Este documento descreve o procedimento para a extração de DNA de milho (Zeamays L.) utilizando o método CTAB. O documento explica os materiais, equipamentos e etapas necessárias para a extração de DNA, incluindo a preparação das amostras, solução CTAB, maceração do tecido, incubação, homogeneização e secagem. O documento também fornece considerações finais e referências bibliográficas.

1. EXTRAÇÃO DE DNA DE MILHO (ZeamaysL.) pelo método CTAB
Confresa-MT
2014

2. Bacharelado em Agronomia -2013
Acadêmicos:
Adrielly Freitas da Silva Ferreira;
André Alves Barbosa;
João Paulo Lima Christichinni;
Nara Rayane Brandão da Silva;
Waldenyr Rodrigues dos Santos;
Wallace Matheus da Silva.
Disciplina: Genética Básica
Docente: Dr. Pedro Martins Sousa
Msc. Reginaldo Vicente Ribeiro

3. EXTRAÇÃO DE DNA DE MILHO
•Introdução;
•Objetivo;
•Materiais & Métodos;
•Considerações Finais.
FONTE: http://i0.statig.com.br/
FONTE: http://www.tecnologiaetreinamento.com.br/

4. MILHO (ZeamaysL.)
Fonte: www.cotrijui.coop.br

5. Mapa da produção agrícola –Milho total (primeira esegunda safras)
Fonte: Conab/IBGE

6. PROCEDIMENTO DA EMBRAPA MILHO E SORGO PARA EXTRAÇÃO DE DNA DE TECIDO VEGETAL EM LARGA ESCALA
•Extração de DNA vegetal;
•Vantagens;
•Objetivo.
Fonte: www.google.imagens

7. AMOSTRAS
•Preparo das amostras;
•Colocar as amostras
em tubos;
•Colocar as amostras nos
tubos específicos.
Alicate utilizado na coleta de tecido vegetal para extração de DNA.
Tubos específicos para o triturador sem tampa (A) e com tampa (B).

8. AMOSTRAS
•Fazer um mapa de identificação;
•Armazenamento;
•Maceração.
Placa tampada

9. ETAPAS
•Extração do DNA:
•Preparo da solução CTAB;
•Colocação das esferas
de aço;
•Equipamento de Maceração.
Imagem do porta-esferas.
Placas balanceadas fixadas no suporte do
triturador.

10. ETAPAS
• Maceração do tecido;
• Retirada das tampas;
• Capela de exaustão;
• Tampar os tubos e placas.

11. EXTRAÇÃO DE DNA
•Materiais e Equipamentos
•-Banho-maria
•-Centrífuga de placas
•-Capela de exaustão
•-Esferas de aço
•-Estufa
•-Freezer -20°C
•-Pipeta multicanal eletrônica
•-Porta-esferas
•-Triturador (Geno/Grinder2000)

12. EXTRAÇÃO DE DNA
•Incubação das amostras;
•Homogeneização;
•Retirar o sobrenadante;
•Secagem na estufa.
Amostras incubadas em banho -maria.
Placas prontas para homogeneização por inversão.
Uso da pipeta
multicanal eletrônica.

13. CONSIDERAÇÕES FINAIS

14. REFERÊNCIA BIBLIOGRÁFICA
•Companhia Nacional de Abastecimento. Acompanhamento da safra brasileira de grãos. –v. 1-Safra 2013/14, n.11-Décimo Primeiro Levantamento, Brasília: Conab, Ago. 2014.
•Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (Embrapa). Procedimento da Embrapa milho e sorgo para Extração de DNA de tecido vegetal em larga escala. Embrapa milho e sorgo.SeteLagoas, MG. 2010.
•GUIMARÃES, P.S.; Desempenho de híbridos simples de milho (ZeamaysL.) e correlação entre heterose e divergência genética entre as linhagens parentais.Campinas, SP: Instituto Agronômico, 2007.

15. REFERÊNCIA BIBLIOGRÁFICA
•SANTOS, J. F.; Heterozigosidadeem ciclos de seleção do composto CMS -43 milho de pipoca (ZeamaysL.) utizandomarcadores microssatélite. Paraná: Dez. 2008.
•SAWAZAKI, E.; PATERNIANI, M.E.A.G.Z. Evolução dos cultivares de milho no Brasil. In: GALVÃO, J.C.C.; MIRANDA, G.V. Tecnologias de produção do milho. 20.ed. Viçosa: Universidade Federal de Viçosa, v.1, p.13-53, 2004.
•ZINSLY, J.R.; MACHADO, J.A. Milho-pipoca. In: PATERNIANI, E.; VIEGAS,
•G.P. (ed.). Melhoramento e produção do milho. Campinas: Fundação Cargill, 1987.

16. Fonte: www.google.imagens