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Qual a função do uso de fendas diante dos detectores na maioria dos tipos de
espectrofotômetros?
Fendas reduzem e fixam as dimensões do feixe de radiação. Elas selecionam
determinados feixes de radiação com a finalidade de detectar somente
comprimentos de onda monitorados.
13) Cite um fator instrumental e um real que ocasiona desvio da linearidade na lei
de Lambert Beer. Explique
Limites reais: concentração da solução acima de 0,01M. Explicação: o aumento na
concentração é acompanhado pelo aumento crescente e proporcional de
abdorbância, até um ponto limite. A partir deste ponto (soluções concentradas),
deixa de existir a proporcionalidade linear entre os valores de absorbância e
concentração.
Instrumentais: somente válida para medidas feitas com radiação monocromática, o
que é de difícil obtenção nos espectrofotêmetros. A consequênciaimediata será
um encurvamento, com desvio negativo à lei, mais ou menos significativo
dependendo dos valores dos coeficientes de absortividade aos diferentes λ.
14) Por que solventes contendo somente ligações saturadas são transparentes na
maior parte da região do UV próximo?
Porque não absorvem a radiação ultra-violeta na mesma região que o analito
15)Cite 2 monocromadores que conhece. Qual deles apresenta maior dispersão
linear dos comprimentos de onda?
Monocromador de rede (apresenta dispersão linear dos lambidas ao longo do plano
focal) e de prisma (apresenta dispersão angular).
16) Qual tipo de transição molecular que determina a absorção no UV-Vis? Dê 2
exemplos deste tipo de transição.
Excitação de é de ligação. Transição sigma – sigma*, n – sigma*, n – PI*, PI – PI*.
17) Dê uma vantagem do uso de monocromadores em comparação a filtros em
espectrômetros. Dê dois tipos de monocromador que você conhece e qual oferece
maiores vantagens?
Os monocromadores separam individualmente os comprimentos de onda e os filtros
separam bandas do comprimento de onda. Tipos : monocromadores de prisma e de
rede. Os de rede fornecem melhor separação de comprimento de onda para um
mesmo tamanho de elemento dispersor e dispersam a radiação linearmente ao
longo do plano focal.
18) A leitura da intensidade de absorção se faz com igual exatidão e precisão para
qualquer valor da escala de absorção? Em caso negativo, como minimizar esse
problema?
19) Explique como é possível analisar 2 analitos (X e Y), cujos espetros estão
parcialmente
sobrepostos, por UV-Vis?
A absorbância total de uma solução em um determinado comprimento de onda é
igual à soma das absorbâncias dos componentes individuais presentes. Essa relação
torna possível a determinação quantitativa dos constituintes individuais de uma
mistura, mesmo que seus espectros se superponham.
20) Qual a vantagem de instrumentos de duplo feixe, em relação aos de feixe único
em
espectrometria na região UV-Vis?
Utilizando um instrumento de duplo feixe, temos um feixe que passa pela amostra e
outro pela referencia, isso diminui os erros experimentais se compararmos ao uso de
um equipamento de feixe único.
Por que os instrumentos de duplo feixe no espaço sao usados em estudos de
cinética em vez dos de duplo feixe no tempo?
21) Qual a expressão matemática usada na quantificação em espectrometria
(escreva, dando o significado de cada termo).
A = Ɛ .b . C (Lei de Lambert-Beer)
A – absorbância
Ɛ – absortividade molar (L .mol-1 . cm-1)
b – percurso ótico (cm)
C – concentração (g . L-1)
22) Qual o efeito da largura da fenda sobre o espectro gerado na regiãodo UV-Vis?
Quanto mais aberta for a fenda, mais intenso será o sinal. Entretanto, com o
estreitamento da fenda, se ganha resolução (perdendo-se intensidade luminosa). A
fenda crítica para definir a resolução é a fenda de saída.
Cite um exemplo de vantagem do detector de fotodiodo em relação ao de
fotomultiplicador em espectrometria UV-VIS
24) Porque os compostos com duplas ligações (n>7) conjugadas absorvem em
regiões de maior comprimento de onda doque o eteno?
Quanto maior o número de ligações múltiplas conjugadas num composto, menor
será a energia de excitação π → π* e maior então seu comprimento de onda na qual
ele absorve luz. Isso ocorre, já que a transição eletrônica energeticamente mais
favorável π → π* ocorre do orbital ocupado mais energético (HOMO) para o orbital
anti-ligante de menor energia (LUMO), ou seja, menor ∆E, maior comprimento de
onda. A excitação eletrônica do π → π* do eteno requer maior absorção de luz
,possuindo menor comprimento de onda, do que a de compostos com duplas
ligações.
Cite uma vantagem de um detector que opera a partir de células
fotomultiplicadoras
O detector que opera a partir de células fotomultiplicadoras tem um poder de
amplificação alto, o que implica que o poder radiante pode ser pequeno
26) Explique como um semicondutor de silício de junção pn converte a radiação
eletromagnética em corrente elétrica?
A radiação eletromagnética vai compensar a inatividade dos portadores majoritários
(elétrons) cedendo energia para causar a diferença de potencial quase inexistente no
diodo, já que trabalha a partir da polarização reversa. Com isso, a corrente começa a
circular.
27) Cite um exemplo de transição eletrônica proibida.
As transições proibidas são aquelas que possuem pouca possibilidade de ocorrer,
quando ocorrem geram pequenos ombros no gráfico, ou picos de intensidade muito
baixa. Um exemplo desse tipo de transição é a que ocorre em aldeídos, transição de
n ->pi*.
28) Porque o espectro do benzeno em estado gasoso, apresenta linhas de
absorção, enquanto que em solvente polar, o espectro dele tem um formato de
bandas?
As linhas surgem de modo a evidenciar estados vibracionais,rotacionais e eletrônicos
da molécula, já que porestá em estado gasoso estão mais livres. Já a banda surge
pela leitura tanto do solvente quanto da molécula, dificultando o discernimento
entre absorbância de diferentes compostos.
29) Dê um exemplo de um tipo de informação que a espectrometria UV-Vis nos dá
sobre a estrutura da molécula.
A espectrometria UV-Vis determina quantitativamente os compostos contendo
grupos absorventes. Depende, em primeiro lugar, do número e do arranjo dos
elétrons nas moléculas ou íons absorventes. Como consequência, o pico de absorção
pode ser correlacionado com o tipo de ligação que existe na espécie que está sendo
estudada.
31) Cite dois critérios pra definir um bom solvente para análise de analito na ragião
do UV-Vis.
Para escolher um bom solvente, deve se considerar: A sua transparência, ou seja, ele
não deve absorver radiação UV-Vis na mesma região do analito. O efeito do solvente
no centro absorvente, por exemplo: ponte de hidrogênio pode levar a perda da
estrutura fina de uma banda de absorção. E por fim, a capacidade de influenciar no
comprimento de onda.
33) A intensidade de uma banda está relacionada com o comprimento de onda?
Em caso negativo, explique o porquê.
Não. A intensidade só está relacionada à amplitude do sinal, enquanto o lambida
influencia somente na largura de banda.
34) Como funciona a célula fotomultiplicadora?
Uma célula fotomultiplicadora dispõe de uma série de eletrodos que permitirão a
amplificação do sinal. Basicamente, ao incidir sobre o primeiro eletrodo, a luz
promove desprendimento de elétrons a partir da superfície desta placa. Tais
elétrons seguem para placas vizinhas, constituídas do mesmo material e submetidas
a um maior potencial elétrico. Ao colidirem sobre as mesmas, mais elétrons serão
desprendidos a partir de uma espécie de efeito cascata que resultará numa
amplificação do sinal.
36) Cite dois tipos de fontes de radiação continua? Descreva o funcionamento de
uma delas.
Fontes contínuas são aquelas nas quais vários λ são emitidas e analisadas. Lâmpada
de Tungstênio e lâmpada de Deutério.
37) O que se entende por difração e refração?
Refração: mudança de velocidade de uma onda ao passar de um meio para outro,
causando muitas vezes, mudança de direção também.
Difração: ondas passam por um orifício ou contornam objeto cuja dimensão é da
mesma ordem de grandeza de seu lambida e, assim, passa a se propagar de forma
esférica.
39) A inclinação da curva de absorbância por concentração nos fornece o valor do
comprimento de onda, certoou errado. Em caso negativo, explique o porquê.
Não. A Lei de Beer permite a quantificação de solutos por espectrofotometria:
Absorbância = (absortividade)*(passo óptico)*(concentração). Portanto, a inclinação
da curva de absorbância por concentração (coeficiente angular) é a absortividade
vezes o passo óptico.
41) Qual a faixa de concentração ideal para se trabalhar na espectrometria UV-Vis?
Segundo o “ Desvio Real da Lei de Beer “, concentrações superiores a 0.01 mol/L
causam erros desvios de leitura. Valores menores que 0.01 são ideiais, porque
evitam interações dos centros absorventes com outras substâncias.
42) Explique, sucintamente, o mecanismo de dispersão da radiação que ocorre na
rede de difração?
Funcionamento de uma rede de difração: (A) Aluminio -> material refletor -> rede
refletora. (B) Material transparente -> é um prob na região do infravermelho, que
não aceitaria vidro. Em (A) a luz chega e não atravessa, mas sofre reflexão ao
encontrar a superfície espelhada. Se a fenda de saída for muito aberta, não há
separação entre diferenças de lambda, de modo que o detetor gera um platô e a
resposta não indica pico separados. Com fenda bem fechada, o detetordetecta o
lambda1, depois uma zona de penumbra e, só então, lambda2; acontece o mesmo
para lambda3. Com a existência de uma zona de penumbra, os lambda não chegam
continuamente ao detetor, de modo que sçao gerados picos separados como
resposta. Quanto mais aberta a fenda, mais intenso é o sinal. Estreitando a fenda,
ganha-se resolução, porém perde-se intensidade luminosa. A fenda crítica para
definir resolução é a de saída, e não a de entrada.
43) Quais os principais componentes de um espectrofotômetro?
Fonte, Seletor de comprimento de onda, amostra, detector, amplificador,
processador e leitor de saída do sinal.
44) Qual a diferença entre fotômetros(=fotocolorimetro?) e espectrofotômetros?
Fotômetros: O comprimento de onda usado é selecionado de modo discreto ou
descontínuo; A seleção é efetuada por filtros que limitam a radiação incidente a uma
determinada banda de comprimentos de onda (larga e de baixa pureza espectral)
Espectrofotômetros: O comprimento de onda usado é selecionado por faixas
limitadas, de forma contínua e variável em toda zona do espectro; A seleção é feito
por monocromador, tornando possível registrar o espectro de absorção (UV-Vis)
35) Qual a transição eletrônica, que ocorre com os compostos orgânicos, em
espectrometria, que requer maior energia? Em qual região será observada a sua
banda de absorção?
A transição sigma ligante para sigma anti-ligante. Observada na região do UV.
46) Como podemos deslocar a banda de absorção de um analito para uma região
de menor energia?
47) O que são cromóforos ?
Cromóforos: grupos covalentes insaturados (capazes de tribuir coloração aos
compostos, capazes de redução).
48) Na espectrometria de absorção molecular, se usa a energia absorvida para
realizar uma
transformação, cite um exemplo dessas transformações?
49) É comum observar se observarem modificações no espectro de absorção de
uma substância no UV-Vis (deslocamento de bandas aspecto da banda, etc., a que
se atribui isto?
Picos associados a transições pi para π* geralmente são deslocados para
comprimentos de ondas menores ao se aumentar a polaridade do solvente.
50) Em que consiste o efeito fotoelétrico? Dê um exemplo do seu uso principal em
espectrofotômetros?
O efeito fotoelétrico ocorre quando uma placa metálica é exposta a uma radiação
eletromagnética de frequência alta, por exemplo, um feixe de luz, e este arranca
elétrons da placa metálica.
2) O que você entende por métodos espectrométricos de análise.
São métodos analíticos baseados na espectroscopia atômica e molecular, que estuda
a interação dos diferentes tipos de radiação com a matéria.
3) O que você entende por espectroscopia.
Espectroscopia é a designação para toda técnica de levantamento de dados físico-
químicos através da transmissão, absorção ou reflexão da energia radiante incidente
em uma amostra.
5) Qual o tipo de transição molecular que é impedida nos aldeídos?
É a transição do n para pi*, no comprimento de onda de aproximadamente 300nm.
10) Como a polaridade do solvente, como a água, influência na absorção de
analitos polares?
A medida de um sinal analítico é diretamente relacionada a concentração do analito,
utilizando um solvente polar, como a água que é transparente, obtém-se uma
solução homogênea garantindo mesma absorção em qualquer localização da
amostra.
Quando um fóton de determinada energia muda de um meio para outro ele
mantem constante a sua frequência, certo ou errado?
12) Comprove matematicamente que a frequência é inversamente proporcional ao
comprimento de ondas?
Lambda=c/v -> v=c/lambda , ou seja, ao aumentar-se o comprimento de onda
lambda diminui-se a frequência (v).
. 43) O fotodiodo converte a energia do fóton em voltagem, certo ou errado,
explique? 

. 44) Qual o instrument de duplo feixe que permite ler simultaneamente a
absorção da amostra e do branco? 

. 55) O que é uma interferência construtiva(onda)?
. A interferência construtiva ocorre quando ondas se encontram em fase, ou
seja, máximo com máximo e mínimo com mínimo.
. 56) A radiação eletromagnética tem natureza dual, qual delas explica o
fenômeno de absorção?
. Os fenômenos de reflexão, refração, interferência, difração e polarização da
luz podem ser explicados pela teoria ondulatória e os de emissão e absorção
podem ser explicados pela teoria corpuscular.
. 57) Dê exemplos de dois fenômenos que podem ser usados para dispersão
(separação decomprimentos de onda da luz em instrumentos
espectrofotométricos?
. Refração (prisma) e difração (rede de difração).
. 59) Qual a finalidade do branco (célula de referência) em espectrometria?
. Tem como finalidade minimizar os erros causados pela absorção luz
ocasionados pelo vidro e pela água.
. 60) O que você entende por um instrumento de varredura?
. As técnicas de varredura consistem em examinar as coisas sob elevadas
resoluções espacial e temporal. O objetivo é fazer análises não de uma
amostra como um todo, mas de pequenos pedaços ou áreas de células ou
superfícies, um chip semicondutor ou qualquer outra coisa.
Por que é plausível que o comprimento de onda da luz varie quando ela passa do
ar para o vidro e sua frequência nao?
. 61) A luz possui: (a) comprimento de onda; (b) freqüência e (c) velocidade.
Quais destas quantidades permanecem inalteradas quando a luz passa do
vácuo para uma lâmina de vidro?
. A freqüência permanece inalterada quando a luz passa do vácuo para uma
lâmina de vidro. Logo, como v = λ * f e a velocidade da luz diminui ao
mudar de meio, o comprimento de onda também (λ) também diminui.
. 52) Explicar a influência do caminho ótico e da concentração na
espectrofotometria. 

. 53) O que é um espectro de absorção e qual a sua utilidade em analises
farmacêuticas? 

. O espectro de absorção é a representação gráfica que correlaciona
intensidade de absorvância com comprimento de onda, que fornece
informações sobre a capacidade de um composto em absorver luz
eletromagnética. A espectrofotometria é o método de análise óptico mais
usado em investigações biológicas.
.
. 79) Explicar a lei de Lambert e Beer. Esquematizar um gráfico.
. A lei de Lambert-Beer permite a quantificação da luz absorvida pela amostra
(Absorbância) relacionando a intensidade da luz incidida na solução(I0) e a
intensidade da luz que sai da solução(I) e correlaciona esse valor com a
concentração do material absorvedor (C),absorvidade molecular (ε) e a
espessura da amostra através da qual a luz passa(l).
. Abs = Log(I0/I) =ε C l
.
80) Por que a quantificação geralmente é feita no Comprimento de onda
MAX?
.
Explique a diferença entre absorvancia e transmitância.
63) Qual o fenômeno responsável pela absorção no IV? O que se passa com a
molécula quando a radiação é absorvida?
A radiação IV não é energética o suficiente para causar as transições eletrônicas que
encontramos na radiação UV e Vis.
. 60) Explique como funciona o interferômetro de Michelson. 

. 61) Porque os detectores empregados em UV-Vis não são usados nos
instrumentos de IV? 

. 62) Qual a importância do momento dipole de uma molécula e a probabilidade da
mesma absorver radiação na região 
do IV? 

. 64) Porque os espectros obtidos na região do infravermelho são em
transmitância versus número
. de onda?
. 65) Cite um tipo de informação estrutural que pode ser obtida pela análise
do espectro de infravermelho.
.
. Determinação da ocorrência de grupos funcionais específicos.
. Tipo das ligações das moléculas
.
. 66) A que se deve o uso limitado do IV para análise quantitativa (embora o
método seja muito usado em análises qualitativas). Dê um motivo técnico -
cientifico.
.
. Várias limitações acompanham a aplicação de métodos no infravermelho
para análise quantitativa. Dentre elas, estão a frequente não obediência à lei
de Beer e a complexidade dos espectros (que aumenta a probabilidade de
superposição de picos de absorção). Por essas razões, os erros analíticos
associados a uma análise no infravermelho quantitativa frequentemente não
podem ser reduzidos ao nível associado aos métodos no ultravioleta
.
. 67) Porque células fotomultiplicadores não são usadas como detectores na
região do IV?
.
. Porque a região infravermelha não promove a liberação de elétrons, pois é
de baixa energia, só promove liberação das ligações moleculares e as células
fotoelétricas trabalham com a emissão de elétrons sob o impacto da luz.
. Vale comentar que fotomultiplicadores estão limitados à medida de radiação
de baixa potência, pois a luz intensa danifica irreversivelmente a superfície
fotoelétrica
.
68) Cite uma vantagem do uso de um espectrômetrono infravermelho com
transformada de Fourier em relação a um instrumento convencional (com rede
ou prisma)?
. A espectroscopia com transformada de Fourier apresenta a vantagem de
permitir sincronizar a leitura de vários comprimentos de onda
simultaneamente, reduzindo de forma significativa o tempo necessário para
a obtenção de um espectro (Vantagem multiplex).
. Outra vantagem é denominada vantagem de Jaquinot. Esta é obtida porque
os instrumentos com TF possuem poucos elementos ópticos e nenhuma
fenda para atenuar a radiação. Como consequência, a potência da radiação
que incide no detector é maior que em instrumentos dispersivos e são
observadas relações sinal-ruído muito melhores (Melhor resolução).
.
. 69) Qual a função de se obter um espectro de “background” no
infravermelho antes de se iniciar as análises?
. 70) Qual a importância do espelho móvel no FTIR? Como obter uma
interferência construtiva?
.
. É um espelho que fica se movendo gerando interferencias construtivas e
destrutivas afimde captar diferentes gamas (trabalha em todos), não precisa
separa-los.
.
. 71) Em relação à espectroscopia no infravermelhoé incorreto afirmar que:
. a) O pico referente a uma carbonila é frequentemente o mais forte do
espectro e possui
. largura média.
. b) Em geral, as bandas de ligações triplas ocorrem em números de ondas
maiores que as
. bandas de ligações duplas.
. c) Apenas ligações que possuem um momento de dipolo que muda com o
tempo exibe
. absorção no infravermelho.
. d) Moléculas longas de hidrocarbonetos do tipo CH3(CH2)xCH3, com X > 5,
apresentam
. uma banda de vibração característica, “banda de cadeia ou vibração
esqueletal”, na faixa de 1500- 1700 cm-1.
. 75) Definir vibração molecular? 

. 76) Porque uma molécula ao absorver energia na região do IV tem a amplitude
das suas vibrações aumentadas? 

. 77) Toda molécula absorve no IV? Em caso negativo, cite dois exemplos. 

. 78) Hidrogênios ligados a carbono sp absorvem em número de ondas maiores do
que hidrogênio ligado a carbono 
sp3, explique a sua resposta. 

. 80) Por que a maioria dos espectrofotômetros modernos para trabalhar no IV é o
FT-IV? 

. 81) Por que as moléculas lineares têm um número de vibrações fundamentais
diferente (3N-5) das não-lineares? 

. 82) Faça um desenho esquemático de um espectrômetro de massas. 

. 83) Qual o princípio da espectrometria de massas 

. 84) Assinalar no espectro abaixo, os seguintes termos usuais em ionização por
impacto de elétrons: pico base, íon 
molecular, picos de fragmentos. 

. 86) Descreva brevemente o funcionamento do analisador de massas quadrupolo.


. 1) Dê dois tipos de informações que a espectrometria de massas pode
fornecer sobre
. a estrutura de um composto.
. Conectividade dos atómos em uma molécula e identificação de grupos
funcionais
. 2) Como aumentar a altura de um pico do íon molecular noespectro de
massas de
. uma molécula, obtido por impacto de elétrons?
. Reduzindo a intensidade do feixe, porém consequentemente perde-se a
sensibilidade e a energia não é completamente transferida.
. 3) Cite uma vantagem de um multiplicador de elétrons de canal curvoem
relação à de
. canal linear?
. Um multiplicador de eletrons é um arranjo de capilares de vidro com paredes
internas de materil condutor, assimo íon ao colidir na parede interna dos
capilares gera uma valanche de eletrons secundários. Os íons entram no
multiplicador de eletrons através de um feixe de íons e a curvatura do canal
facilita a colisão e consequente amplificação do sinal. Produz um sinal com
menos ruído, devido ao caminho percorrido pelos íons ser menor.
. 4) Porque o detectorde placa de microcanais é mais indicado para
equipamentos que
. tem como o analisador o TOF.
. Porque análise de massa com base no tempo de voo requer um detector de
íons com um tempo de resposta rápido. A maioria dos espectrômetros TOF
utilizam o detector multichannel plate (mcp), que apresenta tempo de
resposta < 1 ns e alta sensibilidade (sinal de um único íon > 50 mV). Apenas
alguns poucos das centenas de canais do MCP são afetados pela detecção de
um íon, e assimé possível a detecção de muitos íons ao mesmo tempo.
. 5) Apresente vantagens e desvantagens das fontes de íons por impacto de
elétrons.
. Vantagens: Metodo robusto e simples, A fragmentação fornece informações
estruturais, Espectros facilmente reprodutiveis, Existência de bibliotecas de
“impressões digitais”
. Desvantagens: Requer volatilização da amostra ou derivatização, Aplica-se a
moléculas de m´dia e baixa polaridade, baixo peso molecular, volatéis e
termoestáveis, O íon molecular pode ser de dificil detecção (A fragmentação
pode ser extensa)
. 6) Porque a técnica de MALDI vem sendo altamente utilizada na análise de
. macromoléculas.
. A técnica de ionização/dessorção a laser assistida por matris dispersa a
amostra em uma matris que absorva fotons de alta intensidade, causando
sua volatilização junto com a amostra. A matiz doa um H+ para formar o íon
(M-H)+, impedindo a formação de dímeros. Esse processo é uma íonização
suave e pertmite então a analise de moleculas de forma intacta, facilitando a
geração de um espectro para macromoleculas.
. 7) Qual o motivo mais comum para se recorrer à ionização química por
impacto de
. elétrons?
. Gera espectros simples assimcomo a ionização por eletrons, porém é branda
frente a mesma já que a sua baixa fragmentação preserva o íon molecular
ainda que para moléculas instaveis.
. 8) O que você entende por espectrometria de massas de baixa e alta
resolução, cite
. uma aplicação de cada uma?
. A espectrometria de massa consiste na ionização prévia das moleculas e
posterior analise das massas dos íons gerados. Espectrômetros de massa de
baixa resolução medem valores de m/z ao número inteiro mais próximo
(massa molecular); Espectrômetros de massa de alta resolução medem
valores de m/z com três ou quatro casas decimais.
. 9) O que é uma forma de ionização branda e qual o tipo de espectro
esperado?
. É uma forma de íonização que forma íons de baixa energia interna, através
de processos indiretos. Dessa forma é possivél a observação de especieis
moleculares com pouca ou nenhuma fragmentação, evitando-se o
desaparecimento do íon molecular.
. 10) Cite dois tipos de analisadores de massa. Como se baseia a separação
dos íons
. nos mesmos e qual o tipo de detector indicado para cada um deles?
. Analisadores de massa com quadrupolo de tansmissão.
. Quatro eletodos cilindricos, dois positivos e dois negativos, cujos centros
formam um quadrado e cujos eletrodo opostos estão conectados. Uma
voltagem de corrente contínua e uma radiofrequência são aplicadas as barras
gerando um campo eletrico oscilante na região entre as barras. A depender
da razão entre a amplitude e a voltagem íons adiquirem uma oscilação nesse
campo eletrostáticos. Íons com razão massa carga correta passampor uma
oscilação estavél de amplitude constante e pelos eixos do quadruplo até
atingirem o detector, sendo o mais indicado o detector fotomultiplicador e o
multiplicador de eletrons.
. Analisador por tempo de voô (TOF)
. Baseia-se na ideia simples de que as velodicades de dois íons, criados no
mesmo instante, com a mesma energia cinética variarão conforme a massa
dos íons. O íon mais leve chegara primeiro ao detector. Separando os íons de
em uma região livre de campo eletrico ou magnético após aceleração por
uma voltagem fixa, logo íons com a mesma energia translacional inicial e
diferentes razões carga massa levaramtempos diferentes para atravessar
uma dada distância e atingir o detector, sendo os mais indicado o de placa de
microcanais (MCP).
. 11) Cite dois tipos de introduçãode amostra no EM e para qual tipo de
composto,
. cada uma, é mais indicada.
. Sondas de inserção direta, utilizado para intoduzir uma amostra sólida ou
líquida.
. Cromatografia gasosa de alta desempenho, utilizada para introduzir amostras
gasosas.
. 12) Porque o espectro de massas deve operar a alto vácuo?
. O ambiente de alto vácuo do espectrômetro é ideal para estudar as
propriedades intrínsecas de espécies iônicas emfase gasosa, possibilitando
fazer uma correlação com a fase condensada. Além de previnir a colisão
entre os íons formados diminuindo assimo surgimento de íons indesejados.
. 13) Qual o mecanismo envolvido na ionizaçãodo analitona técnica de
MALDI?
. 14) Dentre as técnicas de dessorção (ionização), qual a que provoca menor
ruído
. químico?
. Eletrospray(ESI)
. 15) Porque a escolha da matriz nas técnicas de dessorção é considerada
uma etapa
. critica na ionização do analito?
. Porque a matriz possue a função de arrastar o analito na forma ionica para o
analisador e ioniza-lo. Se ela não for capaz de co-dessorver o mesmo ela não
o ioniza, não ocorre a protonação do analito para que esse possa ser
visualizado no detector.
. 16) Como você analisaria uma substância instável termicamente por
espectrometria de
. massas convencional?
. 17) Qual a necessidade de usar transdutor de íons em sinal elétrico em
espectrometria
. de massas?
. O transdutor converte o feixe de íons para um sinal elétrico que pode ser
então processado, armazenado na memória de um computador e visualizado
ou registrado de diferentes formas.
. 19) Cite um tipo de reação que ocorre na técnica de ionização química entre
um gás
. ionizante e o analito.
. AH+ + M → A + MH+, reação de protonação
.
. 20) Porque devemos considerar a afinidade protônica do analito ao
escolher o gás
. ionizante?
. Pois a técnica de ionização química requer que os íons do gás ionizante ao
colidir com a molécula do análito transfira para as mesmas o proton, logo é
necessario que o analito desejado tenha maior afinidade protonica do que o
gás ionizante utilizado.
. 106) Qual a importância de se identificar o íon molecular no espectro de
massas de um determinado analito
. 107)Explique, brevemente, porque o TOF é o analisador ideal para separação
de íons gerados pela técnica de
. dessorção?

. 108) Quais as três principais características de um analisador de massas?
Função de fendas em espectrofotômetros

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Função de fendas em espectrofotômetros

  • 1. Qual a função do uso de fendas diante dos detectores na maioria dos tipos de espectrofotômetros? Fendas reduzem e fixam as dimensões do feixe de radiação. Elas selecionam determinados feixes de radiação com a finalidade de detectar somente comprimentos de onda monitorados. 13) Cite um fator instrumental e um real que ocasiona desvio da linearidade na lei de Lambert Beer. Explique Limites reais: concentração da solução acima de 0,01M. Explicação: o aumento na concentração é acompanhado pelo aumento crescente e proporcional de abdorbância, até um ponto limite. A partir deste ponto (soluções concentradas), deixa de existir a proporcionalidade linear entre os valores de absorbância e concentração. Instrumentais: somente válida para medidas feitas com radiação monocromática, o que é de difícil obtenção nos espectrofotêmetros. A consequênciaimediata será um encurvamento, com desvio negativo à lei, mais ou menos significativo dependendo dos valores dos coeficientes de absortividade aos diferentes λ. 14) Por que solventes contendo somente ligações saturadas são transparentes na maior parte da região do UV próximo? Porque não absorvem a radiação ultra-violeta na mesma região que o analito 15)Cite 2 monocromadores que conhece. Qual deles apresenta maior dispersão linear dos comprimentos de onda? Monocromador de rede (apresenta dispersão linear dos lambidas ao longo do plano focal) e de prisma (apresenta dispersão angular). 16) Qual tipo de transição molecular que determina a absorção no UV-Vis? Dê 2 exemplos deste tipo de transição. Excitação de é de ligação. Transição sigma – sigma*, n – sigma*, n – PI*, PI – PI*. 17) Dê uma vantagem do uso de monocromadores em comparação a filtros em espectrômetros. Dê dois tipos de monocromador que você conhece e qual oferece maiores vantagens? Os monocromadores separam individualmente os comprimentos de onda e os filtros separam bandas do comprimento de onda. Tipos : monocromadores de prisma e de rede. Os de rede fornecem melhor separação de comprimento de onda para um mesmo tamanho de elemento dispersor e dispersam a radiação linearmente ao longo do plano focal.
  • 2. 18) A leitura da intensidade de absorção se faz com igual exatidão e precisão para qualquer valor da escala de absorção? Em caso negativo, como minimizar esse problema? 19) Explique como é possível analisar 2 analitos (X e Y), cujos espetros estão parcialmente sobrepostos, por UV-Vis? A absorbância total de uma solução em um determinado comprimento de onda é igual à soma das absorbâncias dos componentes individuais presentes. Essa relação torna possível a determinação quantitativa dos constituintes individuais de uma mistura, mesmo que seus espectros se superponham. 20) Qual a vantagem de instrumentos de duplo feixe, em relação aos de feixe único em espectrometria na região UV-Vis? Utilizando um instrumento de duplo feixe, temos um feixe que passa pela amostra e outro pela referencia, isso diminui os erros experimentais se compararmos ao uso de um equipamento de feixe único. Por que os instrumentos de duplo feixe no espaço sao usados em estudos de cinética em vez dos de duplo feixe no tempo? 21) Qual a expressão matemática usada na quantificação em espectrometria (escreva, dando o significado de cada termo). A = Ɛ .b . C (Lei de Lambert-Beer) A – absorbância Ɛ – absortividade molar (L .mol-1 . cm-1) b – percurso ótico (cm) C – concentração (g . L-1) 22) Qual o efeito da largura da fenda sobre o espectro gerado na regiãodo UV-Vis? Quanto mais aberta for a fenda, mais intenso será o sinal. Entretanto, com o estreitamento da fenda, se ganha resolução (perdendo-se intensidade luminosa). A fenda crítica para definir a resolução é a fenda de saída. Cite um exemplo de vantagem do detector de fotodiodo em relação ao de fotomultiplicador em espectrometria UV-VIS
  • 3. 24) Porque os compostos com duplas ligações (n>7) conjugadas absorvem em regiões de maior comprimento de onda doque o eteno? Quanto maior o número de ligações múltiplas conjugadas num composto, menor será a energia de excitação π → π* e maior então seu comprimento de onda na qual ele absorve luz. Isso ocorre, já que a transição eletrônica energeticamente mais favorável π → π* ocorre do orbital ocupado mais energético (HOMO) para o orbital anti-ligante de menor energia (LUMO), ou seja, menor ∆E, maior comprimento de onda. A excitação eletrônica do π → π* do eteno requer maior absorção de luz ,possuindo menor comprimento de onda, do que a de compostos com duplas ligações. Cite uma vantagem de um detector que opera a partir de células fotomultiplicadoras O detector que opera a partir de células fotomultiplicadoras tem um poder de amplificação alto, o que implica que o poder radiante pode ser pequeno 26) Explique como um semicondutor de silício de junção pn converte a radiação eletromagnética em corrente elétrica? A radiação eletromagnética vai compensar a inatividade dos portadores majoritários (elétrons) cedendo energia para causar a diferença de potencial quase inexistente no diodo, já que trabalha a partir da polarização reversa. Com isso, a corrente começa a circular. 27) Cite um exemplo de transição eletrônica proibida. As transições proibidas são aquelas que possuem pouca possibilidade de ocorrer, quando ocorrem geram pequenos ombros no gráfico, ou picos de intensidade muito baixa. Um exemplo desse tipo de transição é a que ocorre em aldeídos, transição de n ->pi*. 28) Porque o espectro do benzeno em estado gasoso, apresenta linhas de absorção, enquanto que em solvente polar, o espectro dele tem um formato de bandas? As linhas surgem de modo a evidenciar estados vibracionais,rotacionais e eletrônicos da molécula, já que porestá em estado gasoso estão mais livres. Já a banda surge pela leitura tanto do solvente quanto da molécula, dificultando o discernimento entre absorbância de diferentes compostos. 29) Dê um exemplo de um tipo de informação que a espectrometria UV-Vis nos dá sobre a estrutura da molécula.
  • 4. A espectrometria UV-Vis determina quantitativamente os compostos contendo grupos absorventes. Depende, em primeiro lugar, do número e do arranjo dos elétrons nas moléculas ou íons absorventes. Como consequência, o pico de absorção pode ser correlacionado com o tipo de ligação que existe na espécie que está sendo estudada. 31) Cite dois critérios pra definir um bom solvente para análise de analito na ragião do UV-Vis. Para escolher um bom solvente, deve se considerar: A sua transparência, ou seja, ele não deve absorver radiação UV-Vis na mesma região do analito. O efeito do solvente no centro absorvente, por exemplo: ponte de hidrogênio pode levar a perda da estrutura fina de uma banda de absorção. E por fim, a capacidade de influenciar no comprimento de onda. 33) A intensidade de uma banda está relacionada com o comprimento de onda? Em caso negativo, explique o porquê. Não. A intensidade só está relacionada à amplitude do sinal, enquanto o lambida influencia somente na largura de banda. 34) Como funciona a célula fotomultiplicadora? Uma célula fotomultiplicadora dispõe de uma série de eletrodos que permitirão a amplificação do sinal. Basicamente, ao incidir sobre o primeiro eletrodo, a luz promove desprendimento de elétrons a partir da superfície desta placa. Tais elétrons seguem para placas vizinhas, constituídas do mesmo material e submetidas a um maior potencial elétrico. Ao colidirem sobre as mesmas, mais elétrons serão desprendidos a partir de uma espécie de efeito cascata que resultará numa amplificação do sinal. 36) Cite dois tipos de fontes de radiação continua? Descreva o funcionamento de uma delas. Fontes contínuas são aquelas nas quais vários λ são emitidas e analisadas. Lâmpada de Tungstênio e lâmpada de Deutério. 37) O que se entende por difração e refração? Refração: mudança de velocidade de uma onda ao passar de um meio para outro, causando muitas vezes, mudança de direção também. Difração: ondas passam por um orifício ou contornam objeto cuja dimensão é da mesma ordem de grandeza de seu lambida e, assim, passa a se propagar de forma esférica.
  • 5. 39) A inclinação da curva de absorbância por concentração nos fornece o valor do comprimento de onda, certoou errado. Em caso negativo, explique o porquê. Não. A Lei de Beer permite a quantificação de solutos por espectrofotometria: Absorbância = (absortividade)*(passo óptico)*(concentração). Portanto, a inclinação da curva de absorbância por concentração (coeficiente angular) é a absortividade vezes o passo óptico. 41) Qual a faixa de concentração ideal para se trabalhar na espectrometria UV-Vis? Segundo o “ Desvio Real da Lei de Beer “, concentrações superiores a 0.01 mol/L causam erros desvios de leitura. Valores menores que 0.01 são ideiais, porque evitam interações dos centros absorventes com outras substâncias. 42) Explique, sucintamente, o mecanismo de dispersão da radiação que ocorre na rede de difração? Funcionamento de uma rede de difração: (A) Aluminio -> material refletor -> rede refletora. (B) Material transparente -> é um prob na região do infravermelho, que não aceitaria vidro. Em (A) a luz chega e não atravessa, mas sofre reflexão ao encontrar a superfície espelhada. Se a fenda de saída for muito aberta, não há separação entre diferenças de lambda, de modo que o detetor gera um platô e a resposta não indica pico separados. Com fenda bem fechada, o detetordetecta o lambda1, depois uma zona de penumbra e, só então, lambda2; acontece o mesmo para lambda3. Com a existência de uma zona de penumbra, os lambda não chegam continuamente ao detetor, de modo que sçao gerados picos separados como resposta. Quanto mais aberta a fenda, mais intenso é o sinal. Estreitando a fenda, ganha-se resolução, porém perde-se intensidade luminosa. A fenda crítica para definir resolução é a de saída, e não a de entrada. 43) Quais os principais componentes de um espectrofotômetro? Fonte, Seletor de comprimento de onda, amostra, detector, amplificador, processador e leitor de saída do sinal. 44) Qual a diferença entre fotômetros(=fotocolorimetro?) e espectrofotômetros? Fotômetros: O comprimento de onda usado é selecionado de modo discreto ou descontínuo; A seleção é efetuada por filtros que limitam a radiação incidente a uma determinada banda de comprimentos de onda (larga e de baixa pureza espectral) Espectrofotômetros: O comprimento de onda usado é selecionado por faixas limitadas, de forma contínua e variável em toda zona do espectro; A seleção é feito por monocromador, tornando possível registrar o espectro de absorção (UV-Vis) 35) Qual a transição eletrônica, que ocorre com os compostos orgânicos, em espectrometria, que requer maior energia? Em qual região será observada a sua
  • 6. banda de absorção? A transição sigma ligante para sigma anti-ligante. Observada na região do UV. 46) Como podemos deslocar a banda de absorção de um analito para uma região de menor energia? 47) O que são cromóforos ? Cromóforos: grupos covalentes insaturados (capazes de tribuir coloração aos compostos, capazes de redução). 48) Na espectrometria de absorção molecular, se usa a energia absorvida para realizar uma transformação, cite um exemplo dessas transformações? 49) É comum observar se observarem modificações no espectro de absorção de uma substância no UV-Vis (deslocamento de bandas aspecto da banda, etc., a que se atribui isto? Picos associados a transições pi para π* geralmente são deslocados para comprimentos de ondas menores ao se aumentar a polaridade do solvente. 50) Em que consiste o efeito fotoelétrico? Dê um exemplo do seu uso principal em espectrofotômetros? O efeito fotoelétrico ocorre quando uma placa metálica é exposta a uma radiação eletromagnética de frequência alta, por exemplo, um feixe de luz, e este arranca elétrons da placa metálica. 2) O que você entende por métodos espectrométricos de análise. São métodos analíticos baseados na espectroscopia atômica e molecular, que estuda a interação dos diferentes tipos de radiação com a matéria. 3) O que você entende por espectroscopia. Espectroscopia é a designação para toda técnica de levantamento de dados físico- químicos através da transmissão, absorção ou reflexão da energia radiante incidente em uma amostra. 5) Qual o tipo de transição molecular que é impedida nos aldeídos? É a transição do n para pi*, no comprimento de onda de aproximadamente 300nm. 10) Como a polaridade do solvente, como a água, influência na absorção de analitos polares?
  • 7. A medida de um sinal analítico é diretamente relacionada a concentração do analito, utilizando um solvente polar, como a água que é transparente, obtém-se uma solução homogênea garantindo mesma absorção em qualquer localização da amostra. Quando um fóton de determinada energia muda de um meio para outro ele mantem constante a sua frequência, certo ou errado? 12) Comprove matematicamente que a frequência é inversamente proporcional ao comprimento de ondas? Lambda=c/v -> v=c/lambda , ou seja, ao aumentar-se o comprimento de onda lambda diminui-se a frequência (v). . 43) O fotodiodo converte a energia do fóton em voltagem, certo ou errado, explique? 
 . 44) Qual o instrument de duplo feixe que permite ler simultaneamente a absorção da amostra e do branco? 
 . 55) O que é uma interferência construtiva(onda)? . A interferência construtiva ocorre quando ondas se encontram em fase, ou seja, máximo com máximo e mínimo com mínimo. . 56) A radiação eletromagnética tem natureza dual, qual delas explica o fenômeno de absorção? . Os fenômenos de reflexão, refração, interferência, difração e polarização da luz podem ser explicados pela teoria ondulatória e os de emissão e absorção podem ser explicados pela teoria corpuscular. . 57) Dê exemplos de dois fenômenos que podem ser usados para dispersão (separação decomprimentos de onda da luz em instrumentos espectrofotométricos? . Refração (prisma) e difração (rede de difração). . 59) Qual a finalidade do branco (célula de referência) em espectrometria? . Tem como finalidade minimizar os erros causados pela absorção luz ocasionados pelo vidro e pela água. . 60) O que você entende por um instrumento de varredura? . As técnicas de varredura consistem em examinar as coisas sob elevadas resoluções espacial e temporal. O objetivo é fazer análises não de uma amostra como um todo, mas de pequenos pedaços ou áreas de células ou superfícies, um chip semicondutor ou qualquer outra coisa. Por que é plausível que o comprimento de onda da luz varie quando ela passa do ar para o vidro e sua frequência nao?
  • 8. . 61) A luz possui: (a) comprimento de onda; (b) freqüência e (c) velocidade. Quais destas quantidades permanecem inalteradas quando a luz passa do vácuo para uma lâmina de vidro? . A freqüência permanece inalterada quando a luz passa do vácuo para uma lâmina de vidro. Logo, como v = λ * f e a velocidade da luz diminui ao mudar de meio, o comprimento de onda também (λ) também diminui. . 52) Explicar a influência do caminho ótico e da concentração na espectrofotometria. 
 . 53) O que é um espectro de absorção e qual a sua utilidade em analises farmacêuticas? 
 . O espectro de absorção é a representação gráfica que correlaciona intensidade de absorvância com comprimento de onda, que fornece informações sobre a capacidade de um composto em absorver luz eletromagnética. A espectrofotometria é o método de análise óptico mais usado em investigações biológicas. . . 79) Explicar a lei de Lambert e Beer. Esquematizar um gráfico. . A lei de Lambert-Beer permite a quantificação da luz absorvida pela amostra (Absorbância) relacionando a intensidade da luz incidida na solução(I0) e a intensidade da luz que sai da solução(I) e correlaciona esse valor com a concentração do material absorvedor (C),absorvidade molecular (ε) e a espessura da amostra através da qual a luz passa(l). . Abs = Log(I0/I) =ε C l . 80) Por que a quantificação geralmente é feita no Comprimento de onda MAX? . Explique a diferença entre absorvancia e transmitância. 63) Qual o fenômeno responsável pela absorção no IV? O que se passa com a molécula quando a radiação é absorvida?
  • 9. A radiação IV não é energética o suficiente para causar as transições eletrônicas que encontramos na radiação UV e Vis. . 60) Explique como funciona o interferômetro de Michelson. 
 . 61) Porque os detectores empregados em UV-Vis não são usados nos instrumentos de IV? 
 . 62) Qual a importância do momento dipole de uma molécula e a probabilidade da mesma absorver radiação na região 
do IV? 
 . 64) Porque os espectros obtidos na região do infravermelho são em transmitância versus número . de onda? . 65) Cite um tipo de informação estrutural que pode ser obtida pela análise do espectro de infravermelho. . . Determinação da ocorrência de grupos funcionais específicos. . Tipo das ligações das moléculas . . 66) A que se deve o uso limitado do IV para análise quantitativa (embora o método seja muito usado em análises qualitativas). Dê um motivo técnico - cientifico. . . Várias limitações acompanham a aplicação de métodos no infravermelho para análise quantitativa. Dentre elas, estão a frequente não obediência à lei de Beer e a complexidade dos espectros (que aumenta a probabilidade de superposição de picos de absorção). Por essas razões, os erros analíticos associados a uma análise no infravermelho quantitativa frequentemente não podem ser reduzidos ao nível associado aos métodos no ultravioleta . . 67) Porque células fotomultiplicadores não são usadas como detectores na região do IV? . . Porque a região infravermelha não promove a liberação de elétrons, pois é de baixa energia, só promove liberação das ligações moleculares e as células fotoelétricas trabalham com a emissão de elétrons sob o impacto da luz. . Vale comentar que fotomultiplicadores estão limitados à medida de radiação de baixa potência, pois a luz intensa danifica irreversivelmente a superfície fotoelétrica .
  • 10. 68) Cite uma vantagem do uso de um espectrômetrono infravermelho com transformada de Fourier em relação a um instrumento convencional (com rede ou prisma)? . A espectroscopia com transformada de Fourier apresenta a vantagem de permitir sincronizar a leitura de vários comprimentos de onda simultaneamente, reduzindo de forma significativa o tempo necessário para a obtenção de um espectro (Vantagem multiplex). . Outra vantagem é denominada vantagem de Jaquinot. Esta é obtida porque os instrumentos com TF possuem poucos elementos ópticos e nenhuma fenda para atenuar a radiação. Como consequência, a potência da radiação que incide no detector é maior que em instrumentos dispersivos e são observadas relações sinal-ruído muito melhores (Melhor resolução). . . 69) Qual a função de se obter um espectro de “background” no infravermelho antes de se iniciar as análises? . 70) Qual a importância do espelho móvel no FTIR? Como obter uma interferência construtiva? . . É um espelho que fica se movendo gerando interferencias construtivas e destrutivas afimde captar diferentes gamas (trabalha em todos), não precisa separa-los. . . 71) Em relação à espectroscopia no infravermelhoé incorreto afirmar que: . a) O pico referente a uma carbonila é frequentemente o mais forte do espectro e possui . largura média. . b) Em geral, as bandas de ligações triplas ocorrem em números de ondas maiores que as . bandas de ligações duplas. . c) Apenas ligações que possuem um momento de dipolo que muda com o tempo exibe . absorção no infravermelho. . d) Moléculas longas de hidrocarbonetos do tipo CH3(CH2)xCH3, com X > 5, apresentam . uma banda de vibração característica, “banda de cadeia ou vibração esqueletal”, na faixa de 1500- 1700 cm-1. . 75) Definir vibração molecular? 
 . 76) Porque uma molécula ao absorver energia na região do IV tem a amplitude
  • 11. das suas vibrações aumentadas? 
 . 77) Toda molécula absorve no IV? Em caso negativo, cite dois exemplos. 
 . 78) Hidrogênios ligados a carbono sp absorvem em número de ondas maiores do que hidrogênio ligado a carbono 
sp3, explique a sua resposta. 
 . 80) Por que a maioria dos espectrofotômetros modernos para trabalhar no IV é o FT-IV? 
 . 81) Por que as moléculas lineares têm um número de vibrações fundamentais diferente (3N-5) das não-lineares? 
 . 82) Faça um desenho esquemático de um espectrômetro de massas. 
 . 83) Qual o princípio da espectrometria de massas 
 . 84) Assinalar no espectro abaixo, os seguintes termos usuais em ionização por impacto de elétrons: pico base, íon 
molecular, picos de fragmentos. 
 . 86) Descreva brevemente o funcionamento do analisador de massas quadrupolo. 
 . 1) Dê dois tipos de informações que a espectrometria de massas pode fornecer sobre . a estrutura de um composto. . Conectividade dos atómos em uma molécula e identificação de grupos funcionais . 2) Como aumentar a altura de um pico do íon molecular noespectro de massas de . uma molécula, obtido por impacto de elétrons? . Reduzindo a intensidade do feixe, porém consequentemente perde-se a sensibilidade e a energia não é completamente transferida. . 3) Cite uma vantagem de um multiplicador de elétrons de canal curvoem relação à de . canal linear? . Um multiplicador de eletrons é um arranjo de capilares de vidro com paredes internas de materil condutor, assimo íon ao colidir na parede interna dos capilares gera uma valanche de eletrons secundários. Os íons entram no multiplicador de eletrons através de um feixe de íons e a curvatura do canal facilita a colisão e consequente amplificação do sinal. Produz um sinal com menos ruído, devido ao caminho percorrido pelos íons ser menor. . 4) Porque o detectorde placa de microcanais é mais indicado para equipamentos que
  • 12. . tem como o analisador o TOF. . Porque análise de massa com base no tempo de voo requer um detector de íons com um tempo de resposta rápido. A maioria dos espectrômetros TOF utilizam o detector multichannel plate (mcp), que apresenta tempo de resposta < 1 ns e alta sensibilidade (sinal de um único íon > 50 mV). Apenas alguns poucos das centenas de canais do MCP são afetados pela detecção de um íon, e assimé possível a detecção de muitos íons ao mesmo tempo. . 5) Apresente vantagens e desvantagens das fontes de íons por impacto de elétrons. . Vantagens: Metodo robusto e simples, A fragmentação fornece informações estruturais, Espectros facilmente reprodutiveis, Existência de bibliotecas de “impressões digitais” . Desvantagens: Requer volatilização da amostra ou derivatização, Aplica-se a moléculas de m´dia e baixa polaridade, baixo peso molecular, volatéis e termoestáveis, O íon molecular pode ser de dificil detecção (A fragmentação pode ser extensa) . 6) Porque a técnica de MALDI vem sendo altamente utilizada na análise de . macromoléculas. . A técnica de ionização/dessorção a laser assistida por matris dispersa a amostra em uma matris que absorva fotons de alta intensidade, causando sua volatilização junto com a amostra. A matiz doa um H+ para formar o íon (M-H)+, impedindo a formação de dímeros. Esse processo é uma íonização suave e pertmite então a analise de moleculas de forma intacta, facilitando a geração de um espectro para macromoleculas. . 7) Qual o motivo mais comum para se recorrer à ionização química por impacto de . elétrons? . Gera espectros simples assimcomo a ionização por eletrons, porém é branda frente a mesma já que a sua baixa fragmentação preserva o íon molecular ainda que para moléculas instaveis. . 8) O que você entende por espectrometria de massas de baixa e alta resolução, cite . uma aplicação de cada uma? . A espectrometria de massa consiste na ionização prévia das moleculas e posterior analise das massas dos íons gerados. Espectrômetros de massa de baixa resolução medem valores de m/z ao número inteiro mais próximo (massa molecular); Espectrômetros de massa de alta resolução medem valores de m/z com três ou quatro casas decimais. . 9) O que é uma forma de ionização branda e qual o tipo de espectro esperado?
  • 13. . É uma forma de íonização que forma íons de baixa energia interna, através de processos indiretos. Dessa forma é possivél a observação de especieis moleculares com pouca ou nenhuma fragmentação, evitando-se o desaparecimento do íon molecular. . 10) Cite dois tipos de analisadores de massa. Como se baseia a separação dos íons . nos mesmos e qual o tipo de detector indicado para cada um deles? . Analisadores de massa com quadrupolo de tansmissão. . Quatro eletodos cilindricos, dois positivos e dois negativos, cujos centros formam um quadrado e cujos eletrodo opostos estão conectados. Uma voltagem de corrente contínua e uma radiofrequência são aplicadas as barras gerando um campo eletrico oscilante na região entre as barras. A depender da razão entre a amplitude e a voltagem íons adiquirem uma oscilação nesse campo eletrostáticos. Íons com razão massa carga correta passampor uma oscilação estavél de amplitude constante e pelos eixos do quadruplo até atingirem o detector, sendo o mais indicado o detector fotomultiplicador e o multiplicador de eletrons. . Analisador por tempo de voô (TOF) . Baseia-se na ideia simples de que as velodicades de dois íons, criados no mesmo instante, com a mesma energia cinética variarão conforme a massa dos íons. O íon mais leve chegara primeiro ao detector. Separando os íons de em uma região livre de campo eletrico ou magnético após aceleração por uma voltagem fixa, logo íons com a mesma energia translacional inicial e diferentes razões carga massa levaramtempos diferentes para atravessar uma dada distância e atingir o detector, sendo os mais indicado o de placa de microcanais (MCP). . 11) Cite dois tipos de introduçãode amostra no EM e para qual tipo de composto, . cada uma, é mais indicada. . Sondas de inserção direta, utilizado para intoduzir uma amostra sólida ou líquida. . Cromatografia gasosa de alta desempenho, utilizada para introduzir amostras gasosas. . 12) Porque o espectro de massas deve operar a alto vácuo? . O ambiente de alto vácuo do espectrômetro é ideal para estudar as propriedades intrínsecas de espécies iônicas emfase gasosa, possibilitando fazer uma correlação com a fase condensada. Além de previnir a colisão entre os íons formados diminuindo assimo surgimento de íons indesejados. . 13) Qual o mecanismo envolvido na ionizaçãodo analitona técnica de MALDI?
  • 14. . 14) Dentre as técnicas de dessorção (ionização), qual a que provoca menor ruído . químico? . Eletrospray(ESI) . 15) Porque a escolha da matriz nas técnicas de dessorção é considerada uma etapa . critica na ionização do analito? . Porque a matriz possue a função de arrastar o analito na forma ionica para o analisador e ioniza-lo. Se ela não for capaz de co-dessorver o mesmo ela não o ioniza, não ocorre a protonação do analito para que esse possa ser visualizado no detector. . 16) Como você analisaria uma substância instável termicamente por espectrometria de . massas convencional? . 17) Qual a necessidade de usar transdutor de íons em sinal elétrico em espectrometria . de massas? . O transdutor converte o feixe de íons para um sinal elétrico que pode ser então processado, armazenado na memória de um computador e visualizado ou registrado de diferentes formas. . 19) Cite um tipo de reação que ocorre na técnica de ionização química entre um gás . ionizante e o analito. . AH+ + M → A + MH+, reação de protonação . . 20) Porque devemos considerar a afinidade protônica do analito ao escolher o gás . ionizante? . Pois a técnica de ionização química requer que os íons do gás ionizante ao colidir com a molécula do análito transfira para as mesmas o proton, logo é necessario que o analito desejado tenha maior afinidade protonica do que o gás ionizante utilizado. . 106) Qual a importância de se identificar o íon molecular no espectro de massas de um determinado analito . 107)Explique, brevemente, porque o TOF é o analisador ideal para separação de íons gerados pela técnica de . dessorção?
 . 108) Quais as três principais características de um analisador de massas?