O documento discute diluições em laboratório, definindo-as como a adição de uma substância a outra para reduzir a concentração. Explica que diluições são expressões de concentração e não de volume, e fornece exemplos de como expressar diluições corretamente usando proporções. Também aborda títulos e diluições seriadas.

1. CENTRO UNIVERSITÁRIO FRANCISCANO
ÁREA DE CIÊNCIAS DA SAÚDE
CURSO DE FARMÁCIA
DISCIPLINA DE IMUNOLOGIA CLÍNICA
DILUIÇÕES
Os métodos de laboratório nos
quais uma quantidade de uma substância é
adicionada a outra para reduzir a
concentração de uma das substâncias são
conhecidos como diluições.
IMPORTANTE: Uma diluição é uma expressão de concentração, não de volume. Expressa
de outra forma, uma diluição indica a quantidade relativa de substâncias em uma solução.
Quando a palavra diluição é usada, ela deve significar o número de partes que foram diluídas
em um número total de partes. Em outras palavras, uma diluição deve significar o volume de
concentrado no volume total da solução final. O menor número corresponde ao número de
partes da substância que está sendo diluída; o maior número refere-se ao número total de
partes da solução final.
Considere as seguintes frases:
• Faça uma diluição 1 para 10 de soro em salina.
• Faça uma diluição 1 em 10 de soro em salina.
• Faça uma diluição 1 para 10 de soro com salina.
• Faça uma diluição 1/10 de soro com salina.
• Faça uma diluição 1:10 de soro usando salina.
• Faça uma diluição de 1 parte de soro e 9 partes de salina.
• Faça uma diluição de 1 parte de soro para 9 partes de salina.
Qual é a diferença entre essas frases? Nenhuma! Todas significam exatamente a mesma
coisa.
ENTÃO: Diluir é acrescentar solvente a uma solução mantendo-se inalteradas as
quantidades de soluto existentes.
D= V soluto
V soluto + V solvente
1 parte de soro
+ 9 partes de salina
10 partes de solução final
O significado difere quando usamos a palavra razão. Os números passam a se referir
aos materiais da razão, que podem ser escritos de diversas formas:
1

2. • 1:9
• 1 para 9
• 1/9
Não importa como a razão é escrita, a ordem dos números deve corresponder à ordem
das substâncias às quais a razão se refere.
Ex: Uma razão de soro para salina 1:9 é igual a uma razão salina para soro 9:1, o que é
a mesma coisa que uma diluição de 1:10 de soro com salina.
TÍTULO é a concentração de uma solução determinada por titulação. É a menor
quantidade ou concentração que produzia um efeito particular ou produto. O título é a
recíproca da diluição. Então, em uma reação de pesquisa de anticorpos positiva na
diluição ½ e ¼ e negativa na diluição 1/8 e 1/16, o título é 4.
Ex:
Dilua 2 mL de soro com 28 mL de salina. Deve-se somar 28 mL de salina em 2 mL de soro.
Então, o volume total da solução final é 30 mL.
2 mL de soro
+ 28 mL de salina
30 mL de solução final
A diluição desta solução seria 2 em 30. No entanto, diluições são geralmente propostas como
1 para algum número. Para converter uma diluição 2:30 em uma diluição de 1 em algo, é só
montar um problema de razão-proporção: 2 está para 30 assim como 1 está para X.
2/30 = 1/X 2X=30 X=15 - a diluição soro em salina é 2:30 ou 1:15
A razão desta solução seria 2: 28. No entanto, diluições são geralmente propostas como 1 para
algum número. Para converter uma diluição 2:28 em uma diluição de 1 em algo, é só montar
um problema de razão-proporção: 2 está para 28 assim como 1 está para X.
2/28 = 1/X 2X=28 X=14 - a razão soro em salina é 2:28 ou 1:14 ou então,
uma razão salina em soro 14:1
Para diluições seriadas, ao se calcular a concentração, é necessário multiplicar a
concentração original pela 1ª diluição, a seguir pela segunda diluição, esta pela terceira
diluição e assim por diante, até que a diluição final seja conhecida.
Ex: Uma solução de NaOH 2 M é diluída 1/5 e 1/10. Determine a concentração de cada
uma das 3 soluções.
• solução 1 de NaOH: 2M
• solução 1/5 de NaOH: 2M x 1/5 = 0,4M
• solução 1/10 de NaOH: 2M x 1/5 x 1/10 = 0,04M
ENTÃO: Para que diluir em reações imunológicas?
• Para diminuir a concentração de anticorpos inespecíficos.
• Para determinar uma concentração de anticorpos em testes semi-quantitativos – título.
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3. EXERCÍCIOS:
1. Faça 250 mL de uma diluição 1:10 de soro em salina.
2. Faça 45 mL de uma diluição 1:15 de soro em salina.
3. Faça 33 mL de uma diluição 1:22 de soro em salina.
4. Faça 4 mL de uma diluição 1:8 de soro em salina.
5. Faça 7,5 mL de uma diluição 1:150 de soro em salina
6. Determine a quantidade de soro em 40 mL de uma diluição 1:5 de soro em salina.
7. Quanto de uma diluição de 1:32 de urina com água destilada poderia ser feita com 2
mL de urina?
8. Uma diluição 1/10 de uma substância é diluída 3/5, rediluída 2/15 e diluída mais uma
vez ½. Qual é a concentração final?
9. Uma solução 3% é diluída 2/30. Qual é a concentração resultante?
10. Uma solução que contém 70 mg/dL é diluída 1/10 e de novo 2/20. Qual é a
concentração final?
11. A alíquota de 0,2 mL de soro do paciente é adicionada a 0,8 mL de salina. Transfere-
se 0,5 mL para um tubo 2 que possui 0,5 mL de salina. Este procedimento é feito até o
tubo 10. As diluições foram utilizadas para testar um anticorpo de um agente
infeccioso. Do tubo 1 ao 8, a reação foi positiva para o anticorpo testado. Qual o título
que deve ser apresentado ao anticorpo?
12. Em uma série de 8 tubos, coloque 0,9 mL de solução fisiológica no 1º tubo e 0,5 mL
de solução fisiológica nos tubos restantes. Adicione 0,1 mL de soro ao 1º tubo, misture
e coloque 0,5 mL dessa solução no tubo subseqüente e repita o processo até o último
tubo. Despreze o último 0,5 mL. Para cafa tubo adicione 0,5 mL de antígeno. A partir
disso, responda:
a) Qual é a diluição de cada tubo antes de adicionar o antígeno?
b) Qual a quantidade de soro presente nos dois primeiros tubos
após a transferência?
c) Qual pe a diluição em cada tubo após a adição do antígeno?
13. Quais diluições representam as misturas abaixo?
a) 0,3 mL de soro sanguíneo com 4,2 mL de solução fisiológica.
b) 0,5 mL de soro sanguíneo com 3 mL de solução fisiológica.
c) 0,2 mL de soro sanguíneo com 6,2 mL de solução fisiológica.
14. Em vários tubos numerados de 1 a 5, pipetou-se 3X mL de água em cada um deles. No
tubo nº 1 pipetou-se X mL de azul de metileno e homogeneizou-se esta solução.
Pipetou-se do tubo nº 1 X mL e passou-se para o tubo nº 2. Este procedimento foi feito
até o 5º tubo.
a) Qual o volume de todos os tubos se X=2 e as respectivas diluições?
b)Se X=10, qual é o volume final de todos os tubos e as respectivas diluições?
15. Esquematize a diluição de 5 mL de azul de metileno diluído a 1/4000.
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4. 16. Esquematize a preparação de 50 mL de uma solução tampão fosfato a 1/2000. O
tampão foi fornecido pelo fabricante a uma diluição 1/10.
17. Pipetou-se 500 µL se um soluto em tubo de ensaio e acrescentou-se 4,5 mL de
solvente. Qual é a diluição?
18. Pipetou-se 200 µL se um soluto em tubo de ensaio e acrescentou-se 9,8 mL de
solvente. Qual é a diluição?
19. Num laboratório de Virologia, foi diluído 200 µL de soro diluído a 1:4. Porém, a
diluição correta seria 1:10. Como fazer essa correção?
20. Em uma reação imunoenzimática, foi colocado 0,1 mL de soro, 0,8 mL de diluente e
0,1 mL de conjugado. Que volume de soro existe no volume final e qual é a diluição
deste soro?
21. Uma solução estoque de ácido oxálico 1/100 está disponível no laboratório de
química. Como o laboratorista prepararia 6 mL de ácido oxálico 1/150?
22. Fazer uma diluição seriada de razão 2 a partir de uma solução de azul de metileno em
água. Usar uma bateria de 5 tubos. O volume em cada tubo deve ser 4 mL.
23. Fazer uma diluição seriada de razão 10 a partir de uma solução de azul de metileno em
água. Usar uma bateria de 8 tubos. O volume em cada tubo deve ser 4,5 mL.
24. Fazer uma diluição seriada de razão 5 a partir de uma solução de azul de metileno em
água. Usar uma bateria de 5 tubos. O volume em cada tubo deve ser 3 mL.
25. Fazer uma diluição seriada de razão 2 a partir de uma solução de azul de metileno
diluído ½ em água até a diluição 1/64. O volume em cada tubo deve ser 0,7 mL.
26. Fazer uma diluição seriada de razão 2 a partir de uma solução de azul de metileno
diluído 1/16 em água até a diluição 1/512. O volume em cada tubo deve ser 1,6 mL.
27. Fazer uma diluição seriada de razão 3 a partir de uma solução de azul de metileno
diluído 1/3 em água até a diluição 1/81. O volume em cada tubo deve ser 0,2 mL.
28. Fazer uma diluição seriada de razão 3 a partir de uma solução de azul de metileno
diluído 1/62 em água até a diluição 1/162. O volume em cada tubo deve ser 0,4 mL.
29. Fazer uma diluição seriada de razão 5 a partir de uma solução de azul de metileno
diluído 1/10 em água até a diluição 1/250. O volume em cada tubo deve ser 1,6 mL.
30. Fazer uma diluição seriada de razão 10 a partir de uma solução de azul de metileno
diluído 1/20 em água até a diluição 1/20000. O volume em cada tubo deve ser 3,6 mL.
31. Em vários tubos numerados de 1 a 6, pipetou-se 0,5 mL de tampão em todos eles. No
1º tubo pipetou-se 500 µL de azul de metileno e homogeneizou-se. Transferiu-se do
tubo nº 1 para o tubo nº 2, 500 µL. Este procedimento foi realizado até o 6º tubo.
Sabendo-se que não houve perda de volume, responda.
a) Qual o volume de todos os tubos e as respectivas diluições?
b) Qual é o volume e as respectivas diluições de todos os tubos se
fosse pipetado 3,5 mL de tampão.
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