ICSA17 - Eletroforese em gel de acrilamida

2.074 visualizações

Publicada em

Aula SDS PAGE

1 comentário
1 gostou
Estatísticas
Notas
Sem downloads
Visualizações
Visualizações totais
2.074
No SlideShare
0
A partir de incorporações
0
Número de incorporações
2
Ações
Compartilhamentos
0
Downloads
42
Comentários
1
Gostaram
1
Incorporações 0
Nenhuma incorporação

Nenhuma nota no slide

ICSA17 - Eletroforese em gel de acrilamida

  1. 1. Separação de Biomoléculas Eletroforese em Gel de Acrilamida
  2. 2. Eletroforese em Gel de Acrilamida • Metodologia de separação de biomoléculas • Baseada no peso molecular (KDa) e/ou na carga das moléculas • Pode ser realizada uma dimensão ou duas dimensões (2D) • Pode ser em gel desnaturante ou não desnaturante
  3. 3. Eletroforese em Gel de Acrilamida Arranjo básico de um sistema de Eletroforese
  4. 4. Eletroforese em Gel de Acrilamida Diagramas de aparatos de corrida de gel (A) tubo; (B) eletroforese vertical; (C) Eletroforese horizontal; (D) horizontal de camada fina
  5. 5. Eletroforese em Gel de Acrilamida Gel de Agarose e de Acrilamida (A) Géis de agarose são formados por pontes de hidrogênio e interações hidrofóbicas entre os polímeros (B) Géis de Acrilamida possuem ligações covalentes cruzadas entre camadas de polímeros
  6. 6. Eletroforese em Gel de Acrilamida Principais soluções utilizadas para confecção de géis
  7. 7. Eletroforese em Gel de Acrilamida Soluções finais de Gel – De corrida e Stack
  8. 8. Eletroforese em Gel de Acrilamida Diagrama de aparato de eletroforese vertical - montagem
  9. 9. Eletroforese em Gel de Acrilamida Montagem do aparato
  10. 10. Eletroforese em Gel de Acrilamida Montagem do Aparato
  11. 11. Eletroforese em Gel de Acrilamida Efeito de menisco na forma do gel. Adicionar água ou n-butanol acima do gel permite uma superfície reta para melhor formato das bandas
  12. 12. Eletroforese em Gel de Acrilamida Montagem do Aparato
  13. 13. Eletroforese em Gel de Acrilamida Montagem do Aparato
  14. 14. Eletroforese em Gel de Acrilamida Gel final corado
  15. 15. Eletroforese em Gel de Acrilamida (A) Gel de acrilamida para separação de DNA; (B) Gráfico tamanho (par de bases – bp) X distância percorrida; (C) Gráfico do log do tamanho (bp) X distância percorrida
  16. 16. Eletroforese em Gel de Acrilamida Exemplo de tabela de cálculo para encontrar o peso molecular
  17. 17. Eletroforese em Gel de Acrilamida Exemplo de tabela de cálculo para encontrar o peso molecular
  18. 18. Eletroforese em Gel de Acrilamida Sistemas de blotting eletroforético (A) Sistema de transferência úmida (tank buffer) (B) Sistema de transferência semi-úmido

×