais na ocorrência de riscos à segurança alimentar. Detalha os diversos tipos de microrganismos, o seu crescimento, e os fatores intrínsecos e extrínsecos que afetam esse crescimento. Explora como os microrganismos se relacionam com diferentes alimentos, manipuladores, equipamentos e como podem ocorrer contaminações cruz
Revista Ciência Equatorial (ISSN 2179-9563), foi uma publicação semestral do Colegiado de Farmácia, da Universidade Federal do Amapá - UNIFAP. Foi publicada de 2011 à 2013 e teve por objetivo divulgar a produção científica resultante das atividades de estudos, pesquisas, trabalhos técnicos e outros, dos professores, pesquisadores, estudantes de pós-graduação e graduação desta e de outras instituições de ensino e de pesquisa, tanto no Brasil como no exterior. Publicava artigos originais, notas prévias e trabalhos de revisão que cobriam todos os aspectos da ciência em suas diversas áreas.
O documento apresenta uma introdução à microbiologia dos alimentos, abordando conceitos básicos, aspectos históricos da produção e uso de alimentos, e a classificação dos microrganismos em agentes de deterioração, patogênicos e produtores de alimentos.
1) O documento discute métodos para isolar e cultivar microrganismos em cultura pura, incluindo o uso de diferentes tipos de meios de cultura e técnicas de inoculação.
2) Também aborda fatores que influenciam a escolha do meio de cultura adequado e métodos para medir o crescimento microbiano e identificar microrganismos.
3) O isolamento de aeróbios e anaeróbios é explicado, com detalhes sobre como fornecer as condições adequadas de oxigênio para cada grupo
Aula 2 introducao a microb de alimentos 20140316141849Elmo Oliveira
O documento discute a história e importância dos microorganismos nos alimentos. Ele explica como fatores intrínsecos como atividade de água, pH e nutrientes, e fatores extrínsecos como temperatura e umidade afetam o crescimento microbiano. Também descreve como a aplicação tecnológica pode controlar a microbiota dos alimentos através de uma combinação de obstáculos.
O documento discute fatores que influenciam o desenvolvimento microbiano em alimentos, incluindo fatores intrínsecos como pH, atividade de água e potencial redox, e fatores extrínsecos como temperatura, umidade relativa e presença de gases. A teoria dos obstáculos é abordada, enfatizando a interação entre múltiplos fatores para inibir o crescimento de microrganismos.
Trabalho na disciplina de Microbiologia.
Com enfoque em meios de cultura usados em laboratórios de analises clinicas. é utilizado no estudo das propriedades
bioquímicas das bactérias, auxiliando, assim,
sua identificação. Auxiliando no diagnóstico laboratorial. a escolha dos meios de cultura, para o
processamento inicial das amostras é muito
importante e está condicionada à flora
patogênica desse local;
- em geral é usado mais de um tipo de meio,
no sentido de fornecer condições de
crescimento a todos os patógenos possíveis
de estarem presentes.
O documento discute os requisitos nutricionais e meios de cultura para microorganismos. Descreve que os microrganismos precisam de fontes de carbono, nitrogênio, água e outros nutrientes para crescer, e que os meios de cultura fornecem esses nutrientes em quantidades e proporções adequadas para permitir o cultivo em laboratório. Também discute como os meios de cultura podem ser quimicamente definidos ou complexos, e as diferentes finalidades dos meios de cultura, como permitir o crescimento geral de
AULA 5. EXIGÊNCIAS NUTRICIONAIS E CONDIÇÕES FÍSICAS PARA O CULTIVO.pptxKairaEmanuellaSDaSil
O documento discute os requisitos nutricionais e condições físicas para o cultivo de microrganismos. Os principais pontos são: (1) microrganismos precisam de fontes de carbono, nitrogênio, água e outros nutrientes para crescer, (2) a temperatura, pH e pressão osmótica devem estar dentro de faixas adequadas, e (3) meios de cultura fornecem esses requisitos para permitir o estudo de microrganismos em laboratório.
O documento discute os requisitos e preparação de meios de cultura, incluindo fatores como pH, temperatura, nutrientes e consistência necessários para o crescimento de microrganismos. Ele também classifica e exemplifica diferentes tipos de meios de cultura, descreve técnicas de inoculação e fornece recomendações para o controle de qualidade.
Meios de cultura e Técnicas de semeio- MICROBIOLOGIAHemilly Rayanne
O documento descreve os diferentes tipos de meios de cultura, incluindo sólidos, semi-sólidos e líquidos. Detalha como a consistência dos meios é dada pela concentração de agar-agar e fornece exemplos de meios enriquecidos, seletivos e indicadores comumente utilizados para o cultivo e identificação de bactérias.
Microrganismos desempenham um papel crucial na indústria alimentar através de processos fermentativos que transformam alimentos e os conservam. Os principais processos são a fermentação láctica (produzindo iogurte), a fermentação alcoólica (produzindo cerveja e vinho) e a fermentação acética (produzindo vinagre). Estes processos fornecem energia aos microrganismos e transformam os alimentos.
O documento descreve os principais aspectos da nutrição de células procarióticas, incluindo os macronutrientes e micronutrientes necessários, os tipos de meios de cultura, e como fatores ambientais como temperatura, pH, atividade de água e oxigênio afetam o crescimento microbiano.
O documento discute a fisiologia bacteriana, abordando tópicos como nutrição bacteriana, condições de cultivo, meios de cultura, influência de fatores ambientais e curva de crescimento bacteriano. É explicado que as bactérias precisam de nutrientes específicos como carbono, nitrogênio, oxigênio e outros para se desenvolverem, e que fatores como temperatura, pH e presença de oxigênio afetam seu crescimento. Também são detalhados os requisitos para cultivo em laboratório, como meios
Aula de Microbiologia sobre meios de cultura e características bacterianasJaqueline Almeida
Este documento fornece instruções sobre procedimentos gerais para meios de cultura bacteriana, incluindo esterilização adequada, controle de qualidade e validade. Ele também descreve vários meios de cultura, como ágar chocolate para isolamento, meios de transporte como Cary Blair e Stuart, e nutriente ágar para conservação.
O documento descreve o procedimento para isolar e contar Lactobacillus presentes na saliva para avaliar o risco de agravamento da doença cárie no indivíduo. O procedimento envolve a coleta de saliva, diluições seriadas, semeadura em placa de Petri contendo ágar seletivo para Lactobacillus, incubação e contagem de colônias para estimar o número de Lactobacillus e associar ao risco de cárie.
Este documento discute a importância dos microrganismos nos alimentos, classificando-os em três grupos: 1) Úteis, que causam alterações benéficas nos alimentos durante processos como fermentação; 2) Deteriorantes, que causam alterações prejudiciais nos alimentos levando à deterioração; 3) Patogênicos, que podem causar doenças. Exemplos de microrganismos úteis incluem bolores como Penicillium camembertii usado em queijos, e leveduras como Saccharomyces cerevisiae usada em
Este documento resume principais conceitos e técnicas utilizadas em microbiologia, incluindo tipos de meios de cultura, cuidados de assepsia, inoculação, descontaminação, cepas padrão e banco de dados de cepas do laboratório. Ele também descreve procedimentos para preparo de meios de cultura e manutenção de culturas.
O documento descreve diversos meios de cultura e suas aplicações, incluindo meios para transporte, manutenção, isolamento e identificação de microrganismos. São detalhados meios como Ágar Chocolate, Mac Conkey, Salmonella-Shigella e meios para testes como TSI, Christensen e oxidase.
Este documento discute a microbiologia dos alimentos, incluindo três aspectos fundamentais: 1) a preservação dos alimentos através do uso de microrganismos, 2) a detecção e prevenção de intoxicações causadas por microrganismos em alimentos, e 3) o controle da transmissão de doenças através dos alimentos. Também aborda os principais microrganismos de interesse em alimentos, como bactérias, fungos e vírus, e fatores que influenciam na multiplicação microbiana nos alimentos.
Este documento discute os microrganismos e os alimentos. Apresenta os objetivos gerais de conhecer os diferentes tipos de perigos e reconhecer a importância dos fatores ambientais na ocorrência de riscos à segurança alimentar. Detalha os diversos tipos de microrganismos, o seu crescimento, e os fatores intrínsecos e extrínsecos que afetam esse crescimento. Explora como os microrganismos se relacionam com diferentes alimentos, manipuladores, equipamentos e como podem ocorrer contaminações cruz
Revista Ciência Equatorial (ISSN 2179-9563), foi uma publicação semestral do Colegiado de Farmácia, da Universidade Federal do Amapá - UNIFAP. Foi publicada de 2011 à 2013 e teve por objetivo divulgar a produção científica resultante das atividades de estudos, pesquisas, trabalhos técnicos e outros, dos professores, pesquisadores, estudantes de pós-graduação e graduação desta e de outras instituições de ensino e de pesquisa, tanto no Brasil como no exterior. Publicava artigos originais, notas prévias e trabalhos de revisão que cobriam todos os aspectos da ciência em suas diversas áreas.
O documento apresenta uma introdução à microbiologia dos alimentos, abordando conceitos básicos, aspectos históricos da produção e uso de alimentos, e a classificação dos microrganismos em agentes de deterioração, patogênicos e produtores de alimentos.
1) O documento discute métodos para isolar e cultivar microrganismos em cultura pura, incluindo o uso de diferentes tipos de meios de cultura e técnicas de inoculação.
2) Também aborda fatores que influenciam a escolha do meio de cultura adequado e métodos para medir o crescimento microbiano e identificar microrganismos.
3) O isolamento de aeróbios e anaeróbios é explicado, com detalhes sobre como fornecer as condições adequadas de oxigênio para cada grupo
Aula 2 introducao a microb de alimentos 20140316141849Elmo Oliveira
O documento discute a história e importância dos microorganismos nos alimentos. Ele explica como fatores intrínsecos como atividade de água, pH e nutrientes, e fatores extrínsecos como temperatura e umidade afetam o crescimento microbiano. Também descreve como a aplicação tecnológica pode controlar a microbiota dos alimentos através de uma combinação de obstáculos.
O documento discute fatores que influenciam o desenvolvimento microbiano em alimentos, incluindo fatores intrínsecos como pH, atividade de água e potencial redox, e fatores extrínsecos como temperatura, umidade relativa e presença de gases. A teoria dos obstáculos é abordada, enfatizando a interação entre múltiplos fatores para inibir o crescimento de microrganismos.
Trabalho na disciplina de Microbiologia.
Com enfoque em meios de cultura usados em laboratórios de analises clinicas. é utilizado no estudo das propriedades
bioquímicas das bactérias, auxiliando, assim,
sua identificação. Auxiliando no diagnóstico laboratorial. a escolha dos meios de cultura, para o
processamento inicial das amostras é muito
importante e está condicionada à flora
patogênica desse local;
- em geral é usado mais de um tipo de meio,
no sentido de fornecer condições de
crescimento a todos os patógenos possíveis
de estarem presentes.
O documento discute os requisitos nutricionais e meios de cultura para microorganismos. Descreve que os microrganismos precisam de fontes de carbono, nitrogênio, água e outros nutrientes para crescer, e que os meios de cultura fornecem esses nutrientes em quantidades e proporções adequadas para permitir o cultivo em laboratório. Também discute como os meios de cultura podem ser quimicamente definidos ou complexos, e as diferentes finalidades dos meios de cultura, como permitir o crescimento geral de
AULA 5. EXIGÊNCIAS NUTRICIONAIS E CONDIÇÕES FÍSICAS PARA O CULTIVO.pptxKairaEmanuellaSDaSil
O documento discute os requisitos nutricionais e condições físicas para o cultivo de microrganismos. Os principais pontos são: (1) microrganismos precisam de fontes de carbono, nitrogênio, água e outros nutrientes para crescer, (2) a temperatura, pH e pressão osmótica devem estar dentro de faixas adequadas, e (3) meios de cultura fornecem esses requisitos para permitir o estudo de microrganismos em laboratório.
O documento discute características e classificação de microrganismos de importância alimentar, incluindo bactérias, fungos e vírus. Detalha fatores que afetam o crescimento microbiano como temperatura, umidade e pH. Explica conceitos como coliformes a 35°C e 45°C e fornece exemplo de Escherichia coli.
Probióticos e prebióticos - Diretrizes Mundiais da Organização Mundial de Gas...Dr. Benevenuto
Diretrizes Mundiais da Organização Mundial de Gastroenterologia, 2011
1 Probióticos— o conceito 3
2 Produtos, postulados para a saúde, e comercialização 6
3 Probióticos— a ciência 12
4 Aplicações clínicas 15
5 Probióticos, prebióticos e evidência— o quadro geral 18
6 Websites úteis 29
7 Questões e opiniões 29
Oficina de culinária simbiótica por danilo carvalho slide_01Danilo
A oficina aborda os benefícios dos alimentos probióticos e o processo de fermentação, apresentando exemplos como kombucha, kefir, iogurte e chucrute. Discute conceitos como probióticos, prebióticos e simbióticos e seus efeitos positivos comprovados na saúde. A oficina ensina a cultivar colônias de probióticos e receitas para produzir esses alimentos.
O documento discute assepsia e antissepsia, métodos de higienização para evitar contaminação por agentes infecciosos. Também descreve diferentes classes de desinfetantes e anti-sépticos, incluindo seus efeitos sobre bactérias, fungos e vírus. Por fim, lista e explica os principais tipos de meios de cultura usados em microbiologia.
O documento discute a fisiologia bacteriana, abordando tópicos como nutrição bacteriana, condições de cultivo, meios de cultura, influência de fatores ambientais e curva de crescimento bacteriano. É explicado que bactérias requerem nutrientes específicos como carbono, oxigênio, nitrogênio e enxofre para seu crescimento e metabolismo, e que fatores como temperatura, pH e presença de oxigênio influenciam seu desenvolvimento. Também são detalhados os componentes e propósitos dos meios de
A química está presente nos alimentos desde o cultivo até o consumo. Produtos químicos são usados na agricultura para adubar e proteger cultivos, e também são adicionados a alimentos industrializados para conservação, cor e sabor. Embora esses produtos químicos aumentem a produção e duração dos alimentos, alguns podem poluir o solo e água ou causar problemas de saúde se ingeridos em excesso. A química é essencial para entender a composição e propriedades nutricionais dos alimentos.
O conceito de microbiologia é relativamente novo, no entanto, o controle dos microrganismos já era realizado a centenas de anos atrás. O cozimento dos alimentos é um dos métodos de preservação dos alimentos mais antigo e que é empregado até hoje com algumas modificações. Os microrganismos estão presentes em várias coisas que acontecem à nossa volta, estão envolvidos na fermentação, reciclagem de nutrientes, fabricação de alimentos e bebidas, na indústria farmacêutica, medicina e na agricultura.As descobertas que ocorrem na microbiologia ajudam os profissionais da saúde a compreender, diagnosticar e tratar doenças que não são bem compreendidas.
Ao trabalharmos com o manuseio de microrganismos, seja em um laboratório, um hospital, uma indústria dependemos de c onhecer formas de controlar os microrganismos no ambiente em quese encontram. Vários são os métodos que podem manter os microrganismos em uma população estável e a melhor a ser escolhida depende do que você quer destruir
Durante a quebra da teoria da gera ção espontânea, os cientistas da época comprovaram que a fervura poderia matar muitos microrganismos, embora bactérias esporulantes pudessem sobreviver devido à sua resistência ao calor. Os cientistas descobriram que os microrganismos poderiam ser mortos quando expostos a várias substâncias químicas ou de serem removidos do ar ou de um líquido utilizando filtros especiais.
Caro aluno (a),
Na presente atividade prática, você dará sequência na aula prática 1, cujo preparou os meios de cultura bacteriano e agora irá realizar o cultivo de bactérias presente no cotidiano. É de conhecimento cientifico que as infecções relacionadas com os profissionais da área se devem a higienização incorreta das mãos. Portanto, vocês irão semear no meio de cultivo amo stras coletas de mãos não higienizadas, higienizada apenas com álcool 70 e amostra obtida após a realização correta da antissepsia com álcool iodado.VÍDEO-POCKET LEARNING
EMBASAMENTO TEÓRICOAs substâncias antimicrobianas, são aquelas que matam ou inibem o crescimento dos microrganismos. Dependendo do microrganismo afetado se tornam específicos como: antibacterianos, antifúngicos, antiprotozoarios e antiviral. Os agentes antimicrobianos que matam os microrganismos são denominados de microbicidas.
As denominações bactericidas e fungicidas indicam o tipo de microrganismo destruído. E quando ocorre a destruição de todos os microrganismos presentes em um material é denominado de esterilização. No entanto tem os agentes que inibem o desenvolvimento do microrganismo, que são chamados microbiostáticos, e claro que muitas definições podem surgir sendo os mais utilizados fungistático e bacteriostático.
Caros alunos (as),
Ao realizar a prática, separe um espaço organizado, limpo e arejado. Separe todos os materiais necessários e coloque-os em uma disposição de fácil acesso e que permita que você fique confortável, de preferência sentado, respeitando uma postura correta.
Tome cuidado ao manipular os materiais, principalmente no momento de utilizar a fonte de calor, seja o fogão ou o micro-ondas. Coloque o seu material em recipiente adequado para cada situação.
/
VÍDEO POCKET LEARNINGPASSO A PASSO DA PRÁTICAProcedimento 1: Preparo do meio de cultura
1. Inicie o preparo separando os materiais.
2. Posteriormente, macere o tablete de caldo de carne, desmanchando os grumos. Misture com a gelatina em pó. Adicione uma xícara de água, leve ao fogo até ferver levemente e dissolver a gelatina e o caldo de carne.
3. Reserve e deixe esfriar brevemente.
Procedimento 2: Acondicionamento do meio de cultura em placa de Petri
1. Você encontrará as placas de Petri estéreis disponíveis para venda em lojas online. Somente abra as placas no momento da transferência do meio para evitar a contaminação das mesmas. 2. Para evitar a contaminação durante a manipulação das placas e transferência do meio de cultura. Acenda o fogo de uma das bocas do fogão e manuseie a transferência no perímetro ao entorno no fogo.
3. Transfira uma pequena quantidade do meio para as placas de Petri e aguarde sua solidificação em temperatura ambiente ou em geladeira para acelerar o processo caso seja necessário. Mas lembre-se, caso tenha levado as placas para solidificação em geladeira antes de realizar o semeio (prática 2) a mesma deverá estar em temperatura ambiente.
Escaneie ou clique sobre o QR Code
Caro aluno (a), Você deverá entregar o Relatório tipo Apresentação Simples (Power point ). Para isso, faça o download do template, disponibilizado junto a este roteiro, e siga as instruções contidas no mesmo.Vídeo cultivando microrganismos em casa Parte 1. Disponível em:
https://www.youtube.com/watch?v=u3Wfp_YAjIc
CONTROLE DO CRESCIMENTO MICROBIANO –ANTISSEPSIA DAS MÃOS1. Executar corretamente a higienização das mãos, compreendendo a diferença entre o método simples e a antissepsia.
2. Aplicar os conhecimentos obtidos na aula prática demonstrativa através da realização do semeio de amostras em meio de cultura.O conceito de microbiologia é relativamente novo, no entanto, o controle dos microrganismos já era realizado a centenas de anos atrás. O cozimento dos alimentos é um dos métodos de preservação dos alimentos mais antigo e que é empregado até hoje com algumas modificações. Os microrganismos estão presentes em várias coisas que acontecem à nossa volta, estão envolvidos na fermentação, reciclagem de nutrientes, fabricação de alimentos e bebidas, na indústria farmacêutica, medicina e na agricultura.As descobertas que ocorrem na microbiologia ajudam os profissionais da saúde a compreender, diagnosticar e tratar doenças que não são bem compreendidas.
Ao trabalharmos com o manuseio de microrgan
istático e bacteriostático.
Os agentes de controle dos microrganismos podem sofrer grande influência de vários fatores ambientais, bem como as características biológicas do microrganismo. Dentre as variáveis de maior importância a serem consideradas quando se quer avaliar a eficácia de uma agente antimicrobiano são: o tamanho da população microbiana; Intensidade ou concentração do antimicrobiano; tempo de exposição ao agente microbiano; temperatura que os microrganismos são expostos ao agente antimicrobiano; natureza do material que contém microrganismos e característica do microrganismo presente.
Em relação ao tamanho da população, quanto maior for mais tempo vai levar para morrer. Quanto menor for a intensidade ou a concentração do antimicrobiano mais tempo se leva para destruir uma população de microrganismos. E quando se leva em consideração o tempo de exposição, quanto maior for o tempo maior será o número de células mortas.
Os agentes microbianos são classificados como agentes físicos e químicos. A ocorrência da redução do número de microrganismos por meio de um método físico ou químico é denominado de Escaneie ou clique sobre o QR Code
desinfecção. Enquanto, a esterilização é a destruição de todas as formas de vida microbiana (fungos,
bactérias e vírus) seja por meio da aplicação de um método físico ou químico.
Entre os agentes físicos temos: o calor, a flambagem, a filtragem e a radiação. Todavia, os
métodos químicos utilizam substâncias que têm capacidade de matar ou inibir o crescimento de um
microrganismo. Dentre os métodos químicos podemos citar os gases tóxicos e as soluções
desinfetantes.
Entre as soluções desinfetantes mais utilizadas nos laboratórios de microbiologia podemos citar:
o álcool 70%, ou hipoclorito de sódio e o peróxido de hidrogênio. O álcool 70% é amplamente utilizado
na obtenção do microrganismo em cultivo puro, como também em superfícies de trabalho e câmara
de fluxo. Quando utilizamos o álcool 70 % para desinfetar fragmentos estes ficam de 30 a 60 segundos
mergulhados no álcool 70%. O hipoclorito de sódio ou cálcio é eficiente para eliminar microrganismos
oportunistas da superfície dos tecidos. O hipoclorito de sódio ou cálcio é utilizado nas concentrações
de 0,05 a 0,1%. E o peróxido de hidrogênio é usado na concentração de 5% (pv).
A higienização do laboratório é imprescindível temos que estar atentos a vários cuidados de
assepsia e o material a ser utilizado pois qualquer corpo estranho pode levar a risco todo o trabalho,
experimento ou resultado de uma pesquisa. IMPORTÂNCIA DA HIGIENIZAÇÃO DAS MÃOS
De acordo com as comprovações científicas as mãos são responsáveis pela transmissão das
infecções relacionadas a assistência à saúde, portanto, é de suma importância a realização de
procedimentos de higienização das mãos para diminuir as taxas de infecções principalmente entre os
profissionais de saúde.
VÍDEO POCKET LEARNINGPASSO A PASSO DA PRÁTICAProcedimento 1: Identificação das Placas de Petri
Escolha um local confortável com superfície previamente higienizada para iniciar o experimento.
a) Na aula prática 1 você preparou 3 meios de cultura sólidos em placas de Petri e após a solidificação dos meios poderá iniciar o experimento.
b) Com o auxílio de uma caneta marcadora identifique as placas de Petri como: 1) mão sem lavar, 2) álcool 70° e 3) Antissepsia com álcool iodado.
Procedimento 2: Obtenção da amostra e semeadura nos meios de culturaPara as 3 etapas do experimento a amostra deverá ser obtida sempre da mesma mão, podendo escolher realizar a coleta da mão direita ou esquerda.
a) Com o auxílio de um swab ou cotonete limpo (de preferência obtidos de embalagem lacrada sem estar no uso cotidiano). O mesmo foi umedecido no soro fisiológico e friccionadosobre a pele da palma da mão sem estar higienizada. Em seguida, a amostra foi semeada na placa de Petri contendo a identificação “mãos sem lavar (1)”; A semeadura consiste em depositar a amostra na placa de Petri em forma de estrias como mostrado na imagem abaixo.
Escaneie ou clique sobre o QR Code
a) Posteriormente, foi realizado a higienize das mãos com álcool em gel 70° (2). Um novo
swab ou cotonete foi umedecido no soro fisiológico e esfregue na pele das mãos e realizado a
semeadura na placa que estava identificada como álcool 70°.
b) Para finalizar a última parte do experimento, foi realizada a higienização das mãos com
sabão de acordo com a técnica de lavagem das mãos. Posteriormente, foi realizada a antissepsia das
mãos pré-lavadas, com álcool iodado deixando agir por 1 minuto, esperando secar ao ar. A seguir foi
utilizado outro swab ou cotonete umedecido no soro fisiológico e o mesmo foi friccionado na palma da
mão lavada e feito antissepsia corretamente. Após isto, foi realizado a semeadura no meio de cultura
identificado como antissepsia com álcool iodado (III).
Procedimento 3: Crescimento microbiano
OBSERVAÇÃO: Caso queira acelerar o processo de crescimento bacteriano e a temperatura se
sua cidade estiver fria o ideal que seja criado um ambiente aquecido imitando uma estufa. E
para isso basta acoplar uma lâmpada através de um foro na caixa de papelão e mantê-la ligada
na tomada. OBSERVAÇÃO: Caso queira acelerar o processo de crescimento bacteriano e a temperatura se
sua cidade estiver fria o ideal que seja criado um ambiente aquecido imitando uma estufa. E
para isso basta acoplar uma lâmpada através de um foro na caixa de papelão e mantê-la ligada
na tomada. Caro aluno (a), Você deverá entregar o Relatório tipo Apresentação Simples. Neste caso, estruture seu documento conforme apresentado a seguir. Para isso, faça o download do template em Power Point, disponibilizado junto a este roteiro.
• Vídeo correta lavagem das mãos: https://www.youtube.com/watch?v=qR0ejxtr_Wk• Vídeo aula prática antissepsia das mãos: https://eaulas.usp.br/portal/video.action?idItem=20059• Roteiro de Aula Práti
Microbiologia Geral e Biossegurança
MICROBIOLOGIA GERAL E BIOSSEGURANÇA1. Todos os campos do Formulário Padrão deverão ser devidamente preenchidos.
2. Esta é uma atividade individual. Caso seja identificado plágio, inclusive de colegas,
a atividade será zerada.
3. Cópias de terceiros como livros e internet, sem citar a fonte caracterizam-se como plágio, sendo o trabalho zerado.
4. Ao utilizar autores para fundamentar seu Projeto Integrador, os mesmos devem
ser referenciados conforme as normas da ABNT.
5. Ao realizar sua atividade, renomeie o arquivo, salve em seu computador,
anexe no campo indicado, clique em responder e finalize a atividade.
6. Procure argumentar de forma clara e objetiva, de acordo com o conteúdo da disciplina.
Formatação exigida: documento Word, Fonte Arial ou Times New Romantamanho 12.
MEIO DE CULTURA1. Conhecer as técnicas básicas utilizadas na rotina da microbiologia.
2. Produzir o meio de cultura sólida utilizado para favorecer o crescimento bacteriano.
A rotina laboratorial executada por profissional atuante nas análises clínicas é imprescindível para monitorar o estado de saúde dos indivíduos que devem manter o hábito constante de procurar atendimento médico-laboratorial. Os exames básicos promovem uma abordagem ampla a respeito dos agentes patológicos que pode estar prejudicando a saúde do paciente au xiliando profissionais da saúde a compreender, diagnosticar e tratar doenças.Caro aluno (a),
Na presente atividade prática, você irá preparar um meio de cultura caseiro utilizando recursos adaptados da versão laboratorial, mas que proporcionará a você a noção de como o meio de cultura para cultivo bacteriano é preparado. Vamos usar gelatina como substituto para o Ágar, responsável pela solidificação do meio. E o caldo de legumes que será fonte de nutrientes para o crescimento e reprodução das bactérias.
VÍDEO-POCKET LEARNING
EMBASAMENTO TEÓRICOA cultura pura é quando se obtêm um microrganismo por meio de uma única célula que cresce e se multiplica no meio de cultura , possibilitando o estudo das características morfológicas e fisiológicas dos microrganismos.
Quando estamos cultivando os microrganismos empregamos meio de cultura que contém nutrientes e vitaminas necessários parao seu crescimento e reprodução. O fornecimento de nutrientes tem que atender às exigências das espécies a serem cultivadas promovendo o crescimento e ou esporulação satisfatória do microrganismo. A maior parte dos microrganismos cultiváveis crescem em meio à cultura que contém uma fonte de carbono e nitrogênio e em menor quantidade outros nutrientes como potássio, fósforo, enxofre, ferro e manganês.
O carbono é um elemento de grande importância para o desenvolvimento de microrganismos,seja no seu habitat ou em meio de cultivo. Ele é um elemento estrutural que é considerado a principal fonte de energia. O carbono é fornecido por meio de monossacarídeos como glicose, frutose e galactose.
A higienização correta das mãos é uma medida individual simples e imprescindível para prevenir
a propagação das infecções. A higienização das mãos pode ser: simples, antisséptica, fricção
antisséptica e a antissepsia cirúrgica das mãos. A higienização das mãos possui as seguintes
finalidades:
1) Remoção de sujidade, suor, oleosidade, pelos, células descamativas e microbiota da
pele, interrompendo a transmissão de infecções veiculadas ao contato;
2) Prevenção e redução das infecções causadas pelas transmissões cruzadas.
A utilização de agente antisséptico para higienização das mãos deve ter ação antimicrobiana
imediata e efeito residual ou persistente. Não devem ser tóxicos, alergênicos ou irritantes para a pele.
Recomenda-se que sejam agradáveis de utilizar, suaves e, ainda, ofereçam boa relação
custobenefício, dentre os agentes antissépticos disponíveis os mais utilizados são: álcool e a
clorexidina. Os álcoois apresentam rápida ação e excelente atividade bactericida e fungicida usados
para higienização das mãos são o etanol, o isopropanol e o n-propanol. A clorexidina é um agente
antisséptico cuja atividade antimicrobiana é mais lentamente que a dos álcoois, sendo considerada de
nível intermediário. Porém, seu efeito residual, pela forte afinidade com os tecidos, torna-o o melhor
antisséptico disponíveis (CONSELHO REGIONAL DE FARMÁCIA DE SÃO PAULO, 2010).
A técnica de higienização das mãos se torna inadequado na prática diária pelo esquecimento
de algumas etapas necessárias deste procedimento, havendo preocupação, por parte dos
profissionais de saúde, com a quantidade e não com a qualidade deste ato. As principais falhas na
técnica ocorrem, principalmente, pela não utilização de sabonete e a não observação das superfícies
das mãos a serem friccionadas. A higienização das mãos dos profissionais da saúde pode ser feita
utilizando: água e sabonete, preparação alcoólica e antisséptico degermante.
As técnicas de higienização das mãos podem variar, dependendo do objetivo ao qual se
destinam, a eficácia deste procedimento depende da duração e da técnica empregada.
1) Higienização simples das mãos
Possui a finalidade de remoção dos microrganismos que colonizam as camadas superficiais da
pele, assim como o suor, a oleosidade e as células mortas, retirando a sujidade propícia à permanência
e à proliferação de microrganismos.
Duração do procedimento: 40 a 60 segundos.
2) Higienização antisséptica das mãos A finalidade dessa técnica é promover a remoção de sujidades e de microrganismos, reduzindo
a carga microbiana das mãos, com auxílio de um antisséptico. A técnica de higienização antisséptica
é igual àquela utilizada para higienização simples das mãos, com a diferença que o sabonete é
substituído por um antisséptico degermante, por exemplo, clorexidina.
Duração do procedimento: 40 a 60 segundos.
Os meios de cultivo podem apresentar se: seletivos, não seletivos e diferenciais. Os meios de
cultivos seletivos são aqueles que você vai adicionar uma substância que favorece o desenvolvimento
de um determinado organismo. Por exemplo adiciona cristal de violeta ao meio de cultivo favorecendo
o desenvolvimento de bactérias Gram negativa. Os meios de cultivo que desenvolvem uma grande
gama de microrganismos são denominados meios não seletivos. E os meios diferenciais, são meios
que permitem, mediante a adição de reagentes, verificar o comportamento de dois ou mais
microrganismos. Por exemplo quando adiciona ao meio de cultivo eosina e azul de metileno consegue
ver a diferença de Escherichia coli de Enterobacter aerogenes.
O meio de cultivo Batata-agar-dextrose (BDA), que é considerado o meio universal pois suporta
o crescimento de muitos organismos (fungos e bactérias) por isso é usado mundialmente como meio
de rotina nos laboratórios para o isolamento (obtenção da cultura pura) e manutenção temporária das
culturas.
A batata serve como importante fonte de Carboidrato, o amido é absorvido pelo microrganismo
como glicose após a hidrólise enzimática. A dextrose na quantidade certa permite o crescimento do
microrganismo pois é um monossacarídeo mais importante utilizado como fonte de energia na
respiração de procariotos e eucariotos. Como é preparado este meio, qual a receita do meio? O modo
de preparo é simples. Primeiro passo é ferver 200g de batata em 500 ml de água por 30 minutos.
Em seguida filtrar o caldo em gases. Fazer a fusão do ágar (20g) junto com a quantidade de
dextrose (20g) em 500 ml de água. Em seguida adicione o caldo e complete o volume para 1000 ml
de água. E o meio está pronto para ser esterilizado. Após ser esterilizado pode ser vertido em placas
de Petri, para ser feito o isolamento do microrganismo.
Referência: Página 26-28 da unidade II da apostila de Microbiologia e biossegurança.Materiais de consumo:
Descrição Observação3 placas de Petri estéril descartável Material a ser fornecido pelo alunoÁgua Material a ser fornecido pelo aluno 1 tablete de caldo de carne Material a ser fornecido pelo aluno 1 envelope de gelatina em pó incolor Material a ser fornecido pelo aluno Fogão Material a ser fornecido pelo aluno Panela Material a ser fornecido pelo aluno Software/aplicativo/simuladorSim ( ) Não ( X )
Em caso afirmativo, qual?
Pago ( ) Não Pago ( )
Tipo de Licença: Não se aplica
Descrição do software/aplicativo/simulador:
Caso não seja necessário o uso do recurso, preencher com *Não se aplica (NSA)
O nitrogênio é a parte essencial para a formação dos aminoácidos que compõem as proteínas e é fornecido de forma orgânica (asparagina, caseína e peptona) e de forma inorgânica (nitrato de sódio e nitrato de cálcio). Enquanto que o enxofre é utilizado na forma de sulfato para a biossíntese de aminoácidos como cisteínas e metio nina. O enxofre na forma de sulfeto pode ser tóxico aos microrganismos. O fosfato é um componente da membrana e está presente na síntese dos ácidos nucleicos e ATP e é fornecido como fosfato de potássio. Os demais nutrientes são necessários em pequena quan tidade e funcionam como cofatores. Entretanto, a composição do meio de cultivo depende do microrganismo que se deseja cultivar e do objeto de estudo.
Escaneie ou clique sobre o QR Code
De modo geral, quando trabalhamos com o cultivo de microrganismos o ambiente é asséptico,
ou seja, ambiente livre de contaminação. Após o preparo dos meios de cultivo eles devem ser
esterilizados, para garantir que estamos trabalhando somente com o microrganismo que pretendemos
estudar. Os meios de cultivo são classificados quanto: sua consistência; composição e seletividade.
Quanto à consistência, o meio pode ser líquido ou sólido. O meio líquido contém todos os
nutrientes necessários para o crescimento do microrganismo são dissolvidos em água. Uma vez
preparado e esterilizado pode inserir o microrganismo que se pretende trabalhar em meio de cultivo.
Este meio é utilizado quando se tem por objetivo obter maior massa em menor tempo, geralmente é
utilizado para o crescimento de bactérias. Contudo, os meios sólidos são preparados a partir da adição
de um agente solidificador, o AGAR na concentração de 1,5 a 2% p/v, antes de esterilização. Este tipo
de meio é o mais utilizado para a obtenção de culturas puras para estudar as características
morfológicas e para a estocagem de culturas puras.
O meio de cultivo em relação a sua composição pode ser: Sintético, semissintético e natural.
O meio sintético é quando sua composição química e concentrações são conhecidas. Um
exemplo é o meio CZAPK (nitrato de sódio 2g L-1, sulfato de magnésio 0,5 2g L-1, cloreto de potássio
0,52g L-1, sulfato ferroso 0.01 2g L-1, difosfato de potássio 1,0 2g L-1, sacarose 30 2g L-1, e o pH final
7,2).
O meio de cultivo semissintético é a composição química é parcialmente conhecida de alguns
componentes, por exemplo o meio de cultivo batata-ágar-dextrose. Sua composição é 500 ml do caldo
de batata (componentes desconhecidos), 20g dextrose e 20 g de ágar e completa para 1000 ml de
água.
Quando a composição do meio é desconhecida por completo, é denominado de meio de
cultivo natural como por exemplo o meio cenoura-ágar, que é composto de 400 ml do extrato de
cenoura, 20 g de ágar e completa para 1000 ml de água. O meio natural por apresentar baixo custo,
acaba sendo o mais utilizado nos laboratórios de pesquisa.
Caros alunos (as),
Ao realizar a prática, separe um espaço organizado, limpo e arejado. Separe todos os materiais necessários e coloque-os em uma disposição de fácil acesso e que permita que você fique confortável, de preferência sentado, respeitando uma postura correta.
Tome cuidado ao manipular os materiais, principalmente no momento de utilizar a fonte de calor, seja o fogão ou o micro-ondas. Coloque o seu material em recipiente adequado para cada situação.
/
VÍDEO POCKET LEARNINGPASSO A PASSO DA PRÁTICAProcedimento 1: Preparo do meio de cultura
1. Inicie o preparo separando os materiais.
2. Posteriormente, macere o tablete de caldo de carne, desmanchando os grumos. Misture com a gelatina em pó. Adicione uma xícara de água, leve ao fogo até ferver levemente e dissolver a gelatina e o caldo de carne.
3. Reserve e deixe esfriar brevemente.
Procedimento 2: Acondicionamento do meio de cultura em placa de Petri
1. Você encontrará as placas de Petri estéreis disponíveis para venda em lojas online. Somente abra as placas no momento da transferência do meio para evitar a contaminação das mesmas. 2. Para evitar a contaminação durante a manipulação das placas e transferência do meio de cultura. Acenda o fogo de uma das bocas do fogão e manuseie a transferência no perímetro ao entorno no fogo.
3. Transfira uma pequena quantidade do meio para as placas de Petri e aguarde sua solidificação em temperatura ambiente ou em geladeira para acelerar o processo caso seja necessário. Mas lembre-se, caso tenha levado as placas para solidificação em geladeira antes de realizar o semeio (prática 2) a mesma deverá estar em temperatura ambiente.
Escaneie ou clique sobre o QR Code
Caro aluno (a), Você deverá entregar o Relatório tipo Apresentação Simples (Power point ). Para isso, faça o download do template, disponibilizado junto a este roteiro, e siga as instruções contidas no mesmo.• Vídeo cultivando microrganismos em casa Parte 1. Disponível em:
https://www.youtube.com/watch?v=u3Wfp_YAjIc
CONTROLE DO CRESCIMENTO MICROBIANO –ANTISSEPSIA DAS MÃOS1. Executar corretamente a higienização das mãos, compreendendo a diferença entre o método simples e a antissepsia.
2. Aplicar os conhecimentos obtidos na aula prática demonstrativa através da realização do semeio de amostras em meio de cultura.
O conceito de microbiologia é relativamente novo, no entanto, o controle dos microrganismos já era realizado a centenas de anos atrás. O cozimento dos alimentos é um dos métodos de preservação dos alimentos mais antigo e que é empregado até hoje com algumas modificações. Os microrganismos estão presentes em várias coisas que acontecem à nossa volta, estão envolvidos na fermentação, reciclagem de nutrientes, fabricação de alimentos e bebidas, na indústria farmacêutica, medicina e na agricultura.As descobertas que ocorrem na microbiologia ajudam os profissionais da saúde a compreender, diagnosticar e tratar doenças que não são bem compreendidas.
Ao trabalharmos com o manuseio de micror
O meio de cultivo em relação a sua composição pode ser: Sintético, semissintético e natural.
O meio sintético é quando sua composição química e concentrações são conhecidas. Um
exemplo é o meio CZAPK (nitrato de sódio 2g L-1, sulfato de magnésio 0,5 2g L-1, cloreto de potássio
0,52g L-1, sulfato ferroso 0.01 2g L-1, difosfato de potássio 1,0 2g L-1, sacarose 30 2g L-1, e o pH final
7,2).
O meio de cultivo semissintético é a composição química é parcialmente conhecida de alguns
componentes, por exemplo o meio de cultivo batata-ágar-dextrose. Sua composição é 500 ml do caldo
de batata (componentes desconhecidos), 20g dextrose e 20 g de ágar e completa para 1000 ml de
água.
Quando a composição do meio é desconhecida por completo, é denominado de meio de
cultivo natural como por exemplo o meio cenoura-ágar, que é composto de 400 ml do extrato de
cenoura, 20 g de ágar e completa para 1000 ml de água. O meio natural por apresentar baixo custo,
acaba sendo o mais utilizado nos laboratórios de pesquisa.
Os meios de cultivo podem apresentar se: seletivos, não seletivos e diferenciais. Os meios de
cultivos seletivos são aqueles que você vai adicionar uma substância que favorece o desenvolvimento
de um determinado organismo. Por exemplo adiciona cristal de violeta ao meio de cultivo favorecendo
o desenvolvimento de bactérias Gram negativa. Os meios de cultivo que desenvolvem uma grande
gama de microrganismos são denominados meios não seletivos. E os meios diferenciais, são meios
que permitem, mediante a adição de reagentes, verificar o comportamento de dois ou mais
microrganismos. Por exemplo quando adiciona ao meio de cultivo eosina e azul de metileno consegue
ver a diferença de Escherichia coli de Enterobacter aerogenes.
O meio de cultivo Batata-agar-dextrose (BDA), que é considerado o meio universal pois suporta
o crescimento de muitos organismos (fungos e bactérias) por isso é usado mundialmente como meio
de rotina nos laboratórios para o isolamento (obtenção da cultura pura) e manutenção temporária das
culturas.
A batata serve como importante fonte de Carboidrato, o amido é absorvido pelo microrganismo
como glicose após a hidrólise enzimática. A dextrose na quantidade certa permite o crescimento do
microrganismo pois é um monossacarídeo mais importante utilizado como fonte de energia na
respiração de procariotos e eucariotos. Como é preparado este meio, qual a receita do meio? O modo
de preparo é simples. Primeiro passo é ferver 200g de batata em 500 ml de água por 30 minutos.
Em seguida filtrar o caldo em gases. Fazer a fusão do ágar (20g) junto com a quantidade de
dextrose (20g) em 500 ml de água. Em seguida adicione o caldo e complete o volume para 1000 ml
de água. E o meio está pronto para ser esterilizado. Após ser esterilizado pode ser vertido em placas
de Petri, para ser feito o isolamento do microrganismo.
Referência: Página 26-28 da unidade II da apostila de Microbiologia e biossegurança.Materiais de consumo:
Descrição Observação3 placas de Pe
Semelhante a Culturas e isolamento de bacterias meios (20)
1. nstituto Superior de Ciências da Saúde- Sul Manual Prático de Microbiologia
CAPÍTULO 3
Cultura e isolamento de bactérias
3.1 - Introdução
3.1.1 - Generalidades
A maior parte das técnicas bacteriológicas (conservação, isolamento, identificação, ou
contagem de bactérias), exigem a utilização de meios de cultura, sendo a composição
dos meios de cultura função dos conhecimentos sobre os princípios de nutrição
microbiana. Os meios de cultura devem conter, de uma forma utilizável, os nutrientes
necessários ao crescimento das bactérias, nomeadamente, macronutrientes (C, H, N, O,
P, S, K, Mg, Na, etc.), micronutrientes (Fe, Cu, Zn, etc.), e factores de crescimento (por
ex. vitaminas e aminoácidos). Para que se observe crescimento bacteriano há ainda que
incubar os meios em condições adequadas de pH, tensão de oxigénio e temperatura.
Somente em casos excepcionais, se pode identificar uma bactéria pelas suas
características morfológicas. É portanto essencial obtê-la em cultura em meio artificial
e, na hipótese de estarem presentes diversas espécies, separá-las ou isolá-las em cultura
pura, para se poderem efectuar testes de identificação de natureza bioquímica.
Para cultivar uma espécie bacteriana deve adicionar-se a um meio de cultura estéril
adequado uma pequena amostra contendo células vivas da espécie. A essa amostra
chama-se inóculo, e à adição desse inóculo ao meio, chama-se inoculação. O meio
inoculado é então incubado em condições convenientes de temperatura, humidade, etc.,
durante um certo tempo. Durante a incubação, as bactérias multiplicam-se e formam
uma cultura, o que se define como uma população de bactérias (organismos) que se
desenvolve num meio ou à sua superfície.
3.1.2 - Classificação dos meios de cultura
Os meios de cultura podem ser classificados em função da sua consistência, composição
e tipo de utilização.
a) Consistência
Existem meios de cultura em três estados físicos:
• líquido
28
2. nstituto Superior de Ciências da Saúde- Sul Manual Prático de Microbiologia
• semi-sólido
• sólido
Os meios líquidos, como os caldos nutritivos de crescimento, podem ser utilizados para
a multiplicação de microrganismos em estudos de fermentação e em vários testes
bioquímicos. Apresentam no entanto, dois inconvenientes: 1) as culturas desenvolvidas
não revelam em geral quaisquer características especiais e portanto o seu valor é
limitado na identificação de bactérias; 2) é impossível a separação de espécies
bacterianas que se encontrem em misturas.
Ao contrário dos meios líquidos, os meios sólidos e semi-sólidos contêm um agente
solidificante, normalmente o agar. O agar é um polissacárido complexo extraído de
uma alga marinha (agar-agar) e tem várias propriedades que o tornam um agente
solidificante ideal, incluindo ficar transparente no ponto de ebulição da água, não ser
um nutriente para a maior parte dos microrganismos e não ser metabolizado durante o
crescimento microbiano.
Os meios semi-sólidos (aos quais são adicionados geralmente 5 g/l de agar) podem ser
utilizados em estudos de fermentação, estudos de mobilidade bacteriana (ex.: meio
manitol-mobilidade) e na promoção do crescimento de bactérias anaeróbias.
Os meios sólidos (aos quais são adicionados geralmente 15 g/l de agar) permitem
observar as colónias das diferentes bactérias que se desenvolvem à superfície (e por
vezes no interior) do meio e que mostram muitas vezes aspecto e cor diferentes,
auxiliando a sua posterior identificação. São praticamente indispensáveis à obtenção de
culturas puras. São ainda utilizados para a conservação de culturas, e permitem observar
determinadas reacções bioquímicas específicas (ver meios diferenciais).
Uma colónia é um número elevado de células bacterianas em meio de cultura sólido que
é visível a olho nú como uma entidade discreta. Assume-se que uma colónia provém de
uma única célula e portanto representa um clone de uma cultura pura.
b) Composição
Os microrganismos podem ser cultivados utilizando dois tipos diferentes de meios. Os
meios sintéticos, ou quimicamente definidos que são compostos por produtos químicos
bem definidos e dissolvidos em água destilada em proporções determinadas, de modo a
29
3. nstituto Superior de Ciências da Saúde- Sul Manual Prático de Microbiologia
constituir uma solução de nutrientes devidamente tamponada (ex. meio de citrato de
Simmons), e os meios complexos, compostos por uma variedade de substâncias
nutricionalmente indefinidas, de origem animal, vegetal ou microbiana como por
exemplo, extracto de carne, peptonas, e extracto de levedura, que são naturalmente ricos
em nutrientes e vitaminas. Como exemplos destes meios têm-se as geloses de
McConkey, Drigalsky ou Endo.
c) Tipo de utilização
• Meios de isolamento
Os meios de isolamento permitem a obtenção de culturas puras e podem ser de vários
tipos:
Meios basais - Permitem o crescimento de bactérias pouco exigentes. Não existe um
meio de cultura universal (ex. caldo nutritivo, água peptonada, triptona sal, gelose
nutritiva).
Meios selectivos - Permitem o crescimento só de um tipo de bactérias em detrimento
das outras cujo crescimento é inibido. Torna-se útil, no caso de uma população
plurimicrobiana, porque permite favorecer a cultura preferencial de certas bactérias.
Meios diferenciais - São utilizados quando se pretende diferenciar entre vários
microrganismos presentes no meio de cultura. Por exemplo, no caso da gelose sangue,
dado que algumas bactérias produzem enzimas (hemolisinas) que vão lisar os glóbulos
vermelhos enquanto outras não; dependendo do padrão de hemólise pode-se distinguir
entre bactérias hemolíticas (Streptococcus pyogenes) e não hemolíticas.
Meios selectivos e diferenciais - Alguns meios de cultura são simultaneamente
selectivos e diferenciais. São sobretudo utilizados em microbiologia clínica e na área da
saúde pública, como por exemplo na determinação da qualidade da água ou num surto
de intoxicações alimentares. Temos como exemplos deste tipo de meio:
a. Gelose de McConkey - É um meio selectivo, uma vez que contém sais biliares e
cristal violeta que inibem o crescimento das bactérias Gram positivas, permitindo o
crescimento, apenas das bactérias Gram negativas. É diferencial porque a lactose está
presente neste meio e permite diferenciar entre as bactérias Gram negativas que utilizam
a lactose como substrato fermentativo e as que não utilizam. As bactérias Gram
negativas fermentadoras de lactose, tornam o meio ácido e o indicador de pH do meio
30
4. nstituto Superior de Ciências da Saúde- Sul Manual Prático de Microbiologia
de cultura (vermelho de metilo) em meio ácido fica vermelho. As bactérias Gram
negativas que não fermentam a lactose, não acidificam o meio, e este permanece da cor
original.
b. Gelose de Drigalsky - É um meio muito semelhante ao anterior e contém,
igualmente, lactose, indicador de pH (azul de bromotimol), cristal violeta (inibidor das
bactérias Gram positivas). Permite distinguir também entre bactérias Lac +
(fermentadoras de lactose) e Lac - (não fermentadoras de lactose). As primeiras
originam colónias de cor amarela (o pH do meio baixa devido à acumulação de produtos
de fermentação e o indicador “vira” para amarelo); as segundas originam colónias azuis
(a cor original do meio).
c. Meio de Chapman - É um meio selectivo para os estafilococos devido à elevada
concentração de cloreto de sódio (7.5 %) que somente aquelas bactérias suportam. Por
conter manitol (um poliálcool derivado de um açúcar - a manose) é também, diferencial
(por ex.) para Staphylococcus aureus, uma vez que as espécies potencialmente
patogénicas do género Staphylococcus são fermentadoras de manitol. A acumulação dos
produtos de fermentação acidifica o meio, e o indicador de pH (vermelho de fenol)
“vira” de vermelho (cor original do meio) para amarelo, originando colónias amarelas
rodeadas de um halo também amarelo. As espécies de estafilococos não fermentadoras
de manitol apresentam neste meio, colónias incolores (ex. S. epidermidis).
Meios enriquecidos - Os ambientes naturais são geralmente habitados por populações
de vários tipos de bactérias. Quando uma espécie com especial interesse e
nutricionalmemte exigente, se encontra presente num determinado produto mas em
número muito baixo, é fundamental a utilização de um meio muito rico
nutricionalmente e em que nenhum agente inibidor se encontre presente. Estes meios
enriquecidos são meios basais adicionados de produtos biológicos ricos em nutrientes
como o soro, ovo ou sangue. Exemplos: gelose sangue, gelose chocolate, “brain heart
infusion” (BHI).
Gelose Chocolate - É um meio enriquecido com sangue previamente sujeito a
aquecimento a 80ºC durante 20 minutos o que promove a lise dos glóbulos vermelhos e
lhe confere a cor castanha, responsável pelo nome atribuído. A lise dos glóbulos
vermelhos liberta para o meio extracelular, proteínas, cujos cofactores são importantes
factores de crescimento para bactérias muito exigentes (ex. o grupo heme é fundamental
31
5. nstituto Superior de Ciências da Saúde- Sul Manual Prático de Microbiologia
para o crescimento de Haemophilus influenzae, agente importante de meningites
bacterianas em crianças).
• Meios de enriquecimento
São meios líquidos, que favorecem o crescimento de determinadas espécies aumentando
a sua quantidade relativamente a outras, podendo conduzir depois a culturas puras por
sobreposição de espécies (ex. meio de enriquecimento para organismos fotoautotróficos
- meio sem fonte de carbono adicionada; ex. caldo de selenito de sódio para
enriquecimento de fezes em Salmonella e Shigella, agentes causadores de intoxicações
alimentares).
• Meios de transporte
Servem para o transporte de um determinado material biológico a partir do qual se
propõe isolar um ou mais organismos. É então importante manter a viabilidade dos
microrganismos nele existentes sem que haja multiplicação dos mesmos (durante um
período de 48 a 72 horas) e também a sua quantidade relativa no produto biológico para
que depois a inoculação dos meios origine resultados que reflictam a proporção relativa
dos microrganismos nesse produto biológico (ex. meio de Stuart).
• Meios de identificação
São meios que permitem pôr em evidência as características bioquímicas das bactérias
e, por conseguinte, resolver os problemas de identificação postos entre espécies (ex.
meio Clark-Lubs - permite distinguir entre bactérias que fazem a fermentação
butanodiólica da glucose e bactérias que fazem a fermentação ácida mista da glucose).
• Meios de conservação
São meios que permitem a manutenção das bactérias num estado de vida latente durante
meses, anos ou décadas.
3.1.3 - Reconstituição de meios de cultura (esquema geral)
a) Pesagem do meio liofilizado ou, no caso dos meios sintéticos, dos vários compostos
químicos.
b) Adição de água destilada.
32
6. nstituto Superior de Ciências da Saúde- Sul Manual Prático de Microbiologia
c) Dissolução completa dos componentes em banho-maria agitando periodicamente.
d) Esterilização (geralmente em autoclave).
e) Adição da fonte de carbono esterilizada por filtração, no caso dos meios sintéticos,
uma vez que soluções concentradas de glúcidos não devem ser submetidas a
temperaturas elevadas porque caramelizam.
f) Distribuição em tubos ou caixas de Petri após arrefecimento a 40 - 45º C.
3.1.4 - Técnicas de inoculação ou sementeira de meios de cultura sólidos
a) Inundação
É utilizada uma suspensão (que pode previamente ser submetida a várias diluições),
com que se inunda a superfície do meio sólido a usar. O excesso de inóculo é removido
por sucção a vácuo após agitação e a superfície do meio é deixada secar ao ar em
atmosfera asséptica.
b) Espalhamento
É utilizada para contagem de colónias e o inóculo (suspensão) é, neste caso, aplicado à
superfície de meio sólido com um espalhador em L ou, simplesmente, com uma pipeta
de Pasteur dobrada a quente, ou ainda por intermédio de uma zaragatoa.
c) Estrias
A inoculação por estrias é realizada com a finalidade de obter colónias isoladas, e
realiza-se à superfície de meio sólido, com uma ansa de Henle, a partir de uma
suspensão ou de uma colónia isolada (Fig. 3.1).
Figura 3. 1. Esquema
da inoculação de meios
de cultura sólidos pela
técnica das estrias.
33
7. nstituto Superior de Ciências da Saúde- Sul Manual Prático de Microbiologia
d) Incorporação
A inoculação por incorporação é utilizada para contagem de colónias à superfície e no
interior de meio sólido e realiza-se por incorporação do inóculo (suspensão) no meio,
enquanto quente (não mais do que 40ºC para não destruir o inóculo) e portanto ainda
liquefeito.
e) Picada central
Este tipo de inoculação é utilizado por exemplo, no estudo da mobilidade bacteriana e
realiza-se por picada central com a ansa de Henle, ou pipeta de Pasteur fechada, num
meio gelosado em tubo.
3.1.5 - Incubação dos meios de cultura inoculados
Após a inoculação e a devida identificação dos tubos ou caixas de Petri, os meios de
cultura devem ser incubados, isto é, colocados em estufas próprias para o efeito, em
condições adequadas de temperatura, humidade e tempo (geralmente em microbiologia
clínica, 37ºC/24h, uma vez que quase todos os agentes patogénicos são organismos
mesófilos).
3.1.6 - Leitura dos resultados
A observação dos resultados deve ser feita tendo em conta alguns aspectos como a
densidade da cultura, presença de pigmentos solúveis, a presença de odor característico
e o aspecto da cultura, e nomeadamente em meio sólido, a existência de colónias
isoladas e suas características particulares (ver 3.1.7).
3.1.7 - Aspecto das colónias crescidas em meio sólido (Fig. 3.2)
a) Tamanho
• colónias pequenas - diâmetro (d) < 1 mm
• colónias médias - 1.5 < d < 3 mm
• colónias grandes - d > 3 mm
b) Forma geral
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• desenho dos contornos:
bordos lisos regulares
bordos irregulares
bordos dentados
bordos com prolongamento
• forma de relevo:
lisas
convexas
semi-convexas
acuminadas
mamelonadas
umbilicadas
c) Transparência:
• transparentes
• translúcidas
• opacas
• lactescentes
d) Aspecto da superfície:
• colónias lisas
bordos regulares
superfície lisa e brilhante por vezes
consistência cremosa
suspensão homogénea
muitas vezes semi-convexas
• colónias rugosas
bordos muitas vezes dentados
superfície rugosa, baça
consistência pulvurulenta
suspensão heterogénea
sobretudo lisas
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• colónias mucosas
bordos lisos e regulares
convexas
superfície lisa e brilhante
suspensão heterogénea
e) Pigmentação:
A elaboração de um pigmento por certas bactérias pode ser um elemento precioso de
identificação. Exemplos:
Serratia marcescens - colónias vermelhas
Pseudomonas aeruginosa - colónias verdes azuladas (pigmentos - pioverdina e
piocianina)
Forma
Elevação
Margem
Ponto Circular Filamentosa Irregular Rizoidal Fuso
Achatada Elevada Convexa Pulverulenta Umbilical
Inteira Ondulada Lobulada Filamentosa EncaracoladaErusionada
Forma
Elevação
Margem
Ponto Circular Filamentosa Irregular Rizoidal Fuso
Achatada Elevada Convexa Pulverulenta Umbilical
Inteira Ondulada Lobulada Filamentosa EncaracoladaErusionada
Figura 3. 2. Representação esquemática da forma, elevação e margem das colónias
bacterianas obtidas em meio sólido.
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3.2 - Protocolos experimentais
Utilizando bactérias em meio líquido:
1) No meio de tripticase-soja-agar (TSA), inocular por espalhamento E. coli, utilizando
uma pipeta Pasteur como espalhador.
2) No meio de Drigalsky, dividir a placa em duas partes e inocular Proteus spp. e E. coli
por estrias, usando a ansa de Henle.
3) No meio de Chapman, dividir a placa em duas partes e inocular Staphylococcus spp.
e E. coli por estrias, usando a ansa de Henle.
4) Na gelose chocolate, dividir a placa em três partes e inocular por estrias, utilizando
uma zaragatoa as seguintes bactérias: E. coli, Proteus spp. e Staphylococcus spp.
5) Nos tubos de manitol-mobilidade, com a ansa de Henle, inocular Staphylococcus spp.
e Proteus spp por picada central.
Utilizando bactérias isoladas em meio sólido:
1) Com a ansa de Henle retirar 3 ou 4 colónias:
• de uma das bactérias inoculadas no meio de Drigalsky e suspender em soro
fisiológico (SF) ou meio BHI
• de uma das bactérias inoculadas no meio de Chapman e suspender em SF ou BHI
2) Com a ansa, tirar 4 ou 5 gotas das suspensões anteriores para lâminas, fazer
esfregaços, e realizar para cada uma a coloração de Gram.
3.3 – Resultados e discussão
3.3.1 - Classifique quanto à mobilidade as bactérias que inoculou no meio manitol-
mobilidade.
3.3.2 - Identifique as bactérias fermentadoras e não fermentadoras de lactose.
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3.3.3 - Identifique as bactérias fermentadoras e não fermentadoras de manitol.
3.3.4 - Identifique a morfologia e o modo de agrupamento das bactérias estudadas.
3.3.5 - Classifique as bactérias estudadas como Gram (+) ou Gram (-).
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