1) O documento descreve vários métodos de controle microbiológico, incluindo esterilização, desinfecção e outros métodos físicos e químicos.
2) Os métodos físicos incluem calor úmido e seco, filtração, radiação e dessecação. O calor é um dos métodos mais eficientes, enquanto a filtração é usada para materiais termolábeis.
3) Os métodos químicos incluem fenóis, álcoois, biguanidas, metais pesados e
1. 1
CONTROLE MICROBIANOCONTROLE MICROBIANO
P r o f . F e l i p e P i e d a d e G . N e v e s
P r o f . F e l i p e P i e d a d e G . N e v e s
EsterilizaEsterilizaçção:ão: DestruiDestruiçção ou remoão ou remoçção deão de todastodas as formas de vida de um objeto ou habitat.as formas de vida de um objeto ou habitat.
DesinfecDesinfecçção:ão: ReduReduçção do não do núúmero de microrganismos em superfmero de microrganismos em superfíícies inanimadas ecies inanimadas e
consequenteconsequente eliminaeliminaçção de sua potencialidade infecciosa.ão de sua potencialidade infecciosa.
SanitizaSanitizaççãoão:: SemelhanteSemelhante àà desinfecdesinfecçção, porão, poréém usado rotineiramente na indm usado rotineiramente na indúústria destria de
alimentos.alimentos.
AntissepsiaAntissepsia:: SemelhanteSemelhante àà desinfecdesinfecçção, porão, poréém relacionada am relacionada a tecidos vivostecidos vivos;;
InibiInibiçção do crescimento microbianoão do crescimento microbiano XX DestruiDestruiçção do organismoão do organismo
(BacterioST(BacterioSTÁÁTICO)TICO) (BacteriCIDA, fungiCIDA)(BacteriCIDA, fungiCIDA)
CONTROLE DO CRESCIMENTO MICROBIANOCONTROLE DO CRESCIMENTO MICROBIANO
MÉTODOS DE CONTROLE
Métodos físicos e químicos de controle dos microrganismos
FÍSICOS
Temperatura
Radiação
Filtração
Dessecação
Remoção de O2
Vibração ultra-sônica
QUÍMICOS
Desinfetantes
Antissépticos
Preservativos usados em
alimentos
MÉTODOS FÍSICOS
TEMPERATURA
CALOR
• Um dos agentes físicos mais práticos e eficientes para a esterilização e/ou
desinfecção. O calor pode ser empregado sob duas formas: seco e úmido, tendo a
vantagem de apresentar, apenas 2 parâmetros a serem controlados: tempo e
temperatura.
• Esporos mais resistentes destruição por temperaturas acima de 100°C
Calor úmido Autoclave
Pasteurização
Água em ebulição
Calor seco Estufas e fornos
Flambagem
Incineração
BAIXAS TEMPERATURAS
Causa diminuição na taxa de crescimento e na atividade enzimática;
Métodos Refrigeração 0 à 7oC;
Congelamento Residências e indústrias alimentícias
CALORCALOR ÚÚMIDOMIDO
Processo mais eficiente devido ao maior poder de penetraProcesso mais eficiente devido ao maior poder de penetraçção do vapor dão do vapor d’á’água.gua.
A morteA morte éé decorrente da desnaturadecorrente da desnaturaçção deão de áácidos nuclcidos nuclééicos e proteicos e proteíínas, podendo tambnas, podendo tambéémm
romper membranas.romper membranas.
AutoclaveAutoclave (121(121°°C / 15 min)C / 15 min)
Processo mais utilizado em microbiologia;Processo mais utilizado em microbiologia;
DestrDestróói ci céélulas vegetativas e esporos, em um pequenolulas vegetativas e esporos, em um pequeno
volume, em 10 a 12 minutos.volume, em 10 a 12 minutos.
ÁÁgua em ebuligua em ebuliççãoão (100(100°°C/30 min.)C/30 min.)
A tA tíítulo de comparatulo de comparaçção, a eliminaão, a eliminaçção de esporos deão de esporos de C.C. botulinumbotulinum pela fervura, requerpela fervura, requer
cerca de 5,5 horas. Por outro lado, a 121cerca de 5,5 horas. Por outro lado, a 121°°C, estes esporos são eliminados apC, estes esporos são eliminados apóós 4 a 5s 4 a 5
minutos.minutos.
MÉTODOS FÍSICOS
CALORCALOR ÚÚMIDOMIDO
PasteurizaPasteurizaççãoão
6363°°C / 30 minC / 30 min pasteurizapasteurizaçção lentaão lenta
7272°°C /15 segC /15 seg pasteurizapasteurizaçção rão ráápidapida
O tratamento tO tratamento téérmicormico éé breve para evitar alterabreve para evitar alteraçções significativas no sabor e teorões significativas no sabor e teor
nutricional de alimentos, pornutricional de alimentos, poréém alguns microrganismos podem persistir e causarm alguns microrganismos podem persistir e causar
deterioradeterioraçção.ão.
NãoNão eliminaelimina todostodos osos microrganismosmicrorganismos ((nãonão éé esterilizaesterilizaççãoão););
TemTem comocomo alvoalvo microrganismosmicrorganismos patogênicospatogênicos tipicamentetipicamente presentespresentes emem alimentosalimentos;;
ProcessoProcesso muitomuito utilizadoutilizado parapara conservaconservaççãoão dede leiteleite ee bebidasbebidas;;
U.H.T. (UltraU.H.T. (Ultra HighHigh TemperatureTemperature)) 141141°°C / 2 seg (C / 2 seg (““esterilizaesterilizaççãoão”” comercial);comercial);
MÉTODOS FÍSICOS
2. 2
CALOR SECO
Morte por oxidação de constituintes celulares e desnaturação de proteínas e ácidos nucleicos.
Não é a melhor maneira de usar o calor ar é menos condutor da temperatura que a água.
Incineração: processo drástico de eliminação de microrganismos, que destrói o produto.
Flambagem: processo onde o material é submetido diretamente ao fogo, seja seco ou embebido
em álcool.
Estufa Esterilizante : 160°C/2 h ou 180°C/1 h.
Amplamente utilizado para vidrarias e outros materiais.
MÉTODOS FÍSICOS
FILTRAFILTRAÇÇÃOÃO
Recomendado para materiaisRecomendado para materiais termoltermoláábeisbeis em soluem soluçção (ão (ATBsATBs, vacinas) e na, vacinas) e na
descontaminadescontaminaçção do ar, em fluxos laminares e sistema de ventilaão do ar, em fluxos laminares e sistema de ventilaçção;ão;
FiltrosFiltros: celulose, acetato, policarbonato, teflon ou outro material sin: celulose, acetato, policarbonato, teflon ou outro material sinttéético.tico.
Embora o diâmetro dos poros possa variar, os mais utilizados sãEmbora o diâmetro dos poros possa variar, os mais utilizados são aqueles de 0,2o aqueles de 0,2 m, quem, que
removem os microrganismos (exceto vremovem os microrganismos (exceto víírus) das solurus) das soluçções e do ar.ões e do ar.
Membranas filtrantesMembranas filtrantes
Tamanho dos poros em relaTamanho dos poros em relaçção aos microrganismos.ão aos microrganismos.
Tipo mais comum de filtro esterilizante em microbiologiaTipo mais comum de filtro esterilizante em microbiologia
O ar tambO ar tambéém pode ser filtrado, em fluxos laminares contendom pode ser filtrado, em fluxos laminares contendo filtros HEPAfiltros HEPA ((HighHigh EfficiencyEfficiency
ParticulateParticulate Air) muito usados em cabines de seguranAir) muito usados em cabines de segurançça biola biolóógica e hospitais, que removemgica e hospitais, que removem
99,97% de part99,97% de partíículas de 0,3culas de 0,3 m.m.
MÉTODOS FÍSICOS
MÉTODOS FÍSICOS
RADIARADIAÇÇÕESÕES
RadiaRadiaçção Nãoão Não--IonizanteIonizante::
AA radiaradiaçção ultravioletaão ultravioleta (de 4 a 400(de 4 a 400 nmnm -- sendo 260sendo 260 nmnm o comprimento mais eficiente)o comprimento mais eficiente) éé
bastante letal, mas exibebastante letal, mas exibe baixa penetrabilidadebaixa penetrabilidade, não atravessando vidros, filmes sujos e, não atravessando vidros, filmes sujos e
outros materiais.outros materiais.
Como sua maior eficiência se dComo sua maior eficiência se dáá a 260a 260 nmnm, que corresponde ao comprimento de onda, que corresponde ao comprimento de onda
onde se donde se dáá a maior absora maior absorçção pelo DNA, a radiaão pelo DNA, a radiaçção UV afeta primariamente este tipo deão UV afeta primariamente este tipo de
molmoléécula.cula.
MÉTODOS FÍSICOS
RadiaRadiaçção Ionizante:ão Ionizante:
RadiaRadiaçções de pequeno comprimento de onda e de altões de pequeno comprimento de onda e de altííssima energia essima energia e
penetrabilidade.penetrabilidade.
Os 2 principais tipos são aOs 2 principais tipos são a RadiaRadiaçção Gamaão Gama e ose os Raios XRaios X..
São bastante eficientes, pois promovem aSão bastante eficientes, pois promovem a ionizaionizaççãoão dede áátomos, fazendotomos, fazendo--osos
perderem elperderem eléétronstrons gerandogerando radicais livresradicais livres extremamente reativos, que podemextremamente reativos, que podem
destruir pontes de hidrogênio, duplas ligadestruir pontes de hidrogênio, duplas ligaçções, estruturas em anel.ões, estruturas em anel.
Quando na presenQuando na presençça de oxigênio, geram radicais hidroxila livres, absolutamentea de oxigênio, geram radicais hidroxila livres, absolutamente
ttóóxicos para as cxicos para as céélulas.lulas.
MÉTODOS FÍSICOS
Dessecação
Atuam pela remoção de água;
Desidratação massas alimentícias, leite em pó...
Liofilização preservação de alimentos e microrganismos;
Remoção do oxigênio (desaeração)
Previne o crescimento de aeróbios;
Muito usado na indústria de alimentos (café, enlatados).
Vibração ultra-sônica
Vibrações ultra-sônicas em alta freqüência que levam o rompimento da
célula, despolimerização de compostos e quebras do DNA.
MÉTODOS FÍSICOS
3. 3
1)1) FenFenóóis e derivados fenis e derivados fenóólicoslicos
Os fenOs fenóóis (cresis (cresóóis (is (metilmetil--fenolfenol),), xilenxilenóóisis) não são mais usados como desinfetantes) não são mais usados como desinfetantes
ouou antissantisséépticospticos devidodevido àà suasua toxicidadetoxicidade para os tecidos.para os tecidos.
OsOs derivados fenderivados fenóólicoslicos ((hexaclorofenohexaclorofeno,, hexilresorcinolhexilresorcinol) são empregados) são empregados
principalmente comoprincipalmente como antissantisséépticospticos ou desinfetantes hospitalaresou desinfetantes hospitalares::
•• Atuam desnaturando proteAtuam desnaturando proteíínas e rompendo membranas.nas e rompendo membranas.
•• Entretanto, tem odor desagradEntretanto, tem odor desagradáável e são irritantes para pele.vel e são irritantes para pele.
MÉTODOS QUÍMICOS
fenolfenol primeira cirurgia assprimeira cirurgia asséépticaptica
18671867:: ListerLister
2)2) ÁÁlcooislcoois::
Muito usados, efetivos, confiMuito usados, efetivos, confiááveis e baratos, atuando como bactericidas, fungicidasveis e baratos, atuando como bactericidas, fungicidas
e contra ve contra víírus envelopados.rus envelopados.
Etanol eEtanol e isopropanolisopropanol, nas concentra, nas concentraçções entre 70 e 80%.ões entre 70 e 80%.
Atuam desnaturando proteAtuam desnaturando proteíínas e dissolvendo lipnas e dissolvendo lipíídeos de membrana.deos de membrana.
MÉTODOS QUÍMICOS
4) Agentes de Superf4) Agentes de Superfííciecie
Sabões e detergentes aniônicosSabões e detergentes aniônicos
AAçção: Remoão: Remoçção mecânica dos microrganismos e emulsificaão mecânica dos microrganismos e emulsificaçção;ão;
Pouco valorPouco valor antissantisséépticoptico;;
Detergentes catiônicos (Compostos QuaternDetergentes catiônicos (Compostos Quaternáários de Amônio):rios de Amônio):
Desnaturam proteDesnaturam proteíínas;nas;
Ex: cloreto de benzalcônio, que mata a maioria das bactEx: cloreto de benzalcônio, que mata a maioria das bactéérias;rias;
MÉTODOS QUÍMICOS
3)3) BiguanidasBiguanidas ((clorexidinaclorexidina))
AAçção: Ruptura da membrana plasmão: Ruptura da membrana plasmáática.tica.
ÉÉ bactericida contrabactericida contra GramGram (+) e(+) e GramGram ((--), at), atóóxico, persistente.xico, persistente.
ÉÉ utilizado na desinfecutilizado na desinfecçção da pele, principalmente escovaão da pele, principalmente escovaçção cirão cirúúrgica.rgica.
5) Metais Pesados:5) Metais Pesados:
Foram muito usados como germicidas, sendo atualmente substituForam muito usados como germicidas, sendo atualmente substituíídos por compostosdos por compostos
menos tmenos tóóxicos.xicos.
Os mais usados são compostos orgânicos de mercOs mais usados são compostos orgânicos de mercúúrio, prata, cobre e zinco.rio, prata, cobre e zinco.
DesnaturaDesnaturaçção de proteão de proteíínas;nas;
MÉTODOS QUÍMICOS
4) Halogênios (Iodo, Cloro, Fl4) Halogênios (Iodo, Cloro, Flúúor, Bromo):or, Bromo):
IodoIodo:: antissantisséépticoptico para a pele a 2%, ou em solupara a pele a 2%, ou em soluçção com iodeto de potão com iodeto de potáássio.ssio.
•• Eficaz contra bactEficaz contra bactéérias, fungos, vrias, fungos, víírus e protozorus e protozoáários parasitas.rios parasitas.
•• Oxida componentes celulares e proteOxida componentes celulares e proteíínas;nas;
•• Em concentraEm concentraçções elevadas elimina esporos.ões elevadas elimina esporos.
•• Desvantagens: danosDesvantagens: danos àà pele, manchas e alergias;pele, manchas e alergias;
CloroCloro:: Muito utilizado no tratamento deMuito utilizado no tratamento de ááguas e nas indguas e nas indúústrias de laticstrias de laticíínios e alimentos.nios e alimentos.
•• Pode ser aplicado na forma de gPode ser aplicado na forma de gáás, hipoclorito de Nas, hipoclorito de Na++ ou de Caou de Ca++++, que gera, que gera áácidocido
hipoclorosohipocloroso oxidaoxidaçção de materiais celulares;ão de materiais celulares;
•• Eficaz contra fungos, bactEficaz contra fungos, bactéérias e vrias e víírus;rus;
•• ÉÉ eficiente, barato, de feficiente, barato, de fáácil uso, mas altamente reativo com a matcil uso, mas altamente reativo com a matééria orgânica.ria orgânica.
6) Agentes Químicos Esterilizantes:
Aldeídos: Formaldeído e Glutaraldeído (menos irritante)
• Ação: Desnaturação das proteínas.
• É usado para a desinfecção de equipamentos médicos.
Gases esterilizantes: Ex.: Óxido de etileno
• Ação: Desnaturação de proteínas;
• É um excelente agente esterilizante, especialmente para objetos que seriam
danificados pelo calor.
MÉTODOS QUÍMICOS
5) Peroxigênios
Ex.: H2O2 e Ozônio:
Ação oxidante atuam sobre anaeróbios;
MÉTODOS QUÍMICOS
7) Preservativos em alimentos
Ácidos orgânicos Ácidos acético, cítrico, lático, propiônico, benzóico,
sórbico;
Adição de sal e açúcar ↑↑↑↑ pressão osmótica;
Salga a seco ou em salmoura bacalhau, sardinha e outros pescados;
Açúcar geléias, doces em massas, frutas cristalizadas, frutas
glaceadas, leite condensado, melaço e mel.
SALGASALGA
4. 4
CONTROLE E PREVENCONTROLE E PREVENÇÇÃO DA CÃO DA CÁÁRIERIE
Fluoretos:Fluoretos:
EfeitosEfeitos anticariogênicosanticariogênicos ((≠≠≠≠≠≠≠≠ proposiproposiçções)ões)::
•• 11°°:: incorporaincorporaçção deão de ííons fluoreto ao esmalte em desenvolvimento, tornandoons fluoreto ao esmalte em desenvolvimento, tornando--oo
mais resistentemais resistente àà desmineralizadesmineralizaççãoão bacteriana;bacteriana;
•• 22°°:: agem como agente antiagem como agente anti--bacteriano eficazbacteriano eficaz podem inibir enzimas da viapodem inibir enzimas da via
glicolglicolííticatica;;
Agentes Antibacterianos:Agentes Antibacterianos:
1.1. ClorexidinaClorexidina a 2% (a 2% (BiguanidaBiguanida):):
Excelente contraExcelente contra estreptococosestreptococos;;
SubstantividadeSubstantividade;;
Desvantagens:Desvantagens:
•• Cora os dentes com o tempo, altera a percepCora os dentes com o tempo, altera a percepçção gustativa e gosto amargo;ão gustativa e gosto amargo;
CONTROLE E PREVENCONTROLE E PREVENÇÇÃO DA CÃO DA CÁÁRIERIE
2.2. Compostos fenCompostos fenóólicoslicos
3.3. IodoIodo--povidonapovidona + H+ H22OO22
4.4. SanguinarinaSanguinarina
5.5. TriclosanTriclosan eficaz na redueficaz na reduçção do não do n°° de bactde bactéérias formadoras da placa e narias formadoras da placa e na
redureduçção da gravidade da gengiviteão da gravidade da gengivite
Melhor tratamento:Melhor tratamento:
Uso diUso diáário de agentes antibacterianosrio de agentes antibacterianos ++ DebridamentoDebridamento mecânicomecânico ++ FlFlúúoror
Pouco eficazes como agentes antibacterianos oraisPouco eficazes como agentes antibacterianos orais
CONTROLE E PREVENCONTROLE E PREVENÇÇÃO DA DOENÃO DA DOENÇÇA PERIODONTALA PERIODONTAL
Agentes de combateAgentes de combate ààs Doens Doenççasas PeriodontaisPeriodontais::
ClorexidinaClorexidina;;
Fluoretos:Fluoretos: principalmente antiprincipalmente anti--ccáárie, porrie, poréém pode ser eficaz no combatem pode ser eficaz no combate àà
placa e gengivite;placa e gengivite;
ÓÓleos Essenciais (leos Essenciais (Compostos fenCompostos fenóólicoslicos): Ex.:): Ex.: ListerineListerine
•• Atividade antiAtividade anti--placa moderada e sem efeitos colaterais;placa moderada e sem efeitos colaterais;
•• Controle da candidControle da candidííase oral;ase oral;
CONTROLE E PREVENCONTROLE E PREVENÇÇÃO DA DOENÃO DA DOENÇÇA PERIODONTALA PERIODONTAL
Compostos QuaternCompostos Quaternáários de Amôniorios de Amônio
•• Ex.: Cloreto deEx.: Cloreto de cetilpiridcetilpiridíínionio CepacolCepacol, Oral, Oral--BB
•• Atividade antiAtividade anti--placa moderada;placa moderada;
•• Efeitos colaterais: ardência na lEfeitos colaterais: ardência na lííngua, irritangua, irritaçção na mucosa e pigmentaão na mucosa e pigmentaçção reversão reversíívelvel
no dente;no dente;
AgentesAgentes OxigenantesOxigenantes (Ex.: H(Ex.: H22OO22):):
•• ReduReduçção dosão dos periodontopatperiodontopatóógenosgenos anaeranaeróóbios;bios;
•• Efeitos colaterais: queimaduras e irritaEfeitos colaterais: queimaduras e irritaçções teciduais com o uso crônico a 3%;ões teciduais com o uso crônico a 3%;
SanguinarinaSanguinarina (Extrato de Planta)(Extrato de Planta) Parece reduzir a placa e a inflamaParece reduzir a placa e a inflamaçção gengival;ão gengival;
TriclosanTriclosan::
•• Pode ser considerado um composto fenPode ser considerado um composto fenóólico;lico;
•• Menos efetivo que aMenos efetivo que a clorexidinaclorexidina;;
•• Presente em dentifrPresente em dentifríícios (cios (colgatecolgate) e sabonetes;) e sabonetes;
CONTROLE E PREVENCONTROLE E PREVENÇÇÃO DO CÃO DO CÁÁLCULO DENTALLCULO DENTAL
Uso de dentifrUso de dentifríícios ecios e enxaguatenxaguatóóriosrios bucais:bucais:
PirofosfafatoPirofosfafato tetrasstetrassóódicodico (Ex.:(Ex.: ColgateColgate TartarTartar ControlControl))
Cloreto de ZnCloreto de Zn (Ex.:(Ex.: PreventPrevent))
Mecanismo de AMecanismo de Açção:ão:
•• Bloqueiam os sBloqueiam os síítios receptores no esmalte para o fosfato detios receptores no esmalte para o fosfato de
ccáálcio (encontrado na saliva) e inibem a formalcio (encontrado na saliva) e inibem a formaçção de cristais doão de cristais do
ccáálculo.lculo.