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Biologia Molecular

Dogma central da Biologia
Molecular - TRANSCRIÇÃO
Prof. Helber Astolpho
Introdução
Replicação

DNA

Transcrição

Transcrição Reversa

RNA
Tradução

Proteína
Introdução
 Síntese de RNA ocorre a partir do DNA.
 Durante a transcrição, apenas pequenas partes da molécula
de DNA (genes) são transcritas.
 A transcrição é um processo seletivo, ou seja, genes são
transcritos quando seus produtos são necessários.
Introdução

Indica onde estão os GENES
Com a excessão das
MUTAÇÕES, a
informação contida
na sequência de DNA
é ESTÁTICA

Quando serão traduzidos

A quantidade de transcritos
produzidos
Introdução
Características do RNA
 A molécula de RNA é fita simples.
 Sua pentose é uma ribose.
 Na transcrição a timina é substituída pela uracila (ACGU)

TIMINA

URACILA
Características da transcrição
 A transcrição ocorre em apenas um dos dois filamentos de
nucleotídeos de DNA.
 A molécula de RNA sintetizada é complementar com a fita de
DNA 3’- 5’.
 Com a excessão da base nitrogenada URACILA, todos os
nucletídeos do RNA serão iguais a da fita de DNA 5’- 3’.
Características da transcrição
Filamento molde
Filamento não-molde
(Filamento codificante)
Características da transcrição
 Na maioria dos organismos, cada gene é trancrito a partir de
uma única fita de DNA, mas genes diferentes podem ser
transcritos a partir de fitas de DNA diferentes.
Características da transcrição

 Os RNAs são sintetizados a partir de
trifosfatos de ribonucleosídeos
(rNTPs).
Características da transcrição
 Nucleotídeos são adicionados ao grupo 3’- OH da molécula
crescente de RNA pela RNA polimerase.
 Sentido da transcrição da RNA Poli: 5’- 3’.
 A síntese de RNA não requer um primer, como ocorre na
replicação.
Características da transcrição
 A RNA polimerase não possui atividade revisora 3’- 5’ como a
DNA polimerase, pois um erro na transcrição é menos grave
que um erro na replicação.
 Uma das subunidades da RNA Poli. possui atividade de
helicase, promovendo a formação de uma forquilha de
transcrição.
Características da transcrição
Classes de RNA

RNAs
estruturais
RNAs:
RNAs:
••Transportadores
Transportadores
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Ribossômicos
••PequenosRNAs
Pequenos RNAs

RNAs
RNAs
informacionais
informacionais

RNA
RNA
Mensageiros
Mensageiros
RNAs estruturais
• Procariotos

– RNAt e RNAr

• Eucariotos – RNAt, RNAr e pequenos RNA
RNAs estruturais
• Nunca são traduzidos
São representados por:
 Poucos genes
 Muitas cópias no genoma
 Mais estáves que o RNAm

Grande quantidade nas células
RNAs informacionais
• São codificantes pois podem ser traduzidos em
proteínas (RNAm)
Regiões gênicas
Regiões gênicas
 Os genes, tanto de eucariotos como de procariotos,
possuem regiões especializadas para a transcrição, são elas:
 Promotora: Sequência específica de DNA onde se liga a RNA
polimerase. Situado perto do início da região a ser transcrita.
 Região codificante de RNA: sequência de nucleotídeos de
DNA que é transcrita em uma molécula de RNA.
 Finalizadora: sequência de nucleotídeos que indica onde
termina a transcrição.
Regiões gênicas
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Fases da transcrição

• 3 fases - Iniciação, alongamento e terminação
• Fases da transcrição (INICIAÇÃO e ALONGAMENTO) de
eucariotos e procariotos são bem semelhantes.
• No entanto, a fase de TERMINAÇÃO nos eucariotos ainda ‘não
é muito bem conhecida.
Transcrição – fase de iniciação
A fase iniciação da transcrição possui 4 passos:
Reconhecimento do promotor pelo aparelho de transcrição.
Formação da bolha de transcrição.
Adição das primeiras base nitrogenadas .
Liberação do aparelho de transcrição do promotor.
Transcrição – fase de alongamento
Na fase de alongamento:
A RNA polimerase move-se ao longo do molde deselicoidizando o
DNA na margem da bolha de transcrição, adicinando nucleotídeos à
molécula de RNA de acordo com a sequência do molde e
reelicoidizando o DNA na margem antecedente da bolha.
Transcrição – fase de alongamento
Observações:
A transcrição ocorre dentro de um curto trecho de cerca de 18
nucleotídeos de DNA desenrolado.
As topoisomerases aliviam o estresse
deselicoidização e reelicoidização do DNA.

causado

pela
Transcrição – fase de terminação
(procariotos)
 A transcrição termina após ser transcrito o finalizador.
Eventos necessários para o fim da transcrição:
• A RNA polimerase deve parar a síntese.
• A molécula de RNA deve ser liberada da RNA polimerase.
• A molécula de RNA deve se dissociar totalmente do DNA.
• A RNA polimerase deve se separar do molde de DNA.
Transcrição (procariotos)
Fase de terminação independente de rô
Transcrição (procariotos)
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Transcrição em eucariotos

• Embora haja muitas semelhanças no processo de
transcrição com os procariotos…

• … em eucariotos a transcrição é mais complicada por 3
motivos primários:
Transcrição em eucariotos
 Há muito mais DNA não codificante
Ex: Densidade de genes em:
 Escherichia coli – 900 genes por milhão pb;
 Drosophila melanogaster – 110 genes por milhão pb;
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A iniciação se torna
complicada
Transcrição em eucariotos
Os eucariotos dividiram o trabalho da transcrição entre 3
polimerares diferentes:
RNA pol I – genes de RNAr 18S e 28S;
RNA pol II – genes de RNAm e alguns pequenos RNAs;
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RNAr 5S).
Transcrição em eucariotos
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6 dogma central da biologia molecular transcrição

  • 1. Biologia Molecular Dogma central da Biologia Molecular - TRANSCRIÇÃO Prof. Helber Astolpho
  • 3. Introdução  Síntese de RNA ocorre a partir do DNA.  Durante a transcrição, apenas pequenas partes da molécula de DNA (genes) são transcritas.  A transcrição é um processo seletivo, ou seja, genes são transcritos quando seus produtos são necessários.
  • 4. Introdução Indica onde estão os GENES Com a excessão das MUTAÇÕES, a informação contida na sequência de DNA é ESTÁTICA Quando serão traduzidos A quantidade de transcritos produzidos
  • 6. Características do RNA  A molécula de RNA é fita simples.  Sua pentose é uma ribose.  Na transcrição a timina é substituída pela uracila (ACGU) TIMINA URACILA
  • 7. Características da transcrição  A transcrição ocorre em apenas um dos dois filamentos de nucleotídeos de DNA.  A molécula de RNA sintetizada é complementar com a fita de DNA 3’- 5’.  Com a excessão da base nitrogenada URACILA, todos os nucletídeos do RNA serão iguais a da fita de DNA 5’- 3’.
  • 8. Características da transcrição Filamento molde Filamento não-molde (Filamento codificante)
  • 9. Características da transcrição  Na maioria dos organismos, cada gene é trancrito a partir de uma única fita de DNA, mas genes diferentes podem ser transcritos a partir de fitas de DNA diferentes.
  • 10. Características da transcrição  Os RNAs são sintetizados a partir de trifosfatos de ribonucleosídeos (rNTPs).
  • 11. Características da transcrição  Nucleotídeos são adicionados ao grupo 3’- OH da molécula crescente de RNA pela RNA polimerase.  Sentido da transcrição da RNA Poli: 5’- 3’.  A síntese de RNA não requer um primer, como ocorre na replicação.
  • 12. Características da transcrição  A RNA polimerase não possui atividade revisora 3’- 5’ como a DNA polimerase, pois um erro na transcrição é menos grave que um erro na replicação.  Uma das subunidades da RNA Poli. possui atividade de helicase, promovendo a formação de uma forquilha de transcrição.
  • 15. RNAs estruturais • Procariotos – RNAt e RNAr • Eucariotos – RNAt, RNAr e pequenos RNA
  • 16. RNAs estruturais • Nunca são traduzidos São representados por:  Poucos genes  Muitas cópias no genoma  Mais estáves que o RNAm Grande quantidade nas células
  • 17. RNAs informacionais • São codificantes pois podem ser traduzidos em proteínas (RNAm)
  • 19. Regiões gênicas  Os genes, tanto de eucariotos como de procariotos, possuem regiões especializadas para a transcrição, são elas:  Promotora: Sequência específica de DNA onde se liga a RNA polimerase. Situado perto do início da região a ser transcrita.  Região codificante de RNA: sequência de nucleotídeos de DNA que é transcrita em uma molécula de RNA.  Finalizadora: sequência de nucleotídeos que indica onde termina a transcrição.
  • 22. Fases da transcrição • 3 fases - Iniciação, alongamento e terminação • Fases da transcrição (INICIAÇÃO e ALONGAMENTO) de eucariotos e procariotos são bem semelhantes. • No entanto, a fase de TERMINAÇÃO nos eucariotos ainda ‘não é muito bem conhecida.
  • 23. Transcrição – fase de iniciação A fase iniciação da transcrição possui 4 passos: Reconhecimento do promotor pelo aparelho de transcrição. Formação da bolha de transcrição. Adição das primeiras base nitrogenadas . Liberação do aparelho de transcrição do promotor.
  • 24. Transcrição – fase de alongamento Na fase de alongamento: A RNA polimerase move-se ao longo do molde deselicoidizando o DNA na margem da bolha de transcrição, adicinando nucleotídeos à molécula de RNA de acordo com a sequência do molde e reelicoidizando o DNA na margem antecedente da bolha.
  • 25. Transcrição – fase de alongamento Observações: A transcrição ocorre dentro de um curto trecho de cerca de 18 nucleotídeos de DNA desenrolado. As topoisomerases aliviam o estresse deselicoidização e reelicoidização do DNA. causado pela
  • 26. Transcrição – fase de terminação (procariotos)  A transcrição termina após ser transcrito o finalizador. Eventos necessários para o fim da transcrição: • A RNA polimerase deve parar a síntese. • A molécula de RNA deve ser liberada da RNA polimerase. • A molécula de RNA deve se dissociar totalmente do DNA. • A RNA polimerase deve se separar do molde de DNA.
  • 27. Transcrição (procariotos) Fase de terminação independente de rô
  • 28. Transcrição (procariotos) Fase de terminação dependente de rô
  • 29. Transcrição em eucariotos • Embora haja muitas semelhanças no processo de transcrição com os procariotos… • … em eucariotos a transcrição é mais complicada por 3 motivos primários:
  • 30. Transcrição em eucariotos  Há muito mais DNA não codificante Ex: Densidade de genes em:  Escherichia coli – 900 genes por milhão pb;  Drosophila melanogaster – 110 genes por milhão pb;  Homo sapiens – 9 genes por milhão A iniciação se torna complicada
  • 31. Transcrição em eucariotos Os eucariotos dividiram o trabalho da transcrição entre 3 polimerares diferentes: RNA pol I – genes de RNAr 18S e 28S; RNA pol II – genes de RNAm e alguns pequenos RNAs; RNA pol III – RNAs estruturais (RNAt, alguns pequenos RNAs e RNAr 5S).
  • 32. Transcrição em eucariotos • É necessária a montagem de muitas proteínas, conhecidas como fatores de transcrição, antes que a RNA polimerase II possa começar a sintetizar RNA.
  • 33. Processamento do RNA em eucariotos