O documento descreve uma pesquisa sobre as propriedades antioxidantes e efeitos analgésicos do óleo essencial de Citrus limon em camundongos. Os resultados mostraram que o óleo tem atividade antioxidante, inibindo a peroxidação lipídica e removendo radicais livres. Ele também produziu efeitos analgésicos em testes de dor, possivelmente através de mecanismos centrais no sistema opióide.

1. [Limão Siciliano 013.05]
Óleo essencial: Citrus limon
Composto: Limoneno, acetato de geranil e trans-óxido de limoneno
Título: Antioxidant and Antinociceptive Effects of C. limon Essential Oil in Mice
“Avaliação farmacológica do óleo essencial de Citrus limon (Burm) no Sistema
Nervoso”.
Autor: Campêlo, L.M.L.; Almeida, A.A.C.; Freitas, R.L.M.; Sousa, G.F.; Saldanha, G.B.;
Feitosa, C.M.; Freitas, R.M.
Journal: Journal of Biomedicine and Biotechnology
Vol (Issue): 2011
Ano: 2011
DOI: 10.1155/2011/678673
TAGs: Antioxidante; Citrus limon; convulsão; neuroprotetor; sedativo; ansiolítico;
antinociceptiva; atividade redox; nocicepção; in vitro; in vivo; radicais livres; dano
oxidativo; espécies reativas com o ácido tiobarbitúrico; oxidação; óxido nítrico; radicais
hidroxilas; teste de contorção induzida por ácido acético; morfina; opióides; modelo de
dor inflamatória visceral; naloxona; resposta de lambida da pata; ansiedade; teste de
formalina; tempo de lambida; efeito analgésico; estímulo nociceptivo; teste de placa
quente; teste de Rota-rod; coordenação motora; diazepam; síntese de prostaglandinas;
limoneno; acetato de geranil; trans-óxido de limoneno.
Sobre o artigo:
As plantas da família Rutaceae compreendem 150 gêneros com aproximadamente
2.000 espécies. Algumas espécies do gênero Citrus têm um amplo espectro de
atividades biológicas, incluindo antibacteriana, antiviral, antioxidante, antifúngica,
analgésica e antiinflamatória.

2. As plantas medicinais, consideradas com propriedades terapêuticas, têm sido utilizadas
desde o início da civilização humana para o tratamento de diversas doenças, e o uso
desta estratégia para a promoção da saúde humana tem aumentado significativamente
nos últimos anos, à medida que progressos notáveis têm sido feitos no que diz respeito
ao desenvolvimento de terapias naturais.
Citrus limon é uma planta originária do norte e nordeste do Brasil, conhecida pelo nome
popular de “limoeiro”. Infusões preparadas com suas partes aéreas (folhas) são usadas
na medicina popular para o tratamento de obesidade, diabetes, redução de lipídios no
sangue, doenças cardiovasculares, distúrbios cerebrais e certos tipos de câncer.
Os radicais livres e espécies reativas de oxigênio estão fortemente envolvidos em
vários processos patológicos e fisiológicos, incluindo convulsões, câncer, morte celular,
inflamação e dor.
Muitos produtos naturais exercem atividades redox significativas, as quais estão
relacionadas às suas propriedades terapêuticas ou mesmo a um possível efeito tóxico.
Por isso a avaliação das propriedades redox de tais compostos é crucial tanto para a
compreensão dos mecanismos potenciais de suas ações biológicas quanto para a
determinação de possíveis efeitos colaterais tóxicos ou prejudiciais.
Considerando a falta de evidências experimentais e investigações científicas sobre as
possíveis propriedades terapêuticas e/ou redox do Citrus limon, o objetivo do presente
estudo foi avaliar as propriedades redox mais possíveis e efeitos antinociceptivos do
óleo essencial obtido das folhas de Citrus limon (OECL).
Inicialmente, os pesquisadores avaliaram as ações antioxidantes e antinociceptivas in
vitro e in vivo, uma vez que não existem estudos prévios a respeito.
Resultados:

3. Os lipídios da membrana são os alvos mais suscetíveis de ataque de radicais livres e
sua propagação em sistemas biológicos. Além disso, os radicais livres e espécies
reativas relacionadas estão fortemente envolvidos em vários processos patológicos e
fisiológicos, incluindo câncer, morte celular, inflamação e dor.
Assim, foi avaliado o potencial antioxidante da OECL testando sua capacidade de
prevenir o dano oxidativo a um sistema rico em lipídios incubado com uma fonte de
radicais livres (AAPH) in vitro.
Os ensaios TBARS (espécies reativas com o ácido tiobarbitúrico) foram utilizados para
quantificar a peroxidação lipídica e este método foi usado para medir a capacidade
antioxidante do OE.
A quantificação de TBARS demonstrou que o OE exerce um efeito antioxidante
significativo contra os radicais peroxil gerados por AAPH, protegendo os lipídios da
oxidação, principalmente na dose mais alta (Figura 2).
Trolox (300 μM), um análogo sintético da vitamina E, que protege a membrana do dano
oxidativo in vivo, foi usado como um padrão antioxidante geral para comparação.
Em seguida, investigou-se o potencial antioxidante do OE contra duas espécies
reativas diferentes in vitro, onde o OE demonstrou exercer um efeito de eliminação

4. significativo contra o óxido nítrico (ON), mas concentrações mais baixas reverteram
esse efeito de inibição e levaram a um pequeno aumento na produção de ON, em
comparação com as concentrações mais altas (Figura 3).
A atividade sequestrante contra radical hidroxila foi quantificado utilizando degradação
oxidativa in vitro da 2-desoxirribose, que produz malondialdeído por condensação com
2-ácido tiobarbitúrico (TBA), e foi observado que o OE teve um forte efeito de
eliminação dos radicais hidroxilas gerados, especialmente nas doses mais altas (Figura
4).

5. Os resultados mostraram que o OE produziu uma inibição dependente da dose na dor
inflamatória em camundongos, conforme determinado por uma redução significativa
nas contorções abdominais induzidas por ácido acético.
No teste de contorção induzida por ácido acético, o efeito antinociceptivo representado
pela redução da contorção e eliciado por 50, 100 e 150 mg/kg de OE (3.7, 3.5 e 2.9,
respectivamente) em camundongos foi semelhante ao da morfina em 5 mg/kg (1.6), um
opióide padrão, quando os grupos foram comparados ao controle (14.6) (Tabela 1).
A constrição abdominal induzida por ácido acético é um teste padrão, simples e
sensível para medir a analgesia induzida por opióides e analgésicos de ação periférica.
Uma vez que a dor é provocada pela injeção de um irritante, como o ácido acético, a
produção de episódios de movimentos característicos de alongamento (contorção), e a
inibição do número desses episódios por analgésicos é facilmente quantificável.
Alguns autores sugerem que essa ação analgésica central do óleo essencial é pelo
efeito bloqueador da naloxona, um antagonista específico dos receptores
morfinomiméticos.
Portanto, foi observado que a naloxona (1,5 mg/kg) antagonizou a resposta
antinociceptiva da morfina de 1,6 (apenas com veículo) para 11,2 (com veículo mais
naloxona) no teste de contorções induzidas por ácido acético. Da mesma forma, a
naloxona antagonizou o efeito do OE (150 mg/kg) (10,5) quando comparado ao
controle (Tabela 1).

6. O OE também inibiu significativamente a resposta de lambida à pata injetada quando
50, 100 ou 150 mg/kg foram administrados por via oral em camundongos, em
comparação com o grupo de controle (62,0 s) na primeira fase do teste de formalina, de
forma dose-dependente (Tabela 2). No entanto, o OE (100 e 150 mg/kg)
significativamente inibiu a segunda fase.
Como esperado, a morfina (5 mg/kg) também reduziu o tempo de lambida em ambas
as fases deste teste (2,95 s; 3,89 s), enquanto a aspirina (200 mg/kg) o reduziu apenas
durante a segunda fase (4,9 s), já o OE (50 mg/kg) não produziu alterações
significativas na segunda fase do teste da formalina.

7. Os resultados sugerem que o OE (50, 100 e 150 mg/kg) tem um efeito analgésico
central (Tabela 3), como evidenciado pelo atraso prolongado no tempo de resposta
quando os camundongos foram submetidos a um estímulo nociceptivo durante o teste
da placa quente.
No teste de Rotarod, camundongos tratados com OE não apresentaram alterações
significativas no desempenho motor nas doses de 50 e 100 mg/kg. Como era de se
esperar, o depressor do SNC diazepam (2 mg/kg) reduziu o tempo dos animais
tratados no rotarod após 60 minutos (77,43 s) em comparação com o grupo controle
(177,0 s).
Neste teste, após a administração do óleo essencial de Citrus limon na dose de 150
mg/kg (via oral), o tempo restante dos animais no aparelho Rota-rod foi reduzido
significativamente em 30% (125,0 s).
Na prática:
Os resultados suportam que o óleo essencial de Citrus limon exibe uma ação
antioxidante na prevenção da lipoperoxidação (provavelmente devido à atividade de

8. eliminação do radical hidroxila) e uma clara atividade antinociceptiva (sem percepção
de dor).
Talvez exerça seu efeito antinociceptivo por mecanismos inibitórios centrais (sistema
opióide) e isso pode ser devido a alterações na coordenação motora. Esta atividade
antiinflamatória do extrato pode interferir na síntese de prostaglandinas e também
envolver mecanismos mediados por reduções oxidativas.