Funções de DNA
MSc. Rito Pereira
Funções de DNA
1. Autoduplicação ou auto-replicação;
2. Comanda a síntese de proteína.
1. Autoduplicação ou auto-replicação
 A replicação do DNA é iniciada em pontos específicos,
chamados de origens de replicação, gerando forquilhas de
replicação em forma de “Y” onde a dupla hélice está aberta.
 Cada uma das fitas desenroladas de DNA serve como molde
para a síntese de fitas filhas complementares que correm em
direção oposta.
 Cada base exposta tem potencial para parear com
nucleotídeos livres na solução, obedecendo os
requisitos rígidos de pareamento.
 Cada base exposta ira parear apenas com sua base
complementar, A com T e G com C.
 A direção do crescimento é 5´ 3´ para uma fita
→ líder e ´3
5´ para a fita
→ retardada.
 As reações catalisadas pela DNA polimerase envolvem a
adição de um resíduo de desoxinucleosídeo monofosfato
(dNMP) no grupo hidroxila livre na extremidade da cadeia
nascente do DNA.
 No entanto, apenas a fita líder possui sempre um grupo
hidroxila livre que permite elongação continua na
mesma direção em que a forquilha de replicação se
move.
 A direção da síntese da fita retardada é oposta aquela
na qual se move a forquilha de replicação. Como
resultado disso:
 A síntese da nova fita precisa ser realizada numa série de
progressiva de passos, produzindo segmentos de DNA curtos
chamados de fragmentos de Okazaki.
 Fragmentos sucessivos são posteriormente ligados de forma
covalente pela enzima DNA ligase, garantindo a criação de
uma de duas hélices de DNA filhas.
Principais classes de enzimas envolvidas na replicação de
DNA
 Topoisomerases – inicia o processo de desenrolamento do
DNA pela quebra de uma das fitas de DNA, aliviando a
tensão que mantém a hélice em sua forma superenrolada.
 Helicases – desenrolam a dupla-hélice na forquilha de
replicação, uma vez que o superenrolamento feito pela
topoisomerase.
 Proteínas de ligação a fita simples – mantém a
estabilidade de forquilha de replicação. O DNA de fita
simples é bastante vulneráveis ao ataque enzimático e as
proteínas ligadas o protegem da degradação.
 DNA-ligases – necessárias para fechar as falhas deixadas
na fita de DNA recém-sintetizadas, após a remoção dos
primers de RNA e o preenchimentos dessas lacunas.
 DNA-polimerases – sintetizam novas fitas de DNA.
Nova síntese de DNA celular depende normalmente da
existência de uma fita molde de DNA, a qual é lida por
uma polimerase dependente de DNA. Este complexo
agregado de subunidades proteicas também fornece
atividade de revisão e reparo do DNA.
 Primases – enzimas que adicionam uma pequena
sequência de RNA complementar (um primer) ao DNA
fita simples na forquilha de replicação. O primer do RNA
fornece a extremidade 3´ OH necessária para que a
DNA-polimerase inicie a síntese.
Tipos de replicação
 Semiconservativa (TPC)
 Conservativa (TPC)
 Dispersiva (TPC)
2. Comanda a síntese de proteína
 O número de proteínas de um organismo é muito grande mas
elas podem ser agrupadas em tipos de acordo com sua função:
a) Proteínas estruturais;
b) Enzimas;
c) Anticorpos;
d) Hormônios.
 Proteínas estruturais: São responsáveis pela forma dos
organismos, pois constroem as paredes e as membranas
nucleares, fazendo parte, ainda, do conteúdo citoplasmático e
de seus organelos.
 Enzimas: São proteínas especializadas na catálise de reações
biológicas.
 Anticorpos: São proteínas responsáveis pela defesa do
organismo. Sua função é eliminar substâncias estranhas,
desempenhando, portanto, um papel importante nas
infecções e nos transplantes.
 Hormônios: São proteínas formadas em órgãos específicos
e transportados pelo sangue para outras regiões do
organismo, com finalidade de regular o seu funcionamento
Etapas da síntese de protéicas
1. Transcrição: DNA RNAm ou
→ RNA DNA (reversa).
→
2. Tradução: RNAm cadeia polipeptídica
→
Transcrição
 Para formar uma cadeia de RNA, a dupla fita de DNA
abre-se no sentido longitudinal pela quebra das pontes
de hidrogênio, deixando livres os terminais das bases.
 A nova cadeia formada é denominada de cadeia
codificadora ou cadeia com sentido e é complementar
a outra cadeia do DNA (cadeia molde ou anti-sentido).
Enzimas que catalisam síntese de RNA
 RNA polimerase I (pol I): transcreve o RNA ribossômico
 RNA Polimerase II (pol II): transcreve o RNA
mensageiro
 RNA polimerase III (pol II): transcreve o RNA
transportador e outros pequenos RNAs
 A transcrição inicia quando a enzima RNA-polimerase II liga-
se ao promotor, sitio promotor ou região promotora (Ex:
TATA, CAT e GC boxes);
 O produto imediato da transcrição é denominado de
transcrito primário, RNA primário, RNA heterogêneo
nuclear ou pré-RNA.
Etapas da transcrição
 Reconhecimento da molde
 Iniciação
 Elongação
 Finalização
Reconhecimento da molde
 Começa com a ligação da RNA-polimerase II ao sitio
promotor do gene. As duas cadeias de DNA separam-se
para construir o molde, criando-se a bolha de
transcrição, devido a um desenrolamento que se inicia
no sitio de ligação da RNA-polimerase II com o
promotor.
Iniciação
 São sintetizadas e liberadas as primeiras sequencias,
com dois a nove nucleotídeos; esta etapa termina
quando a enzima libera-se do promotor e a cadeia
ultrapassa o comprimento mencionado; a sequencia de
DNA necessária para a RNA-polimerase II ligar-se ao
molde e realizar a reação de iniciação define o
promotor.
Elongação
 A enzima move-se ao longo da cadeia de DNA e alonga a
cadeia de RNA; á medida que se move, a enzima desenrola
a dupla hélice de DNA, expondo um novo segmento da
cadeia-molde, com o qual paream os nucleotídeos da
cadeia de RNA em crescimento e, atrás dessa região
desenrolada, a cedeia-molde de DNA pareia com a sua
cadeia complementar para restabelecer a dupla ligação.
Finalização
 Supõe o reconhecimento do ponto a partir do qual
nenhuma base mais é adicionada á cadeia de RNA.
Quando a ultima base é adicionada a essa cadeia, tanto o
RNA-polimerase II quanto a cadeia de RNA são liberadas
constituindo esta ultima o RNA heterogêneo nuclear ou
pré-RNA. Antes de sair do núcleo, sofre o processamento
pós-transcricional (splicing).
2. Tradução
 É o segundo evento na síntese proteica, consistindo na
transmissão de informação genética do RNAm para um
polipeptídios.
 Deste processo participam:
 RNAm (TPC)
 RNAt (TPC)
 Ribossomas (TPC)

Aula 2 Funcoes de DNA.pptx apresentaçãoo

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    Funções de DNA 1.Autoduplicação ou auto-replicação; 2. Comanda a síntese de proteína.
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    1. Autoduplicação ouauto-replicação  A replicação do DNA é iniciada em pontos específicos, chamados de origens de replicação, gerando forquilhas de replicação em forma de “Y” onde a dupla hélice está aberta.  Cada uma das fitas desenroladas de DNA serve como molde para a síntese de fitas filhas complementares que correm em direção oposta.
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     Cada baseexposta tem potencial para parear com nucleotídeos livres na solução, obedecendo os requisitos rígidos de pareamento.  Cada base exposta ira parear apenas com sua base complementar, A com T e G com C.
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     A direçãodo crescimento é 5´ 3´ para uma fita → líder e ´3 5´ para a fita → retardada.  As reações catalisadas pela DNA polimerase envolvem a adição de um resíduo de desoxinucleosídeo monofosfato (dNMP) no grupo hidroxila livre na extremidade da cadeia nascente do DNA.
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     No entanto,apenas a fita líder possui sempre um grupo hidroxila livre que permite elongação continua na mesma direção em que a forquilha de replicação se move.  A direção da síntese da fita retardada é oposta aquela na qual se move a forquilha de replicação. Como resultado disso:
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     A sínteseda nova fita precisa ser realizada numa série de progressiva de passos, produzindo segmentos de DNA curtos chamados de fragmentos de Okazaki.  Fragmentos sucessivos são posteriormente ligados de forma covalente pela enzima DNA ligase, garantindo a criação de uma de duas hélices de DNA filhas.
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    Principais classes deenzimas envolvidas na replicação de DNA  Topoisomerases – inicia o processo de desenrolamento do DNA pela quebra de uma das fitas de DNA, aliviando a tensão que mantém a hélice em sua forma superenrolada.  Helicases – desenrolam a dupla-hélice na forquilha de replicação, uma vez que o superenrolamento feito pela topoisomerase.
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     Proteínas deligação a fita simples – mantém a estabilidade de forquilha de replicação. O DNA de fita simples é bastante vulneráveis ao ataque enzimático e as proteínas ligadas o protegem da degradação.  DNA-ligases – necessárias para fechar as falhas deixadas na fita de DNA recém-sintetizadas, após a remoção dos primers de RNA e o preenchimentos dessas lacunas.
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     DNA-polimerases –sintetizam novas fitas de DNA. Nova síntese de DNA celular depende normalmente da existência de uma fita molde de DNA, a qual é lida por uma polimerase dependente de DNA. Este complexo agregado de subunidades proteicas também fornece atividade de revisão e reparo do DNA.
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     Primases –enzimas que adicionam uma pequena sequência de RNA complementar (um primer) ao DNA fita simples na forquilha de replicação. O primer do RNA fornece a extremidade 3´ OH necessária para que a DNA-polimerase inicie a síntese.
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    Tipos de replicação Semiconservativa (TPC)  Conservativa (TPC)  Dispersiva (TPC)
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    2. Comanda asíntese de proteína  O número de proteínas de um organismo é muito grande mas elas podem ser agrupadas em tipos de acordo com sua função: a) Proteínas estruturais; b) Enzimas; c) Anticorpos; d) Hormônios.
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     Proteínas estruturais:São responsáveis pela forma dos organismos, pois constroem as paredes e as membranas nucleares, fazendo parte, ainda, do conteúdo citoplasmático e de seus organelos.  Enzimas: São proteínas especializadas na catálise de reações biológicas.
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     Anticorpos: Sãoproteínas responsáveis pela defesa do organismo. Sua função é eliminar substâncias estranhas, desempenhando, portanto, um papel importante nas infecções e nos transplantes.  Hormônios: São proteínas formadas em órgãos específicos e transportados pelo sangue para outras regiões do organismo, com finalidade de regular o seu funcionamento
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    Etapas da síntesede protéicas 1. Transcrição: DNA RNAm ou → RNA DNA (reversa). → 2. Tradução: RNAm cadeia polipeptídica →
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    Transcrição  Para formaruma cadeia de RNA, a dupla fita de DNA abre-se no sentido longitudinal pela quebra das pontes de hidrogênio, deixando livres os terminais das bases.  A nova cadeia formada é denominada de cadeia codificadora ou cadeia com sentido e é complementar a outra cadeia do DNA (cadeia molde ou anti-sentido).
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    Enzimas que catalisamsíntese de RNA  RNA polimerase I (pol I): transcreve o RNA ribossômico  RNA Polimerase II (pol II): transcreve o RNA mensageiro  RNA polimerase III (pol II): transcreve o RNA transportador e outros pequenos RNAs
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     A transcriçãoinicia quando a enzima RNA-polimerase II liga- se ao promotor, sitio promotor ou região promotora (Ex: TATA, CAT e GC boxes);  O produto imediato da transcrição é denominado de transcrito primário, RNA primário, RNA heterogêneo nuclear ou pré-RNA.
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    Etapas da transcrição Reconhecimento da molde  Iniciação  Elongação  Finalização
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    Reconhecimento da molde Começa com a ligação da RNA-polimerase II ao sitio promotor do gene. As duas cadeias de DNA separam-se para construir o molde, criando-se a bolha de transcrição, devido a um desenrolamento que se inicia no sitio de ligação da RNA-polimerase II com o promotor.
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    Iniciação  São sintetizadase liberadas as primeiras sequencias, com dois a nove nucleotídeos; esta etapa termina quando a enzima libera-se do promotor e a cadeia ultrapassa o comprimento mencionado; a sequencia de DNA necessária para a RNA-polimerase II ligar-se ao molde e realizar a reação de iniciação define o promotor.
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    Elongação  A enzimamove-se ao longo da cadeia de DNA e alonga a cadeia de RNA; á medida que se move, a enzima desenrola a dupla hélice de DNA, expondo um novo segmento da cadeia-molde, com o qual paream os nucleotídeos da cadeia de RNA em crescimento e, atrás dessa região desenrolada, a cedeia-molde de DNA pareia com a sua cadeia complementar para restabelecer a dupla ligação.
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    Finalização  Supõe oreconhecimento do ponto a partir do qual nenhuma base mais é adicionada á cadeia de RNA. Quando a ultima base é adicionada a essa cadeia, tanto o RNA-polimerase II quanto a cadeia de RNA são liberadas constituindo esta ultima o RNA heterogêneo nuclear ou pré-RNA. Antes de sair do núcleo, sofre o processamento pós-transcricional (splicing).
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    2. Tradução  Éo segundo evento na síntese proteica, consistindo na transmissão de informação genética do RNAm para um polipeptídios.  Deste processo participam:
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     RNAm (TPC) RNAt (TPC)  Ribossomas (TPC)