Separação de Biomoléculas
Eletroforese em Gel de Acrilamida
Eletroforese em Gel de Acrilamida
• Metodologia de separação de biomoléculas
• Baseada no peso molecular (KDa) e/ou na
car...
Eletroforese em Gel de Acrilamida

Arranjo básico de um sistema de Eletroforese
Eletroforese em Gel de Acrilamida

Diagramas de aparatos de corrida de gel (A) tubo; (B) eletroforese vertical;
(C) Eletro...
Eletroforese em Gel de Acrilamida

Gel de Agarose e de Acrilamida
(A) Géis de agarose são formados por pontes de hidrogêni...
Eletroforese em Gel de Acrilamida

Principais soluções utilizadas para confecção de géis
Eletroforese em Gel de Acrilamida

Soluções finais de Gel – De corrida e Stack
Eletroforese em Gel de Acrilamida

Diagrama de aparato de eletroforese vertical - montagem
Eletroforese em Gel de Acrilamida

Montagem do aparato
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Montagem do Aparato
Eletroforese em Gel de Acrilamida

Efeito de menisco na forma do gel. Adicionar água ou n-butanol acima do gel permite
uma...
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Montagem do Aparato
Eletroforese em Gel de Acrilamida

Montagem do Aparato
Eletroforese em Gel de Acrilamida

Gel final corado
Eletroforese em Gel de Acrilamida

(A) Gel de acrilamida para separação de DNA; (B) Gráfico tamanho (par de bases – bp) X ...
Eletroforese em Gel de Acrilamida

Exemplo de tabela de cálculo para encontrar o peso molecular
Eletroforese em Gel de Acrilamida

Exemplo de tabela de cálculo para encontrar o peso molecular
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Sistemas de blotting eletroforético
(A) Sistema de transferência úmida (tank buffer)
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ICSA17 - Eletroforese em gel de acrilamida

  1. 1. Separação de Biomoléculas Eletroforese em Gel de Acrilamida
  2. 2. Eletroforese em Gel de Acrilamida • Metodologia de separação de biomoléculas • Baseada no peso molecular (KDa) e/ou na carga das moléculas • Pode ser realizada uma dimensão ou duas dimensões (2D) • Pode ser em gel desnaturante ou não desnaturante
  3. 3. Eletroforese em Gel de Acrilamida Arranjo básico de um sistema de Eletroforese
  4. 4. Eletroforese em Gel de Acrilamida Diagramas de aparatos de corrida de gel (A) tubo; (B) eletroforese vertical; (C) Eletroforese horizontal; (D) horizontal de camada fina
  5. 5. Eletroforese em Gel de Acrilamida Gel de Agarose e de Acrilamida (A) Géis de agarose são formados por pontes de hidrogênio e interações hidrofóbicas entre os polímeros (B) Géis de Acrilamida possuem ligações covalentes cruzadas entre camadas de polímeros
  6. 6. Eletroforese em Gel de Acrilamida Principais soluções utilizadas para confecção de géis
  7. 7. Eletroforese em Gel de Acrilamida Soluções finais de Gel – De corrida e Stack
  8. 8. Eletroforese em Gel de Acrilamida Diagrama de aparato de eletroforese vertical - montagem
  9. 9. Eletroforese em Gel de Acrilamida Montagem do aparato
  10. 10. Eletroforese em Gel de Acrilamida Montagem do Aparato
  11. 11. Eletroforese em Gel de Acrilamida Efeito de menisco na forma do gel. Adicionar água ou n-butanol acima do gel permite uma superfície reta para melhor formato das bandas
  12. 12. Eletroforese em Gel de Acrilamida Montagem do Aparato
  13. 13. Eletroforese em Gel de Acrilamida Montagem do Aparato
  14. 14. Eletroforese em Gel de Acrilamida Gel final corado
  15. 15. Eletroforese em Gel de Acrilamida (A) Gel de acrilamida para separação de DNA; (B) Gráfico tamanho (par de bases – bp) X distância percorrida; (C) Gráfico do log do tamanho (bp) X distância percorrida
  16. 16. Eletroforese em Gel de Acrilamida Exemplo de tabela de cálculo para encontrar o peso molecular
  17. 17. Eletroforese em Gel de Acrilamida Exemplo de tabela de cálculo para encontrar o peso molecular
  18. 18. Eletroforese em Gel de Acrilamida Sistemas de blotting eletroforético (A) Sistema de transferência úmida (tank buffer) (B) Sistema de transferência semi-úmido

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