Pesquisa INÉDITA sobre a presença de Bartonella no sertão pernambucano em animais domésticos e silvestres

1. Orientador: Prof. Dr. Maurício Claudio Horta
Orientada: Naylla Mayana dos Santos
Universidade Federal do Vale do São Francisco
X Jornada de Iniciação Científica
PESQUISA
UNIVASF
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2.  Descrita pela primeira vez em 1889 por Parinaud et al. em pacientes com
conjuntivite e linfoadenopatia regional;
 O gênero Bartonella recebeu esse nome em homenagem ao argentino Alberto
L. Barton Thompson em 1905;
 Em 1950 Robert Debrè et al., realizou a primeira divulgação formal e
escrita da doença;
 Principais pesquisadores: Chomel, Kosoy, Fleishman, Breitschwerdt,
Dehio, Lamas. No Brasil: Favacho, Corrêa, Velho.
2
Fonte: blogspot.com.br

3.  Bactéria Gram-negativa;
 Pequenos cocobacilos pleomórficos;
 Aeróbica obrigatória;
 Oportunista;
 Flagelos ou fímbrias (B. henselae, B. quintana);
 Intracelular facultativa;
 Crescimento fastidioso, com muitas exigências;
 Responsável por zoonoses e doenças pouco conhecidas.
3
Fonte:logspot.com.br

4.  Bartonella bacilliformis (Doença de Carrión);
4
 B. quintana (Febre das trincheiras);
 B. henselae (Doença da arranhadura do Gato, AB);
 B. elizabethae (Endocardites);
 B. vinsonii (Endocardites);
 B. clarridgeiae (Bacteremia);
 B. grahamii (Neuroretinite);
 B. washoensis (Miocardites).
Fonte:focinhoserabinhos.blogspot.com.br

5. Felídeos;
Canídeos;
Roedores;
Lagomorfos;
Primatas;
Etc...
5

6.  Ectoparasitas como: pulgas, piolhos, carrapatos;
 Fômites;
 Arranhadura, lambedura ou mordedura de animais infectados.
6Fonte:focinhoserabinhos.blogspot.com.br

7.  Febre;
 Cefaleia;
 Angiomatose
 Anemia hemolítica;
 Hepatomegalia;
 Lesões cutâneas linfoproliferativas (AB);
 Lesões cutâneas granulomatosas (peliose bacilar);
 Neurológicos;
 Oculares;
 Síndrome de Parinaud;
 Endocardites
 ... inúmeros outros sintomas...
7

8.  Cultura – Isolamento;
 Sorológico;
 Moleculares – PCR;
 Imunohistoquímicos;
 Clínico;
 Diferencial: Sarcoma de Kaposi.
8Fonte:focinhoserabinhos.blogspot.com.br

9. CAATINGA?
9

10.  Realizar a pesquisa de infecção por Bartonella sp. em hospedeiros
mamíferos domésticos (cães e gatos) e silvestres (marsupiais e
roedores) e em seus ectoparasitas (pulgas, carrapatos) em áreas
urbanas e rurais do município de Lagoa Grande e Petrolina, PE,
localizado no bioma Caatinga, semiárido pernambucano.
10

11. Coleta e identificação de ectoparasitas em fase de
parasitismo em marsupiais, roedores, cães e gatos;
Detecção de DNA de Bartonella sp. em sangue total de
roedores, marsupiais, cães e gatos e seus ectoparasitas,
pela Reação em Cadeia pela Polimerase (PCR) e
sequenciamento de DNA.
11

12. 12

13. Etapa Data Estação Município Localidade
1
31/08/2014 a
03/09/2014
Inverno
Lagoa Grande Fazenda Tanque de Ferro – Açude
2
05/09/2014 a
08/09/2014
Petrolina Batalhão do 72.º BIMtz
3
31/10/2014 a
03/11/2014
Primavera
Petrolina CCA UNIVASF
4
30/11/2014 a
03/12/2014
Lagoa Grande Fazenda Tanque de Ferro – Riacho
5
10/01/2015 a
13/01/2015
Verão
Petrolina Capim
6
14/01/2015 a
17/01/2015
Lagoa Grande Fazenda Pajeú
7
19/04/2015 a
22/04/2015
Outono
Lagoa Grande Fazenda Tanque de Ferro – Estrada
8
01/05/2015 a
04/05/2015
Petrolina Pedrinhas
13

14.  94 Armadilhas por noite, durante 4 noites consecutivas;
 Reiscadas todos os dias;
 Sherman e Tomahawk.
14
Fonte: Arquivo pessoal.

15.  Pesagem – cloridrato de quetamina 10%
 Colheita: via intracárdica, veia lateral da
cauda, veia cefálica com agulhas e seringas
descartáveis
15
Fonte: Arquivo pessoal.

16.  Auxílio de pinças e pentes;
 Retirar todos os visíveis;
 Identificados por chaves
dicotômicas.
Linard e Guimarães (2000)
Aragão e Fonseca (1991)
16
Fonte: Arquivo pessoal.

17. 17Fonte: Arquivo pessoal.
 Extração de sangue utilizou-se comercial Wizard® Genomic DNA
Purification Kit (seguindo recomendações do fabricante);
 Extração de carrapatos segundo protocolo de Horta et al. 2007;
 Extração de pulgas segundo protocolo de Horta et al. 2011, por
meio de termoextração;
 PCR: BhCS.781p –BhCS.1137n, amplifica um fragmento gene gltA
de Bartonella sp.

18. Ordem Espécie n
Rodentia Thrichomys apereoides 30
Wiedomys pyrrhorhinus 3
Galea spixii 3
Calomys expulsus 2
Marsupialia Didelphis albiventris 27
Monodelphis domestica 10
Gracilinanus agilis 1
Carnivora Cerdocyon thous 1
109 cães
40 gatos
18

19. Espécie Animal Espécie Pulgas Quantidade pulga
Didelphis albiventris C. felis 03
Cerdocyon thous Pulex irritans 09
• Marquez et al. (2009) obteve resultados positivos para Bartonella sp.
detectados por PCR em Pulex irritans de canídeo silvestre na Espanha.
19
Similarmente, Gabriel et al. (2009), obteve amplificação para DNA de
Bartonella (B.vinsonii subsp.Berkhoffii) de pulex spp. coletadas de
canídeos silvestres (Urocyon cinereoargenteus) da Califórnia.

20. SANGUE
CARRAPATOS
NEGATIVOS
• Em 2014 Fleischaman et al, comprovaram a soro prevalência do gênero de
Bartonella em canídeos selvagens no Brasil.
20
A detecção de Bartonella usando PCR é muitas vezes mal sucedida por efeito inibitório da
hemina segundo Kirillov et al. (2007) e dificuldade de encontrar em sangue periférico (baixa
bacteremia no momento da colheita de sangue), assim como descreveu Yore et al. (2014).

21.  CÃES
CÃES PARASITADOS ESPÉCIE PULGA
109 21 Pullex irritans 61
C. felis 43
SANGUE
CARRAPATOS
NEGATIVOS
• Em um trabalho no Chile foi demonstrado a positividade de pulgas de cães para o
genoma de Bartonella spp. por PCR (Perez-Martínes et al., 2009).
• Foi dito por Breitschwerdt et al. (1999) que a presença do carrapato Rhipicephalus
sanguineus está associada ao fator de risco de infecção por Bartonella vinsonni, E.
canis e Babesia canis. Porém não foram evidenciados no presente trabalho.
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22.  GATOS
GATOS PARASITADOS ESPÉCIE PULGA POSITIVAS
40 08 C. felis 25
SANGUE (4/40) POSITIVOS
Esse resultado positivo foi também evidenciado em outros trabalhos pelo Brasil, como
no trabalho de Miceli et al. (2013) em Cuiabá no qual quatro gatos foram positivos
para DNA de Bartonella por método molecular da PCR.
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Corroborando com a pesquisa Chomel et al. (1996), em que pulgas de gatos
foram examinadas para DNA de Bartonella por PCR e apresentaram-se
positivas.

23.  A gênero da Bartonella está presente na região do vale do são Francisco,
em sangue de gatos e pulgas de diferentes espécies animal. Porém mais
pesquisas precisam ser feitas para determinar a prevalência em animais
silvestres, domésticos e ectoparasitas e identificar as espécies de
Bartonella que estão parasitando-os.
 São necessários outros tipos de investigação utilizando sorologia, cultura
ou outros.
23

24. 24

25. 25
“Estamos na infância das pesquisas sobre essas espécies” Gregory Dasch

26. Orientador: Prof. Dr. Maurício Claudio Horta
Orientada: Naylla Mayana dos Santos
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