Micro

FACULDADE DE EXCELÊNCIA EDUCACIONAL DO RIO GRANDE DO NORTE - FATERN
UNIVERSIDADE GAMA FILHO - UGF
DISCIPLINA DE CITOLOGIA,EMBRIOLOGIA E HISTOLOGIA
MICROSCOPIA CELULAR: TEORIA E PRÁTICA 1

MICROSCOPIA CELULAR:TEORIA E PRÁTICA
PROFESSORAS: ADRIANA MOTTA
MONARA BITTENCOURT DE AMORIM
Profª Monara Bittencourt de Amorim
Farmacêutica-Bioquímica
2
BIBLIOGRAFIA CONSULTADA:
1.JUNQUEIRA e CARNEIRO, L.C. Histologia Básica. 9ed.Rio de Janeiro:Guanabara Koogan, 2004.
2.Manual de Instruções da BIOVAL, 2007.

MICROSCÓPIO
“APARELHO COM LENTES ÓPTICAS QUE MAXIMIZA UM SER OU
ESTRUTURAS MINÚSCULAS A UM TAMANHO DE BOA OBSERVAÇÃO”
BACTÉRIAS
CÉLULAS
SANGUÍNEAS
3
CÉLULA
LEUCÓCITOS

PRINCIPAIS COMPONENTES DE UM MICROSCÓPIO
O MICROSCÓPIO ÓPTICOMICROSCÓPIO ÓPTICO, É TAMBÉM CONHECIDO
COMO MICROSCÓPIO DE LUZ
COMPÕE-SE DE UMA PARTE MECÂNICAPARTE MECÂNICA
QUE SERVE DE SUPORTE PARA A PARTE
ÓPTICA
PARTE ÓPTICAPARTE ÓPTICA
É CONSTITUÍDA POR TRÊS SISTEMAS DE LENTES:
O CONDENSADOR, AS OBJETIVAS E AS OCULARES.
4

PRINCIPAIS COMPONENTES DA PARTE ÓPTICA
CONDENSADORCONDENSADORCONDENSADORCONDENSADOR
SUA FINALIDADE É PROJETAR UM CONE DE LUZ SOBRE AS CÉLULAS QUE
ESTÃO SENDO EXAMINADAS AO MICROSCÓPIO.
APÓS ATRAVESSAR AS CÉLULAS, ESSE FEIXE LUMINOSO, EM FORMA DE
CONE, PENETRA NAS OBJETIVAS.
OBJETIVASOBJETIVASOBJETIVASOBJETIVAS
PROJETAM UMA IMAGEM AUMENTADA , NO PLANO FOCAL DAS
OCULARES, QUE NOVAMENTE A AMPLIA.
OCULARESOCULARESOCULARESOCULARES
AS IMAGENS FORNECIDAS PELA OCULARES PODEM SER PERCEBIDAS
PELA RETINA.
5

CONDENSADOR
OCULARES
OBJETIVAS
LÂMPADA
BASE
6
PLATINA
BRAÇO
PINÇA
PARAFUSO
MACROMÉTRICO
PARAFUSO
MICROMÉTRICO

REVÓLVER
PARAFUSO
MACROMÉTRICO
PARAFUSO
MICROMÉTRICO
CONDENSADOR
OBJETIVAS
OCULARES
BRAÇO OU
SUPORTE
PLATINA
BASE
LÂMPADA
7Profª Monara Bittencourt de Amorim

PODER DE RESOLUÇÃO X LIMITE DE RESOLUÇÃO
 O PODER DE RESOLUÇÃO DE UM SISTEMA ÓPTICO É A SUA CAPACIDADE DE
SEPARAR DETALHES.
• É EXPRESSO PELO LIMITE DE RESOLUÇÃO.
 É A MENOR DISTÂNCIA QUE DEVE EXISTIR ENTRE DOIS PONTOS PARA QUE
ELES APAREÇAM INDIVIDUALIZADOS.
PODER DE RESOLUÇÃOPODER DE RESOLUÇÃO
LIMITE DE RESOLUÇÃOLIMITE DE RESOLUÇÃO

EXEMPLO DE LIMITE DE RESOLUÇÃO::
O QUE DETERMINA, A RIQUEZA DE DETALHES DA IMAGEM FORNECIDA POR
UM SISTEMA ÓPTICO É O SEU LIMITE DE RESOLUÇÃO, E NÃO O SEU PODER
DE AUMENTAR O TAMANHO DO OBJETO.
É A MENOR DISTÂNCIA QUE DEVE EXISTIR ENTRE DOIS PONTOS PARA QUE ELES APAREÇAM INDIVIDUALIZADOS.
HEMÁCIAS

MICROSCOPIA ÓPTICA EM
LÂMINA DE TECIDO
SANGUÍNEO
HEMÁCIAS MICROSCOPIA ELETRÔNICA (ME) DE
BACTÉRIAS COMENSAIS
EOSINÓFILOS
LEUCÓCITO
LINFÓCITO
DIFERENÇAS DE IMAGENS ENTRE UM MICROSCÓPIO ÓPTICO
(MO) E UM MICROSCÓPIO ELETRÔNICO (ME)
11
PLAQUETAS

12
DETERMINE QUAL O TIPO DE MICROSCÓPIO QUE SE UTILIZOU NA OBSERVAÇÃO
DESSAS IMAGENS

PRINCIPAIS UNIDADES DE MEDIDAS USADAS NA MICROSCOPIA
ESTA UNIDADE ESTÁ SENDO SUBSTITUÍDA PELO NANÔMETRO
MICRÔMETRO (µm)MICRÔMETRO (µm)
NANÔMERO (nm)NANÔMERO (nm)
1mm = 1.000 μm
1μm = 1.000 nm
1nm = 10 Å
ÂNGSTROM (Å)ÂNGSTROM (Å)

ESPECIFICAÇÕES DAS OBJETIVAS E SUAS AMPLIAÇÕES
OBJETIVAS
(COM OCULAR DE 10X)
AMPLIAÇÃO TOTAL
(VER SEMPRE AS OCULARES)
04 x 40 X
10 x 100 X
40 x 400 X
100 x
(Sempre usar com óleo de Imersão)
1000 X

OPERAÇÃO (PRÁTICA LABORATORIAL)
NORMAS E CONDUTAS NA PRÁTICA LABORATORIAL
1. OBEDECER TODAS AS NORMAS DE BIOSEGURANÇA (EPI/EPC).
2. LAVAR AS MÃOS NA ENTRADA E NA SAÍDA APÓS A PRATICA.
3. É OBRIGATÓRIO QUE VOCÊ CONHEÇA AS PARTES ÓPTICAS E MECÂNICAS
DOS MICROSCÓPICOS ANTES DE USÁ-LO.
4. NÃO MANUSEAR O APARELHO COM AS MÃOS SUJAS OU MOLHADAS
5. NUNCA DESLOQUE O APARELHO COM A LÂMPADA ACESA.
6. NA REMOÇÃO DO EQUIPAMENTO, SEGURE-O FIRMEMENTE COM UMA
DAS MÃOS NO BRAÇO E A OUTRA NA BASE.
7. É PROIBIDO O USO DE CÂMARAS FOTOGRÁFICAS DURANTE A EXPOSIÇÃO
DA AULA PRÁTICA.

COMO USAR O MICROSCÓPIO
USANDO A OBJETIVA 100x
1. INICIE SEMPRE PELA OBJETIVA DE MENOR AUMENTO.
2. NA OBSERVAÇÃO DE UMA PREPARAÇÃO, OLHE PELA OCULAR E
MOVA O MACROMÉTRICO MUITO LENTAMENTE, ASSIM QUE A
IMAGEM APARECER, MESMO CONFUSA, PARE E COMPLETE A
FOCALIZAÇÃO COM O MICROMÉTRICO.
 O USO DA OBJETIVA DE IMERSÃO É MAIS DELICADA POIS, A
DISTÂNCIA FOCAL ENTRE A FACE DA OBJETIVA E A PARTE SUPERIOR
DA LAMÍNULA, DIMINUI QUANDO A AMPLIAÇÃO É AUMENTADA.

COLORAÇÃO
QUASE TODAS AS ORGANELAS SÃO TRANSPARENTES E INCOLORES, O QUE
DIFICULTA SEU ESTUDO MICROSCÓPICO, LOGO A COLORAÇÃO FACILITA A
VISUALIZAÇÃO DAS ESTRUTURAS DOS TECIDOS.
PARA VENCER ESSA DIFICULDADE, FORAM CRIADOS NUMEROSOS PROCESSOS
DE COLORAÇÃO QUE TORNAM VISÍVEIS OS DIVERSOS COMPONENTES
CELULARES.

 SÃO OS COMPONENTES DOS
TECIDOS QUE SE CORAM
FACILMENTE COM CORANTES
ÁCIDOS (Ex:EOSINA)
EX: ESTRUTURAS BÁSICAS
(ORGANELAS CITOPLASMÁTICAS)
A MAIORIA DOS CORANTES COMPORTA-SE COMO ÁCIDOS OU BASES
 SÃO OS COMPONENTES DOS
TECIDOS QUE SE CORAM
FACILMENTE COM CORANTES
BÁSICOS (Hematoxilina)
EX: ESTRUTURAS ÁCIDAS (NÚCLEOS)
ESTRUTURAS BASOFÍLICAS:ESTRUTURAS BASOFÍLICAS: ESTRUTURAS ACIDÓFILAS:ESTRUTURAS ACIDÓFILAS:

TÉCNICAS DE COLORAÇÃO MAIS USUAIS, TÉCNICA DE IMPREGNAÇÃO
PELA PRATA E ALGUNS DOS RESULTADOS OBTIDOS COM ELAS:
TÉCNICAS CONSTITUINTES NÚCLEOS CITOPLASMA
FIBRAS
COLÁGENAS
FIBRAS
RETICULARES
HE
HEMALÚMEN
(Hematoxilina),
EOSINA
HEMATOXILINA
FÉRRICA
AZUL
PRETO
ROSA ROSA
TRICRÔMICO
DE MASSON
FUCCINA ÁCIDA
E PONCEAU DE
XILIDINA,
VERDE-LUZ
VERMELHO
VERDE
IMPREGNAÇÃO
ARGÊNTICA
PARA FIBRAS
RETICULARES
SOLUÇÕES DE
SAIS DE PRATA
PRETO

 OS MICROSCÓPIOS MODERNOS UTILIZAM LASERS COMPLEXOS,
DETECTORES EXTREMAMENTE SENSÍVEIS, OBJETIVAS PODEROSAS.
 PERMITEM FILMAR DIVISÃO CELULAR, O TRÁFICO DE MOLÉCULAS DENTRO
DAS CÉLULAS, PERMITEM OBSERVAR CERTAS PROTEÍNAS NO CÉREBRO DE
ANIMAIS VIVOS ETC.

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EXERCÍCIOS DE FIXAÇÃO
1.Defina microscópio, suas principais estruturas ópticas e mecânicas, observando
os cuidados a serem utilizados no manuseio deste aparelho.
2.Diferencie Poder de Resolução de Limite de Resolução.
3.Quais as características para cada parte do Microscópio óptica ?
4.Quais os cuidados a serem observados antes de manusear o aparelho?
5.De acordo com as oculares de 22x, calcule a ampliação total de uma imagem
observada por objetivas de : 05x,10x,20x,40x e 100x.
Jamais esqueçam de acrescentar os cálculos destas respostas na prova
6.Defina Ampliação Total.
7.Cite 6 elementos estruturais de um Microscópio Óptico.
8.Quais os dois principais corantes da Técnica de coloração por HE?
9.Quais os cuidados individuais que se deve ter ao uso dos laboratórios?
10.Defina Equipamento de Proteção Individual (EPI).
11.Qual a importância dos Equipamento de Proteção Coletiva (EPC)?
12.Cite 5 condutas inapropriadas dentro de um laboratório.
13.Quais as vacinas que devem ser tomadas antes de se adentrar dentro de um
laboratório com riscos biológicos?
14. O que são riscos e quais os principais relacionados com a área da saúde?
15. Qual a única objetiva que só deve ser usada com óleo de imersão?

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