Duplicação do DNA
Adila Trubat
Síntese de DNA
Mitose / Meiose
Síntese de DNA
Estrutura do DNA
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Síntese de DNA – estrutura do DNA
Síntese de DNA
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Síntese de DNA
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Síntese de DNA
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A informação genética é
estocada no DNA por
meio de um código (o
código genético) no qual a
seqüência de bases
adjacentes determina a
seqüência de aminoácidos
no polipeptídeo
codificado.
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
É a única molécula capaz de sofrer auto-auto-
duplicaçãoduplicação.

Ocorre durante a fase Sfase S da intérfaseintérfase.

É do tipo semiconservativasemiconservativa, pois cada molécula
nova apresenta uma das fitas vinda da mãe e outra
fita recém sintetizada.
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DNA Duplicação DNA DNA
Origens de duplicação
Como começa
Desenovelamento do DNA
Síntese de DNA
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Origens de duplicação
Síntese de DNA
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A nova fita de DNA começa sempre pelo
extremo 5'
Síntese de DNA
Enzimas de duplicação
Síntese de DNA – enzimas de duplicação
Síntese de DNA – enzimas de duplicação
Topoisomerases ou DNA topoisomerases – aliviam a
tensão do trecho de DNA que não está sendo duplicado
Síntese de DNA – enzimas de duplicação
Helicases – reconhecem a origem do trecho de DNA que
está sendo duplicado. Desenrola a dupla hélice na
forquilha de duplicação. Separa as cadeias
antiparalelas.
Desenovelamento do DNA

Retirada das histonas

Proteínas de ligação a fita simples (SSBPs)

DNA helicase
− Quebra pontes de H

DNA topoisomerases
− Tiram a tensão
Síntese de DNA – proteínas de duplicação
SSBs – proteínas que se ligam às fitas separadas pelas
helicases, impedindo que elas se enrolem de novo.
Mantém a estabilidade da forquilha de replicação. São
importantes na recombinação e reparação do DNA.
Síntese de DNA – enzimas de duplicação
Primase – sintetiza o primer de RNA para que a síntese
de DNA comece;
Síntese de DNA – enzimas de duplicação
Primase – sintetiza o primer de RNA para que a síntese
de DNA comece;
Síntese de DNA – enzimas de duplicação
Primase – sintetiza o primer de RNA para que a síntese
de DNA comece;
Forquilha de duplicação

Fita líder
− Primase age uma vez

Fita retardada
− Primase age várias vezes
− 1967, Fragmentos de Okasaki
Okazaki R, Okazaki T, Sakabe K, Sugimoto K. Mechanism of DNA replication
possible discontinuity of DNA chain growth. Jpn J Med Sci Biol. 1967
Jun;20(3):255-60
Primase

Ribonucleoproteína

Liga-se à helicase em
procariotos formando o
chamado primossomo

Sintetiza um primer de RNA
contendo aproximadamente
11 bases; fornece 3’ OH

DNA polimerase lenta e
sujeita a erros

Evita a progressão da
forquilha uma vez que a fita
líder anda mais rápido
Síntese de DNA – enzimas de duplicação
Síntese de DNA – enzimas de duplicação
DNA polimerases – sintetiza o DNA
Síntese de DNA – enzimas de duplicação
DNA polimerases – sintetizam o DNA
Enzimas que catalisam a reação de síntese do DNA
Adiciona nucleotídeos tri-fosfato à extremidades 3’OH
livre
Alongamento da cadeia de DNA sempre é feito na
direção 5’>3’ (endonuclease 5’>3’)
Incapaz de fazer DNA do zero (precisa ter extremidade
3’OH livre)
Possui mecanismo de correção de erros (exonuclease
3’>5’)
Síntese de DNA – enzimas de duplicação
Síntese de DNA – enzimas de duplicação

DNA Polimerase III

Sentido 5’ 3’→

Nucleotídeos 3P
são adicionados
− Liberação de
Pirofosfato
Síntese de DNA –
enzimas de
duplicação
DNA Polimerase I
Eliminação
dos
fragmentos
de Okasaki
DNA Pol I
Síntese de DNA – enzimas de duplicação
DNA ligase - é a enzima que une os fragmentos de
Okazaki, após a retirada dos iniciadores (ou primers)
pela DNA polimerase de reparação.
Também é utilizada como ferramenta em técnicas de
Biologia Molecular para “colar” fragmentos de DNA de
interesse.

DNA polimerase I
− Descoberta em 1956 (Kornberg pai)
− Função precisa descoberta apenas em 1969: remove o
primer de RNA da fita descontínua

DNA polimerase III
− Descoberta em 1970 (Kornberg filho)
− Principal enzima que realiza a replicação em
procariotos

DNA polimerase II
− Lenta, envolvida em reparo do DNA, retira os primers
Síntese de DNA – enzimas de duplicação
Síntese de DNA – enzimas de duplicação
Duplicação do DNA
DNA RNA
Síntese de DNA
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• Sintetizados quimicamente;
• 15 a 25 bases ;
• Define limites alvo a amplificar – marcadores genéticos
• Serve como ponto de início para a replicação;
• Permite a cópia das 2 cadeias simultaneamente nas duas
direções (para frente e para trás);
• Banco de Dados International Nucleotide Sequence Database
(www.insdc.org)
• GenBank (NCBI, NIH) European Molecular Biology Laborstory
(EMBL) DNA DataBank of Japan (DDBJ)
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Aula5 dna duplicação