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PRODUTOS DE ORIGEMPRODUTOS DE ORIGEM
BIOTECNOLÓGICA APLICADOSBIOTECNOLÓGICA APLICADOS
À CADEIA PRODUTIVA DO CAFÉÀ CADEIA PRODUTIVA DO CAFÉ
Sara MariaSara Maria ChalfounChalfoun
XIX Simpósio de Pesquisa dos Cafés do Brasil
Sara MariaSara Maria ChalfounChalfoun
Pesquisadora EPAMIGPesquisadora EPAMIG
Dívida histórica da cafeicultura
Cultivo não sustentável do café gera consequências
- Contaminação lençol freático (com os defensivos e os fertilizantes usados na lavoura)
- Diminuição da área florestal (desmatamento)
- Alterações climáticas, intoxicação pelo uso de agrotóxicos
Produtos de origem biotecnológica para a cadeia
produtiva do café - Sára Chalfoun
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- Alterações climáticas, intoxicação pelo uso de agrotóxicos
- Degradação do patrimônio genético,
- Degradação dos solos (plantações de café sem realizar as curvas de nível)
- Poluição dos mananciais, etc
Novo Cenário
• Um novo cenário no qual o
café, como maior riqueza
brasileira, precisa ser
exemplo em consciência
ambiental, sendo precursor
em sustentabilidade.
• Imposição de mudança pela
alteração no perfil dos
consumidores, cada vez
mais conscientes quanto a
aspectos de segurança
aplicados a todos os elos da
cadeia produtiva.
Visão de futuro
1
• Avançar mais no
caminho da
sustentabilidade
2
• Sanar conflitos
localizados entre
2 localizados entre
cafeicultura e
questões sociais
3
• Sanar conflitos
localizados entre
cafeicultura e
questões
ambientais
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Oportunidades e desafios
1
• Rever o modelo de
cultivo
vigente,fortemente
dependente de
produtos químicos.
2
• Aprimorar as
tecnologias
Curitiba/PR
Produtos de origem biotecnológica para a cadeia
produtiva do café - Sára Chalfoun
2 tecnologias
alternativas ou
complementares.
3
• Pesquisar,
desenvolver e
ofertar produtos de
origem
biotecnológica.
Vantagens da utilização de microrganismos
• Não há necessidade de grandes locais para o seu desenvolvimento;
• Fatores de crescimento como pH, concentração de nutrientes,oxigênio podem
ser facilmente manipulados.
• Conseguem degradar e crescer em variados substratos, inclusive resíduos
agroindustriais.
• Possuem rápido crescimento em condições favoráveis, podendo, em relação
aos fungos, a população dobrar em um intervalo de 4 a 12 horas, as
leveduras de 1 a 3 horas e as bactérias de 0,5 a 2 horas.leveduras de 1 a 3 horas e as bactérias de 0,5 a 2 horas.
• Podem ser manipulados geneticamente.
(Bravo et al.,2000)
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Critérios para a seleção de um agente biológico
Geneticamente estável
Efetivo em baixas concentrações
Vigoroso
Desenvolvimento em condições ambientais adversas
Desenvolvimento em meio de baixo custoDesenvolvimento em meio de baixo custo
Ser facilmente transportado e armazenado
Não ser prejudicial ao homem
Compatível com tratamentos químicos e físicos do produto
Não ser patogênico ao hospedeiro
Produtos de origem biotecnológica para a cadeia
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Critério para a seleção de agentes
biológicos - bioprocessos
Elevada atividade – capaz de converter
rapidamente o substrato em produto
com altos rendimentos
Estabilidade sob condições ambientaisEstabilidade sob condições ambientais
extremas (elevada pressão osmótica
do meio, elevada temperatura, elevada
força iônica ).
Tolerante a substâncias tóxicas que
podem ser geradas no processo de
tratamento da matéria prima ou
encontradas em resíduos e efluentes.
Produtos de origem biotecnológica para a cadeia
produtiva do café - Sára Chalfoun
Curitba/PR
• Definir o produto de
interesse:enzimas,ácidos
orgânicos,etc.
• Selecionar e melhorar os
isolados produtores.
4 1
Seleção de agentes biológicos-
bioprocessos com células vivas
• Identificar, na
literatura,agentes biológicos
portadores das características
desejadas ou com potencial
para possuí-la.
• Adquirir os isolados de
coleções de culturas e/ou
isolar amostras naturais.
23
Produtos de origem biotecnológica para a cadeia
produtiva do café - Sára Chalfoun
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Melhoramento de isolados produtores
Técnicas de Biologia Molecular
e Engenharia Metabólica
para maximizar as
propriedades desejáveis.
Ex.penicilina técnicas deEx.penicilina técnicas de
mutação e otimização do
processo fermentativo-
aumento do rendimento de
0,06 a 26gL
Produtos de origem biotecnológica para a cadeia
produtiva do café - Sára Chalfoun
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Produtos biotecnológicos para cadeia produtiva
do café-oportunidades e desafios
• Melhor aproveitamento de fertilizantes fosfatados-inoculantes.
• Preservação da qualidade-microrganismos competitivos.
• Controle de pragas e doenças-bioinseticidas e bionematicidas.
• Melhoria de processos - acelerador da desmucilagem / biofiltros
Produtos de origem biotecnológica para a cadeia
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• A Biofábrica foi instalada na
Universidade Federal de Lavras, Minas
Gerais como parte do Programa de
Inovação (PI) da UFLA (2007).
ESTRUTURA
Inovação (PI) da UFLA (2007).
• Startup – Tbio, criada para dar suporte
para a proteção, registro e comercialização
dos produtos, baseado no fato que tem
sido demonstrado que universidades e
institutos de pesquisa podem criar com
sucesso start-ups de alta tecnologia(De-Jin
Su, D.; ALI, M.; and SOHN, D.,2011).
Produtos de origem biotecnológica para a cadeia
produtiva do café - Sára Chalfoun
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Normas e Padrões
• Análises dos produtos são conduzidas segundo
protocolos padronizados e reconhecidos, devidamente
documentados (POP, 5S,etc)
Se necessário utilizar recursos estatísticos e matemáticos
(cálculos de índices, gráficos, tabelas, diagramas, para
realização de inferências).
• Análises de interesse conduzidas na própria instituição
(EPAMIG/UFLA) ou em laboratórios de referência.
Produtos de origem biotecnológica para a cadeia
produtiva do café - Sára Chalfoun
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Avaliação de qualidade dos produtos
biológicos
• Contagem dos esporos mínimos
1x10
conídios/g
• Germinação mínima80%
8
• Viabilidade mínima
8,5x10
UFC/g
• Vida de prateleira
30 – 180 dias
Temperatura ambiente
• Vida de prateleira
180 – 360 dias
Geladeira /câmara fria (4-
6°C)
7
Produtos de origem biotecnológica para a cadeia
produtiva do café - Sára Chalfoun
Curitba/PR
Tipos de produtos de origem biotecnológica
para cadeia produtiva do café
• Bioprotetor da qualidade do café.
• Solubilizador de fósforo.
• Bioinseticida / bionematicida.
• Biorremediador – adsorção de metais.
Bioprodutos ou produtos biológicos
• Biorremediador – adsorção de metais.
Produtos de origem biotecnológica para a cadeia
produtiva do café - Sára Chalfoun
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Produtos de origem biológica
• Acelerador da desmucilagem.
• Bioinseticida / bionematicida.
• Biossurfactantes.
Bioprodutos ou produtos biológicos
• Primeiro relato Bitancourt,1957.
Agente bioprotetor da qualidade do café
“Cladosporium apresentava um comportamento diferente dos outros
fungos; ele não era encontrado no solo, mas no campo associado ao
• Pesquisas relativas a relação microrganismos e qualidade do
café,EPAMIG,1989.
fungos; ele não era encontrado no solo, mas no campo associado ao
café mais seco na planta. Nas regiões de elevada umidade relativa
do ar, havia menor incidência de Cladosporium e a qualidade era
pior, o contrário ocorrendo em regiões de clima seco.”
Produtos de origem biotecnológica para a cadeia
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Bioprodutos ou produtos biológicos
Agente bioprotetor da qualidade do café
Produtos de origem biotecnológica para a cadeia
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• Estabelecimento da Qualified Presumption of Safe(QPS).
• Sistema da EU correspondente ao sistema Generally Recognized as Safe(GRAS)
dos EUA.
Agente bioprotetor da qualidade do café
Qualified Presumption of Safe(QPS)
1.Identificação
Taxônomica
• Gênero
• Espécie
2.
Familiaridade
• Experiência
prática
• Compreensão e
previsão de
ausência de
efeitos adversos
3. Finalidade
• Ação sobre os
frutos na planta
• Ação durante a
secagem
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Verde Cana (25%)
Agente bioprotetor da qualidade do café
Dinâmica de colonização do Fungo
Cereja
Passa
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Agente bioprotetor da qualidade do café
Modo de Ação
• Simples presença física do microrganismo inibindo o desenvolvimento de outras
populações microbianas – a mais provável.
• Produção de antibióticos.
• Parasitismo e hiperparasitismo.
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Agente bioprotetor da qualidade do café
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Agente bioprotetor da qualidade do café
Formas de utilização
• Manejo da ocorrência natural.
• Introdução ou reintrodução do microrganismo.
Utilização de 2L de suspensão de esporos na concentração de 1x10 /
8
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Utilização de 2L de suspensão de esporos na concentração de 1x10 /
ha
Uso de duas aplicações com intervalo de 30 a 45 dias, sendo a primeira
aplicação no início da maturação dos frutos
Agente bioprotetor da qualidade do café
Produção
Bioprotetor da qualidade: fase de produção massal(esquerda)
e produto para teste(direita).
Produtos de origem biotecnológica para a cadeia
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Agente bioprotetor da qualidade do café
Apresentação do Bioprotetor
• Suspensão concentrada de esporos contendo no mínimo 1x10 esporos/ml de
suspensão.
8
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Produto de origem biológica
• O acelerador da desmucilagem do café, é um “pool” de enzimas obtido de
microrganismos selecionados.
Acelerador da desmucilagem do café
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Acelerador da desmucilagem do café-
vantagens
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Acelerador da desmucilagem do café
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Bioprodutos ou produtos biológicos
Solubilizador de fosfato
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Fonte: ANDA
Solubilizador de fosfato
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Relevância da pesquisa
• O avanço com as pesquisas nesta tecnologia pode ter alto impacto
econômico na agricultura nacional , incluindo a cafeicultura devido a
diversos fatores.
• Os principais seriam a redução da dependência do país a fertilizantes
Solubilizador de fosfato –
microrganismos selecionados
• Os principais seriam a redução da dependência do país a fertilizantes
químicos processados, o uso em larga escala de reservas nacionais de
fosfato de baixa reatividade (Gomes et al., 2010).
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Solubilizador de fosfato
“Assim, caso algumas limitações forem superadas
em condições de campo, a inoculação com um
número alto de microrganismos pode fazer com que
as plantas recebam mais benefícios da
Produtos de origem biotecnológica para a cadeia
produtiva do café - Sára Chalfoun
Curitba/PR
as plantas recebam mais benefícios da
solubilização dos fosfatos por estes “(Rodrígues &
F& Fraga, 1999).
Solubilizador de fosfato
Questões técnicas para a produção de inoculantes
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Solubilizador de fosfato
Questões técnicas para a produção de inoculantes
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Resultados indicativos
Solubilizador de fosfato
16% - Aumento na altura da planta
90% - Aumento número de vagens
66% - Aumento número de grãos por planta
57% - Aumento peso dos grãos
59% - Aumento de Fósforo na planta
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Produtos biológicos/origem biológica
Bionematicida
Nematóides na cafeicultura geram prejuízos econômicos:
Redução
de 15% na
produção
mundial
Redução
de até 75 %
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Curitba/PR
mundial
Redução de
20% na
produção
brasileira
de até 75 %
em algumas
regiões
Fonte: IAPAR (Dhalton Shiguer Ito)
Produtos biológicos/origem biológica
Bionematicida
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Danos
• Clorose;
• Depauperamento das plantas;
• Crescimento desigual;
• Alterações das características da cultivar;
• Redução na capacidade produtiva;
• Morte da planta;
Fonte: IAPAR (Dhalton Shiguer Ito)
Foto: Experimento Tbio
Etapas de execução da pesquisa
Determinar o potencial de produção de metabólitos a partir de uma
coleção de fungos- literatura e novos.
Determinar tratamentos mais eficazes no controle do nematóide
Bionematicida – Meloidogyne paranaensis
Produtos de origem biotecnológica para a cadeia
produtiva do café - Sára Chalfoun
Curitba/PR
Determinar tratamentos mais eficazes no controle do nematóide
Meloidogyne paranaensis, em condições de laboratório e casa de
vegetação-controle biológico e produtos de origem biológica.
Desenvolvimento de uma formulação eficaz e econômica.
Testes em condição de campo (dependendo de registro).
Resultados indicativos
Bionematicida – Meloidogyne paranaensis
Gêneros Testados
Beauveria
Lecanicillium
Pleurotus
Penicillium
+ Metabólitos
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23% - Redução da taxa de eclosão
100% - Imobilidade do J2 em 24h
Penicillium
Cladosporium
Resultados indicativos
Bionematicida – Meloidogyne paranaensis
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Produtos biológicos/origem biológica
Bioinseticida para broca-do-café
Prejuízos qualitativos
abertura de porta
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produtiva do café - Sára Chalfoun
Curitba/PR
abertura de porta
de entrada para
microrganismos
Bioinseticida para broca-do-café
Os prejuízos
quantitativos - perda
de peso de 20% do
café beneficiado.
Prejuízos
causados
pela broca-
do-café
Produtos de origem biotecnológica para a cadeia
produtiva do café - Sára Chalfoun
Curitba/PR
Outro prejuízo é no
tipo de café produzido,
já que 2 a 5 sementes
broqueadas
constituem um defeito.
Etapas de execução da pesquisa
Determinar o potencial de produção de metabólitos a partir de uma
coleção de fungos- literatura e novos.
Determinar tratamentos mais eficazes no controle da praga, em
Bioinseticida para broca-do-café
Produtos de origem biotecnológica para a cadeia
produtiva do café - Sára Chalfoun
Curitba/PR
Determinar tratamentos mais eficazes no controle da praga, em
condições de laboratório-controle biológico e produtos de origem
biológica.
Desenvolvimento de uma formulação eficaz e econômica.
Testes em condição de campo (dependendo de registro).
Bioinseticida para broca-do-café
Beauveria bassiana
Resultados da literatura
• 47 isolados - índices de eficiência chegaram a 86,7% eleitos dez diferentes
isolados de fungo.
• Teste em campo, quatro melhores isolados foram experimentados no
município de Machadinho do Oeste, em Rondônia.
• Processo de avaliação da tecnologia por meio de testes das diferentes
(Jose Nilton Medeiros Costa,Embrapa Rondônia,2009)
Produtos de origem biotecnológica para a cadeia
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• Processo de avaliação da tecnologia por meio de testes das diferentes
concentrações e épocas de aplicação.
Bioinseticida para broca-do-café
Resultados indicativos
mortalidade brocas em
laboratório
76,6% a
100%
Produtos de origem biotecnológica para a cadeia
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Curitba/PR
Desenho base: EPAMIG
100%
Fase inicial dos testes em campo
Tratamento com Inóculos
Tbio 006 e 007
METABÓLITOS
Bioinseticida para broca-do-café
Resultados indicativos
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Empresas com linha de produtos biológicos
- Brasil
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Parceiros
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Pesquisadores que apoiam
• Luís Roberto Batista- taxonomia de fungos, micotoxinas/UFLA
• Disney Ribeiro Dias-Enzimologia/UFLA
• Sonia Maria Salgado- Nematologia/EPAMIG
• Ana Maria Meneguim – Entomologia/IAPAR-PR
• Douglas Ramos Guelfi Silva – Fertilidade do Solo/UFLA
• Mario Lúcio Villela-Fitopatologia/UFLA
• Júlio César de Souza-Entomologia/UFLA
• Clayton Grillo Pinto – Consultor em Cafeicultura
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Equipe técnica e administrativa
Samantha Brettas – Administração
Igor Chalfoun – C.Computação
Fernanda Costa – Biologia
Douglas Tostes – Agronomia
EQUIPE
• Luís Roberto Batista- taxonomia de fungos, micotoxinas/UFLA
• Disney Ribeiro Dias-Enzimologia/UFLA
• Sonia Maria Salgado- Nematologia/EPAMIG
• Ana Maria Meneguim – Entomologia/IAPAR-PR
• Douglas Ramos Guelfi Silva – Fertilidade do Solo/UFLA
• Mario Lúcio Villela-Fitopatologia/UFLA
• Júlio César de Souza-Entomologia/UFLA
• Clayton Grillo Pinto – Consultor em Cafeicultura
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Douglas Tostes – Agronomia
Lívia Fonseca – Agronomia
Carolina Rezende - Biologia
Perspectivas Futuras
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Base científica
Autor (a) Título Tipo e Local
BATISTA, L. R. ; CHALFOUN, S.
M. ; PRADO,G.
Identificação de espécies toxigênicas de
Aspergillus associadas aos grãos de café.. Revista Brasileira de Armazenamento.
Viçosa-MG, n.3, p. 11-16, 2001
CHALFOUN, S. M. ; CUNHA, Rodrigo Luz da
; CARVALHO, V.L. de.
Seletividade de fungicidas ao fungo
Cladosporium cladosporioides em cafeeiros.
Summa Phytopathologica, Botucatu-SP, v.
33, p. 85-87,2006
CHALFOUN, S. M. et al. Seletividade de fungicidas cúpricos e
sistêmicos sobre o fungo Cladosporium
cladosporioides em cafeeiro.
Summa Phytopathologica, Botucatu, v. 33,
n. 1, p. 93-95. 2007.
ELISEI, V.G. Avaliação da viabilidade de fungos
encapsulados e armazenados em diferentes
temperaturas.
Dissertação (Mestrado em Microbiologia
Agrícola) – Universidade federal de Lavras,
Lavras, 2009.
SILVA,JF ; CHALFOUN, S. M. . Isotermas de biossorção de cobre(Cu2+) em
utilizando o resíduo de escória como meio
Congresso Latino Americano y del Caribe de
Ingenieria Agricola, 2010, Vitória. Congresso
Produtos de origem biotecnológica para a cadeia
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utilizando o resíduo de escória como meio
suporte e o fungo Cladosporium
cladosporioides como biomassa.
Ingenieria Agricola, 2010, Vitória. Congresso
Latino Americano y del Caribe de Ingenieria
Agricola. Vitoria: INCAPER, v. 1. p. 849-
852.2010
CHALFOUN, S. M. Biological control and bioactive microbial
metabolites: a coffee quality perspective.
Ciência e Agrotecnologia, Lavras, v. 34, n.
5, p. 1071-1085, set./out. 2010.
Costa, L.M.A.S. Tese (Doutorado em Ciência
dos Alimentos - Universidade Federal de
Lavras/UFLA) - Universidade Federal de
Lavras.
C aracterização de isolados e produção de
ácido cítico por Aspergillus niger.
Tese (Doutorado em Ciência dos Alimentos -
Universidade Federal de Lavras/UFLA) -
Universidade Federal de Lavras.2011.
Angélico, C.L. Aplicação do agente biológico Cladosporium
cladosporioides(Fresen) de Vries
"Cladosporin"como bioprotetor da qualidade
do café(Coffea arabica L.).
Tese (Doutorado em Ciências dos Alimentos)
- Universidade Federal de Lavras.2012
Base científica
Autor (a) Título Tipo e Local
Bastos. S.C. 2012. Tese (Doutorado em
Ciências dos Alimentos) - Universidade
Federal de Lavras.
Pectinases de Cladosporium
cladosporioides(Fres.)de Vries:condições de
cultivo, purificação e caracterização.
Tese (Doutorado em Ciências dos Alimentos)
- Universidade Federal de Lavras.2012
FERNANDES, A.P. Utilização de resíduos de processamento via
seca e via úmida de café na obtenção de
pectinases.
Tese (Doutorado em Ciências dos Alimentos)
- Universidade Federal de Lavras.2013
BASTOS, S.,C. ; PIMENTA, C. J. ; DIAS, D.
R. ; CHALFOUN, S. M. ; ANGÉLICO, C. L. ;
TAVARES, L. S. .
Pectinases from a New Strain of
Cladosporium cladosporioides (Fres.).
World Journal of Agricultural Sciences
(Print), v. 9, p. 167-172, 2013.
CARMO, J. R. ; PIMENTA, C. J. ; SILVA, J. F.
DA ; CHALFOUN, S.M.
Recovery of copper (II) absorbed in biomass
of Cladosporium cladosporioides.
Scientia Agrícola (USP. Impresso), v. 70, p.
147-151, 2013.
ELIZEI, V. G. ; BOTELHO, D.M.S. ; Imobilização de fungos filamentosos com Arquivos do Instituto Biológico (Impresso), v.
Produtos de origem biotecnológica para a cadeia
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ELIZEI, V. G. ; BOTELHO, D.M.S. ;
REBELLES, Pedro Paulo Reis ; CHALFOUN,
S. M. .
Imobilização de fungos filamentosos com
potencial para uso agroindustrial.
Arquivos do Instituto Biológico (Impresso), v.
81, p. 165-172, 2014
Pereira,A.R.B. ; Soares,C.R.F. ; SILVA, J. F. ;
SILVA, M. ; CHALFOUN, S.M..
Removal of trace element by isolates of
Aspergillus brasiliensis EPAMIG 0084 and
Penicillium citrinum EPAMIG 0086 in
biofilters.
African Journal of Biotechnology, v. 13, p.
3759-3773, 2014.
BERMEJO, L. P. S. ; BOTELHO, D.M.S. ;
SOUZA, S. M. C. .
Antifungal activity of extracts of Cladosporium
cladosporioides(Fres) de Vries.
JOURNAL OF PURE AND APPLIED
MICROBIOLOGY, v. 8, p. 2791-2799, 2014.
COSTA, L. M. A. S. ; SOUZA,S.M.C.de ;
ABREU, P. S. ; BASTOS, S.,C. ;
NASCIMENTO, M. N. ; MALLET, A. C. T. .
Citric acid production and citrate syntase
genes in distinct strains of Aspergillus niger.
African Journal of Biotechnology, v. 13,
p. 2220-2226, 2014.
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produtiva do café - Sára Chalfoun
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Sara maria chalfoun palestra IX Simpósio de Pesquisa dos Cafés do Brasil

  • 1. PRODUTOS DE ORIGEMPRODUTOS DE ORIGEM BIOTECNOLÓGICA APLICADOSBIOTECNOLÓGICA APLICADOS À CADEIA PRODUTIVA DO CAFÉÀ CADEIA PRODUTIVA DO CAFÉ Sara MariaSara Maria ChalfounChalfoun XIX Simpósio de Pesquisa dos Cafés do Brasil Sara MariaSara Maria ChalfounChalfoun Pesquisadora EPAMIGPesquisadora EPAMIG
  • 2. Dívida histórica da cafeicultura Cultivo não sustentável do café gera consequências - Contaminação lençol freático (com os defensivos e os fertilizantes usados na lavoura) - Diminuição da área florestal (desmatamento) - Alterações climáticas, intoxicação pelo uso de agrotóxicos Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR - Alterações climáticas, intoxicação pelo uso de agrotóxicos - Degradação do patrimônio genético, - Degradação dos solos (plantações de café sem realizar as curvas de nível) - Poluição dos mananciais, etc
  • 3. Novo Cenário • Um novo cenário no qual o café, como maior riqueza brasileira, precisa ser exemplo em consciência ambiental, sendo precursor em sustentabilidade. • Imposição de mudança pela alteração no perfil dos consumidores, cada vez mais conscientes quanto a aspectos de segurança aplicados a todos os elos da cadeia produtiva.
  • 4. Visão de futuro 1 • Avançar mais no caminho da sustentabilidade 2 • Sanar conflitos localizados entre 2 localizados entre cafeicultura e questões sociais 3 • Sanar conflitos localizados entre cafeicultura e questões ambientais Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR
  • 5. Oportunidades e desafios 1 • Rever o modelo de cultivo vigente,fortemente dependente de produtos químicos. 2 • Aprimorar as tecnologias Curitiba/PR Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun 2 tecnologias alternativas ou complementares. 3 • Pesquisar, desenvolver e ofertar produtos de origem biotecnológica.
  • 6. Vantagens da utilização de microrganismos • Não há necessidade de grandes locais para o seu desenvolvimento; • Fatores de crescimento como pH, concentração de nutrientes,oxigênio podem ser facilmente manipulados. • Conseguem degradar e crescer em variados substratos, inclusive resíduos agroindustriais. • Possuem rápido crescimento em condições favoráveis, podendo, em relação aos fungos, a população dobrar em um intervalo de 4 a 12 horas, as leveduras de 1 a 3 horas e as bactérias de 0,5 a 2 horas.leveduras de 1 a 3 horas e as bactérias de 0,5 a 2 horas. • Podem ser manipulados geneticamente. (Bravo et al.,2000) Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR
  • 7. Critérios para a seleção de um agente biológico Geneticamente estável Efetivo em baixas concentrações Vigoroso Desenvolvimento em condições ambientais adversas Desenvolvimento em meio de baixo custoDesenvolvimento em meio de baixo custo Ser facilmente transportado e armazenado Não ser prejudicial ao homem Compatível com tratamentos químicos e físicos do produto Não ser patogênico ao hospedeiro Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR
  • 8. Critério para a seleção de agentes biológicos - bioprocessos Elevada atividade – capaz de converter rapidamente o substrato em produto com altos rendimentos Estabilidade sob condições ambientaisEstabilidade sob condições ambientais extremas (elevada pressão osmótica do meio, elevada temperatura, elevada força iônica ). Tolerante a substâncias tóxicas que podem ser geradas no processo de tratamento da matéria prima ou encontradas em resíduos e efluentes. Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR
  • 9. • Definir o produto de interesse:enzimas,ácidos orgânicos,etc. • Selecionar e melhorar os isolados produtores. 4 1 Seleção de agentes biológicos- bioprocessos com células vivas • Identificar, na literatura,agentes biológicos portadores das características desejadas ou com potencial para possuí-la. • Adquirir os isolados de coleções de culturas e/ou isolar amostras naturais. 23 Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR
  • 10. Melhoramento de isolados produtores Técnicas de Biologia Molecular e Engenharia Metabólica para maximizar as propriedades desejáveis. Ex.penicilina técnicas deEx.penicilina técnicas de mutação e otimização do processo fermentativo- aumento do rendimento de 0,06 a 26gL Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR
  • 11. Produtos biotecnológicos para cadeia produtiva do café-oportunidades e desafios • Melhor aproveitamento de fertilizantes fosfatados-inoculantes. • Preservação da qualidade-microrganismos competitivos. • Controle de pragas e doenças-bioinseticidas e bionematicidas. • Melhoria de processos - acelerador da desmucilagem / biofiltros Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR
  • 12. • A Biofábrica foi instalada na Universidade Federal de Lavras, Minas Gerais como parte do Programa de Inovação (PI) da UFLA (2007). ESTRUTURA Inovação (PI) da UFLA (2007). • Startup – Tbio, criada para dar suporte para a proteção, registro e comercialização dos produtos, baseado no fato que tem sido demonstrado que universidades e institutos de pesquisa podem criar com sucesso start-ups de alta tecnologia(De-Jin Su, D.; ALI, M.; and SOHN, D.,2011). Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR
  • 13. Normas e Padrões • Análises dos produtos são conduzidas segundo protocolos padronizados e reconhecidos, devidamente documentados (POP, 5S,etc) Se necessário utilizar recursos estatísticos e matemáticos (cálculos de índices, gráficos, tabelas, diagramas, para realização de inferências). • Análises de interesse conduzidas na própria instituição (EPAMIG/UFLA) ou em laboratórios de referência. Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR
  • 14. Avaliação de qualidade dos produtos biológicos • Contagem dos esporos mínimos 1x10 conídios/g • Germinação mínima80% 8 • Viabilidade mínima 8,5x10 UFC/g • Vida de prateleira 30 – 180 dias Temperatura ambiente • Vida de prateleira 180 – 360 dias Geladeira /câmara fria (4- 6°C) 7 Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR
  • 15. Tipos de produtos de origem biotecnológica para cadeia produtiva do café • Bioprotetor da qualidade do café. • Solubilizador de fósforo. • Bioinseticida / bionematicida. • Biorremediador – adsorção de metais. Bioprodutos ou produtos biológicos • Biorremediador – adsorção de metais. Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR Produtos de origem biológica • Acelerador da desmucilagem. • Bioinseticida / bionematicida. • Biossurfactantes.
  • 16. Bioprodutos ou produtos biológicos • Primeiro relato Bitancourt,1957. Agente bioprotetor da qualidade do café “Cladosporium apresentava um comportamento diferente dos outros fungos; ele não era encontrado no solo, mas no campo associado ao • Pesquisas relativas a relação microrganismos e qualidade do café,EPAMIG,1989. fungos; ele não era encontrado no solo, mas no campo associado ao café mais seco na planta. Nas regiões de elevada umidade relativa do ar, havia menor incidência de Cladosporium e a qualidade era pior, o contrário ocorrendo em regiões de clima seco.” Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR
  • 17. Bioprodutos ou produtos biológicos Agente bioprotetor da qualidade do café Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR
  • 18. • Estabelecimento da Qualified Presumption of Safe(QPS). • Sistema da EU correspondente ao sistema Generally Recognized as Safe(GRAS) dos EUA. Agente bioprotetor da qualidade do café Qualified Presumption of Safe(QPS) 1.Identificação Taxônomica • Gênero • Espécie 2. Familiaridade • Experiência prática • Compreensão e previsão de ausência de efeitos adversos 3. Finalidade • Ação sobre os frutos na planta • Ação durante a secagem Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR
  • 19. Verde Cana (25%) Agente bioprotetor da qualidade do café Dinâmica de colonização do Fungo Cereja Passa Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR
  • 20. Agente bioprotetor da qualidade do café Modo de Ação • Simples presença física do microrganismo inibindo o desenvolvimento de outras populações microbianas – a mais provável. • Produção de antibióticos. • Parasitismo e hiperparasitismo. Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR
  • 21. Agente bioprotetor da qualidade do café Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR
  • 22. Agente bioprotetor da qualidade do café Formas de utilização • Manejo da ocorrência natural. • Introdução ou reintrodução do microrganismo. Utilização de 2L de suspensão de esporos na concentração de 1x10 / 8 Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR Utilização de 2L de suspensão de esporos na concentração de 1x10 / ha Uso de duas aplicações com intervalo de 30 a 45 dias, sendo a primeira aplicação no início da maturação dos frutos
  • 23. Agente bioprotetor da qualidade do café Produção Bioprotetor da qualidade: fase de produção massal(esquerda) e produto para teste(direita). Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR
  • 24. Agente bioprotetor da qualidade do café Apresentação do Bioprotetor • Suspensão concentrada de esporos contendo no mínimo 1x10 esporos/ml de suspensão. 8 Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR
  • 25. Produto de origem biológica • O acelerador da desmucilagem do café, é um “pool” de enzimas obtido de microrganismos selecionados. Acelerador da desmucilagem do café Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR
  • 26. Acelerador da desmucilagem do café- vantagens Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR
  • 27. Acelerador da desmucilagem do café Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR
  • 28. Bioprodutos ou produtos biológicos Solubilizador de fosfato Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR Fonte: ANDA
  • 29. Solubilizador de fosfato Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR
  • 30. Relevância da pesquisa • O avanço com as pesquisas nesta tecnologia pode ter alto impacto econômico na agricultura nacional , incluindo a cafeicultura devido a diversos fatores. • Os principais seriam a redução da dependência do país a fertilizantes Solubilizador de fosfato – microrganismos selecionados • Os principais seriam a redução da dependência do país a fertilizantes químicos processados, o uso em larga escala de reservas nacionais de fosfato de baixa reatividade (Gomes et al., 2010). Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR
  • 31. Solubilizador de fosfato “Assim, caso algumas limitações forem superadas em condições de campo, a inoculação com um número alto de microrganismos pode fazer com que as plantas recebam mais benefícios da Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR as plantas recebam mais benefícios da solubilização dos fosfatos por estes “(Rodrígues & F& Fraga, 1999).
  • 32. Solubilizador de fosfato Questões técnicas para a produção de inoculantes Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR
  • 33. Solubilizador de fosfato Questões técnicas para a produção de inoculantes Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR
  • 34. Resultados indicativos Solubilizador de fosfato 16% - Aumento na altura da planta 90% - Aumento número de vagens 66% - Aumento número de grãos por planta 57% - Aumento peso dos grãos 59% - Aumento de Fósforo na planta Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR
  • 35. Produtos biológicos/origem biológica Bionematicida Nematóides na cafeicultura geram prejuízos econômicos: Redução de 15% na produção mundial Redução de até 75 % Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR mundial Redução de 20% na produção brasileira de até 75 % em algumas regiões Fonte: IAPAR (Dhalton Shiguer Ito)
  • 36. Produtos biológicos/origem biológica Bionematicida Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR Danos • Clorose; • Depauperamento das plantas; • Crescimento desigual; • Alterações das características da cultivar; • Redução na capacidade produtiva; • Morte da planta; Fonte: IAPAR (Dhalton Shiguer Ito) Foto: Experimento Tbio
  • 37. Etapas de execução da pesquisa Determinar o potencial de produção de metabólitos a partir de uma coleção de fungos- literatura e novos. Determinar tratamentos mais eficazes no controle do nematóide Bionematicida – Meloidogyne paranaensis Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR Determinar tratamentos mais eficazes no controle do nematóide Meloidogyne paranaensis, em condições de laboratório e casa de vegetação-controle biológico e produtos de origem biológica. Desenvolvimento de uma formulação eficaz e econômica. Testes em condição de campo (dependendo de registro).
  • 38. Resultados indicativos Bionematicida – Meloidogyne paranaensis Gêneros Testados Beauveria Lecanicillium Pleurotus Penicillium + Metabólitos Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR 23% - Redução da taxa de eclosão 100% - Imobilidade do J2 em 24h Penicillium Cladosporium
  • 39. Resultados indicativos Bionematicida – Meloidogyne paranaensis Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR
  • 40. Produtos biológicos/origem biológica Bioinseticida para broca-do-café Prejuízos qualitativos abertura de porta Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR abertura de porta de entrada para microrganismos
  • 41. Bioinseticida para broca-do-café Os prejuízos quantitativos - perda de peso de 20% do café beneficiado. Prejuízos causados pela broca- do-café Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR Outro prejuízo é no tipo de café produzido, já que 2 a 5 sementes broqueadas constituem um defeito.
  • 42. Etapas de execução da pesquisa Determinar o potencial de produção de metabólitos a partir de uma coleção de fungos- literatura e novos. Determinar tratamentos mais eficazes no controle da praga, em Bioinseticida para broca-do-café Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR Determinar tratamentos mais eficazes no controle da praga, em condições de laboratório-controle biológico e produtos de origem biológica. Desenvolvimento de uma formulação eficaz e econômica. Testes em condição de campo (dependendo de registro).
  • 43. Bioinseticida para broca-do-café Beauveria bassiana Resultados da literatura • 47 isolados - índices de eficiência chegaram a 86,7% eleitos dez diferentes isolados de fungo. • Teste em campo, quatro melhores isolados foram experimentados no município de Machadinho do Oeste, em Rondônia. • Processo de avaliação da tecnologia por meio de testes das diferentes (Jose Nilton Medeiros Costa,Embrapa Rondônia,2009) Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR • Processo de avaliação da tecnologia por meio de testes das diferentes concentrações e épocas de aplicação.
  • 44. Bioinseticida para broca-do-café Resultados indicativos mortalidade brocas em laboratório 76,6% a 100% Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR Desenho base: EPAMIG 100% Fase inicial dos testes em campo Tratamento com Inóculos Tbio 006 e 007 METABÓLITOS
  • 45. Bioinseticida para broca-do-café Resultados indicativos Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR
  • 46. Empresas com linha de produtos biológicos - Brasil Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR
  • 47. Parceiros Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR
  • 48. Pesquisadores que apoiam • Luís Roberto Batista- taxonomia de fungos, micotoxinas/UFLA • Disney Ribeiro Dias-Enzimologia/UFLA • Sonia Maria Salgado- Nematologia/EPAMIG • Ana Maria Meneguim – Entomologia/IAPAR-PR • Douglas Ramos Guelfi Silva – Fertilidade do Solo/UFLA • Mario Lúcio Villela-Fitopatologia/UFLA • Júlio César de Souza-Entomologia/UFLA • Clayton Grillo Pinto – Consultor em Cafeicultura Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR
  • 49. Equipe técnica e administrativa Samantha Brettas – Administração Igor Chalfoun – C.Computação Fernanda Costa – Biologia Douglas Tostes – Agronomia EQUIPE • Luís Roberto Batista- taxonomia de fungos, micotoxinas/UFLA • Disney Ribeiro Dias-Enzimologia/UFLA • Sonia Maria Salgado- Nematologia/EPAMIG • Ana Maria Meneguim – Entomologia/IAPAR-PR • Douglas Ramos Guelfi Silva – Fertilidade do Solo/UFLA • Mario Lúcio Villela-Fitopatologia/UFLA • Júlio César de Souza-Entomologia/UFLA • Clayton Grillo Pinto – Consultor em Cafeicultura Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR Douglas Tostes – Agronomia Lívia Fonseca – Agronomia Carolina Rezende - Biologia
  • 50. Perspectivas Futuras Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR
  • 51. Base científica Autor (a) Título Tipo e Local BATISTA, L. R. ; CHALFOUN, S. M. ; PRADO,G. Identificação de espécies toxigênicas de Aspergillus associadas aos grãos de café.. Revista Brasileira de Armazenamento. Viçosa-MG, n.3, p. 11-16, 2001 CHALFOUN, S. M. ; CUNHA, Rodrigo Luz da ; CARVALHO, V.L. de. Seletividade de fungicidas ao fungo Cladosporium cladosporioides em cafeeiros. Summa Phytopathologica, Botucatu-SP, v. 33, p. 85-87,2006 CHALFOUN, S. M. et al. Seletividade de fungicidas cúpricos e sistêmicos sobre o fungo Cladosporium cladosporioides em cafeeiro. Summa Phytopathologica, Botucatu, v. 33, n. 1, p. 93-95. 2007. ELISEI, V.G. Avaliação da viabilidade de fungos encapsulados e armazenados em diferentes temperaturas. Dissertação (Mestrado em Microbiologia Agrícola) – Universidade federal de Lavras, Lavras, 2009. SILVA,JF ; CHALFOUN, S. M. . Isotermas de biossorção de cobre(Cu2+) em utilizando o resíduo de escória como meio Congresso Latino Americano y del Caribe de Ingenieria Agricola, 2010, Vitória. Congresso Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR utilizando o resíduo de escória como meio suporte e o fungo Cladosporium cladosporioides como biomassa. Ingenieria Agricola, 2010, Vitória. Congresso Latino Americano y del Caribe de Ingenieria Agricola. Vitoria: INCAPER, v. 1. p. 849- 852.2010 CHALFOUN, S. M. Biological control and bioactive microbial metabolites: a coffee quality perspective. Ciência e Agrotecnologia, Lavras, v. 34, n. 5, p. 1071-1085, set./out. 2010. Costa, L.M.A.S. Tese (Doutorado em Ciência dos Alimentos - Universidade Federal de Lavras/UFLA) - Universidade Federal de Lavras. C aracterização de isolados e produção de ácido cítico por Aspergillus niger. Tese (Doutorado em Ciência dos Alimentos - Universidade Federal de Lavras/UFLA) - Universidade Federal de Lavras.2011. Angélico, C.L. Aplicação do agente biológico Cladosporium cladosporioides(Fresen) de Vries "Cladosporin"como bioprotetor da qualidade do café(Coffea arabica L.). Tese (Doutorado em Ciências dos Alimentos) - Universidade Federal de Lavras.2012
  • 52. Base científica Autor (a) Título Tipo e Local Bastos. S.C. 2012. Tese (Doutorado em Ciências dos Alimentos) - Universidade Federal de Lavras. Pectinases de Cladosporium cladosporioides(Fres.)de Vries:condições de cultivo, purificação e caracterização. Tese (Doutorado em Ciências dos Alimentos) - Universidade Federal de Lavras.2012 FERNANDES, A.P. Utilização de resíduos de processamento via seca e via úmida de café na obtenção de pectinases. Tese (Doutorado em Ciências dos Alimentos) - Universidade Federal de Lavras.2013 BASTOS, S.,C. ; PIMENTA, C. J. ; DIAS, D. R. ; CHALFOUN, S. M. ; ANGÉLICO, C. L. ; TAVARES, L. S. . Pectinases from a New Strain of Cladosporium cladosporioides (Fres.). World Journal of Agricultural Sciences (Print), v. 9, p. 167-172, 2013. CARMO, J. R. ; PIMENTA, C. J. ; SILVA, J. F. DA ; CHALFOUN, S.M. Recovery of copper (II) absorbed in biomass of Cladosporium cladosporioides. Scientia Agrícola (USP. Impresso), v. 70, p. 147-151, 2013. ELIZEI, V. G. ; BOTELHO, D.M.S. ; Imobilização de fungos filamentosos com Arquivos do Instituto Biológico (Impresso), v. Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR ELIZEI, V. G. ; BOTELHO, D.M.S. ; REBELLES, Pedro Paulo Reis ; CHALFOUN, S. M. . Imobilização de fungos filamentosos com potencial para uso agroindustrial. Arquivos do Instituto Biológico (Impresso), v. 81, p. 165-172, 2014 Pereira,A.R.B. ; Soares,C.R.F. ; SILVA, J. F. ; SILVA, M. ; CHALFOUN, S.M.. Removal of trace element by isolates of Aspergillus brasiliensis EPAMIG 0084 and Penicillium citrinum EPAMIG 0086 in biofilters. African Journal of Biotechnology, v. 13, p. 3759-3773, 2014. BERMEJO, L. P. S. ; BOTELHO, D.M.S. ; SOUZA, S. M. C. . Antifungal activity of extracts of Cladosporium cladosporioides(Fres) de Vries. JOURNAL OF PURE AND APPLIED MICROBIOLOGY, v. 8, p. 2791-2799, 2014. COSTA, L. M. A. S. ; SOUZA,S.M.C.de ; ABREU, P. S. ; BASTOS, S.,C. ; NASCIMENTO, M. N. ; MALLET, A. C. T. . Citric acid production and citrate syntase genes in distinct strains of Aspergillus niger. African Journal of Biotechnology, v. 13, p. 2220-2226, 2014.
  • 53. Produtos de origem biotecnológica para a cadeia produtiva do café - Sára Chalfoun Curitba/PR