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Cultura de
Tecidos e
Genética
Lucas Alexandre Batista
Sumário
 Introdução
 Aspectos gerais da cultura de tecidos
 O meio MS (Murashige & Skoog 1962)
 Reguladores de Crescimento Vegetal
 Aplicações das técnicas de cultura de tecidos para o melhoramento
 Oque é esperado das técnicas de melhoramento na cultura de
tecidos?
 Os problemas a serem enfrentados
 Conclusão
Introdução:
A cultura de tecidos tem alto potencial no melhoramento vegetal.
Ela pode ser utilizada desde a multiplicação de material genético para
a troca e a avaliação do germoplasma até a obtenção de mudas livres
de vírus.
Aumento da variabilidade genética mediante de variantes somo-clonais
como base essencial para obtenção de plantas transgênicas.
Aspectos gerais da Cultura de tecidos
A cultura de tecidos é uma técnica com grande aplicação na
agricultura. Nessa técnica, pequenos fragmentos de tecido vivo(pode
ser um fragmento de folha raiz caule...), chamado explantes, que são
isolados de um organismo vegetal, desinfestado e cultivado
assepticamente.
Os trabalhos realizados na cultura de tecidos são em sua maioria são
no laboratório.
Esses trabalhos são divididos em etapas:
O meio MS (Murashige & Skoog 1962)
O meio MS são todos os nutrientes que a planta precisa para
completar seu ciclo de vida.
Cada planta necessita de quantidades especificas de nutrientes para
completar seu ciclo de vida.
O cultivo em vitro com o meio MS e muito eficaz e produtivo em
função dos nutrientes estarem todos disponíveis para a formação da
planta
Componente Fórmula Concentração (mg L-1)
Macronutrientes
Nitrato de amônio NH4NO3 1650
Nitrato de potássio KNO3 1900
Cloreto de cálcio CaCL2.2H2O 441
Sulfato de magnésio MgSO4.7H2O 370
Fosfato de potássio KH2PO4 170
Sódio EDTA Na2EDTA 37,25
Iodeto de potássio KI 0,83
Micronutrientes
Sulfato de ferro FeSO4.7H2O 27,85
Sulfato de manganês MnSO4.H2O 16,9
Sulfato de zinco ZnSO4.7H2O 8,6
Ácido bórico H3BO3 6,2
Molibdato de sódio Na2MoO4.2H2O 0,25
Cloreto de cobalto CoCL2.6H2O 0,025
Sulfato de cobre CuSO4.5H2O 0,025
Vitaminas
Ácido nicotínico C6H5NO2 0,5
Cloridrato de piridoxina C6H12CINO2 0,5
Cloridrato de tiamina C12H18CL2N4OS 0,5
Glicina C2H5NO2 2,0
Mio-inositol C6H12O6 100,0
Outros
Agar 7.000
Sacarose C12H22O11 30.000
Reguladores de Crescimento Vegetal
 Os estímulos de desenvolvimento da planta é causalisado através
dos hormônios que direciona o seu crescimento.
 Estes hormônios são dividido em duas classes que são as auxinas
e citocininas.
 As citocininas estimulam o crescimento da parte aérea e as auxinas
a parte radicular, e os ambos estimulam a formação de calos.
Aplicações das técnicas de cultura de
tecidos para o melhoramento
 Cultura de meristemas: Técnica mais antiga para a propagação
clonal massal e para a obtenção de plantas livres de vírus, a cultura
de meristemas permite a obtenção de uma progênie clonal
geneticamente idêntica à planta matriz, permitindo a captura e
fixação de ganhos genéticos.
 Avaliação rápida de suscetibilidade: A cultura de células, tecidos e
órgãos pode ser empregada para a avaliação de
suscetibilidade/tolerância à várias moléstias ou estresses abióticos.
 Indução de florescimento precoce: Esta técnica é empregada para
reduzir o longo período de juventude da planta permitindo uma
redução substancial de tempo nos programas de melhoramento
genético.
 Reversão de fases de desenvolvimento: Em plantas arbóreas,
florestais e frutíferas, a seleção de plantas elite é baseada nos
espécimes mais velhos e comprovadamente sadios e produtivos. A
propagação vegetativa convencional destas plantas torna-se
dificultada. O cultivo in vitro continuado pode restaurar os genótipos
facilitando a propagação clonal massal.
Oque é esperado das técnicas de
melhoramento na cultura de tecidos?
 A curto prazo: Propagação em massa de genótipos a partir de
pequenas quantidades de sementes, Plantas com potencial
esperado, material limitado de plantas(podem ser ameaçadas em
extinção) e híbridos obtidos em cruzamentos.
 A Longo prazo: Aumento do ganho genético, Obtenção de sementes
sintéticas e a diminuição do custo em comparação ao mudas obtido
por métodos convencionais.
Os problemas a serem enfrentados
 Mesmo considerando-se as diversas aplicações, ainda existem
limitações para a aplicação mais ampla destas técnicas no
melhoramento de plantas :
O sucesso de um sistema regenerativo in vitro é substancialmente
dependente da adequação de um meio de cultura apropriado para
cada espécie.
O desenvolvimento de eixos caulinares, gemas e embriões somáticos
não é, em geral, sincronizado.
A aclimatização é um processo difícil pois a planta pode sofrer
estresse e intervenção de fatores esternos.
Conclusão
A cultura de tecidos é uma ferramenta que oferece soluções para o
programa de melhoramento vegetal, que podem resultar na
otimização do tempo e na qualidade das cultivares. Apesar dos
problemas a serem enfrentados Há ainda resultados positivos.
Cultura Tecidos Genética

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  • 2. Sumário  Introdução  Aspectos gerais da cultura de tecidos  O meio MS (Murashige & Skoog 1962)  Reguladores de Crescimento Vegetal  Aplicações das técnicas de cultura de tecidos para o melhoramento  Oque é esperado das técnicas de melhoramento na cultura de tecidos?  Os problemas a serem enfrentados  Conclusão
  • 3. Introdução: A cultura de tecidos tem alto potencial no melhoramento vegetal. Ela pode ser utilizada desde a multiplicação de material genético para a troca e a avaliação do germoplasma até a obtenção de mudas livres de vírus. Aumento da variabilidade genética mediante de variantes somo-clonais como base essencial para obtenção de plantas transgênicas.
  • 4. Aspectos gerais da Cultura de tecidos A cultura de tecidos é uma técnica com grande aplicação na agricultura. Nessa técnica, pequenos fragmentos de tecido vivo(pode ser um fragmento de folha raiz caule...), chamado explantes, que são isolados de um organismo vegetal, desinfestado e cultivado assepticamente.
  • 5.
  • 6. Os trabalhos realizados na cultura de tecidos são em sua maioria são no laboratório. Esses trabalhos são divididos em etapas:
  • 7. O meio MS (Murashige & Skoog 1962) O meio MS são todos os nutrientes que a planta precisa para completar seu ciclo de vida. Cada planta necessita de quantidades especificas de nutrientes para completar seu ciclo de vida. O cultivo em vitro com o meio MS e muito eficaz e produtivo em função dos nutrientes estarem todos disponíveis para a formação da planta
  • 8. Componente Fórmula Concentração (mg L-1) Macronutrientes Nitrato de amônio NH4NO3 1650 Nitrato de potássio KNO3 1900 Cloreto de cálcio CaCL2.2H2O 441 Sulfato de magnésio MgSO4.7H2O 370 Fosfato de potássio KH2PO4 170 Sódio EDTA Na2EDTA 37,25 Iodeto de potássio KI 0,83 Micronutrientes Sulfato de ferro FeSO4.7H2O 27,85 Sulfato de manganês MnSO4.H2O 16,9 Sulfato de zinco ZnSO4.7H2O 8,6 Ácido bórico H3BO3 6,2 Molibdato de sódio Na2MoO4.2H2O 0,25 Cloreto de cobalto CoCL2.6H2O 0,025 Sulfato de cobre CuSO4.5H2O 0,025 Vitaminas Ácido nicotínico C6H5NO2 0,5 Cloridrato de piridoxina C6H12CINO2 0,5 Cloridrato de tiamina C12H18CL2N4OS 0,5 Glicina C2H5NO2 2,0 Mio-inositol C6H12O6 100,0 Outros Agar 7.000 Sacarose C12H22O11 30.000
  • 9. Reguladores de Crescimento Vegetal  Os estímulos de desenvolvimento da planta é causalisado através dos hormônios que direciona o seu crescimento.  Estes hormônios são dividido em duas classes que são as auxinas e citocininas.  As citocininas estimulam o crescimento da parte aérea e as auxinas a parte radicular, e os ambos estimulam a formação de calos.
  • 10. Aplicações das técnicas de cultura de tecidos para o melhoramento  Cultura de meristemas: Técnica mais antiga para a propagação clonal massal e para a obtenção de plantas livres de vírus, a cultura de meristemas permite a obtenção de uma progênie clonal geneticamente idêntica à planta matriz, permitindo a captura e fixação de ganhos genéticos.  Avaliação rápida de suscetibilidade: A cultura de células, tecidos e órgãos pode ser empregada para a avaliação de suscetibilidade/tolerância à várias moléstias ou estresses abióticos.
  • 11.  Indução de florescimento precoce: Esta técnica é empregada para reduzir o longo período de juventude da planta permitindo uma redução substancial de tempo nos programas de melhoramento genético.  Reversão de fases de desenvolvimento: Em plantas arbóreas, florestais e frutíferas, a seleção de plantas elite é baseada nos espécimes mais velhos e comprovadamente sadios e produtivos. A propagação vegetativa convencional destas plantas torna-se dificultada. O cultivo in vitro continuado pode restaurar os genótipos facilitando a propagação clonal massal.
  • 12. Oque é esperado das técnicas de melhoramento na cultura de tecidos?  A curto prazo: Propagação em massa de genótipos a partir de pequenas quantidades de sementes, Plantas com potencial esperado, material limitado de plantas(podem ser ameaçadas em extinção) e híbridos obtidos em cruzamentos.  A Longo prazo: Aumento do ganho genético, Obtenção de sementes sintéticas e a diminuição do custo em comparação ao mudas obtido por métodos convencionais.
  • 13. Os problemas a serem enfrentados  Mesmo considerando-se as diversas aplicações, ainda existem limitações para a aplicação mais ampla destas técnicas no melhoramento de plantas : O sucesso de um sistema regenerativo in vitro é substancialmente dependente da adequação de um meio de cultura apropriado para cada espécie. O desenvolvimento de eixos caulinares, gemas e embriões somáticos não é, em geral, sincronizado. A aclimatização é um processo difícil pois a planta pode sofrer estresse e intervenção de fatores esternos.
  • 14. Conclusão A cultura de tecidos é uma ferramenta que oferece soluções para o programa de melhoramento vegetal, que podem resultar na otimização do tempo e na qualidade das cultivares. Apesar dos problemas a serem enfrentados Há ainda resultados positivos.